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Este documento contiene las respuestas a un cuestionario sobre espectrometría de masas. Explica que en un analizador de tiempo de vuelo, los iones se aceleran y su tiempo de vuelo hasta el detector depende de su relación masa/carga, permitiendo distinguir las diferentes masas iónicas. También describe que la técnica MALDI se usa para analizar biopolímeros como proteínas y que una limitación puede ser la formación de aductos.
Este documento contiene las respuestas a un cuestionario sobre espectrometría de masas. Explica que en un analizador de tiempo de vuelo, los iones se aceleran y su tiempo de vuelo hasta el detector depende de su relación masa/carga, permitiendo distinguir las diferentes masas iónicas. También describe que la técnica MALDI se usa para analizar biopolímeros como proteínas y que una limitación puede ser la formación de aductos.
Este documento contiene las respuestas a un cuestionario sobre espectrometría de masas. Explica que en un analizador de tiempo de vuelo, los iones se aceleran y su tiempo de vuelo hasta el detector depende de su relación masa/carga, permitiendo distinguir las diferentes masas iónicas. También describe que la técnica MALDI se usa para analizar biopolímeros como proteínas y que una limitación puede ser la formación de aductos.
Curso: Química Analítica III Orientador: Basilio Diaz Pongutá Qco MCAs
En analizador de tiempo de vuelo (TOF), es uno de los más antiguos diseños
en la Espectrometría de Masas. Explique cuál es el principio de funcionamiento.
Inicialmente introducimos la muestra en la fuente iónica, que puede ser de impacto
electrónico, desorción láser, etc. Una vez producida la ionización, cosa que ocurre de modo instantáneo, se evita que los iones formados puedan salir de la fuente dispersados en el tiempo, reteniéndolos en la fuente por medio de un potencial de retardo de igual signo al de la carga de los iones (fig. 4.19)
Una vez conseguida la ionización, y confinados los iones en el recinto de la fuente,
aplicamos un voltaje de extracción, con lo que conseguimos que todos los iones salgan de la fuente de modo simultáneo. Pasan seguidamente por un campo electrostático acelerador con un voltaje “V”, adquiriendo una elevada energía cinética que les impulsa en la dirección del tubo de vuelo, o analizador, hacia el detector. Lo iones de mayor m/z volarán a menor velocidad que los de mayor m/z. El resultado será que los iones más pequeños alcanzarán primero el detector, seguidos en el tiempo, y de modo sucesivo, por lo de mayor tamaño (suponiendo a todos carga unitaria). El tiempo empleado en recorrer la longitud del tubo de vuelo será proporcional a la masa, o relación masa/carga, de los iones, y el sistema de detección será capaz de distinguir o diferenciar los diferentes masas iónicas tanto mejor cuanto mayor sea su separación en el tiempo (cuanto más largo sea el tubo de vuelo), y cuanto menor sea la dispersión en energías de los iones formados en la fuente.
¿Cuáles son las aplicaciones y limitaciones de la técnica MALDI?
La técnica MALDI se utiliza en el análisis de proteínas, glicoproteínas,
polinucleótidos, oligosacáridos, glicolípidos y, en general, bioplímeros.
Debido al carácter extraordinariamente blando del método, y dependiendo de la
matriz elegida, de la longitud de onda e irradiación del láser utilizado, y de otras condiciones de operación o parámetros instrumentales, puedo realizarse incluso el análisis de mezcla complejas de péptidos o proteínas.
Como una limitación, altamente dependiente de la matriz empleada, podemos citar
la posible formación de aductos, producidos por la captación de pequeños fragmentos procedentes de la descomposición fotoquímica de la matriz. En el caso de las proteínas, los aductos aparecen como picos satélites a masa ligeramente más elevada que el ion molecular o quasi-molecular. La intensidad de éstos picos satélite aumenta con el peso molecular de la proteína analizada, lo que, unido a la baja resolución conseguida por los sistemas MALDI-TOF, hace que no sean distinguibles en muchos casos, provocando errores por exceso en la asignación de masas.
Otro factor limitante a tener en cuenta es la fragmentación, que depende también
de la matriz y de las características de la fuente excitadora. Esta fragmentación, aunque limitada, también aumenta con el peso molecular del Analito, originando picos cercanos al ion molecular y a masas ligeramente inferiores, lo que conlleva posibles errores por defecto en la asignación de masas.