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Determinación
Separación
Historia
M. Tswett (1903)
Martin y Synge (1941)
Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez
La cromatografía es un método físico de separación en el
que los componentes de la muestra se distribuyen entre dos
fases, una de las cuales es fija o estacionaria y la otra
móvil.
tipos de técnicas
cromatografías cromatográficas
la naturaleza de las fases móvil y
dispositivo utilizado para
estacionaria y la clase de equilibrios
conseguir el contacto entre la
implicados en la transferencia de los
fase móvil y la estacionaria
solutos entre las fases, es decir, el
mecanismo de interacción
t0
intervalo de tiempo que transcurre desde que el trazador es insertado al
principio del lecho cromatográfico hasta que sale del mismo
tR
el tiempo que tarda el máximo de un pico en ser eluido después de la
inyección
t´R t'R = tR - to
K´
tiempo que el soluto pasa en la FE C S VS
K'= ß KD
tiempo que el soluto pasa en la FM Cm Vm K'= ß D
tR = t0 (1 + K')
V0 = t0F
volumen de FM necesario para que se
produzca la elución de un soluto
V= tF VR = tRF
V'R = t'RF
K' = V'R/V'0
VR = V'R + V0
VR = V0 (1 + K‘)
Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez
La longitud de una columna en la que el soluto experimenta
un equilibrio completo entre las dos fases
N = L/H
La eficacia de la columna aumenta cuanto mayor es el número de platos
teóricos y menor la altura del mismo.
Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez
Una columna cromatográfica es más eficaz cuando menores son
los ensanchamientos de banda que origina
N = tR2/t2
N = 16 tR2 / Wb2
N = 4 tR2 / Wi2
= 5,54 tR2 / Wh2
2
41,7 (tR / W0,1 )
N=
A 1,25
B
H : cm
H = B/u + CS u + CM u u: velocidad lineal de FM (cm/s)
B, CS, CM: ctes relacionadas con las
propiedades de la columna y del analito
Mecanismo diferente de
ensanchamiento de la banda
Ing. Mg. Ricardo Rodriguez Vilchez
Define la capacidad de un sistema cromatográfico para distinguir
entre dos componentes.
Es una función termodinámica que depende de las distribuciones
relativas entre las fases móvil y estacionaria.
Se expresa mediante el factor de selectividad o retención relativa:
tR
Sustancia desconocida podemos
identificarla comparando su tR con el de un
patrón
dependen de una
dividir la muestra en dos alícuotas: una de variedad de
ellas de cromatografía directamente, condiciones
mientras que a la otra se le adiciona una experimentales
cantidad dada de una sustancia patrón que
se sospecha existe en la muestra, y también
se cromatografía.
fx = fs (As/Ax) (wx/ws)
H/e
H
Tiempo
t
tI
W
tF