UNIVERSIDAD DE NARIÑO - PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA

PRACTICA DE BIOQUÍMICA: pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Docente: Jesús Cabrera

Introducción Efecto amortiguador del pH

La concentración de iones hidrógeno tiene gran importancia para
todos los organismos vivos. Por ejemplo, cambios pequeños en la
concentración de ión hidrógeno en la sangre de los animales
producen cambios notables en procesos fisiológicos tales como la
respiración en plantas y animales y también cambios en la conducta
del individuo. Cambios pequeños en la concentración de iones
hidrógeno pueden alterar la eficacia de las enzimas como
catalizadores. Otro ejemplo de la interminable lista es la que la
mayor parte de microbios requieren una regulación estrecha de la
concentración de iones hidrógeno para mostrar una rapidez óptima
de división y crecimiento celular.
Empleo del potenciómetro.
Se define el pH como el logaritmo del recíproco de la actividad de
ión hidrógeno. Uno de los dispositivos más utilizados para medir el
pH es el electrodo de vidrio que es sensible directamente a la
concentración de iones hidrógeno de la solución en la que se
sumerja el electrodo y a la cual se desea medir su pH.
Todos los organismos vivos requieren regular la concentración de
iones hidrógeno en un margen estrecho de pH. Para ello utilizan
“soluciones amortiguadoras” o tampones o buffer. Un tampón es
una solución acuosa de un ácido débil y su sal o una base débil y su
sal. Por ejemplo: ácido acético y acetato de sodio: hidróxido de
amonio y cloruro de amonio. De tal manera que una adición de un
ácido o una base fuertes produce cambios muy pequeños en el pH,
así, el cambio de pH de una solución es mucho menor del que se
esperaría si la solución buffer no estuviera presente.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Mida el valor de pH de las siguientes sustancias y clasifíquelas
como ácidas o básicas.

SUSTANCIA pH Carácter
(ácido o básico)
Coca-cola recién destapada (con gas)
Coca cola al finalizar la práctica (sin gas)
Zumo de limón
Zumo de naranja
Zumo de mandarina
Plasma o suero sanguíneo (prepararlo según instrucciones del docente)
Orina
Alkaseltzer® (disolver 1 tableta en 100 mL de agua destilada)
Leche fresca
Leche dejada a temperatura ambiente durante 48 horas
Suero de leche
Yogurt sin azúcar (disolver en agua 1:1)

Lea el pH de la solución resultante: ____________.

2. Preparación de una solución amortiguadora o buffer de pH.
¡Usted acaba de preparar un buffer!
Determine el pH de una solución de ácido acético 0.2 N: Para llevar a cabo el estudio de las propiedades de esta solución
_______ buffer prepare 5 soluciones en sendos vasos marcados y haga
Determine el pH de una solución de acetato de sodio 0.2 N: las anotaciones respectivas
____ Mezcle 30 ml de solución de ácido acético con 30 ml de
solución de acetato de sodio.
.
SOLUCIÓN 1 2 3 4 5
Buffer 50 ml 20 ml 20 ml
Agua 20 ml 20 ml
NaOH 0.1 N 1 ml 1 ml
HCl 0.1 N 1 ml 1 ml
pH

3. Propiedades amortiguadoras de los fluidos biológicos.

a. En un vaso de precipitados de 100 ml coloque 10 ml de solución que su grupo haya acordado previamente con el profesor, la cual
puede ser: solución buffer previamente preparada, plasma sanguíneo, zumo de naranja, zumo de limón, zumo de mandarina, suero
sanguíneo, orina, leche, suero de leche o yogurt (diluido 1:1). Determine su pH con el potenciómetro. Adicione luego 1 ml de HCl 0.1
N, agite y determine el pH; continúe agregando cada vez 1 mL de HCl y continúe determinando el pH hasta alcanzar un valor de 2.0 o
cercano a 2.0.
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b. En otro vaso de precipitados coloque otros 10 ml del fluido utilizado en el punto a. y repita el procedimiento anterior, pero adicionando
esta vez 1 ml de NaOH 0.1 N hasta alcanzar un pH de 11 o cercano a 11.

CUESTIONARIO:
(sobre el cual será evaluada la práctica de laboratorio; ¡no es para entregar!)

1. Justifique los resultados de pH obtenidos en las distintas soluciones del punto 1 de la presente práctica de laboratorio.
2. Realice los cálculos para obtener los valores de pH en un experimento teórico similar al del punto 3., en el que se haya utilizado
AGUA en lugar del fluido convenido.
3. Realice las respectivas gráficas de titulación de los diferentes fluidos utilizados por todo el grupo (todos los fluidos, no solo el que
su grupo utilizó en la práctica. Para ello se requiere que pidan los resultados obtenidos por los demás grupos y compartan los suyos
con los demás grupos). Para ver mejor el efecto y las diferencias entre los distintos fluidos, en una misma gráfica elaborada en papel
milimetrado trace los resultados de todos los fluidos tanto al adicionar base como ácido y los resultados teóricos que calcularon para la
titulación del agua.
4. Identifique que fluido presenta el mejor poder amortiguador, tanto en la región básica como en la región ácida. ¿Hay algún fluido
que amortigüe muy bien en las dos regiones? ¡Justifique su respuesta!
5. Consulte cual es el principal amortiguador existente en el plasma sanguíneo. Teniendo en cuenta que el plasma tiene un pH de 7.4;
es ese el mejor amortiguador para ese valor de pH? ¿Por qué funciona bien ese amortiguador y no el que teóricamente podríamos
recomendar?