Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs es un ciclo metabólico cuyo alimentador es acetil-

CoA que es uno de los productos finales de la degradación de
glúcidos, aminoácidos y lípidos. Este sustrato inicial se degrada paso
a paso en el ciclo quedando transformado en 2 CO2 con liberación de
energía que queda contenida en los cofactores reducidos (un FADH2 y
3 NADH) y también en un GTP. Además, es una vía que se relaciona
con muchos otros procesos anabólicos del metabolismo de glúcidos,
proteínas, ácidos nucleicos, porfirinas y lípidos. Por eso se considera
al igual que la glucólisis (degradación de la glucosa), una vía central
del metabolismo.

Podemos plantear como reacción global esquematizada del ciclo de

Krebs:

En esta reacción general podemos ver cuál es el sustrato inicial,

cuáles son sus productos finales y los cofactores que participan.

Tipo de proceso del ciclo de Krebs

Es un proceso catabólico pues su alimentador, acetil-CoA (grupo

acetilo -compuesto de 2 carbonos- unido a la CoA) se degradará y se
formará 2 CO2, compuestos más pequeños, y sus hidrógenos
quedarán formando parte de los cofactores reducidos. Además se
forma el GTP, que contiene la misma cantidad de energía que el ATP.
Todo lo anterior podemos verlo en la reacción global anterior.

Localización del ciclo de Krebs

Este proceso se lleva a cabo en la matriz mitocondrial. Allí es donde

se encuentran la mayoría de las enzimas que participan en él.
Además en la propia mitocondria es donde se encuentran localizados
los otros 2 procesos de la respiración celular que forman la cadena
respiratoria. En la cadena respiratoria se van a utilizar los cofactores
reducidos formados por el ciclo de Krebs. La localización mitocondrial
de ambos procesos facilita con una máxima eficiencia la función de
ambos procesos, que es otro de los principios de la Bioquímica: el
principio de la máxima eficiencia.
En cuanto a su localización hística, se produce en todos los tejidos
cuyas células tengan mitocondrias. Por ello, el ciclo no se produce en
los hematíes, que carecen de mitocondrias.

Visión general de las reacciones del ciclo de Krebs

Se compone de 8 reacciones y cada una de ellas está catalizada por

enzimas. Escojamos como primera reacción la entrada del acetil CoA
(a) que se condensa con el ácido oxalacético (b). Las reacciones de
óxido-reducción son la 3; 4; 6 y 8 (Fig. 7.11). Otra reacción de
importancia es la 5 donde se forma GTP por una fosforilación a nivel
de sustrato. Es una vía cíclica porque el ácido oxalacético (b) que es
el producto final de la última reacción, la 8, vuelve a ser sustrato de
la primera reacción. Este ciclo es globalmente irreversible, aunque
algunas de sus reacciones son reversibles (reacciones 2, 5, 6, 7 y 8).
El grupo acetilo, bicarbonatado, se oxida por pasos graduales en el
ciclo de Krebs y como en cada vuelta del ciclo se forman 2 CO2, se
pudiera decir que el acetilo que está unido a la CoA se degrada en
cada vuelta del ciclo. Los otros productos de la vía son los cofactores
reducidos (3NADH.H+ y 1FADH2) y un GTP.

Fig.7.11.Las reacciones del ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo

de Krebs, a) acetil-coA, b) ácido oxalacético,(c) ácido cítrico, d) cis
aconítico, e) ácido isocítrico, f) ácido á ceto glutámico, g) succinil
coA, h) ácido succínico, i) ácido fumárico, j) ácido L-málico.

Origen del acetil-CoA

El acetil-CoA proviene del catabolismo de lípidos, aminoácidos y

glúcidos; estos últimos constituyen su fuente principal en el cerebro,
pero en otros tejidos como el hígado y músculo, son los ácidos grasos
su fuente principal.
Reacciones del ciclo de Krebs

Primera reacción: enzima ácido cítrico sintasa.

Esta enzima cataliza la condensación entre el grupo acetilo del acetil-

CoA y el ácido oxaloacético. Este ácido debe unirse a la enzima antes
que el acetilCoA, debido a esto tienen que encontrarse a
concentraciones adecuadas para que se lleve a cabo la primera
reacción; De esta forma se mantienen los niveles adecuados de los
metabolitos del ciclo y se garantiza la actividad del mismo. Además
es una de las enzimas reguladoras del ciclo y su regulación se trata
más adelante en este capítulo.

Segunda reacción: enzima aconitasa

La aconitasa cataliza una isomerización del ácido cítrico en ácido

isocítrico, pues como vemos en la figura 7.11 el grupo hidroxilo
cambia de posición.

Tercera reacción: enzima isocítrico deshidrogenasa

En esta reacción, el ácido isocítrico se oxida y descarboxila. La

enzima es dependiente del NAD+ que debe estar unido a la enzima
para que ella pueda realizar su acción. Los productos son el CO2 y el
ácido alfa-ceto-glutárico. En esta reacción ocurre la formación del 1er
cofactor reducido, el NADH, como se observa a continuación. Esta es
otra de las enzimas reguladoras importante del ciclo de Krebs.
Cuarta reacción: enzima alfa-ceto-glutárico deshidrogenasa

La reacción está catalizada por un complejo multienzimático. Además

de las 3 enzimas que lo forman, requiere de 5 cofactores; el
pirofosfato de tiamina (PPT), el ácido lipoico, la coenzima A, el FAD y
el NAD+. El ácido alfa-ceto-glutárico se descarboxila y se oxida
transformándose en succinil-CoA. En esta reacción ocurre la
formación del 2do cofactor reducido, el NADH. La reacción es
irreversible.

Quinta reacción: enzima succinil-tioquinasa o succinil CoA sintetasa

Esta reacción es totalmente reversible y transfiere la energía

contenida en el enlace tíoester de la succinil-CoA al último enlace
anhídrido fosfórico del GTP. El tercer fosfato del GTP puede ser
transferido al ADP y formar ATP. Esta es la única reacción del ciclo
donde se forma un compuesto con energía semejante al ATP, es una
fosforilación a nivel de sustrato. El otro producto de la reacción es el
ácido succínico.

Sexta reacción: enzima succínico deshidrogenasa

La succínico deshidrogenasa no es una proteína simple, es una

proteína compleja (la proteína se encuentra unida a un grupo
prostético), es una flavo proteína, cuyo grupo prostético es el FAD. Es
una proteína integral de la membrana interna de la mitocondria.
Participa en 2 procesos, en el ciclo de Krebs y lo relaciona con la
cadena respiratoria. Cataliza la oxidación del ácido succínico en ácido
fumárico, mientras que se forma el 3er cofactor reducido, el FADH2.
La reacción es reversible.
Séptima reacción: enzima fumarasa

Una molécula de agua se introduce en el doble enlace y se forma el

ácido málico. Esta reacción es libremente reversible.

Octava reacción: enzima málico deshidrogenasa

Con esta reacción se completa el ciclo y su producto es el ácido

oxalacético, iniciador del ciclo. También es la última reacción de
oxido-reducción que se produce; se forma el 3er NADH. Constituye
una reacción reversible, pero el equilibrio está desplazado hacia la
formación de del ácido málico. Sin embargo, la propia marcha del
ciclo, o lo que es lo mismo, el consumo del ácido oxalacético hace
que esta reacción se desplace en el sentido de la formación del ácido
oxalacético.

Regulación del ciclo de Krebs

Varios tipos de mecanismos reguladores intervienen en el control de

la velocidad del ciclo de los ácidos tricarboxílicos. Estos son la
disponibilidad de sustrato, la inhibición por producto o
inhibición feedback por intermediarios del propio ciclo. También, de
gran importancia, está presente la regulación por efectores
alostéricos. Aun cuando todas las reacciones poseen alguna
regulación, las que fundamentalmente determinan la velocidad de
ciclo de Krebs son las reacciones catalizadas por las enzimas cítrico
sintasa e isocítrico deshidrogenasa.

Regulación de la cítrico sintasa

Esta regulación ocurre por el mecanismo de disponibilidad se

sustrato. Un metabolito importante que regula la actividad de la
cítrico sintasa es uno de sus sustratos, el ácido oxalacético. Esta
enzima normalmente trabaja a concentraciones no saturantes de sus
sustratos, por lo que su actividad varía en dependencia de los
cambios de concentración de estos. Es indispensable la unión del
ácido oxalacético en el centro activo de la enzima para que pueda
unirse el acetil CoA y llevarse a cabo la reacción. Si las
concentraciones del ácido oxalacético son pobres esta primera
reacción del ciclo ocurre deficientemente.

Regulación de la isocítrico deshidrogenasa

Está regulada por la disponibilidad de NAD+ e inhibida por su

producto final, el NADH.

También tiene regulación alostérica por el ADP (su efector alostérico

positivo) y el ATP (su efector alostérico negativo). Las
concentraciones de ATP y de ADP son reguladoras importantes de
varios procesos celulares. La relación entre las concentraciones de
ATP/ADP nos dan un índice del estado energético de la célula, el
llamado potencial energético celular (PEC). Si la concentración de ATP
se eleva, el PEC es alto e indica que en la célula no se requieren en
esos momentos mucho ATP y es el propio ATP el que inhibe los
procesos que lo forman. Esto sucede, por ejemplo, en el reposo. Si
las concentraciones de ATP disminuyen y se elevan las de ADP, esto
es indicador de un bajo PEC, indica que se requiere del ATP, y el ADP
es el activador alostérico de los procesos formadores de ATP. Esto
sucede, por ejemplo, en el ejercicio. Así sucede con la enzima
isocítrico deshidrogenasa, enzima reguladora del ciclo de Krebs. Al
aumentar la concentración de ADP, la enzima se activa y lo mismo
ocurre con el ciclo. Si aumentan las concentraciones de ATP, la
enzima se inhibe y también el ciclo. Se considera a esta enzima como
la marcapaso del ciclo.

El resumen de la regulación del ciclo lo podemos observar en la figura

7.12.

Fig.7.12. Esquema de la regulación del ciclo de Krebs. La activación

fundamental de la enzima cítrico sintasa se debe a los aportes de
ácido oxalacético y del acetil-CoA a partir de la pirúvico
deshidrogenasa. La isocítrico deshidrogenasa es activada
alostéricamente por el ADP e inhibida por el ATP.
Relación del ciclo de Krebs con otros procesos metabólicos

Algunos metabolitos del ciclo de Krebs participan en procesos de

biosíntesis. Se observa en la figura 7.13, que a partir de los
intermediarios se forman aminoácidos, grupos hemo y otros
compuestos.

Fig.7.13. Participación de los intermediarios del ciclo de Krebs en los

procesos biosintéticos.

El ácido oxalacético y el ácido alfa-ceto-glutárico se pueden

transformar en sus aminoácidos correspondientes que son el ácido
aspártico y el ácido glutámico respectivamente. Estas reacciones, de
transaminación, se estudiarán en el capítulo del metabolismo de los
compuestos nitrogenados de bajo peso molecular (capítulo 10). Los
aminoácidos pueden utilizarse en la síntesis de proteínas, pero
además ellos intervienen en la síntesis de las bases nitrogenadas tan
necesarias en la síntesis de los ácidos nucleicos, y en la de algunos
cofactores.

El succinil~CoA es un precursor de la síntesis del grupo hemo,

importante grupo prostético que forma parte de la mioglobina,
hemoglobina y otras hemo-proteínas como los citocromos. Estos
últimos compuestos los veremos cuando se trate la cadena
transportadora de electrones.

El ácido málico, en determinadas condiciones fisiológicas, se

incorpora al proceso de gluconeogénesis.

El ácido cítrico, al acumularse en momentos de alto potencial

energético celular, sale de la mitocondria y en el citoplasma
constituye la fuente de acetil-CoA citoplasmático, precursor para los
procesos de la síntesis de los ácidos grasos y colesterol.

Por supuesto, los cofactores reducidos relacionan al ciclo con el resto

de los procesos de la respiración celular, pues son los sustratos de la
cadena transportadora de electrones donde se reoxidan y así podrán
ser utilizados de nuevo por el ciclo de Krebs. En la figura 7.13
podemos ver las relaciones que tiene el ciclo de Krebs con otros
procesos metabólicos a través de sus intermediarios.

Funciones del ciclo de Krebs

De todo lo planteado anteriormente el ciclo de Krebs tiene 2
funciones importantes. Una de ellas es la formación de los cofactores
reducidos que serán sustratos de la cadena respiratoria y se emplean
en la formación de ATP. La segunda función importante es que a
partir de sus metabolitos intermediarios se sintetizan compuestos
como son los aminoácidos, grupos hemo y ácidos grasos, Esto hace
que este ciclo tenga relaciones con el metabolismo de proteínas, con
el de las hemoproteínas, los ácidos nucleicos, los glúcidos y los
lípidos. Además es sumamente importante la relación que tiene con
otros procesos de la cadena respiratoria.

Anaplerosis

En las reacciones del ciclo de Krebs, al producirse el catabolismo de la

acetil-CoA se regeneran todos los intermediarios, pero como estos
además se escapan del ciclo al participa en otros procesos de síntesis,
entonces al ciclo de Krebs le faltarían las cantidades necesarias de
sus metabolitos intermediarios para realizar sus funciones. Las
cantidades de ácido oxalacético disminuidas no se corresponden con
las requeridas para su condensación con las de acetil-CoA lo que
implicaría un deficiente funcionamiento de este proceso.

Esto no sucede realmente porque existen ciertas reacciones que

reponen los metabolitos del ciclo; son las reacciones de anaplerosis,
palabra que proviene del griego y que quiere decir rellenar. Las
propias transformaciones de los metabolitos del ciclo en aminoácidos
son reversibles y pueden aportar intermediarios a este ciclo. Pero la
reacción de relleno fundamental es la catalizada por la enzima ácido
pirúvico carboxilasa, enzima localizada en la mitocondria.

En esta reacción el ácido pirúvico se carboxila y se transforma en

ácido oxalacético y el ATP aporta la energía necesaria para que ocurra
la reacción. Esta enzima tiene un activador alostérico, el propio acetil-
CoA. Se comprende la importancia de esta regulación que activa la
formación del ácido oxalacético, sustrato imprescindible para que
ocurra la primera reacción del ciclo.
El aporte del ácido oxalacético es suficiente para rellenar de
metabolitos el ciclo, pues este ácido se transforma en los otros
metabolitos en las subsiguientes reacciones (Fig. 7.14).

Fig.7.14. Se representa un ciclo metabólico de 3 componentes (B, C

y D). El rojo más fuerte representa una concentración más alta del
componente que el del color más pálido. En a) A se ha transformado
en B y así se aumentó su concentración, B y C se encuentran a
concentraciones muy bajas. Al funcionar el ciclo (b), B se transformó
en C y este componente también aumentó su concentración a partir
de B. Finalmente en c) vemos como ya los 3 componentes del ciclo se
encuentran a concentraciones aumentadas. Y todo esto ocurrió sólo
por la formación de B a partir de A.