POUR PLATE halaman TEKNIK 56 UNTUK BAKTERI PENGHITUNGAN David B.

Fankhauser , PhD 5 Juli 1989 , rvsd 18 Juli '93 , 21 Jul '95 , 23 Jul '96 , 21 Jul '97 , 17 Juli 98
, 28 Jan 00 , ulasan tentang 28 Juni 2 , 23July09 , 22July10
http://biology.clc.uc.edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Meat_Milk/Pour_Plate.htm
PROTOKOL TERKAIT : Media Umumnya Digunakan dalam Kursus ini Kontaminasi
Bakteri Susu dan Daging Ragi pelat TUJUAN Count: Teknik pour plate dapat digunakan
untuk menentukan jumlah mikroba / mL dalam spesimen . Ini memiliki keuntungan yang
tidak membutuhkan piring disiapkan sebelumnya , dan sering digunakan untuk uji
kontaminasi bakteri dari bahan makanan . Langkah-langkah prinsip adalah untuk: 1 )
menyiapkan dan / atau mencairkan sampel 2 ) menempatkan aliquot dari sampel disiapkan
dalam piring kosong berlabel steril 3 ) tuangkan 15 mL agar meleleh , didinginkan sampai 45
° C , ke piring , swirl untuk aduk 4 ) biarkan dingin untuk memperkuat ( tanpa mengganggu )
5 ) invert dan menetaskan untuk mengembangkan koloni ( 24-48 jam ) . Setiap koloni
merupakan " koloni forming unit " ( CFU ) . Seperti biasa , untuk jumlah akurat , jumlah
optimal harus berada dalam kisaran 30 sampai 300 koloni / piring . Salah satu kelemahan dari
tuangkan pelat adalah bahwa koloni tertanam jauh lebih kecil daripada orang-orang yang
kebetulan berada di permukaan . Dengan demikian, kita harus berhati-hati untuk mencetak ini
sehingga tidak ada yang diabaikan . Juga , aerob obligat dapat tumbuh buruk jika sangat
tertanam dalam agar-agar .
PERALATAN : 15 mL Plat steril Hitung Agar ( PCA ) dalam capped 16 x 150 mm tabung
reaksi * Hot Block, 45o C ( atau air mandi ) 3 " mendalam untuk kedalaman yang sama agar
steril capped 16 x 150 mm tabung uji 0.1 , 1.0 dan 2.0 mL pipets , steril piring petri , kosong
dan steril api penghitung koloni dengan kaca pembesar
POUR PLATE TEKNIK : 1 . Buatlah tabel di notebook Anda : rincian menyiapkan dan
plating spesimen Anda ( s ) : dengan garis untuk setiap lempeng yang menjelaskan : a :
identitas rinci atau sumber dari spesimen b : pengenceran spesimen digunakan (
mempersiapkan pengenceran diharapkan . mengandung antara 30 - 300 CFU / alikuot
Jelaskan metode untuk cairannya / preparasi c : volume spesimen diencerkan ( aliquot ) Anda
akan piring (biasanya 0,1 sampai 1,0 ml ) 2 Label bawah piring dengan di atas . . Data
ditambah inisial , nomor tempat duduk dan tanggal . 3 . Encerkan spesimen seperti yang
tertulis dalam 1.b. 4 . menyuntik berlabel kosong cawan dengan yang ditentukan mL
spesimen diencerkan (dari 1.c. ) 5 . Tuangkan 15 mL meleleh , Plat 45oC Hitungan agar ke
cawan petri diinokulasi . 6 . Aduk dengan memiringkan dan berputar-putar piring. Jangan
slop agar di tepi cawan petri . 7 . Biarkan agar untuk benar-benar gel tanpa mengganggu . (
sekitar 10 menit ) . . . . 8 Invert dan menetaskan di 37o C selama 24-48 jam 9 Jumlah ,
merekam , menghitung : hitung semua koloni (lagi : perhatikan bahwa koloni tertanam akan
jauh lebih kecil daripada mereka yang kebetulan terbentuk di permukaan ) . Sebuah pembesar
perhitungan koloni dapat membantu dalam menghitung koloni tertanam kecil . Catat data .
Hitung CFU / mL atau CFU / g . Masukkan hasil di meja Anda . [ CFU x faktor pengenceran
x 1/aliquot = CFU / mL ]
* Untuk 600 mL NA + 1 % glu : 9 g agar, 4,8 g kaldu nutrisi , 6 g dekstrosa . Larutkan bahan
pada 95oC , repipet menjadi 16 x 150 mm tabung , topi, autoclave , £ 15 , 15 menit .
Dinginkan sampai 45 oC sebelum menggunakan . Plate Count Agar dapat juga digunakan .