UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología

BIOTECNOLOGIA

BIORREMEDIACION DE SUELOS CONTAMINADOS CON

HIDROCARBUROS

INTEGRANTES:

 Argomedo Alquizar Elizabeth

 Benites Amaya Katherine
 Castillo Ruiz Maria
 Cruz Chiclayo Briggit
 Cruz Castillo Sheyla
 Gallardo Paredes Denis
 González Enríquez Yessenia
 Huayan Muñoz Gabriela
 Lavado Enco Alessandra
 Llanos Caballero Joyce

DOCENTE:
Dr. HEBER MAX ROBLES CASTILLO

TRUJILLO – PERU
2017
 BIOTECNOLOGIA MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

BIORREMEDIACION DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS

I. DEFINICION
Los hidrocarburos son compuestos orgánicos formados únicamente por átomos de carbono e
hidrógeno. La estructura molecular consiste en un armazón de átomos de carbono a los que
se unen los átomos de hidrógeno. Los hidrocarburos son los compuestos básicos de la
Química Orgánica.1

El gas natural es un hidrocarburo que puede encontrarse tanto en los subsuelos marinos como
continentales y se presenta en un estado gaseoso compuesto de metano principalmente, y de
propano y butano en menor medida.1

Los hidrocarburos son una fuente importante de generación de energía para las industrias,
para nuestros hogares y para el desarrollo de nuestra vida diaria. Pero no son sólo
combustibles, sino que a través de procesos más avanzados se separan sus elementos y se
logra su aprovechamiento a través de la industria petroquímica. Los hidrocarburos son fuente
de energía para el mundo moderno y también un recurso para la fabricación de múltiples
materiales con los cuales hacemos nuestra vida más fácil.1

Las empresas de hidrocarburos modernas realizan una gestión social y ambientalmente

responsable; el mejorar la calidad de vida de los pobladores de las zonas donde opera es
parte de su gestión de relacionamiento comunitario para evitar la contaminación ambiental. 1

II. CLASIFICACION DE HIDROCARBUROS

1. ALIFATICOS
Formados por cadenas de átomos de carbono en las que no hay estructuras cíclicas. Se les
denominan en general, hidrocarburos de cadena abierta o acíclicos1.
 Ejemplo: propano, pentano, 2-buteno

1.1. Saturados: Parafínicos de fórmula general CnH2n+2

El metano, CH4, primero de la serie, el etano, el propano y el n-butano son gaseosos a
temperatura ambiente; del n-pentano al n-cetano, C16, son líquidos; las moléculas para
fínicas normales de peso molecular superior son sólidas y constituyen la parafina. Todos
estos hidrocarburos se encuentran en el petróleo crudo2.
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1.2. No saturados: olefínicos o eilénicos

Según el número de dobles enlaces, la fórmula de estas moléculas será: CnH2n, CnH2n_2,
CnH2n_4, etc. Los carbonos se disponen en cadena recta o ramificada. Estos hidrocarburos
olefínicos no se encuentran en el petróleo crudo2

2. HIDROCARBUROS ALICÍCLICOS
O simplemente cíclicos, compuestos por átomos de carbono encadenados formando uno o
varios anillos.
 Ejemplo: ciclobutano, ciclopentano, biciclo [4,4,0] decano
El hidrocarburo más simple capaz de enlazarse de esa manera es uno que contiene tres
átomos de carbono: el ciclopropano (C3H6). Es muy reactivo, debido a la gran tensión que
ejerce la estructura nuclear en los enlaces químicos.

Al aumentar el número de átomos de un anillo, se reduce esa tensión; por ello, el

ciclobutano (C4H8) es más estable que el ciclopropano, pero menos estable que el
ciclopentano (C5H10). El ciclohexano (C6H12), compuesto cíclico de seis átomos de
carbono, es muy estable y se emplea mucho como disolvente en las reacciones químicas.
Muchos de los hidrocarburos cíclicos tienen propiedades similares a las que caracterizan a
los hidrocarburos de cadena lineal; por ejemplo, el ciclohexano es un líquido incoloro a
temperatura ambiente, inflamable e inmiscible en el agua, propiedades que son compartidas
por su análogo de cadena lineal -hexano (C6H14)2

3. AROMATICOS
Que constituyen un grupo especial de compuestos cíclicos que contienen en general anillos
de seis eslabones en los cuales alternan enlaces sencillos y dobles. Se clasifican,
independientemente de los hidrocarburos alifáticos y alicíclicos, por sus propiedades físicas
y químicas muy características2.
 Ejemplo: benceno, naftaleno, fenantreno

III. OBTENCION DE HIDROCARBUROS

A. MÉTODOS DE OBTENCIÓN DE ALCANOS

 HIDROGENACIÓN DE ALQUENOS: Un alqueno en presencia de un catalizador e

hidrogeno rompe el doble enlace y se convierte en un alcano. Donde el catalizador puede ser
Níquel, Paladio y Platino.
 MÉTODO DE BERTHELOT: Consiste en tratar los derivados hidroxilados de las
parafinas (alcoholes) por el ácido yodhídrico para obtener un derivado halogenado y agua;
posteriormente, tratar l derivado halogenado obtenido, con nuevas porciones del mismo
ácido, con lo cual se produce el alcano y se separa el yodo.
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 SÍNTESIS DE WÜRTZ: Consiste en tratar los derivados monohalogenados de

parafinas con el sodio metálico. A 200-300°C. se forman alcanos simétricos.

 HIDRÓLOSIS DEL REACTIVO DE GRIGNARD: Cuando se pone en contacto una

solución de haluro de alquilo con éter etílico seco, con virutas de magnesio, la solución se
hace lechosa, comienza a hervir y el magnesio metálico desaparece gradualmente. Reactivo
que se utiliza para convertir haluros de alquilo en alcanos.
 DESHALOGENACIÓN DE HALOGENUROS DE ALQUILO CON METAL
ÁCIDO: A un halogenuro de alquilo se le adiciona un metal, utilizando como catalizador un
ácido, el cual puede ser cloruro de hidrógeno.

B. MÉTODOS DE OBTENCIÓN DE ALQUENOS

 DESHIDRATACIÓN DE ALCOHOLES: Consiste en la eliminación de agua de un

compuesto por medio del calor y en ciertos casos en presencia de catalizadores como el ácido
sulfúrico.
 HIDROGENACIÓN DE ALQUILOS: Al adicionar hidrógeno a un alquino en
presencia de platino, níquel o paladio como catalizadores, se forma un alqueno.
 DESHALOGENACIÓN: es un proceso por medio del cual, se reduce el número de
átomos de halógeno que se encuentra en una molécula donde existen dos átomos de
halógenos.
 DESHIDROHALOGENACIÓN: Un proceso para la deshidrohalogenación de
alcanos halogenados, el cual implica poner en contacto un alcano halogenado que tenga 3 o
más átomos de carbono, con un catalizador de haluro de tierra rara u oxihaluro de tierra rara.

C. MÉTODOS DE OBTENCIÓN DE ALQUINOS

 DESHIDROHALOGENACIÓN DE DERIVADOS DIHALOGENADOS: La

deshidrohalogenación de derivados halogenados en alquenos. Es una eliminación
biomolecular de halógenos, y el reactivo es KOH.
 DESHALOGENACIÓN DE DERIVADOS TETRAHALOGENADOS: Proceso por el
cual un alcano tetrahalogenado rompe sus enlaces y se convierte en un alquino y halógeno
libre.
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IV. ACCIDENTES CON HIDROCARBUROS

La industria de los hidrocarburos es la más popular a nivel mundial por tener entre sus
productos más comerciales el petróleo y la gasolina cuyos productos son de la mayor
demanda a nivel mundial. Es esta industria la que causa uno de los mayores impactos
ambientales en su extracción, transporte y distribución; teniendo como medios de
contaminación el agua, aire y tierra. Las mermas de petróleo causan un daño irreversible en
zonas acuíferas donde se habitan especies marinas provocando que especies de animales
migren o mueran por el impacto. 3

En la Industria de los Hidrocarburos se han reportado muchos accidentes de los cuales

muchos de ellos han tenido un impacto de gran magnitud en el mundo, tanto en el ámbito
económico, energético y ambiental. Estos accidentes se dan en la exploración, perforación,
transporte del hidrocarburo; causando daños a la flora y fauna que habita dicho lugar también
dañando el suelo y el agua.4
Los derrames pueden venir de dos fuentes:

a) Terrestres:
- Ruptura de ductos.
- Pérdidas de plantas industriales.

b) Marinas:
- Buque tanque (lavado y limpieza de tanques, carga y descarga, colisiones).
- Pozos mar adentro (ruptura de ductos, descontrol de producción).

 Causas de los accidentes con hidrocarburos:

- Fuga de depósitos
- Vertidos accidentales
- Enterramiento de residuos que contienen hidrocarburos
- Lavado de aglutinantes de caminos asfaltados
- Riegos de caminos de tierra con aceites residuales para evitar el polvo

Existe un organismo internacional que se encarga de crear políticas para prevenir accidentes
o derrames de crudo en el transporte del mismo el cual es la Organización Marítima
Internacional el cual es un organismo especializado de la ONU5.

 Accidentes en el mundo con hidrocarburos:

 Exxon Valdez (Alaska 1989)
 Plataformas petrolíferas
 Piper Alpha (06/07/1988)
 Encallamiento del Nakhodka, Japon (1997)
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 Naufragio del Erika, Francia (1999)

 Incidente del Katja en 1997
 Naufragio del Tanio en 1980
 El naufragio del Bohlen
 El Baltic Carrier en marzo 2001, en Dinamarca (2 700 toneladas)
 El Nakhodka en 1997 en Japón (6 200 m³)
 El Argo Merchant en 1976 ante las costas de Nantucket en EEUU (5 700 m³)
 El Hamilton Trader en 1969 en la bahía de Liverpool en Gran Bretaña (640 m³)

 Accidentes con hidrocarburos en el Perú:

 Derrames de petróleo en el Perú en el año 2005:

- Conchán – enero 01:

Se produjo otro derrame de aproximadamente 10 barriles en las playas de Conchán
involucrando a la Refinería Conchán y el buque “BAP Talara” de la Marina de Guerra del
Perú.

- Derrames en la selva
La empresa PlusPetrol fue sancionada con dos multas por daño al medio ambiente.

 Derrames de petróleo en el Perú en el año 2007:

- Talara – febrero 12:
Se dio una fisura en la línea submarina del terminal de boyas de Petro-Perú después de que el
buque-tanque “Cabo Hellas” había terminado de cargar el crudo desde la refinería de Talara.
Se originó según la empresa “un leve derrame” de petróleo crudo en el mar frente a la zona
conocida como Punta Arenas, al sur de Talara, en el departamento de Piura.

- Bagua – mayo 07:

Se produjo la caída del alud en un sector de la provincia de Bagua, en el departamento de
Amazonas, sector comprendido entre la estación 6 de bombeo y la estación de refinería el
Valor, cercana a Bagua. El oleoducto Nor Peruano tiene 854 Km. y parte desde el poblado
San José de Saramuro, en el nororiental departamento de Loreto, y desemboca en el océano
Pacífico, en el puerto de Bayóvar, en el departamento norteño de Piura. Según la empresa se
derramaron 100 barriles de crudo. En su nota de prensa la empresa manifestó: “No se ha
producido mayor contaminación del río Marañon ni de la zona adyacente”. Según pobladores
de la zona sin embargo se efectuó el comienzo del derrame aproximadamente a las 11:00
p.m. del día 7 de mayo y el equipo encargado de reparar el ducto recién se hizo presente a las
10:00 a.m. del día 9 de mayo, observándose la mancha negra del crudo en la zona de la
desembocadura del río Nieva el día martes a las 12:00 del día y al día siguiente esta se
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observó en la zona de Saramiriza aproximadamente a 180 km. de la desembocadura del río

Nieva. Según estimados de especialistas independientes sin embargo al producirse la rotura
del ducto, se calcula que de derramaron aproximadamente entre 4,000 a 6,000 barriles de
petróleo, según las observaciones realizadas y los datos de hora del rompimiento y hora de la
reparación y el diámetro del oleoducto, considerando además la distancia de válvula a
válvula.

- Callao – septiembre 30:

Derrame de 120 toneladas de petróleo en el muelle Minerales de la Empresa Nacional de

Puertos del Perú (ENAPU) en el Callao. El buque “Lydia Oldendorff” de bandera Antigua y
Barbuda sufrió una avería en la toma de descarga de agua de lastre, produciéndose una fuga
de combustible IFO 380 (petróleo).

- Selva peruana:
La Federación de Comunidades Nativas del río Corrientes (FECONACO) responsabilizó a la
empresa Pluspetrol por 6 derrames de petróleo en el año 2007.

 Derrames de petróleo en el Perú en el año 2008:

- Torata – enero 26:

Un camión cisterna boliviano que transportaba 9.350 galones de petróleo desde Ilo al vecino
país, volcó a la altura del kilómetro 94 de la Carretera Binacional, en la localidad de Torata.
Se derramaron más de nueve mil galones de petróleo sobre el cauce de los ríos Chilligua y
Huaracane, los cuales abastecen de agua a todo el valle de Moquegua e Ilo

- Tumbes – enero 30:

Una unidad petrolera de la Marina de Guerra del Perú. La nave tenía una antigüedad de 43
años, pues fue construida en 1965 en Noruega. El 3 de agosto 1995 se había autorizado la
compra de dicha unidad, la cual fue asignada a la Oficina Naviera Comercial de la Marina
bajo la denominación de buque auxiliar transporte de petróleo con número de casco 157. La
nave transportaba crudo entre la plataforma Corvina, en el Lote Z-1 (Tumbes), y la refinería
de PetroPerú en Talara (Piura). Las llamaradas de fuego alcanzaron varios metros de altura.
Dos miembros de la Marina que formaban parte de la tripulación del BAP Supe se lanzaron
hacia la proa de la nave para desatar sus amarras y lograron que esta fuera arrastrada por la
corriente. La nave empezaba a hundirse. La acción dio tiempo a que una barcaza de una
empresa privada llegara al lugar y rescatara a varios heridos.
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- La Libertad – setiembre 11:

Tres hectáreas de sembríos del caserío de Plazapampa, en la provincia de Otuzco (La

Libertad), entre los kilómetros 55 y 56 de la carretera a la sierra de La Libertad fueron
contaminadas por un camión cisterna cargado de combustible perteneciente a la compañía
Prímax; la cual, abastece de petróleo al Proyecto Minero Lagunas Norte de la empresa
minera Barrick Misquichilca. La empresa Primax removió la tierra afectada, pero lugareños
señalaron que esto no es suficiente pues el petróleo filtró hasta la capa interna del suelo y
llegó al río Moche, por lo cual, hasta cinco valles estarían afectados.

 Derrames de petróleo en el Perú en el año 2009:

- Amazonas – enero 10:

A 45 minutos de Iquitos por el río Amazonas se ubica Barrio Florido, un centro poblado con
1.500 habitantes dedicados a la pesca, y que está asentado al lado de una quebrada que limita
con la refinería de Petro-Perú. Lluvia hizo que cuatro barriles de hidrocarburos se rebalsaran
en la quebrada y como consecuencia el agua de la quebrada donde pescan y se bañan emite
un fuerte olor parecido al de la gasolina. Los vecinos protestaron porque “Muchos niños que
se bañan en esta quebrada tienen sarpullido y manchas rojas en la piel”.

- Talara – febrero 28:

El derrame de hidrocarburo, perteneciente a PetroPerú, ocurrió a las 10:45 a.m.

al encontrarse realizando el “BAP Bayóvar” (Barco de la Marina de Guerra del Perú)

abastecimiento de combustible en el muelle de Talara. Se derramó una cantidad desconocida
de combustible tipo búnker.

- Pucallpa – marzo 03:

Los tubos de metal que transportan petróleo hasta la refinería de Pucallpa tienen una
antigüedad de cincuenta años. El oleoducto antiguo sufrió averías y causó un derrame de
petróleo crudo, originando una fuerte contaminación ambiental en una zona ubicada a seis
kilómetros de Pucallpa. Ante la alarma dada por los vecinos de inmediato personal de la
empresa Maple Gas iniciaron los trabajos para recoger los restos del combustible derramado.
El daño ecológico es permanente por los continuos derrames. En la siguiente pelicula se
puede apreciar la sofisticada tecnologia de limpieza (trapos viejos) y la motivación de los
trabajadores de Maple Gas 5.
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V. TÉCNICAS DE BIORREMEDIACIÓN EN SUELOS CONTAMINADOS

POR HIDROCARBUROS
Biorremediación: Es la utilización de tecnologías mediante las cuales se estimula la
biodegradación del contaminante o la capacidad de recuperación del ecosistema mediante
procesos biológicos, usando organismos vivos, componentes celulares y enzimas libres, al
objeto de minimizar las consecuencias de un contaminante. Estos procesos de
biodegradación pueden ser llevados a cabo por la microbiota autóctona de la zona
contaminada o por microorganismos adicionados al efecto, en ambos casos, lo que se
consigue es una biotransformación de sustancias peligrosas en sustancias menos tóxicas o
inocuas.
Algunas tecnicas de biorremediacion son:

 Micorremediacion
 Bioaireacion
 Cultivo de tierras
 Bioaumentacion
 Bioestimulacion
 Bioceldas o biopilas
 Fitoremediacion

 MICORREMEDIACIÓN
La micorremediación es una de las formas de biorremediación existentes en la actualidad,
se basa en el empleo de hongos para realizar un proceso de descontaminación en un área
determinada, el micelio o cuerpo vegetativo del hongo es pieza clave en el desarrollo del
metabolismo degradador de hidrocarburos. Debido a su capacidad para descomponer
materia orgánica, los micelios pueden ser empleados para transformar hidrocarburos e
incluso gases nerviosos como el VX (sustancia extremadamente tóxica) y el sarín
(compuesto organofosforado) en fertilizantes orgánico, de un modo económico6.
Si se quiere realizar una micorremediación de suelo, se coloca paja, idealmente
pasteurizada o desinfectada, sobre el terreno contaminado; y sobre ésta se colocan las
semillas (inóculos de micelio crecido en paja o granos de trigo); permitiendo su adecuado
crecimiento7.

Para descontaminar algún recurso hídrico, por ejemplo, un derrame de petróleo, se colocan
mangas de arpillera rellenas con paja de trigo, donde se cultivan dichos inóculos. De esta
manera, funciona como filtro y barrera mecánica, para evitar que el producto químico siga
contaminando, y a la vez se pueda recuperar el agua7.

Ejemplo de aplicación8:
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Hongos aislados desde sedimentos de fiordos chilenos degradadores de oxitetraciclina

Resumen:

Los hongos marinos por su condición heterótrofa, su adaptabilidad a la variabilidad

ambiental y su resistencia específica a diferentes estresores, son una opción para ser
empleados como restauradores de sectores contaminados con antibióticos. Con esta
hipótesis se realizó la investigación en una zona de cultivo de salmones en el sur de Chile.
Para ello se evaluó la concentración de oxitetraciclina (OTC) de sedimentos de diferentes
zonas cercanas a jaulas de cultivo de salmón. También se aisló de sedimentos cepas de
hongos para evaluar su capacidad de degradar OTC. Los resultados obtenidos mostraron en
el área de estudio concentraciones de OTC que fluctuaron entre 4,62 ± 0,12 a 24,1 ± 1,03
µg g-1, en el sector Este a la balsa jaula y en los sedimentos de 100 m de profundidad.
Además, de estos sedimentos se aisló 38 cepas de hongos y se identificó y trabajó con 6
cepas del Phylum Ascomycetes: Penicillium commune, Aspergillus terreus, Beauveria
bassiana, Trichoderma harzianum, Epicoccum nigrum y Emericellopsis alkalina.

Conclusión:

Las pruebas de biodegradación demostraron que las cepas fueron capaces de degradar OTC
en porcentajes que fluctuaron entre 76 y 92%. Los resultados representan un primer paso en
la implementación de procesos que permitan la biorremediación de residuos de OTC desde
los sedimentos.

 BIOAIREACIÓN
La bioaireación o bioventing es una biorremediación “in-situ” que utiliza microorganismos
endógenos para degradar contaminantes tanto del subsuelo como de las aguas subterráneas
contaminadas. El objetivo de esta práctica es estimular a las bacterias ya presentes en el
área degradada, para así acelerar la biodegradación de los hidrocarburos. Consiste en
insuflar oxígeno y, si es necesario, añadir nutrientes para facilitar el crecimiento bacteriano.
El oxígeno es inducido a través de una inyección directa de aire en el lugar donde se ha
producido la contaminación9.

Se emplea con éxito como asistencia para acelerar la degradación de residuos de crudo,
aunque también para disipar compuestos orgánicos volátiles (VOC en sus siglas en inglés),
vapores o gases presentes en combustibles fósiles, disolventes y pinturas, los VOC son
liposolubles y afectan al sistema nervioso central, también pueden ser cancerígenos, como
el benceno. De ahí la conveniencia y premura de reducir su presencia en zonas
contaminadas9.
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Ejemplo de aplicación10:

Evaluación de las técnicas de atenuación natural, bioventing, bioaumentación y

bioaumentación- bioventing, para la biodegradación de diésel en un suelo arenoso, en
experimentos en columna
Resumen:

El presente estudio fue desarrollado dentro del convenio de cooperación institucional

realizado entre la Universidad Pontificia Bolivariana, Seccional Bucaramanga y el Instituto
Colombiano de Petróleos – ICP, con el fin de dar solución a una problemática que se
presenta en las zonas de manejo de hidrocarburos, donde se evidencian suelos arenosos
contaminados con diésel hasta concentraciones del 6% y a una profundidad máxima de 80
cm. Para el desarrollo metodológico se contaminó un suelo artificialmente con diésel para
evaluar las técnicas de Bioventing, Atenuación Natural, Bioaumentación y Bioventing-
Bioaumentación, utilizando montajes en columnas. Se definieron los parámetros de diseño
y seguimiento como dimensiones de las columnas, caudal de entrada, concentración de
diésel, oxígeno disuelto y crecimiento bacteriano; para la bioaumentación se inoculó el
suelo con un consorcio bacteriano producido por el ICP. Se realizaron los montajes
experimentales por triplicado y se controló el proceso durante cuatro meses. Con la técnica
de Bioventing-Bioaumentación se alcanzaron porcentajes de remoción hasta del 75% y con
las técnicas de Atenuación Natural y Bioaumentación, los porcentajes de remoción no
superaron el 48%. El estudio mostró que el consorcio bacteriano utilizado y evaluado
mediante las técnicas de Bioaumentación y Bioventing-Bioaumentación, no potencializó la
eficiencia de los procesos de biorremediación del suelo arenoso contaminado con diésel.
Conclusión:
Los resultados obtenidos mostraron que en la técnica de Bioventing se obtuvieron
porcentajes de remoción de diésel hasta del 97%.

 CULTIVO DE TIERRAS

El ser humano ha empleado el cultivo agrícola como

tratamiento de biorremediación del suelo superficial
desde tiempos inmemoriales. El proceso es tan sencillo
como efectivo: suelos contaminados por purines,
sedimentos o lodos tóxicos, se incorporan a la
superficie del suelo cultivable, que es arado en varias
ocasiones para airear la nueva composición11.

Se ha usado con éxito durante años para disipar altas

concentraciones de hidrocarburos y pesticidas, sin usar más equipamiento que el usado en
cualquier explotación agraria convencional, desde un arado con tiro animal a un sofisticado
tractor11.
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La mezcla y arado de suelos con hidrocarburos y pesticidas para aumentar su oxigenación,

estimula la flora microbiana que acelerará, con la ayuda de la cosecha elegida, la
degradación de componentes tóxicos para el medio ambiente12.

Cuanto mayor el peso molecular de un suelo mixto (cuanto más elevada la concentración de
hidrocarburos), mayor lentitud en el proceso de degradación. Los compuestos más clorados
y nitrados son más difíciles y lentos de biodegradar mediante el cultivo de tierras12.

 BIOAUMENTACION

Esta tecnología se utiliza cuando se requiere el tratamiento inmediato de un sitio

contaminado, o cuando la microflora autóctona es insuficiente en número o capacidad
degradadora13.

Consiste en la adición de microorganismos vivos, que tengan la capacidad para degradar

el contaminante en cuestión, para promover su biodegradación o su biotransformación. El
tamaño del inóculo a utilizar, depende del tamaño de la zona contaminada, de la
dispersión de los contaminantes y de la velocidad de crecimiento de los microorganismos
degradadores14.

Aplicaciones:
Se ha usado para tratar suelos contaminados con herbicidas (2,4-D, clorofam), insecticidas
(lindano, clordano, paratión), clorofenoles (PCP) y nitrofenoles, BPC, HTP y HAP
También se ha aplicado efectivamente para tratar desechos con concentraciones
relativamente altas de metales.

 Limitaciones. Antes de llevar a cabo la bioaumentación en un sitio, deben realizarse

cultivos de enriquecimiento, aislar microorganismos capaces de cometabolizar o utilizar
el contaminante como fuente de carbono, y cultivarlos hasta obtener grandes cantidades
de biomasa.

 Costos y tiempos de remediación.

Es una tecnología que puede durar varios meses o años, y su utilización no implica mucho
capital ni costos de operación.

Ejemplo de aplicación15:

Bioaumentaciòn y sustancias húmicas en la biodegradación de hidrocarburos del petróleo

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Resumen:
Se estudió el efecto de un producto húmico y la bioaumentacion en la biorremediación de
un suelo petrolizado mediante ensayos a escala de laboratorio. Se aislaron 29 cepas
bacterianas del suelo contaminado y se conformó un cultivo mixto con aquellas que
dieron respuesta positiva a un grupo de pruebas enzimáticas. La actividad
hidrocarburolıtica fue corroborada mediante ensayo en medio acuoso empleando gasoil
como ´única fuente de carbono. El ensayo de biodegradabilidad en el suelo se construyó
bajo un diseño de bloques al azar en parcelas divididas, estando la parcela principal
definida por muestras del suelo contaminado con/sin adición de inoculo y la parcela
secundaria por los tratamientos con 0 %, 1 %, 3 % y 5 % de humus, a los que se hizo
seguimiento de la densidad bacteriana y el contenido de grasas y aceites durante 80 días.
Los mayores niveles de remoción de aceites y grasas (97,2 %, 96,0 % y 93,1 %) se
obtuvieron para los tratamientos con humus e inoculación combinados.

Conclusión:

La bioaumentacion con un inóculo autóctono fue favorable para la biodegradación de los

hidrocarburos en todos los casos estudiados. La incorporación de humus líquidos al suelo
aceleró las tasas de biodegradación en todos los casos. Se obtuvieron los mayores niveles
de remoción de grasas y aceites en los casos en que se emplearon los tratamientos de
bioaumentacion y adición de humus combinados, con un aumento de la remoción para
mayores concentraciones de humus.

 BIOESTIMULACION
Consiste en la estimulación de las poblaciones microbianas indígenas existentes en el suelo
mediante la adición de nutrientes, regulación de condiciones redox, cambio de pH, u otras
condiciones diversas sobre las que se puede influir.

En este sistema, el agua subterránea es conducida a la superficie por medio de un sistema

de pozos de extracción, se acondiciona en un reactor para volverla a inyectar y estimular la
degradación bacteriana de los contaminantes del subsuelo y del acuífero. En el reactor en
superficie se agregan al agua: nutrientes, oxígeno, microorganismos previamente
seleccionados y adaptados, y el efluente se retorna al subsuelo por medio de pozos de
inyección, aspersores superficiales o galerías de infiltración distribuidas a lo largo y ancho
del sitio que se requiere remediar. Algunas veces esta técnica utiliza biosurfactantes para
ayudar al lavado de contaminantes del suelo.

Las características determinantes en la selección, el éxito o el fracaso de esta técnica de

remediación son:
Tipo de suelo. Los suelos deben ser lo más homogéneos posible, con un valor de porosidad
y permeabilidad al aire adecuado (> 10-10 cm2).
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Deben existir unas condiciones óptimas de pH (6 y 8), de humedad (12-30% en peso),

temperatura entre 0 y 40 ºC y los nutrientes del suelo en relación N:P de 10:1.

Esta técnica es muy útil en el tratamiento de extensas zonas contaminadas de centros

industriales donde no es posible o conveniente parar el proceso operativo para realizar el
tratamiento requerido.
Ejemplo aplicativo16:

Evaluación de la bioestimulación en la biodegradación de TPHs en suelos contaminados

con petróleo.
Resumen:

El presente estudio evaluó el efecto de la adición de nutrientes (N y P) en forma de sales

inorgánicas simples(SIS) y un fertilizante inorgánico compuesto (FIC) en la biodegradación
de hidrocarburos totales de petróleo(TPHs). Se emplearon mesocosmos con suelo
contaminado (20,000 mgTPH/kgps) y se evaluó un controlabiótico y un control sin
nutrientes (n=3). El estudio se realizó durante 125 días con 5 eventos de muestreo(EM).
Durante el estudio se evaluaron y compararon dos métodos analíticos para la cuantificación
de TPHs: elmétodo D-5831 (ASTM, 1995) y el método modificado de extracción por
agitación mecánica y determinacióngravimétrica (EAMG) (EPA, 1994; Schawab et ál.,
1999). Para monitorear la biorremediación se evaluaronparámetros físico-químicos: pH,
porcentaje de humedad y nutrientes, y microbiológicos: recuento en placade heterótrofos y
degradadores de HCs por la técnica del número más probable (NMP-INT). Finalmente,se
realizó una caracterización bioquímica de los degradadores. Las mayores tasas de
degradación de TPHs seobservaron durante los primeros 28 días en SIS y FIC (278 y 235
mgTPHs/kgps/d, respectivamente) conrelación a los controles (110 mgTPHs/kgps/d). El
control abiótico mostró que la biodegradación intrínseca fueel proceso predominante en la
degradación de TPHs durante el estudio. Aunque no hubo diferenciassignificativas en las
concentraciones de TPHs a través del tiempo, entre los tratamientos y el control
sinnutrientes, las SIS mostraron un mayor porcentaje de degradación (39% y 41% por los
métodos D-5831yEAMG, respectivamente). El bajo número de degradadores
(1x103NMP/gps) y el bajo pH (4,1) alcanzado enlos tratamientos pudieron haber limitado
mayores porcentajes de degradación.Stenotrophomonas maltophilia fue la especie
predominante durante el estudio (34%).
Conclusiones:

Las mayores tasas de degradaci ó n se presentaron en los tratamientos ( SIS y FIC ) durante
los primeros 28 d í as, lo cual indica que la adici ó n de nutrientes es- timul ó la degradaci ó
n de TPHs. Sin embargo, esta reducci ó n despu é s de los 28 d í as no fue significati-
vamente diferente al control sin nutrientes, debido al bajo pH que se present ó en los
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tratamientos. El pH pudo inhibir el crecimiento de heter ó trofos y degra- dadores y, por lo

tanto, reducir las tasas de degrada- ci ó ndeTPHs

 BIOCELDAS O BIOPILAS
Es un tratamiento de biorremediación en condiciones no saturadas, que consiste en la
reducción de la concentración de contaminantes derivados del petróleo en suelos excavados
mediante el uso de la biodegradación a partir de la construcción de un sistema cerrado que
permita controlar lixiviados, hidrocarburos volátiles y algunas variables de diseño mediante
el suministro de nutrientes y oxígeno a través de la pila del suelo. La técnica consiste en la
formación de pilas de material biodegradable de dimensiones variables, formadas por suelo
contaminado y materia orgánica (compost) en condiciones favorables para el desarrollo de
los procesos de biodegradación de los contaminantes. En el fondo de la pila el sistema
cuenta con un aislante que generalmente son geomembranas o canales plásticos para el
control de lixiviados. Estas pilas de compost pueden ser aireadas de forma activa, volteando
la pila, o bien de forma pasiva, mediante tubos perforados de aireación, con distribución
permanente de nutrientes, microorganismos y aire. En principio, las biopilas se pueden
aplicar a la mayoría de los compuestos orgánicos, siendo más eficaz en los compuestos de
carácter más ligero.
Ejemplo aplicativo17:

Saneamiento de suelos contaminados con hidrocarburos utilizando biopilas en degollado,

Jalisco, México
Resumen:

El sitio contaminado se localiza en el municipio de Degollado en el Estado de Jalisco, se

trata de una toma clandestina descontrolada (TCD), el punto de fuga se encuentra a una
altura de 1,578m sobre el nivel del mar, el derrame ocasionado por la toma clandestina fue
de diesel y gasolina magna, siendo su escurrimiento a una zona agrícola en la Comunidad
La Loma. El saneamiento en este sitio involucró la tecnología de Biorremediación “On
Site” mediante la utilización de biopilas o bioceldas. El volumen del material saneado fue
de 11,274.82 m3 con un valor inicial de contaminación de 5,820.40 mg/kg de HTP
(hidrocarburos totales del petróleo), por encima de los valores máximos permitidos en la
NOM-EM-138-ECOL-2003. La caracterización de la pluma de contaminación,
considerando la información del contaminante, geología, topografía, presencia del nivel
freático y clima, aportaron información suficiente para decidir la técnica de saneamiento.
Los trabajos de restauración del sitio se llevaron a cabo con una eficiencia del 99%,
consistiendo en medidas de seguridad para la extensión del daño ambiental, como la
extracción del suelo afectado para su tratamiento en biopilas, monitoreo de la evolución del
saneamiento, con muestreo y análisis semanal para monitorear la evolución de la
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restauración. Una vez remediado el suelo hasta alcanzar los niveles de limpieza marcados
por la norma de emergencia y con la aprobación de las autoridades, se regresó el material,
al sitio del que fue excavado, para ser utilizado en agricultura.

Conclusiones:

En el Km 121+800, el material contaminado con valores arriba de norma con un volumen

de 11,274.82 m3 fue restaurado exitosamente mediante la utilización de la tecnología de
saneamiento de biorremediación. Los valores al final de la biorremediación se encuentran
por debajo de los criterios definidos por el Grupo de Trabajo y la NOM-EM-138-ECOL-
2002. La Biorremediación es considerada como la vía más factible para la degradación de
suelos contaminados, es efectiva y económica. El Tiempo de tratamiento, comparado con
otros métodos biológicos, es relativamente corto. La empresa Energía y Ecología de
México S.A. de C.V. privilegia métodos biológicos, solamente cuando es estrictamente
necesario utiliza métodos físico-químicos o la combinación de ambos.

 FITOREMEDIACION
La fitorremediación se refiere al tratamiento de problemas medioambientales mediante el
uso de plantas, un proceso más sencillo y mucho menos costoso que modalidades
tradicionales, como excavar el material contaminante y depositarlo en un lugar controlado.
Asimismo, como el resto de modalidades de biorremediación, se evita el impacto ecológico
de la maquinaria y el transporte de las sustancias peligrosas, que además deben ser
almacenadas y no desaparecen.

En cambio, la fitorremediación usa plantas que absorben del suelo las sustancias
contaminantes. Se han usado técnicas de restauración medioambiental con plantas en
distintas situaciones: tanto cuando la contaminación se concentra en el suelo como el agua
o incluso el aire.

Se emplean en el proceso plantas con la habilidad de absorber y acto seguido degradar o

eliminar pesticidas, solventes, explosivos, hidrocarburos y sus derivados, así como otras
sustancias tóxicas tales como restos de metales pesados. La fitorremediación se ha usado
con éxito para restaurar el suelo de minas abandonadas, incluyendo minas de carbón, donde
abundan sustancias tóxicas como los bifenilos policlorados o PCB.

 Fitoextracción: Es el proceso por medio del cual, tanto los contaminantes

metálicos, como los contaminantes orgánicos del suelo, son absorbidos
directamente por las plantas e incorporados a su biomasa, que con posterioridad
será recolectada para su destrucción.
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 Fitovolatizacion: Proceso por el cual las plantas y la actividad microbiana asociada,

a través de enzimas especializados, pueden transformar, degradar y finalmente
volatilizar los contaminantes desde el suelo. La volatilización puede producirse
tanto desde el sistema radicular como desde la parte superficial del suelo.
 Fitodegradación: Es el proceso mediante el cual las plantas toman el contaminante
y lo metabolizan transformándolo en un material sin riesgos para el medio natural.
 Rizodegradación: Es el proceso por medio del cual las raíces de las plantas, su
microflora asociada y/o los productos excretados destruyen el contaminante en la
zona radicular.
Ejemplo aplicativo18:

Uso de Panicum máximum y Brachiaria brizantha para fitorremediar suelos contaminados

con un crudo de petróleo liviano.
Resumen:

Se evaluó la capacidad de las gramíneas Panicum maximumy Brachiaria brizanthapara

fitorremediar un suelo contaminado levemente (3%) con un hidrocarburo de petróleo
(HCP) liviano en ensayos de invernadero, tomando en cuenta los efectos de la
contaminación sobre la germinación de las semillas y la sobrevivencia y producción de
materia seca por las plántulas, así como el tiempo y magnitud de la reducción de la carga
del contaminante. Luego de 45 días no se encontraron diferencias significativas en la
germinación de semillas en suelos contaminados y no contaminados. Sin embargo, la
sobrevivencia de plántulas de P. maximumfue significativamente menor en los suelos
contaminados (64%) respecto al control (93%), mientras que para B. brizanthano se
obtuvieron diferencias (82 vs. 100%). La presencia de HCP causó también una fuerte
reducción en la producción total de materia seca (aérea y subterránea), siendo en el caso de
B. brizanthaun 11,4% de la producción obtenida sin contaminación, mientras que para P.
maximumapenas el 1,2%. Pese a la fuerte reducción de la producción en los primeros 45
días del ensayo, los suelos con las gramíneas presentaron una disminución del contenido de
aceites y grasas a los 240 días respecto a los suelos contaminados, sin vegetación, hecho
que demuestra el potencial que tienen las especies utilizadas para descontaminar suelos con
concentraciones de crudo liviano inferiores o iguales al 3%.
Conclusiones:

La contaminación de suelos con HCP liviano a una concentración del 3 % produjo un fuerte
impacto en la producción de biomasa radical y foliar de las plántulas de P. maximun y B.
brizantha . Sin embargo, a los 240 días, estas gramíneas lograron una reducción de la
contaminación respecto a los suelos carentes de vegetación. Esto demuestra la capacidad de
P. maximun y B. brizantha para fitorremediar suelos contaminados con HCP livianos
(menor o igual al 3%) donde estas especies pueden procurar una recuperación efectiva,
pasiva y estéticamente agradable del terreno.
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VI. CAMPOS DE INVESTIGACIÓN

 CASO DE EXXON VALDEZ

Los derrames de petróleo provocados por accidentes en
el mar han sido relativamente abundantes a lo largo de
las últimas décadas. Si bien algunos han sido tan
importantes en cuanto a la cantidad de combustible
arrojado al mar y el daño ecológico causado, hay
algunos que han quedado para la historia como
verdaderos desastres. El más famoso de estos desastres
ecológicos es el accidente del petrolero Exxon Valdez, y
que es considerado la primera gran catástrofe medio
ambiental de su tipo.

El desastre del Exxon Valdez fue un derrame de petróleo provocado por el petrolero Exxon
Valdez tras encallar el 24 de marzo de 1989, con una
carga de 11 millones de galones / 41 millones de litros
de crudo, en Prince William Sound, Alaska, vertiendo
37.000 toneladas de hidrocarburo.
Alaska vivió la peor tragedia ecológica de su historia al
encallar el petrolero y verter millones de litros de crudo
que se expandieron sobre más de 2.000 kilómetros de
costa. Para la limpieza de la marea negra se utilizaron
aspiradores, mangueras de agua caliente a presión, se
trasladó el crudo que aún contenía el Exxon Valdez a otro petrolero. Los daños a la fauna
que se produjeron en esta zona aún se siguen estudiando.

Fig. 01 Magnitud del Accidente de Exxo Valdez

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El vertido condujo a la aprobación de nueva legislación medioambiental en los Estados

Unidos de América (Oil Pollution Act 1990).

Dentro de los métodos de limpieza utilizados, fue el uso de los microorganismos. Donde el
gobierno norteamericano contrató a Gene Kaizer, un
científico experto en agentes antigrasos, quién en
compañía de los gemelos Jay y Jack Collins, descubrieron
que los microorganismos llamados Arqueas, tienen la
capacidad de metabolizar moléculas de hidrocarburos,
desintegrando por completo así esta mancha y evitando
de esta manera una multa billonaría de parte de Canadá a
USA

Debido a esos grandes accidentes ocurridos a lo largo de la historia, se han implantado

técnicas para remediar estos grandes daños contra los ecosistemas, así pues la
MICROBIOLOGÍA tiene un extenso campo de investigación para controlar este problema,
como lo es la biorremediación.

Siendo el Factor microbiológico uno de los más importantes en la biorremediación de los

ambientes contaminados por hidrocarburos a través de la transformación biológica de
compuestos orgánicos, catalizada por acción de las enzimas. La biodegradación de un
compuesto específico es frecuentemente un proceso que se realiza paso a paso en el cual se
involucran muchas enzimas y muchos organismos. Las enzimas son específicas en términos
de los compuestos que atacan y las reacciones que catalizan. Más de una enzima es
normalmente requerida para romper una sustancia orgánica. Frecuentemente, los
organismos que tienen las enzimas para degradar están presentes en el suelo.

Siendo uno de los campos de investigación: La búsqueda de microorganismos en la

biorremediación como: mohos, levaduras, bacterias, actinomicetos, protozoos, algas,
virus.

Teniendo dentro de estos a:

- Rhodococcus. Uno de los géneros bacterianos más explotados en bioprocesos no

convencionales es Rhodococcus, un grupo único consistente en microorganismos
que presentan una gran diversidad metabólica, capaz de transformar, biodegradar y
utilizar como única fuente de carbono compuestos hidrófobos.

- Pseudomonas. Las bacterias de este género poseen la habilidad para utilizar

diversos substratos, incluyendo aquellos creados por el petróleo. Las Pseudomonas
son bacterias Gram negativas, obicuas, que pertenecen a la subclase gamma de las
Proteobacterias.
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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

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