UNIVERSIDAD DE SANTANDER

FACULTAD DE SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLINICO

GUIA DE LABORATORIO 3
METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS

Nombre del Profesor : Carolina Coronel Ruiz

Nombre del Curso Bioquímica - Correlación
Código del curso: 17408
Horas totales (desarrollo de la práctica) 4 horas

1. Introducción
En individuos sanos, la concentración de glucosa en el plasma varía sólo ligeramente durante el día y en
general se sitúa en el intervalos de 45 -130 mg/dL.
Este grado de aumento es diferente del que se observa cuando se realiza una prueba de tolerancia a la
glucosa, en la cual se administra una carga de glucosa a individuos sanos (jóvenes, adultos jóvenes) las
concentraciones de glucosa puedes oscilar de 20 a 50 mg/dL por encima de los niveles obtenidos cuando los
mismos individuos consumen un desayuno con 75 g de hidratos de carbono.
En individuos diabéticos insulinodependientes, las concentraciones de glucosa en sangre pueden ser
anormales durante el día, con fluctuaciones de la glucosa en sangre de 150 mg/dL en adelante.
Los niveles de glucosa plasmática inferiores a 45 mg/dL son poco frecuentes y requieren una investigación,
especialmente en individuos asintomáticos. Los niveles bajos pueden reflejar una respuesta fisiológica normal
de la concentración plasmática de la glucosa o puede demostrar un indicio de un trastorno del metabolismo de
la glucosa.
2. Competencias

2.1 Competencia general

Desarrollar en el estudiante habilidad y destreza en la determinación del nivel de glucosa en
muestras biológicas e incentivar su capacidad crítica para interpretar, analizar los resultados
obtenidos

2.2 Competencias específicas

Comprender y aplicar los conceptos relacionados con el metabolismo de carbohidratos

Desarrollar en el estudiante su capacidad crítica para observar, analizar y extraer conclusiones a

partir de los resultados obtenidos

3. Lista de Equipos
Espectrofotómetro
Microlab
Micropipeta 10 -100 μL
Micropipeta 200 – 1000 μL

3.1. Lista de materiales y reactivos

Gradilla
Tubos de ensayo
Puntas azules
Puntas amarillas
Toalla desechable
Kit Glucosa (Human)
Control 2 (RANDOX)
Control 3 (RANDOX)
Agua destilada
Solución salina

4. Procedimiento
1. Glicemia en ayunas
Requisitos de paciente para realizar glicemia en ayunas
1. Ayuno 8 - 12 horas
2. No consumir alcohol en las últimas 72 horas
3. No consumir cigarrillo 12 horas previo a realizar el examen
4. No realizar ejercicio extenuante
5. Si consume algún medicamento en ayunas, suspender el consumo el día del examen

2. Glicemia pre - post prandial

1. Tomar la muestra para realizar la glicemia basal (Ver indicaciones glicemia en ayunas)
2. Recomendar al paciente tomar desayuno (preferiblemente lo que desayuna normalmente)
3. A partir del momento en el cual el paciente comienza a desayunar se empieza a contabilizar las 2 horas
4. Durante las 2 horas el paciente debe permanecer en reposo, evitar el consumo de alimentos y/o bebidas
5. Transcurridas las 2 horas tomar la muestra

3. Glicemia pre - post Carga

1. Tomar la muestra para realizar la glicemia basal (Ver indicaciones glicemia en ayunas)
2. A partir de la muestra en ayunas realizar glucometría para determinar si el individuo puede recibir la carga de 75
g de glucosa. Aquellos individuos en los que la glicemia supere 130 mg/dL, no se administra la carga de glucosa
3. Preparar la carga de glucosa
La magnitud de la carga de glucosa empleada es variable
Adultos: 75 g glucosa disueltos en 300 mL de agua
Niños: 1,75 g/Kg de peso hasta un valor máximo de 75 g de glucosa

Para disolver la glucosa es necesario utilizar 100 mL de agua por cada 25 g de glucosa.
4. Indicar al paciente que el tiempo máximo para tomar la carga es de 5 minutos
5. A partir del momento en el cual el paciente comienza a tomar la carga de glucosa contabilizar las 2 horas
6. Durante las 2 horas el paciente debe permanecer en reposo, evitar el consumo de alimentos y/o bebidas
7. Transcurridas las 2 horas tomar la muestra

Observación: Si el paciente durante la realización de la prueba presenta nauseas, mareo, o cualquier manifestación, es
necesario suspender el examen.

4. Curva de tolerancia a la glucosa

1. Tomar la muestra para realizar la glicemia basal (Ver indicaciones glicemia en ayunas)
2. A partir de la muestra en ayunas realizar glucometría para determinar si el individuo puede recibir la carga de 75
g de glucosa. Aquellos individuos en los que la glicemia supere 130 mg/dL, no se administra la carga de glucosa
3. Preparar la carga de glucosa
La magnitud de la carga de glucosa empleada es variable
Adultos: 75 g glucosa disueltos en 300 mL de agua
Niños: 1,75 g/Kg de peso hasta un valor máximo de 75 g de glucosa

Para disolver la glucosa es necesario utilizar 100 mL de agua por cada 25 g de glucosa.
4. Indicar al paciente que el tiempo máximo para tomar la carga es de 5 minutos
5. A partir del momento en el cual el paciente comienza a tomar la carga de glucosa contabilizar el tiempo
6. Durante las 3 horas el paciente debe permanecer en reposo, evitar el consumo de alimentos y/o bebidas
7. Transcurrida 1 hora, 2 horas y tres horas se debe tomar al paciente las muestras respectivas

5. Test O´Sullivan

1. Tomar la muestra para realizar la glicemia basal (Ver indicaciones glicemia en ayunas)
2. A partir de la muestra en ayunas realizar glucometría para determinar si el individuo puede recibir la carga de de
glucosa. Aquellos individuos en los que la glicemia supere 130 mg/dL, no se administra la carga de glucosa
3. Preparar la carga de glucosa
La magnitud de la carga de glucosa empleada es de 50 g disueltos en 200 mL de agua

4. Indicar al paciente que el tiempo máximo para tomar la carga es de 5 minutos

5. A partir del momento en el cual el paciente comienza a tomar la carga de glucosa contabilizar una hora
6. Durante los 60 minutos el paciente debe permanecer en reposo, evitar el consumo de alimentos y/o bebidas
7. Transcurrido el tiempo tomar la segunda muestra

6. Hemoglobina glicosilada
La hemoglobina A1c refleja la glicemia promedio durante los dos o tres meses anteriores a la prueba. Esta prueba
proporciona información para valorar el tratamiento de la diabetes, es útil para controlar el tratamiento de pacientes
diabéticos, permitiendo así conocer con mayor certeza cambios importantes en la dieta y en la terapia. En general, cuanto
más alto sea el nivel de HbA1c, mayor será el riesgo para el paciente de desarrollar complicaciones de la diabetes
(enfermedad ocular, enfermedad renal, daño al nervio, enfermedad cardíaca y accidente cerebrovascular). Esto sucede
especialmente si el nivel de HbA1c permanece elevado en más de una ocasión.

Requisitos de paciente para realizar hemoglobina glicosilada

1. Ayuno 8 - 12 horas
2. No consumir alcohol en las últimas 72 horas
3. No consumir cigarrillo 12 horas previo a realizar el examen
4. No realizar ejercicio extenuante
5. Si consume algún medicamento en ayunas, suspender el consumo el día del examen

Procedimiento

Prueba Observaciones Muestra

Glicemia en ayunas
Glicemia pre – post prandial
Glicemia pre – post carga
Curva tolerancia a la glucosa
Test O´Sullivan
Hemoglobina glicosilada
Tubo sin anticoagulante (Tapa roja)
Tubo sin anticoagulante (Tapa roja)
Tubo sin anticoagulante (Tapa roja)
Tubo sin anticoagulante (Tapa roja)
Tubo sin anticoagulante (Tapa roja)
Tubo anticoagulante EDTA (Tapa lila)
Suero libre de hemólisis
Suero libre de hemólisis
Suero libre de hemólisis
Suero libre de hemólisis
Suero libre de hemólisis
Sangre total

1. Glicemia
Longitud de onda: 500 nm
Paso de luz: 1 cm
Temperatura: 20- 25˚C, 37˚C
Medición: Frente a blanco de reactivo. Solo se requiere blanco de reactivo por serie

Pipetear en la cubeta Blanco de reactivo Muestra /STD

Muestra o STD - 10 μL
Reactivo 1000 μL 1000 μL
Mezclar, incubar por 10 min 20- 25˚C, o por 5 min a 37˚C. Medir la
absorbancia del STD y de la muestra frente a blanco de reactivo
antes de 60 minutos

Revisar inserto de reactivo para elaborar los cálculos.

Resultados y discusión
Se debe definir en el momento de reporte del resultado si la prueba fue tomada al azar o en
ayuno (no ingestión de alimento por lo menos en las 8 horas previas a realizar el examen)

Valores normales:
En ayuno : 70 -100 mg/dL
2 horas después de una carga de 75 g de glucosa: Menor 140 mg/dL

6. Conclusiones

7. Evaluación/Autoevaluación
Quiz 30%
Informe laboratorio 40%
Trabajo laboratorio 30%
8. Observaciones
Realizar el reporte de los resultados especificando los valores de las absorbancias obtenidas
para el estándar, los controles de calidad y las muestras proporcionadas, y los cálculos de las
concentraciones.

9. Bibliografía- Webibliografía
 Diabetes, Insulin secretion and the pancreatic Beta cell mitochondrion. Clinical Implications of Basic Research
N Engl J Med, Vol. 345, No. 24 · December 13, 2001

 Olivera Marsenic, MD. Glucose Control by the Kidney: An Emerging Target in Diabetes. American Journal of
Kidney Diseases, Vol 53, No 5 (May), 2009: pp 875-883

 Vandana Menon. Glycosylated Hemoglobin and Mortality in Patients with Nondiabetic Chronic Kidney Disease
J Am Soc Nephrol 16: 3411–3417, 2005
 G. Ruiz Reyes. Fundamentos de la Interpretación Clínica de los Exámenes de Laboratorio. Editorial Médica
Panamericana p. 262 - 266