MORFOLOGIA Y FISIOLOGIA DE LEUCOCITOS

Recuento manual de leucocitos.

Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:

 Dilución de la sangre
 Muestreo de la sangre diluida en un volumen
 Recuento de células en ese volumen
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que
corresponden a los campos 1, 3,7 y 9.

Para su dilución, se hace lo mismo que para los hematíes pero empleando la pipeta de
blancos, de modo que la solución que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el
líquido de Turk. El líquido de Turk es hipotónico de modo que se destruyen los hematíes y
así no entorpecen en el recuento.

El líquido de Turk consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana disolución de
1% 1ml y agua destilada en cantidad suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse a menudo
para evitar levaduras y hongos.

En un principio es un poco difícil distinguir los leucocitos de los restos de membranas de

los hematíes hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son más
refringentes (más brillantes) al moverlo con el microscopio que los restos de hematíes. Se
debe observar la presencia de la membrana citoplasmática y de la membrana nuclear (a
veces más) como líneas finas y brillantes. Esto se observa fácilmente moviendo el
microscopio hacia delante y hacia atrás

PROCEDIMIENTO
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica
punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar
una dilución de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre
se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente
4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk)
y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

5. Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un

rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

6. Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.
7. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota
pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene
exactamente.

8. Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten

9. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar en los
4 cuadrados angulares.
10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera
las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se
consideran los que estén en los límites inferior y derecho.
OBSERVACIONES

Cámara de Neubauer, 40x

Enfocando uno de los cuadros laterales, se aprecian claramente los 16 cuadros pequeños donde
se tienen que contar los leucocitos que hay en ellos. Se debe de tener cuidado de no confundir los
restos de eritrocitos hemolizados con los leucocitos, que deben de aparecer como puntos purpuras
o negros, como los que están a las 9
RESULTADOS
Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como
concentraciones, que en este caso serían número de células por unidad de volumen de
sangre, que es 1mm3
Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total
de ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente cálculo:
N° de leucocitos x mm3 = altura x dilución x área
N° de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000
N° de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50
 N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50

En el análisis hecho, los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla:

El número de leucocitos fue de 111, que al multiplicarse por 50 daba como resultado 5
550/mm3, lo que indica un índice normal, sin embargo apenas y supera el mínimo, pues el
paciente era un hombre, de 41 años de edad.

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de células/mm3)
Hombres y Mujeres:………………………………..5 000-10 000

CONCLUSIÓN
Los leucocitos son las células sanguíneas que dentro del organismo participan
desarrollando diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunológica
específica o inespecífica.
Existen dos grandes tipos de estos glóbulos:
Polimorfonucleares:
 Basófilos
 Eosinófilos
 Neutrófilos
Mononucleares:
 Linfocitos (células T y células B)
 Monocitos
El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre
completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el
diagnóstico de enfermedades.
Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
 Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización
anormal).
 Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico).
 Enfermedad del hígado o el bazo.
 Radioterapia o exposición a la radiación.
Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
 Anemia.
 Tumores de la médula ósea.
 Enfermedades infecciosas.
 Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia).
 Leucemia.
 Estrés emocional o físico intensos.
 Daño tisular (por ejemplo, quemaduras).
Es muy importante comentarle al médico acerca de cualquier medicamento que se esté
tomando, incluyendo productos de venta libre. Ciertos fármacos pueden interferir con los
resultados del examen, como Sulfonamidas, Alopurinol, Ácido acetilsalicílico (aspirina),
cloroformo, corticosteroides, epinefrina, heparina, quinina o triamtereno

La cámara de Neubauer o hemocitómetro es una lámina portaobjeto gruesa, en cuyo

centro se hayan dos superficies cuadriculadas iguales, separadas del resto de la lámina
por surcos y dos barras transversales algo más elevadas.
Una laminilla cubreobjetos ópticamente plan, que al colocarse sobre las barras elevadas
de la lámina forma una cámara entre el cubreobjetos y la superficie cuadriculada, teniendo
una altura de 0.1mm

En la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y leucocitos son

diferentes, como se muestra en la imagen.
Frotis de leucocitos

Cuenta de leucocitos
Numero de leucocitos que se encuentra en un milímetro cúbico (un mililitro) de
sangre. Se expresa en miles de células/mililitro (“n” x 103/mm3), o de manera menos
frecuente, (“n” x 109/l).
Los leucocitos se distinguen de los eritrocitos por su gran tamaño, también porque
estos tienen núcleo, mitocondrias y otros organelos. Se van a encontrar en menor
cantidad que los eritrocitos, 7000 por mililitro cúbico en comparación de 4 a 5
millones de eritrocitos por mililitro. En un hombre promedio hay 75 mil millones de
leucocitos en total.
Una cuenta normal de leucocitos no descarta la posibilidad de una enfermedad.

 En el recién nacido de 10 a 26 mil/mm3

 A los 3 meses de 6 a 18 mil/mm3
 Al año de vida de 8 a 16 mil/mm3
 Entre los 3 y 5 años de 10 a 14 mil/mm3
 De los 5 a los 15 años de 5,5 a 12 mil/mm3
 En el adulto de 4,5 a 10 mil/mm3
Fórmula diferencial
También llamada “Recuento Diferencial” y es la proporción (tanto por ciento) de
cada tipo de leucocito.
Es la cantidad de cada uno de los tipos o población de leucocitos.
a) Granulocitos:

• Neutrófilos. • Eosinófilos. • Basófilos.

b) No granulocitos o agranulocitos:

• Monocitos. • Linfocitos.

Los granulocitos son llamados así porque al teñirlos presentan gránulos coloreados
en su citoplasma.

Puede obtenerse mediante aparatos automatizados y se expresará de la misma

forma que la cuenta de leucocitos. También se pueden observar 100 leucocitos en
un frotis mediante microscopía, en cuyo caso se obtiene un valor porcentual o
relativo. Si hay anormalidades en la cuenta de leucocitos y sólo se tiene un reporte
relativo de la cuenta diferencial, es necesario obtener un valor absoluto, ya que los
valores porcentuales, cuando la cuenta de leucocitos está aumentada o disminuida,
pueden ocasionar confusión e inducir al error. Esto ayudará para el diagnóstico de
enfermedades infecciosas, inflamatorias, procesos neoplásicos, leucemia, entre otros.

Leucocitosis o Leucopenia.
Leucocitosis:
Causa más común Neutrofilia, Linfocitosis, Monocitosis. O bien, Granulocitosis.
Neutrofilia: Principalmente por infección aguda. También puede ser por infección
crónica, procesos mieloproliferativos, glucocorticoides, liberación de adrenalina y
tabaquismo.
Eosinofilia: Enfermedades parasitarias, enfermedades alérgicas. También en tumores
malignos.
Basofilia: Muy rara. Puede ser por enfermedad mieloproliferativa.
Linfocitosis: Absoluta y relativa (junto con neutropenia). Mononucleosis infecciosa.
Monocitosis: Normal en neonatos y mujeres gestantes, junto con los neutrófilos.
Infecciones crónicas o tumores.

Leucopenia: Menor de 4,000/ mm3

Neutropenia: Hereditaria o adquirida
Eosinopenia: Ocurre durante la gestación y especialmente en el trabajo de parto.
Puede ser por estrés, infección bacteriana aguda, administración de glucocorticoides.
Linfocitopenia: Principalmente en niños por una inmunodeficiencia severa. Muy útil
para pacientes con VIH. Por tensión, neoplasias, infecciones, inmunodeficiencias y
radioterapia. Tratamiento de esteroides lo provoca por 12 h.
Monocitopenia: Aplasia medular o leucemia de células pilosas.
Basopenia: Sólo por aparatos automatizados. Ocurre en la ovulación.

Revisión del frotis

Se hace un frotis sanguíneo.
Método longitudinal: En una lanceta estéril se hace una punción en el pulpejo del
dedo (meñique), se coloca una gota de sangre en la parte central de un
portaobjetos. Se coloca otro portaobjetos delante de la gota de sangre hasta que
este toco con su borde la gota de sangre, se desliza sobre toda la superficie del otro
portaobjetos donde se había colocado la sangre de manera que se obtenga una fina
capa de sangre, que sería el frotis.
Método Transversal: Sobre la gota se deja caer un segundo portaobjetos de tal
manera que la sangre se extendiera en forma rápida y uniforme. En el momento en
que la sangre deje de extenderse, se desliza paralelamente el portaobjetos superior
con un movimiento constante.
Se coloca etanol para fijar la tinción. Posteriormente se agregan las sustancias para la
tinción, puede ser con Hematoxilina o Giemsa. Usando Hematoxilina se deja actuar
15 minutos, se enjuaga y se agrega Eosina para que actúe 1 minuto, por otra parte si
se utiliza Giemsa es lo único que se agregaría y se dejaría actuar por 5 minutos. Se
deja secar la muestra y se aérea en forma de abanico.

En primer lugar se inspecciona la extensión sanguínea para seleccionar la región con

la mejor distribución de leucocitos. Los leucocitos se identifican fácilmente por la
presencia de su núcleo teñido de morado.

No Granulocitos:
Linfocitos Núcleo redondeado que ocupa casi todo el glóbulo.
Monocitos Poco frecuentes
Granulocitos:
Neutrófilos Más abundantes. Granulaciones pequeñas y teñidas de azul pálido
Basófilos Menos abundantes. Granulaciones grandes y teñidas de color azul
Eosinófilos Poco abundantes. Granulaciones teñidas de rojo
REFERENCIAS
 Bramblia, Eduardo. Et al. Red de Revistas Científicas de América Latina, El Caribe, España y Portugal.
Bioquímica, Vol. 28, núm. 3, Julio-Septiembre 2003, pp. 4-12, México.
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57611572002
 García, Flora. Et al. Utilidad de la Biometría Hemática en la Práctica Clínica. Leucocitos (Segunda
parte). Rev Sanid Milit México 2012. http://www.medigraphic.com/pdfs/sanmil/sm-2012/sm121g.pdf
 Mateo, Rafael. Análisis Clínicos de Rutina. Capítulo 8 La Cuenta de Leucocitos. México, 21 de Julio del
2006. http://www.mailxmail.com/curso-analisis-clinicos-rutina/cuenta-leucocitos
 UNAM, Facultad de Medicina. Biología Celular e Histología Médica, Unidad Temática 2.
Departamento de Biología Celular y Tisular. Curso 2011-2012. México.
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/Doc/Valores_normales-BH.pdf