PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS, aceites esenciales de plai y cúrcuma mostró
MORFOLOGÍA Y ACTIVIDAD la mayor actividad de barrido de radicales
ANTIOXIDANTE DE PELÍCULA DE DPPH y ABTS, respectivamente (p <0.05), GELATINA DE PIEL DE PESCADO en comparación con la película de control y INCORPORADA CON ACEITES la película añadida de aceite esencial de ESENCIALES DE RAÍZ jengibre. Por lo tanto, la incorporación de aceites esenciales de raíz afecta directamente RESUMEN las propiedades de la película basada en Se investigaron las influencias de tres aceites gelatina de piel de pescado, dependiendo de esenciales de raíz (jengibre, cúrcuma y plai) los tipos y niveles incorporados. en diferentes niveles (25%, 50% y 100%, en INTRODUCCIÓN función del contenido de proteína) en las propiedades y actividad antioxidante de la El empaque biodegradable incluye películas película basada en gelatina de piel de y recubrimientos preparados a partir de pescado. Las películas incorporadas con materiales orgánicos y biopolímeros. Se todos los aceites esenciales mostraron la puede utilizar como una alternativa al menor resistencia a la tracción (TS) pero embalaje de plástico, que no es biodegradable mayor elongación a la rotura (EAB) con una y causa un desequilibrio ecológico y un cantidad creciente de aceites esenciales, en deterioro estético de la naturaleza. Las comparación con la película de control (sin películas biodegradables pueden estar hechas aceite incorporado) independientemente de de biopolímeros neutros, que incluyen los tipos de aceites esenciales (p <0.05 ) La polisacáridos, proteínas y lípidos o la permeabilidad al vapor de agua (WVP) de las combinación de estos materiales (Huber et películas que contienen aceites esenciales al., 2009; Tharanathan, 2003). La película disminuyó a medida que aumentaba la basada en proteínas ha recibido atención cantidad de aceites esenciales (p <0.05). como un envase prometedor, debido a sus Disminuye en L*-valor y aumenta en b*-, buenas propiedades de barrera a los gases Diferencia E- y el valor de transparencia se (Cuq et al., 1997; Park y Chinnan, 1995), observó con una cantidad creciente de aceites biodegradación y aspecto respetuoso con el esenciales incorporados (p <0.05). Los medio ambiente (Gennadios et al., 1994). espectros de FTIR indicaron que las películas La gelatina es un material proteínico derivado añadidas con aceites esenciales, del colágeno y puede formar un gel especialmente de raíz de plai, exhibieron térmicamente reversible cuando la hidrofobicidad más alta que la película de suspensión acuosa tibia se enfría control, como se evidencia por una mayor (Arvanitoyannis, 2002). Se puede utilizar amplitud en octubre de 2877-2922 cm-1 y como aditivo alimentario, revestimiento 1732 cm-1. Se obtuvo una menor temperatura comestible y película (Kester y Fennema, de degradación en películas que contienen 1986) y como agente encapsulante aceites esenciales. El estudio (Moorhous y Grudon, 1994). Se ha microestructural reveló que las películas informado que la gelatina, especialmente la bicapa podían formarse cuando se gelatina de pescado, tiene buena capacidad de incorporaban aceites esenciales a un nivel formación de película; sin embargo, la superior al 50%. La película incorporada con película de gelatina tiene poca propiedad de pueden servir como fuente potencial de barrera al vapor de agua (Gómez-Guillen et aceites esenciales. Los aceites esenciales de al., 2009; Hoque et al., 2010; Jongjaronaon et las raíces poseen actividad antioxidante y son al., 2006). Esto limita la aplicación adicional de naturaleza hidrofóbica. Como de películas basadas en gelatina como consecuencia, podrían incorporarse a la envases de alimentos. Por lo tanto, las película basada en gelatina para mejorar la sustancias hidrofóbicas como aceites, grasas, propiedad de barrera al vapor de agua con la ceras y ácidos grasos se han utilizado para actividad antioxidante concomitante. Sin mejorar la propiedad de barrera al vapor de embargo, no se ha informado sobre la mejora agua (Limpisophon et al., 2010; Prodpran et de la propiedad de barrera al agua de la al., 2007; Soazo et al., 2011). película a base de gelatina de pescado que utiliza aceites esenciales de raíz. Este estudio Los aceites esenciales, también llamados tuvo como objetivo dilucidar el impacto de aceites odoríferos volátiles, son líquidos diferentes aceites esenciales de raíz sobre las oleosos aromáticos extraídos de diferentes propiedades y la actividad antioxidante de la partes de plantas vegetales aromáticas por película de gelatina de pescado. medios físicos y ampliamente utilizados como sabores alimentarios (Burt, 2004). Los MATERIALES Y MÉTODOS aceites esenciales son la mezcla compleja de 2.1. Gelatina de pescado y productos compuestos naturales. Los principales químicos componentes de los aceites esenciales son los terpenos (monoterpenos y sesquerpenos), los compuestos aromáticos (aldehído, alcohol, La gelatina de pescado producida a partir de fenol, metoxi derivado, etc.) y los terpenoides piel de tilapia (~ 240 flores) se compró en (isoprenoides) (Bakkali et al., 2008; Lapi Gelatine S.p.A. (Empoli, Italia). Los Mohamed et al., 2010). Además, se ha aceites esenciales de las raíces de jengibre informado que los aceites volátiles exhiben (Zingiber of fi cinale), cúrcuma (Curcuma diversas propiedades antibacterianas, longa) y plai (Zingiber montanum) se antifúngicas, antivirales y antioxidantes adquirieron en Botanicessence (Bangkok, (Burt, 2004; Kordali et al., 2005). Además, Tailandia). Sal de diamonio 2,2-azino-bis (3- los aceites esenciales pueden prolongar la etilbenzotiazolin-6 sulfónico) (ABTS), ácido vida útil de los alimentos al reducir la 6-hidroxi-2, 5, 7,8-tetrametilcroman- oxidación de los lípidos (Oussalah et al., 2carboxílico (Trolox), 2,2-difenil-1- picryl 2004; Zivanovic et al., 2005). Recientemente, hydrazyl (DPPH), glicerol y Tween 20 se Tongnuanchan et al. (2012) incorporaron compraron de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, aceites esenciales de cáscara de cítricos en la EE. UU.). El metanol se obtuvo de Merck película a base de gelatina de pescado y (Darmstadt, Alemania). descubrieron que podría aumentar la propiedad de barrera al vapor de agua. Las 2.2. Preparación de película a partir de películas resultantes también mostraron gelatina incorporada con diferentes aceites actividad antioxidante (Tongnuanchan et al., esenciales 2012). Los aceites esenciales de raíz son de Para preparar la solución de formación de interés ya que varias raíces son abundantes en película (FFS), el polvo de gelatina se mezcló países tropicales, incluida Tailandia, y con agua destilada para obtener la Iwata et al. (2000) con una ligera concentración de proteína del 3,5% (p / v). La modificación usando la máquina de prueba mezcla se calentó a 70ºC durante 30 minutos. universal (Lloyd Instrument, Hampshire, Se usó glicerol al 30% (p / p) de contenido de RU) equipada con una celda de carga de proteína como plastificante. Se añadieron tracción de 100 N. Se usaron diez muestras (2 diferentes aceites esenciales previamente x 5 cm2) con una longitud de agarre inicial de mezclados con Tween 20 al 25% (p / p, 3 cm para la prueba. La velocidad de cruce se basado en aceite esencial) en FFS a niveles de ajustó a 30 mm / min. 25%, 50% y 100% (p / p, basado en el 2.3.3. Permeabilidad al vapor de agua contenido de proteína). Se homogenizó FFS (WVP) a 22.000 rpm durante 3 min usando un homogeneizador (homogenizador IKA El WVP se midió usando un método ASTM Labortechnik, Selangor, Malasia). El aire modificado (American Society for Testing & disuelto en el FFS se eliminó mediante una Materials, 1989) como se describe por Shiku bomba de vacío (bomba de vacío Diaphragm, et al. (2004) La película se selló en una copa Wertheim, Alemania) durante 30 minutos a de permeación de aluminio que contenía gel temperatura ambiente. Para preparar la de sílice seco (0% RH) con grasa de silicona película, se moldeó FFS (4 g) sobre una placa al vacío y una junta de goma para mantener de resina de silicona con borde (50 x 50 mm2) la película en su lugar. Las copas se colocaron y se sopló durante 12 ha temperatura en un desecador que contenía agua destilada ambiente antes de secar a 25 ° C y 50 ± 5% a 30 ° C. Las copas se pesaron a intervalos de de HR durante 24 h en una cámara ambiental 1 h durante un período de 10 h. WVP de la (WTB Binder, Tuttlingen, Alemania). Las película se calculó de la siguiente manera: películas resultantes se pelaron manualmente y se sometieron a análisis. Se prepararon películas de control a partir de FFS sin aceites esenciales añadidos. Donde w es la ganancia de peso de la copa (g); l es el espesor de la película (m); A es el 2.3.1. Espesor de la película área expuesta de la película (m2); t es el El grosor de la película se midió usando un tiempo de ganancia (s); P2 - P1 es la micrómetro (Mitituyoyo, modelo ID C diferencia de presión de vapor a través de la 112PM, número de serie 00320, Mitutoyo película (Pa). Corp., Kawasaki-shi, Japón). Se usaron cinco 2.3.4. Color ubicaciones aleatorias alrededor de cada película de 10 muestras de película para la Las muestras de película se sometieron a determinación del espesor promedio. medición de color usando un colorímetro CIE (Hunter Associates Laboratory, Inc., VA, EE. 2.3.2. Propiedades mecánicas UU.). Se usó D65 (luz de día) y una celda de Antes de probar las propiedades mecánicas, medida con una abertura de 30 mm. El color las películas se acondicionaron durante 48 h de las películas se expresó como L * - valor a 25 ° C y 50 ± 5% de HR. La resistencia a la (claridad), a * - valor (verdor / tracción (TS) y el alargamiento a la rotura enrojecimiento), b * -valor (azul / amarillo) y (EAB) se determinaron según lo descrito por la diferencia total de color, que se calculó de obtuvieron después de la centrifugación a la siguiente manera (Gennadioset al., 1996): 3000 g durante 5 minutos usando Hettich Zentrifuge (MIKRO-20, D-78532, Tuttlingen, Alemania). El contenido de proteína de las soluciones preparadas de Donde ∆𝐿∗ , ∆𝑎∗ 𝑦 ∆𝑏 ∗ son las diferencias película de gelatina se determinó de acuerdo entre el parámetro de color de las muestras y con el método de Biuret (Robinson y Hodgen, el parámetro de color del estándar blanco (L 1940). Las soluciones se mezclaron después = 92.85, a * = -1.20, b * = 0.46). con tampón de muestra (Tris-HCl 0,5 M, pH 6,8 que contenía SDS al 4% (p / v), glicerol 2.3.5. Transmitancia de la luz y valor de al 20% (v / v)) en la relación de 1: 1 (v / v). transparencia Se cargaron muestras (20 mg de proteína) en La transmitancia de la luz de las películas se el gel de poliacrilamida hecho de 7,5% de gel midió en el rango ultravioleta y visible (200- corriente y 4% de gel de apilamiento y se 800 nm) usando un espectrofotómetro UV- sometieron a electroforesis a una corriente vis (UV-1800, Shimadzu, Kyoto, Japón) constante de 15 mA por gel usando una como se describe por Shiku et al. (2004) El unidad Mini Protein II (Bio-Rad valor de transparencia de la película se Laboratories, Inc., Richmond, CA, EE. UU.). calculó usando la siguiente ecuación (Han y Después de la electroforesis, el gel se tiñó con Floros, 1997): Coomassie blue R-250 al 0,05% (p / v) en etanol al 15% (v / v) y ácido acético al 5% (v / v) y se destiñó con metanol al 30% (v / v). Nol y 10% v / v) de ácido acético. Se usaron Donde 𝑇600 es la transmitancia fraccionada a marcadores de proteína de alto rango de peso 600 nm y x es el espesor de película (mm). El molecular para estimar el peso molecular de mayor valor de transparencia representa la las proteínas. menor transparencia de la película. 2.3.7. Resfluencia total atenuada: 2.3.6. Electroforesis en gel de SDS- poliacrilamida espectroscopia infrarroja de transformada de Fourier (ATRFTIR) Antes del análisis, las Los patrones de proteínas de la película de películas se acondicionaron en un desecador gelatina se analizaron bajo condiciones no que contenía P2O5 durante 2 semanas a reductoras usando electroforesis en gel de temperatura ambiente para obtener las poliacrilamida con dodecilsulfato sódico películas más deshidratadas (Sobral et al., (SDS-PAGE) de acuerdo con el método de 2001). Las películas se escanearon con un Laemmli (1970). Antes del análisis, las espectrómetro Bruker Modelo Equinox 55 muestras de película se prepararon de FTIR (Bruker Co., Ettlingen, Alemania) acuerdo con el método de Jongjareonrak et al. equipado con una celda de cristal de placa (2006) con algunas modificaciones. Se ATR Trough horizontal (45 ° ZnSe; 80 mm disolvieron muestras de película (200 mg) en de largo, 10 mm de ancho y 4 mm de espesor) 10 ml de SDS al 1% (p / v). La mezcla se (PIKE Technology Inc. Madison, WI, EE. agitó continuamente a temperatura ambiente UU.) A 25ºC como se describe por Nuthong durante 12 h. Los sobrenadantes se et al., (2009). Las películas se colocaron en la celda de cristal y la celda se fijó en la montura Las películas se solidificaron usando del espectrómetro FTIR. Los espectros en el nitrógeno líquido en un mortero y se rango de 650-4000 cm-1 con ganancia de molieron con una mano de mortero. Se señal automática se recogieron en 32 mezcló película de tierra (0,25 g) con 5 ml de exploraciones a una resolución de 4 cm-1 y metanol y se agitó vigorosamente durante 3 se relacionaron con un espectro de fondo h. La mezcla se centrifugó a 2700 g durante registrado desde la celda limpia vacía a 25 ° 10 min usando una centrífuga (Beckman C. Coulter, Avanti J-E Centrifuge, Beckman Coulter, Inc., Palo Alto, CA, EE. UU.). El 2.3.8. Análisis termo gravimétrico (TGA) sobrenadante obtenido se analizó para Antes de la prueba, las películas se actividades de eliminación de radicales acondicionaron en un desecador que contenía DPPH y ABTS. P2O5 durante 2 semanas a temperatura 2.4.1. Actividad captadora de radicales ambiente. Las películas deshidratadas se DPPH escanearon usando un analizador termogravimétrico (TGA7, PerkinElmer, La actividad depuradora de radicales DPPH Norwalk, CT, EE. UU.) De 50 a 600 ° C a una se determinó como se describe por Wu et al. velocidad de 10 ° C / min (Nuthong et al., (2003) con una ligera modi fi cación. La 2009). Se usó nitrógeno como gas de purga a muestra (1,5 ml) se añadió con 1,5 ml de 2,2- un caudal de 20 ml / min. difenil-1-picrilhidrazilo 0,15 mM (DPPH) en etanol al 95%. La mezcla se mezcló 2.3.9. Microscopía electrónica de barrido vigorosamente usando una mezcla de vértices (SEM) (Vertex-Genie 2, Modelo G-560E, Scientific La morfología de la superficie y la sección Industries, Inc., Bohemia, Nueva York, EE. transversal de las muestras de película se UU.) Y se dejó reposar a temperatura visualizaron usando un microscopio ambiente en la oscuridad durante 30 minutos. electrónico de barrido (SEM) (Quanta 400, La absorbancia de la solución resultante se FEI, Eindhoven, Países Bajos). Para la midió a 517 nm usando un sección transversal, las muestras se espectrofotómetro. El blanco de muestra se fracturaron en nitrógeno líquido antes de la preparó de la misma manera excepto que se visualización. Luego, las muestras se usó metanol al 95% en lugar de solución de montaron en un trozo de bronce y se DPPH. Se preparó una curva estándar usando pulverizaron con oro (Sputter coater SPI- Trolox en el intervalo de 10-60 lM. La Module, West Chester, PA, EE. UU.) Para actividad se calculó después de la hacer que la muestra sea conductiva. Las substracción del blanco de muestra y se fotografías fueron tomadas con un voltaje de expresó como lmol equivalentes de Trolox aceleración de 15 kV. (TE) / g película seca.
2.4. Determinación de actividad 2.4.2. Actividad de barrido radical ABTS
antioxidante de películas de gelatina de La actividad de barrido de radicales ABTS se piel de pescado incorporadas con aceites ensayó según el método de Arnao y col. esenciales. (2001) con una ligera modi fi cación. Las soluciones madre incluían una solución ABTS 7,4 mM y una solución 2,6 mM de Las películas de gelatina incorporadas sin y peróxido de potasio. La solución de trabajo se con tres aceites esenciales (jengibre, cúrcuma preparó mezclando las dos soluciones madre y plai) en diferentes niveles (25, 50 y 100% p en cantidades iguales y permitiendo que / p, en función del contenido de proteína) reaccionaran durante 12 horas a temperatura fueron generalmente flexibles y fáciles de ambiente en la oscuridad. La solución se manipular. La película tenía una mayor diluyó después mezclando 1 ml de solución flexibilidad y extensibilidad, pero disminuía ABTS con 50 ml de metanol para obtener una la transparencia al aumentar la concentración absorbancia de 1,1 ± 0,02 unidades a 734 nm de aceite esencial, independientemente de los usando un espectrofotómetro. Se preparó una tipos de aceites esenciales utilizados. En solución ABTS fresca para cada ensayo. La general, no se encontraron exudados de aceite muestra (150 l) se mezcló con 2850 l de en la película incorporada con baja solución ABTS y la mezcla se dejó a concentración (25%) de aceite esencial; sin temperatura ambiente durante 2 h en embargo, a una alta concentración de aceite oscuridad. Luego se midió la absorbancia a esencial (100%), se encontraron algunos 734 nm usando un espectrofotómetro. Se exudados de aceite en la superficie de las preparó una muestra en blanco de la misma películas. En presencia de aceites esenciales manera, excepto que se usó metanol en lugar de raíz, se enmascaró el olor fétido de las de solución ABTS. Se preparó una curva películas de gelatina. La intensidad del olor estándar de Trolox comprendida entre 50 y del aceite esencial en las películas aumentó al 600 lM. La actividad se calculó después de la aumentar el nivel de aceite esencial. Esto resta del blanco de muestra y se expresó podría limitar la aplicación de la película en como lmol equivalentes de Trolox (TE) / g de los alimentos cuando se incorporó con aceite película seca. esencial en grandes cantidades. Sin embargo, una cantidad menor (25%) de aceite esencial 2.5. Análisis estadístico añadido no causó el efecto perjudicial sobre Todos los experimentos se realizaron por la percepción del olor o la inaceptabilidad de triplicado con diferentes tres lotes de la película. películas. Los datos se sometieron a análisis 3.2. Propiedades mecánicas y espesor de varianza (ANOVA) y las comparaciones de medias se llevaron a cabo mediante la Las propiedades mecánicas y el espesor de prueba de rango múltiple de Duncan. Para la las películas de gelatina de piel de pescado comparación de pares, se usó la prueba T incorporadas con tres aceites esenciales (Steel y Torrie, 1980). El análisis se realizó (jengibre, cúrcuma y plai) en diferentes utilizando el paquete SPSS (SPSS para niveles (25, 50 y 100% p / p, basado en Windows, SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.). contenido de proteína) se muestran en la Tabla 1. Películas incorporadas con todos los 3. Resultado y discusión aceites esenciales a un nivel del 25% no 3.1. Características de la película de presentaron cambios en el espesor, en gelatina incorporada con aceites esenciales comparación con la película de control. Sin de raíz embargo, los aumentos en el espesor de la película se observaron cuando se agregaron aceites esenciales a niveles de 50% y 100% (p <0.05), independientemente de los tipos de discontinuidad de la red de película. Además, aceites esenciales. La interacción de los los aceites esenciales que eran inmiscibles aceites esenciales entre las cadenas con proteína en FFS más probablemente peptídicas podría reducir la alineación impedían la interacción de las cadenas de ordenada, cuando la red compacta no podría péptidos de gelatina. Esto podría reducir el desarrollarse. Entre todas las películas, la enlace entre las gelatinas en la red de película de control (sin aceite esencial películas. La unión de hidrógeno y la añadido) mostró la mayor resistencia a la interacción hidrofóbica fueron los enlaces tracción (TS) y el menor alargamiento a la principales que se estabilizaron en la película rotura (EAB) (p <0,05), en comparación con de gelatina de piel de pescado (Hoque et al., otros. Las películas incorporadas con aceites 2010). La adición de lípidos o aceites en esenciales a niveles más altos mostraron TS películas basadas en proteínas puede más bajo, pero mayor EAB, interrumpir la red de proteínas a través de la independientemente de los tipos de aceites interacción proteína-proteína y la falta de esenciales, en comparación con el control (p integridad de la estructura cohesiva de aceites <0,05). Entre todas las películas añadidas con o lípidos también contribuyó a una propiedad aceites esenciales, la TS más baja se encontró mecánica más pobre (Gontard et al., 1995). en películas añadidas con 100% de aceite La reducción en la resistencia de la película esencial (p <0.05). En general, cuando el proporcionó la extensibilidad de la película. nivel de concentración de aceites esenciales Por lo tanto, un aceite esencial incorporado aumentó, el EAB de las películas resultantes exhibió un efecto plastificante en la película aumentó (p <0.05). Sin embargo, EAB de de gelatina de pescado. Sin embargo, (Atarés películas incorporadas con aceites esenciales et al. (2010)) informaron que la adición de de cúrcuma y plai al 50% y 100% fueron aceites esenciales de canela y jengibre no similares (p P0.05). En general, no se notó afectó significativamente la resistencia a la ninguna diferencia en EAB en la película tracción y el alargamiento a la rotura de la incorporada con diferentes aceites esenciales película a base de Caseinato de sodio. Esto en el mismo nivel. Por lo tanto, el nivel de fue probablemente debido al bajo contenido aceites esenciales incorporados tuvo un de aceite incorporado. Por lo tanto, la impacto significativo en las propiedades cantidad de aceite esencial en la película de mecánicas de la película. gelatina determina directamente las propiedades mecánicas de las películas La adición de lípidos, aceites o ácidos grasos resultantes. con un nivel creciente disminuyó TS de películas basadas en proteínas, por ejemplo, 3.3. Permeabilidad al vapor de agua películas de gelatina de piel de tiburón azul (WVP) (Limpisophon et al., 2010), proteína de Las películas de gelatina WVP de piel de músculo de pescado (Prodpran et al., 2007; pescado, que contienen 30% de glicerol, Tanaka et al..., 2001) y proteína de suero de incorporadas con aceites esenciales de leche (Soazo et al., 2011), etc. La jengibre, cúrcuma y plai en diferentes incorporación de aceites esenciales en la niveles, se muestran en la Tabla 1. Las película de gelatina podría mejorar el películas WVP incorporadas con aceites desarrollo de una matriz de película esenciales disminuyeron (p <0.05), heterogénea, lo que llevaría a la especialmente con una cantidad creciente de relación proteína / aceite de 1: 0.025-0.075 no petróleo. La película de gelatina WVP of skin presentaba diferencias en WVP. Por lo tanto, de piel disminuyó notablemente de 3.11 a la incorporación de aceites esenciales, 1.88, 1.89 y 2.45 x 10-11 gm-1 s-1 Pa-1 (p particularmente los de jengibre y cúrcuma, <0.05), cuando se incorporaron películas con podría mejorar la propiedad de barrera al jengibre, cúrcuma y plai, respectivamente, a vapor de agua de la película a base de gelatina un nivel del 100%. La incorporación de los de pescado. aceites esenciales de jengibre, cúrcuma y plai 3.4. Color al más alto nivel (100% basado en proteína) redujo la película de WVP en un 39.54%, A medida que aumentaban los niveles de 39.22% y 21.22%, respectivamente. Se aceites esenciales, se observaron valores de b observó que los aceites esenciales de jengibre * y DE más altos en las películas resultantes y cúrcuma fueron más efectivos para mejorar con la L * y a * y valores menores (p <0.05) la propiedad de barrera al vapor de agua que concomitantes (Tabla 2). Entre todas las el aceite esencial de plai en todos los niveles muestras de película, las incorporadas con evaluados (p <0.05). El resultado sugirió una aceite esencial de cúrcuma tuvieron los hidrofobicidad diferente de los compuestos valores más altos b * y DE * (p <0.05) cuando presentes en diferentes aceites esenciales se incorporó el mismo nivel de aceite utilizados. Los monoterpenos son sustancias esencial. Este resultado sugiere que el color altamente hidrofóbicas que se encuentran en del aceite esencial afecta directamente el los aceites esenciales, en los que el contenido color de la película resultante. Se observó que varía con los tipos de aceites esenciales el color amarillento del aceite de cúrcuma se (Turina et al., 2006). El aceite esencial correlacionaba con los valores b * y DE * más hidrofóbico podría aumentar la altos de la película resultante. El aceite hidrofobicidad de las películas, lo que esencial de Plai también tenía el color reduciría la migración de vapor de agua a ligeramente amarillento, que también través de la película. Generalmente, las determinaba el color de las películas. Los películas de mezcla basadas en proteína cambios en el color de las películas tienen la WVP disminuida con un contenido resultantes probablemente se atribuyeron a creciente de lípidos o hidrocarburos. Su los componentes colorantes en los aceites hidrofobicidad regula la velocidad de esenciales. Este resultado estuvo de acuerdo transmisión de vapor de agua a través de con Atarés et al. (2010) que informaron que películas de mezcla de aceite (McHugh y el aumento de la cantidad de aceite esencial Krochta, 1994). Este resultado estuvo de de canela aumentó marcadamente C con la acuerdo con Pires et al. (2011) que disminución concomitante en el índice de informaron que el aceite esencial de tomillo blancura (WI) de las películas a base de incorporado en la película a base de proteína casinato de sodio y de proteína de soja. Sin de merluza disminuyó la WVP de las embargo, los parámetros de color de esas películas resultantes, especialmente al películas no se vieron afectados cuando se aumentar la cantidad de aceite. Atarés et al. incorporó el aceite esencial de jengibre. (2010) informaron que la película basada en Pranoto y col. (2005) también informaron casinato de sodio incorporada con aceites que el color de la película a base de alginato esenciales de canela y jengibre con una agregado con aceite de ajo tiende a ser amarillento y oscurecerse. El cambio en el causada por la dispersión de la luz de las color de la película de biopolímero se vio gotas de lípidos distribuidas por toda la red de afectado principalmente por el origen del proteínas. Al mismo nivel de aceite esencial petróleo incorporado. Sin embargo, la agregado, el aceite esencial de jengibre tuvo adición de aceite de tomillo en la película de la mayor eficiencia en la reducción de la proteína de merluza no tuvo un impacto transmisión de la luz en el rango visible. significativo en el parámetro de color y el También se presumió la diferencia en la atributo de color, principalmente causado por dispersión o absorción de la luz por diferentes el bajo contenido de aceite (0-0.25 ml de compuestos en diferentes aceites esenciales. aceite /g de proteína) en la película (Pireset Según el valor de transparencia (Tabla 3), las al. 2011). películas incorporadas con todo tipo de aceites esenciales tuvieron el valor de 3.5. Transmisión de la luz y transparencia transparencia más alto que la película de de la película control (p <0.05). El resultado indicó que las La transmisión de luz UV y visible en el películas incorporadas con todos los aceites rango de 200-800 nm de películas esenciales se volvieron menos transparentes incorporadas con aceites esenciales de a medida que se incorporaban los aceites jengibre, cúrcuma y plai a diferentes niveles esenciales de alto nivel. En niveles de 25% y se presenta en la Tabla 3. Las películas tenían 50%, la película incorporada con aceite la excelente propiedad de barrera a la luz en esencial de jengibre tuvo un valor de UV a 200 nm, independientemente del tipo y transparencia más alto que los agregados con nivel de aceite esencial incorporado. Se aceites esenciales de cúrcuma y plai (p informó una mayor capacidad de barrera a la <0.05). Por otro lado, cuando se incorporaron luz ultravioleta para las películas de gelatina aceites esenciales a un nivel del 100%, la de la piel de pargo del patudo (Jongjareonrak película añadida con aceite esencial de et al., 2006) y la piel de jibia (Hoque et al., jengibre mostró el mayor valor de 2011). La transmitancia de luz de las transparencia, en comparación con aquellos películas a una longitud de onda de 280 nm que contienen aceites esenciales de cúrcuma disminuyó marcadamente del 40.73% y plai (p <0,05). Este resultado estuvo de (película de control) al 0.55%, 0.00% y acuerdo con Pires et al. (2011) que 0.05% con la incorporación de aceites informaron que la adición de aceite esencial esenciales de jengibre, cúrcuma y plai a un de tomillo disminuyó la transparencia de la nivel de 100%, respectivamente. Por lo tanto, película de proteína de merluza. Las películas la incorporación de aceites esenciales a la de quitosano tuvieron una disminución en la película de gelatina podría mejorar la transparencia cuando se agregaron los aceites propiedad de barrera a los rayos ultravioleta, esenciales de tomillo, clavo de olor y canela especialmente para las películas añadidas con (Hosseini et al., 2009). El resultado indicó aceites esenciales de cúrcuma y plai. La que la adición de esos aceites esenciales transmisión del rango de luz visible (350-800 podría aumentar la opacidad de la película nm) de las películas incorporadas con esos resultante. Las disminuciones en la aceites esenciales también disminuyó al transparencia de las películas basadas en aumentar los niveles. La disminución en la gelatina estuvieron relacionadas con la transmitancia de la luz posiblemente fue disminución de la transmitancia de la luz cuando se incorporó el aceite esencial. Los patrón de proteínas de la película de gelatina componentes colorantes en los aceites de la piel del pescado. esenciales, así como la disminución de la red 3.7. Espectroscopia infrarroja de de proteínas de película ordenada, fueron en transformada de Fourier (FTIR) su mayoría contribuyentes a la disminución de la transparencia de las películas de Los espectros FTIR de películas de gelatina gelatina incorporadas en aceites esenciales. incorporadas con tres aceites esenciales en Por lo tanto, la incorporación de aceite diferentes niveles se ilustran en la Fig. 2. En esencial tuvo el impacto sobre el aspecto y las general, los espectros FTIR de película de propiedades de barrera a la luz de la película control y películas que contienen diferentes de gelatina. aceites esenciales mostraron los picos principales similares pero las amplitudes de 3.6. Patrón de proteínas los picos variaron, dependiendo del nivel de Los patrones de proteína de las películas de aceites esenciales incorporados. La banda gelatina incorporadas con los aceites situada en el número de onda de 1031-1035 esenciales de jengibre, cúrcuma y plai en cm -1 se encontró en todas las muestras de diferentes niveles se ilustran en la figura 1. película, correspondientes al grupo OH, Todas las películas de gelatina contenían las principalmente a partir de glicerol añadido cadenas a1 y a2 como componentes como plastificante (Bergo y Sobral, 2007). Se principales. a1 y a2 cadenas constituidas observó que la amplitud de este pico como los principales componentes en la disminuyó al aumentar el nivel de aceites gelatina de piel de pescado (Benjakul et al., esenciales incorporados. Esto fue más 2009). Las intensidades de banda de esas dos probable debido al efecto de dilución causado bandas principales de proteína en las por los aceites esenciales añadidos. Todas las películas incorporadas con aceites esenciales películas tenían espectros similares en el fueron similares a las de la película de control rango de 1700-700 cm-1, cubriendo las (sin aceite esencial incorporado). Para todos bandas de amida-I, II y III. Todas las los tipos de aceites esenciales incorporados, películas tenían las bandas principales a 1630 no se observaron diferencias en los patrones cm-1 (amida-I, que ilustra C = O estiramiento de proteínas entre las películas que contienen / unión de hidrógeno junto con COO), 1538 aceite esencial a diferentes niveles. Este cm-1 (amida-II, presentando las vibraciones resultado sugirió que los principales enlaces de flexión de grupos NH y vibraciones de en la matriz de la película eran enlaces estiramiento de CN grupos) y 1237 cm-1 débiles, que podrían ser interrumpidos por el (amida-III, que ilustra las vibraciones en el agente desnaturalizante utilizado para la plano de grupos CN y NH de amida unida o electroforesis. Además, se sugirió que los vibraciones de grupos CH2 de glicina) aceites esenciales rara vez interactuaban con (Aewsiri et al., 2009; Muyonga et al., 2004a). la gelatina por enlaces covalentes. Se postuló Jongjareonrak y col. (2008) también que los aceites esenciales formaban una informaron los espectros similares para el interacción hidrofóbica con la gelatina en los pargo de patudo y la película de gelatina de dominios hidrofóbicos. Por lo tanto, los piel de pargo pardo, donde las bandas de aceites esenciales no tuvieron impacto en el amida I y II se encontraron en los números de onda de 1630 y 1545 cm -1, respectivamente. Se encontró que las amplitudes de amideI, II aumentaron marcadamente cuando se y III de la película de control eran más altas incorporaron con aceites esenciales a niveles que las de las películas incorporadas con más altos. El resultado indicó que la aceites esenciales, independientemente de los presencia de aceites esenciales, que se tipos, pero las amplitudes se redujeron con la dispersaban en la matriz de la película adición de una cantidad creciente de aceites proteica e impedía la interacción proteína- esenciales. Esto podría deberse al mayor proteína en la matriz de la película. contenido de proteína en la película de También se encontraron picos con números control, en comparación con las películas de onda de 2869-2877 cm-1 y 2922-2933 cm- incorporadas con aceites esenciales. Es más 1 en todas las muestras. Los picos en los probable que los aceites esenciales números de onda 2853,62 cm-1 y 2923,58 disminuyan el contenido de proteína en la cm-1 representan la vibración de estiramiento matriz de la película con la proporción asimétrica y simétrica de metileno del C-H concomitante creciente de aceite esencial en alifático en los grupos CH2 y CH3, las películas resultantes. respectivamente (Guillén y Cabo, 1997, Se observó una banda de amida A en el 2004; Muik et al., 2007). Ambas bandas de número de onda de 3273 - 3306 cm ^ {- 1}, y estiramiento asimétrico de metileno a la banda de amida B se encontró a 2922 - aproximadamente 2853 cm-1 y una banda de 2933 cm para todas las muestras de película. estiramiento simétrica de metileno cerca de La banda de amida A representaba el 2924 cm-1 estaban obviamente presentes en estiramiento NH acoplado con enlaces de la mayoría de los lípidos (Guillén y Cabo, hidrógeno y la banda de amida B 2004). La mayor amplitud de estos picos se representaba el estiramiento CH y un NH3 + obtuvo en la película incorporada con aceite en el número de onda de 2928 cm (Muyonga esencial, lo que indica la presencia de aceite et al., 2004b). El pico de amida-A de la esencial que contiene hidrocarbono en la película de control encontrado en el número matriz de la película. Esto estaba de acuerdo de onda 3273 cm-1 se desplazó gradualmente con las disminuciones en la amplitud de la a números de onda más altos a medida que amida-A. aumentaba el nivel de aceite esencial. Los Además, el pico en el número de onda de números de onda del pico de amida-A se 1732 cm-1 tuvo el aumento en la amplitud desplazaron a 3306, 3303 y 3300 cm-1 para con niveles crecientes de aceites esenciales. las películas incorporadas con aceites El pico con número de onda de 1742 cm-1 esenciales de jengibre, cúrcuma y plai a un podría representar la vibración de nivel del 100%, respectivamente. Además, la estiramiento C = O de los grupos aldehído o amplitud de la banda de amida-A disminuyó éster carbonilo (Guillén y Cabo, 1997; Muik al aumentar el nivel de aceites esenciales, et al., 2007). El aldehído, la cetona y el éster especialmente a un nivel del 100%. Esto son los principales grupos químicos en los confirmó la menor interacción entre las aceites esenciales (Mohamed et al., 2010). gelatinas, como se refleja en el TS inferior Además, el aumento en la hidrofobicidad de con el aumento del EAB de las películas la película de gelatina se obtuvo cuando se cuando se incorporaron los aceites esenciales incorporaron los aceites esenciales, como lo en el nivel superior. Además, la amplitud y el demuestran los picos existentes en el número tamaño del pico de películas de amida-B de onda de 2876 cm, 2929 cm-1 y 1732 cm-1 más probable debido a la degradación del (Aewsiri et al., 2011). Esto estuvo de acuerdo glicerol y de la proteína de pequeño tamaño con las disminuciones en WVP de la película en la red de películas. Hoque et al. (2011) que contiene aceite esencial (Tabla 1). también informaron la temperatura de degradación en el rango de 196.30-216.71 ° 3.8. Análisis termo gravimétrico (TGA) C para la película de gelatina de piel de jibia. Los termogramas TGA que representan el Para la tercera etapa de pérdida de peso, se comportamiento de degradación térmica de obtuvieron Dw3 de 38.79-57.88% y Td3 de las películas de gelatina incorporada con tres 306.30-326.98 ° C para todas las muestras de aceites esenciales a diferentes niveles se película. Esto probablemente se asoció con la presentan en la Fig. 3. Las temperaturas de degradación del tamaño más grande o la degradación (Td), pérdida de peso (Dw) y fracción proteica altamente asociada. Para la residuos de todas las muestras se muestran en cuarta etapa de pérdida de peso, Dw4 de la Tabla 4. Película de control y aquellos 14.35-25.56% con Td4 414.15 ° C se incorporados con aceites esenciales a un nivel obtuvieron para las películas incorporadas del 25% exhibieron tres etapas principales de con diferentes aceites esenciales al nivel de pérdida de peso. Sin embargo, se observaron 50% o 100%. Sin embargo, para las películas cuatro etapas principales de pérdida de peso de control y las películas incorporadas con en las películas incorporadas con todos los aceites esenciales a un nivel del 25%, la aceites esenciales en niveles de 50% y 100%, cuarta etapa de pérdida de peso (Dw4) no era excepto para la película incorporada con 50% detectable. Este resultado sugiere que la de cúrcuma, que tenía tres etapas. Para todas cuarta etapa de la pérdida de peso las películas, la pérdida de peso de la primera posiblemente esté relacionada con la pérdida etapa a 4.15-7.34% se obtuvo con la de componentes estables a alta temperatura temperatura (Td1) de 33.01 - 52.94? C. La en la película que contiene aceites esenciales. pérdida de peso en este rango de temperatura En general, la Td3 para todas las películas estuvo plausiblemente relacionada con la incorporadas con aceites esenciales era más pérdida de agua libre y absorbida. baja que la película de control pero variaba La menor pérdida de peso de las películas con los tipos y niveles de aceites esenciales añadidas con todos los aceites esenciales en agregados. Esto podría estar correlacionado todos los niveles, en comparación con la con la discontinuidad o interacción película de control, posiblemente se debió al interrumpida proteína-proteína de las menor contenido de agua en los formadores moléculas de gelatina en la red de película asociado con su mayor hidrofobicidad. El por aceites esenciales incorporados en resultado similar se observó en la película a diferentes grados. Este resultado estuvo de base de proteínas de diversas fuentes, acuerdo con el TS reducido y el EAB más alto incluido el aislado de proteína de tilapia roja de las películas incorporadas con aceites (Tongnuanchan et al., 2011) y la proteína esenciales, en comparación con el control porcina plasmática (Nuthong et al., 2009). La (Tabla 1). Una reducción en la estabilidad segunda etapa de pérdida de peso (Dw2 = térmica puede ser promovida por cambios en 18.94-26.90%) se observó a Td2 de 214.15 - la estructura de la proteína y provocada por la 264.42 ° C. Esta etapa de pérdida de peso fue ruptura de enlaces intermoleculares de baja energía que mantienen la conformación proteica (Kaminska y Sionkowska, 1999). La fase acuosa. Esto fue indicado por la disminución de la pérdida de peso en la distribución heterogénea de aceites primera, segunda y tercera etapa de la esenciales como se visualiza por los cristales película incorporada con todos los aceites formados a nivel macroscópico. esenciales, especialmente al 100%, se asoció La película de control mostró una sección de forma plausible con la menor interacción transversal más suave que las incorporadas proteica. Se postuló el efecto interferente del con aceites esenciales. Esto reveló que la aceite esencial a un nivel más alto en la película de control tenía una estructura más formación de la red de proteínas de la matriz homogénea que otras películas. Las películas de película. En general, se encontraron que contienen diferentes aceites esenciales residuos más bajos de la degradación térmica mostraron diferentes micrografías de sección en las películas incorporadas con aceites transversal. Las películas añadidas con esenciales, en comparación con la película de aceites esenciales se volvieron más ásperas, control, independientemente de la en comparación con la película de control. Es concentración de aceite. Por lo tanto, tanto el más probable que la adición de petróleo tipo como el nivel de aceites esenciales reduzca la interacción proteína-proteína en la tuvieron un marcado impacto en la red de película, mejorando así la estabilidad térmica de la película de gelatina. discontinuidad y la rugosidad de la 3.9. Morfología de la película microestructura de la película. Obviamente, las películas incorporadas con 50% hasta Micrografías SEM de la superficie y sección 100% de concentración de aceite mostraron transversal fracturada por congelación de las la separación de fases entre la fase oleosa películas de gelatina incorporados con tres (superior) y la fase proteica (inferior), aceites esenciales a diferentes niveles se independientemente de los tipos de aceites presentan en la Fig. 4. La superficie de esenciales. Como consecuencia, el mayor control de fi lm (sin aceite esencial contenido de gotas de aceite esencial podría incorporado) fue más suave que las de mejorar el descremado y la separación de películas incorporadas con aceites esenciales, fases. Los aceites esenciales con alto independientemente del tipo y la contenido y baja densidad se separaron y concentración de petróleo. Sin embargo, la localizaron en la superficie superior de la superficie más rugosa se encontró en la película, formando así la microestructura película incorporada con aceites esenciales bicapa. Se observó que la estructura / para todos los tipos y niveles. Las películas morfología interna de la bicapa de la película incorporadas con aceites de jengibre y plai en se observó solo a nivel microscópico después niveles de 25% y 50% tenían una superficie de la observación de SEM. De hecho, el bi- áspera. Sin embargo, se formó una partícula layer of film no era perceptible a nivel muy pequeña cuando se incorporó aceite macroscópico. A pesar de que el aceite esencial a un nivel del 100%. Se postuló que esencial parecía localizarse en la parte el aceite esencial a alto nivel preferiblemente superior de la película, todavía estaba localizado en la parte superior de la película incrustado y atrapado en la matriz proteica de después de la colada y el secado. A niveles la película. Esto se relacionó con la estructura más altos, los aceites esenciales que eran de interna morfológica de la bicapa. Por lo tanto, naturaleza hidrófoba podrían segregarse de la no se encontraron exudados de aceite en la película incorporada con baja concentración 6). La película de control (sin aceite esencial (25%) de aceite esencial; sin embargo, se incorporado) mostró actividad de barrido de encontraron algunos exudados de aceite en la radicales DPPH y ABTS hasta cierto punto. superficie de las películas como aceite La actividad antioxidante de la gelatina se esencial a alto nivel (100%). La debió a los péptidos que contienen microestructura bicapa-morfológica podría aminoácidos particulares tales como glicina y contribuir a una menor WVP de películas de prolina (Bao et al., 2009; Gomez-Estaca et gelatina incorporadas en aceites esenciales al., 2009; Kim et al., 2001). Gomez-Guillen y (Fig. 5), comparados con la película de otros informaron que las películas preparadas control, como se muestra en la Tabla 1. La a partir de gelatina de piel de atún mostraron gotita de aceite hidrófoba podría impedir que actividad antioxidante según lo determinaron las moléculas de agua se transfieran a través los ensayos FRAP y ABTS. La película de la película (Karbowiak et al., 2007). incorporada con todos los aceites esenciales mostró una mayor actividad antioxidante que 3.10. Actividad antioxidante de aceites la película de control (p <0.05). Se ha esenciales y películas de gelatina de piel informado que los aceites esenciales son una de pescado excelente fuente de antioxidantes (Wu et al., Incorporada con aceites esenciales La 1982). En general, tanto las actividades de actividad antioxidante expresada como eliminación de radicales DPPH como ABTS actividad captadora de radicales DPPH y la de películas incorporadas con aceites actividad depuradora de radicales ABTS de esenciales aumentaron con una cantidad los aceites esenciales de jengibre, cúrcuma y creciente de 25% a 100% (p <0,05). Sin plai se presentan en la Tabla 5. La actividad embargo, la actividad antioxidante variaba depuradora de radicales DPPH del aceite con los tipos de aceites esenciales. La esencial de plai fue la más alta (p <0.05), actividad depuradora de radicales DPPH seguida por aceite esencial de plai y jengibre, incorporada con aceite esencial de plai fue la respectivamente. Las diferencias en la más alta (p <0,05), seguida de la película actividad antioxidante de diferentes aceites añadida con aceite esencial de cúrcuma y esenciales se debieron principalmente a las jengibre, respectivamente. Para la actividad diferencias en los tipos y cantidades de de eliminación de radicales ABTS, la película componentes antioxidantes presentados en incorporada con aceite esencial de cúrcuma los aceites esenciales (Burt, 2004; Kordali et mostró la mayor actividad (p <0,05), seguido al., 2005). Los componentes principales en de la película añadida con aceite esencial de aceites esenciales son terpenos plai y jengibre, respectivamente. El resultado (monoterpenos y sesquerpenos), compuestos indicó que los diferentes aceites esenciales aromáticos (aldehído, alcohol, fenol, contenían diferentes antioxidantes, que derivados metoxi, etc.) y terpenoides podían eliminar radicales en distintos grados. (isoprenoides) (Bakkali et al., 2008; Además, varios compuestos antioxidantes Mohamed et al., 2010). A partir de los podrían interactuar con la matriz de película resultados, las películas de gelatina de manera diferente, en la que los compuestos incorporadas con diferentes aceites antioxidantes libres en aceites esenciales esenciales a diferentes niveles exhibieron podrían liberarse de manera diferente. En el diferentes actividades antioxidantes (Tabla presente estudio, las actividades antioxidantes de las películas de gelatina afectó el olor de la película de gelatina, incorporadas con los aceites esenciales de la especialmente cuando se usaba una alta raíz fueron más bajas que las del aceite concentración. Esto podría limitar su esencial puro, independientemente del tipo de aplicación en los alimentos. Por lo tanto, el aceite esencial utilizado. Esto fue más uso de aceites esenciales de raíz apropiados probable debido a la interacción entre la en la cantidad adecuada no solo podría gelatina y los compuestos antioxidantes en el mejorar la propiedad de barrera de vapor de aceite esencial, lo que reduce la liberación de agua de la película de gelatina de piel de esos compuestos. Como consecuencia, la pescado, sino también proporcionar actividad actividad más baja se encontró en las antioxidante para las películas resultantes. películas resultantes. Los resultados sugirieron que la película basada en gelatina de pescado incorporada con aceite esencial de raíces podría usarse como películas activas que poseen actividad antioxidante para usos posteriores. 4. Conclusión La incorporación de aceites esenciales de raíz de jengibre, cúrcuma y plai disminuyó marcadamente el TS con el aumento concomitante de EAB de películas de gelatina de piel de pescado, particularmente con niveles crecientes. Los aceites esenciales podrían actuar como plastificantes, en los que se impidió la interacción de proteínas en la red de películas. La propiedad barrera al agua se mejoró efectivamente cuando se incorporó la película con todo tipo de aceites esenciales. Sin embargo, los aceites esenciales incorporados disminuyeron la transparencia de las películas. La película incorporada con aceite esencial de raíz a alto nivel (50%) exhibió una microestructura morfológica bicapa; sin embargo, la incorporación de aceite esencial a un nivel excesivo (100%) dio como resultado la presencia de algunos exudados de aceite en la superficie de la película. La película que contiene aceites esenciales mostró actividad antioxidante, pero la actividad se rige por el tipo y la cantidad de aceites esenciales. Sin embargo, el aceite esencial de raíz incorporado también