Eliminación de amoníaco del efluente de digestión anaeróbica de desechos de ganado usando

alga verde Scenedesmus sp.

Abstracto

La alga verde Scenedesmus fue investigada por su capacidad para eliminar el nitrógeno de la
digestión anaeróbica efluente que posee alto contenido de amonio y alcalinidad además de sus
características de crecimiento. El nitrato y el amonio eran indistinguibles como fuente de
nitrógeno cuando la concentración de amonio estaba en niveles de cultivo normales. El amonio de
hasta 100 ppm de NH4-N no inhibió el crecimiento celular, pero lo hizo disminuya la densidad
celular final hasta en un 70% a una concentración de 200-500 ppm de NH4-N. Carbono inorgánico
de la alcalinidad en forma de bicarbonato se consumió rápidamente, a su vez causando la
atenuación de la célula crecimiento. Por lo tanto, es necesario mantener un cierto nivel de
carbono inorgánico para prolongar el amoníaco eliminación. Un grado moderado de aireación fue
beneficioso para la eliminación de amoníaco, no solo debido a la extracción de amonio a gas de
amoníaco, pero también debido a la eliminación de oxígeno, que es un inhibidor de fotosíntesis
regular El magnesio se consume fácilmente en comparación con otros componentes metálicos
ypor lo tanto, requiere una suplementación periódica. Mantener niveles adecuados de alcalinidad,
Mg, aireación junto con un NH4 óptimo + / relación de células fueron todas necesarias para el
amonio semicontinuo a largo plazo eliminación y crecimiento celular.

Introducción

Las aguas residuales de ganado contienen una alta concentración de nitrógeno que causa
eutrofización cuando se descarga sin el tratamiento adecuado. Los desechos de ganado a menudo
se someten a digestión anaeróbica usando bacterias mesófilas o termófilas. El resultado principal
de la digestión anaeróbica es la reducción de materia orgánica y residuos volumen a través de la
degradación fermentativa de orgánicos Constituyentes. Aun así, los niveles de nutrientes como el
amoniaco no están completamente reducido durante la digestión anaeróbica porque los
microorganismos empleados generalmente carecen de suficiente autótrofo metabolismo del
nitrógeno inorgánico (Cheng y Liu, 2002; Noike et al., 2004; Ulundag-Demirer et al., 2008). Bacteria
tradicional nitrificación-desnitrificación se puede utilizar para eliminar el amoníaco, pero requiere
la asimilación de carbono orgánico extra como un carbono fuente. Otra característica importante
de la digestión anaerobia es la alta concentración de alcalinidad involucrada (principalmente HCO
3 o CO2 3, 1000-5000 ppm como CaCO3). La alta alcalinidad también lo hace difícil aplicar
procesos avanzados de oxidación utilizando ozono o peróxidos porque el bicarbonato actúa como
un carroñero radical (Ma y Graham, 2000; Currie y otros, 2003).

Muchas especies de microalgas, como las algas verdes y las cianobacterias puede asimilar
nitrógeno y fosfato en su biomasa también como carbono inorgánico para la fotosíntesis
(Yoshihara et al., 1996; Nagase et al., 2001; Jin et al., 2005). Un sistema de microalgas puede ser
empleado como tratamiento secundario o postsecundario alternativo proceso para eliminar los
nutrientes de las aguas residuales, especialmente cuando cantidad sustancial de nitrógeno
permanece después de la reducción de materia orgánica por métodos biológicos tradicionales
(Przytocka-Jusiak et al., 1984; Berman y Chava, 1999; Olguin, 2003).Las microalgas han sido objeto
de interés reciente debido a su capacidad de aumentar el crecimiento mediante la adopción de
diversas formas de inorgánicos nitrógeno, incluido NHþ 4; NO 3; NO 2, o NO, etc. (Nolte y Prouix,
1988; Tam y Wong, 1990; Hu et al., 2000; Olguin, 2003; Jin et al., 2008; Park et al., 2009). Las
microalgas también producen potencialmente biomasa valiosa, que puede usarse como aditivo
para piensos y materia prima de biocombustibles para biodiesel e hidrógeno (Melis y Happe, 2001;
Travieso et al., 2006; Tran et al., 2009). Ha sido recientemente sugirió que un sistema de
microalgas puede ser utilizado para el tratamiento de gases de combustión a través de la fijación
simultánea de CO2 y NOx, seguido por la conversión de biomasa de algas cosechadas en
biocombustible (Chisti, 2007; Jin et al., 2005). Este estudio intentó investigar las características de
microalgal crecimiento junto con la eliminación de amoníaco de anaeróbico efluente de digestión
que contiene altos niveles de amonio y alcalinidad usando el alga verde Scenedesmus. Los efectos
del amonio contenido, alcalinidad y aireación en el crecimiento celular y eliminación de amoníaco
se discuten, y una estrategia a largo plazo semi-continuo la operación se introduce.

2. Métodos

2.1. Cepa de Micro alga

La alga verde Scenedesmus accuminatus (KCTC AG10316) era obtenido del Centro de Recursos
Biológicos (BRC) de Corea Instituto de Investigación de Biociencias y Biotecnología (KRIBB). Células
se cultivaron a pH 7,5 en medio Bristol modificado (NaNO3, 250 mg / l; K2HPO4, 75 mg / l;
KH2PO4, 175 mg / l; CaCl2, 25 mg / l; NaCl, 25 mg / l; H3BO3, 0,2 mg / l; MgSO47H2O, 75 mg / l;
FeCl3, 0.3 mg / L; MnSO44H2O, 0,3 mg / l; ZnSO47H2O, 0,2 mg / l; CuSO45H2O, 0.06 mg / L). 250
mg / l de NaNO3 como fuente de nitrógeno es equivalente a 41 mg-N / L. Para investigar el efecto
de amonio, 157 mg / L de NH4Cl (41 mg-N / L) se usó en su lugar.

2.2. Cultivo

Las células de Scenedesmus se cultivaron en un reactor de vidrio cilíndrico con un volumen de

trabajo de 1 L Iluminaciones externas fueron hechas por lámparas fluorescentes para que la
intensidad de la luz en el centro de la reactor lleno de medio fue de alrededor de 200 lmol / m2 / s
(Li-250A, Lightmeter Li-COR) con 12 h: 12 h de luz: ciclo oscuro.

2.3. Aguas residuales

El agua residual utilizada en este estudio se compone de un anaeróbico efluente de digestión

obtenido de una granja local de cerdos en Hwasung, Corea. Para evitar interferencias de otros
microorganismos, las aguas residuales se filtraron a través de un filtro GF / Cy luego esterilizado en
autoclave. La composición de las aguas residuales antes ydespués de este pretratamiento se
muestra en la Tabla 1. Después de la filtración y autoclave, se redujo una fracción de SS, COD, TOC
y TP. Mientras tanto, SCOD, NH4-N, TN y alcalinidad solo se modificaron ligeramente.
Dado que este estudio se centró en la eliminación de amoníaco y el autotrófico el crecimiento de
microalgas fue influenciado por carbono inorgánico (alcalinidad) y fuente de nitrógeno (NH4-N o
TN), no por carbono orgánico (DQO, SCOD o TOC), se consideró que los resultados obtenidos ser
aplicable al agua residual sin procesar utilizada en este estudio. Amoníacoestá sujeto a evaporarse
fácilmente durante el autoclave si el amonio libre es dominante en el cuerpo de agua como aguas
residuales domésticas. sin embargo, el contenido de amonio es casi invariante en la Tabla 1,
porque el amonio iones existen en forma de sal estable con bicarbonato o carbonato debido a la
alta alcalinidad en las aguas residuales utilizadas en este estudio.

Las células se cultivaron inicialmente en medio Bristol, pero las aguas residuales se añadió a la
suspensión de cultivo cuando la concentración de nitrógeno se redujo casi a cero y la densidad
celular alcanzó un valor deseado (como 1.0 g / L). Las aguas residuales se diluyeron 1/10 en
Además del cultivo, haciendo que la concentración de nitrógeno sea aproximadamente 100 mg / L.
La eliminación de nitrógeno se realizó en modo por lotes o modo semicontinuo. En modo
semicontinuo, nuevas aguas residuales se añadió al cultivo para aumentar la concentración de
nitrógeno que había caído por debajo de 10 ppm a alrededor de 100 ppm. Para investigar la
influencia de los componentes metálicos en crecimiento celular, boro, hierro, manganeso, zinc,
cobre y magnesio fueron introducidos uno por uno a la cultura en curso cuando la célula la tasa de
crecimiento fue marcadamente atenuada.

2.4. Análisis

La densidad de células de algas se expresó como peso de células secas (DCW) por litro de
suspensión de cultivo. El DCW fue evaluado por secado células a 85 o C durante 24 h después de la
filtración a través de un filtro GF / C. Otro los análisis se realizaron básicamente según los métodos
estándar (APHA, 1995). HACH DR4000U fue utilizado en la determinación de CODCr, SCODCr, TN y
TP. Shimadzu 5000A se usó para total
Carbono orgánico (TOC) y carbono inorgánico (IC). Para NH4-N, HACH DR4000U y electrodo de
Orion fueron utilizados. El método Brucine se usó para determinar NO3-N. La alcalinidad se midió
a través de método titrimétrico. La intensidad de la luz se analizó utilizando Li-250A medidor de
luz (Li-COR).

3. Resultados y discusión

3.1. Preferencia de fuentes de nitrógeno

Para examinar qué fuente de nitrógeno es la cultura Scenedesmus Prefiere, se compararon el

crecimiento celular y el consumo de nitrógeno en presencia de 45 mg / L de NO3-N o NH4-N.
Medio Bristol contenido ya sea nitrato o amonio suministrado en forma de NaNO3 o NH4Cl,
respectivamente. La figura 1 muestra que la concentración de nitrógeno los perfiles fueron
similares independientemente de si el nitrato o el amoniose utilizó. Este resultado implica que las
celdas de Scenedesmus no diferencian entre nitrato y amonio como fuente de nitrógeno, y puede
utilizarse para la eliminación de nitrógeno en el tratamiento de amoníaco rico aguas residuales. La
absorción de amonio y nitrato es importante en microalgas eliminación de nitrógeno porque el
nitrógeno a menudo existe como amonio en aguas residuales (Tabla 1), especialmente para aguas
residuales agua residual digerida anaeróbicamente De hecho, la tasa de amonio la absorción es
generalmente inferior a la del nitrato en muchas microalgas especies debido a la toxicidad del
amoníaco (Przytocka-Jusiak, 1976; Azov y Goldman, 1982; Tam y Wong, 1996). Además de nitrato,
la especie Scenedesmus utilizada en este estudio fue capaz de utilizando amonio cuando la
concentración de amonio estaba en
niveles normales de cultivo, lo que resulta en tasas de crecimiento celular comparables (Figura 1).

3.2. Inhibición del crecimiento por amonio

La Fig. 2 muestra los cambios en la densidad celular a varios amonio inicial concentraciones que
varían de 100 a 1000 ppm de NH4-N. los cultivo con 100 ppm de NH4-N resultó en el mejor
crecimiento celular, que fue ligeramente mejor que el cultivo que contiene 100 ppm NO3-N. Las
tasas de crecimiento inicial del cultivo que contiene 200- 500 ppm de NH4-N fueron similares a los
de 100 ppm NH4-N pero nivelados apagado después de 7-8 días a una densidad celular final cerca
de 70% tan grande. Esto implicaba que los niveles de inhibición eran similares desde 200 a 500
ppm. La inhibición del crecimiento celular causado por el amonio se volvió severo cuando el
contenido de NH4-N alcanzó 800 ppm, con solo el 35% de la densidad celular final obtenida en
presencia de 1000 ppm NH4-N. Se sabe que las células de microalgas se inhiben con alto amoníaco
concentraciones, aunque a bajas concentraciones todavía pueden absorber amoníaco (Przytocka-
Jusiak, 1976; Azov y Goldman, 1982; Tam y Wong, 1996). Las células Scenedesmus utilizadas en el
estudio actual creció sin ningún signo de inhibición o influencia tóxica a 100 ppm NH4-N. La masa
celular final se redujo en un 30% por 200 a 500 ppm NH4-N, aunque la tasa de crecimiento celular
inicial no fue afectado. 3.3. Efecto de la concentración celular de siembra La Fig. 3 muestra los
cambios en el contenido de amonio y la densidad celular a una concentración de siembra
diferente de Scenedesmus al principio de cultivo. Este conjunto de experimentos se realizó con
dilución aguas residuales reales de cerdos que contienen 120 ppm de NH4-N. La siembra la
concentración de células varió de 0.5 g / L a 1.5 g / L DCW. El cuantitativo los valores de tasa de
crecimiento y tasa de remoción de amonio fueron resumido en la Tabla 2. La tasa neta de
crecimiento celular durante 10 días de cultivo fue de 45.8 mg / L / d con 0.5 g / L de siembra y
aumentó hasta 55.6 mg / L / d a 1.5 g / L de siembra (Fig. 3a). En términos de crecimiento
específico tasa (Fig. 3b), las células crecieron relativamente rápido y mostraron la mayor tasa de
crecimiento específica a la baja concentración de siembra de 0.5 g / L. La tasa de crecimiento
específica se redujo a medida que la concentración de siembra se incrementó.La variación en la
concentración de siembra influyó en la remoción de amoníaco durante el cultivo celular (Fig. 3c y
Tabla 2). Aunque el