• Introducción Trabajo Práctico Nº 9

• Objetivo ESTERILIZACIÓN
POR FILTRACIÓN
• Fundamento

• Procedimiento

• Resultados

• Conclusiones

• Bibliografía

INTRODUCCIÓN

La esterilización por filtración se logra por el paso de

un líquido o un gas a través de un material capaz de
retener los microorganismos presentes.

La esterilización por filtración se emplea para mate-

riales sensibles al calor, tales como ciertos medios de
cultivo, azúcares, soluciones de antibióticos y otros
medicamentos, etc.

TIPOS DE FILTROS

Hay varios tipos de filtros, entre ellos los que más se

usan son los filtros de profundidad y los filtros de su-
perficie o filtros de membrana.

Filtros de profundidad

Estos filtros están elaborados por un material fibroso

(papel, asbesto o fibra de vidrio) dispuesto al azar, de
manera que dentro de la estructura del filtro se crean
vías tortuosas donde pueden quedar retenidos la ma-
yoría de los contaminantes presentes.
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Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidad

de retención de partículas sobre su superficie y a
través de toda su estructura y que permiten filtrar
grandes volúmenes. Sin embargo, tienen como des-
ventajas que no presentan un tamaño de poro uni-
forme y existe la posibilidad de liberación, hacia el
material filtrado, de partículas y microorganismos
que hayan crecido dentro del filtro.

Dadas sus características los filtros de profundidad se usan principalmente como

prefiltros, ya que permiten eliminar las partículas grandes pero no la eliminación
total de los microorganismos.

Filtros de superficie

Son filtros elaborados generalmente de acetato

de celulosa o nitrato de celulosa y contienen po-
ros de tamaño uniforme. Este tipo de filtro tiene
como ventaja que, al conocer exactamente el
tamaño de poro que presentan, se pueden selec-
cionar filtros capaces de retener la totalidad de
los microorganismos presentes en una solución.
Sin embargo, se saturan rápidamente y la veloci-
dad de filtración a través de ellos es lenta.

Para la filtración esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de pro-

fundidad con un filtro de superficie que tenga un tamaño de poro de 0.22 µm. La
mayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en autoclave y luego
se manipulan asépticamente al ensamblar el equipo.

EQUIPOS DE FILTRACIÓN

Existen diferentes equipos de filtración, la se-

lección del mismo está determinado principal-
mente por el volumen de líquido a filtrar. Así
tenemos equipos de filtración para pequeños
volúmenes, los cuales generalmente se esteri-
lizan por separado y se ensamblan aséptica-
mente en el momento de la filtración. Cuando
se requiere filtrar volúmenes mayores, el filtro
de membrana se dispone en un cartucho y se
coloca en un estuche de acero inoxidable.
También existen pequeños cartuchos de plás-
tico que se pueden esterilizar después de la
inserción de un filtro de membrana; con estos dispositivos la filtración se hace utili-
zando una jeringa que permite forzar el líquido a filtrar a través del filtro hasta un
recipiente estéril.

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Antes de utilizar cualquier sistema de filtración hay que determinar que los filtros
no presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el proceso de
filtración.

OBJETIVO

Al finalizar el trabajo práctico el estudiante estará en capacidad de:

Demostrar la esterilización de un medio de cultivo al pasarlo a través de un filtro

de membrana de 0,22 μm.

FUNDAMENTO

Al pasar un medio de cultivo a través de un filtro de membrana de 0,22μm todos

los microorganismos quedan retenidos sobre la superficie del mismo.

PROCEDIMIENTO

1. Separar el medio de cultivo en dos porciones.

2. Pasar la porción A a través del equipo de filtración preparado con un filtro de

membrana de 0,22 μm.

3. Recoger el líquido filtrado en un recipiente estéril y rotular.

4. Colocar la porción B directamente en un recipiente estéril y rotular.

5. Incubar ambas porciones a 32,5ºC +/- 2,5ºC durante 24 horas.

RESULTADOS

Observar ambas porciones después del periodo de incubación y anotar sus obser-
vaciones.

Aspecto de la porción A: ______________________________________________

Aspecto de la porción B: ______________________________________________

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CONCLUSIONES

Anotar sus conclusiones

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BIBLIOGRAFÍA

Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Ge-

nerales (segunda edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Vene-
zuela.

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Tortora G. J., B. R. Funke and Ch. L. Case 2007. Introducción a la Microbiología

9na Edición. Editorial Médica Panamericana.

Prof. Sofía Gutiérrez de Gamboa

Octubre 2001
Revisión 2008

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