UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS

CARRERA DE LABORSATORIO CLINICO E HISTOTENOLOGICO

CATEDRA DE INMUNOLOGIA

NOMBRE: PERALTA REINOSO DAYANA

TEMA: INMUNO DIFUSION

OBJETIVOS

Comprender la naturaleza de la reacción antígeno-anticuerpo in vitro.

- Conocer los factores que intervienen en la reacción Ag-Ac y la forma en que afectan el

resultado final.

Detectar la formación de complejos inmunes constituidos cuando el antígeno y elanticuerpo

difunden y se unen en un punto medio (punto de equivalencia) donde se observauna
banda de precipitado.

INTRODUCCION

Esta técnica permite cuantificar de manera sencilla y económica inmunoglobulinas de isotipo

G, M y A o antígenos solubles (C3, C4, transferrina, etc) presentes en muestras biológicas. La
técnica se basa en la difusión de la muestra conteniendo el antígeno a medir
(inmunoglobulinas o antígenos solubles) en una matriz semisólida de agar en la que se
encuentra disuelto el Ac específico.

Utiliza un soporte de agar en el que difunden el Ag y Ac. Donde se establece el equilibrio entre
las concentraciones de Ag y de Ac se observa una banda de precipitado. La difusión puede
realizarse en una o dos dimensiones y además en tubo y en placa

Un anticuerpo es incorporado en agarosa fundida, la cual es vertida dentro de una caja de Petri
la cual se deja solidificar. Se cortan pequeños pozos dentro de la agarosa y estos son llenados
con concentraciones conocidas de antígeno correspondientes al anticuerpo, con el objeto de
construir una curva de calibración. Las muestras desconocidas se colocan dentro de los pozos.
Los antígenos en solución difundirán hacia fuera del pozo en un patrón circular rodeando al
pozo. El anticuerpo está presente en exceso y la difusión del antígeno continuará hasta que se
forme un precipitado antígeno-anticuerpo en forma de anillo estable. Habrá complejo Ag-Ac
en toda la zona circundante al pozo dentro de la línea de precipitina. En esta línea es donde
está presente el mayor número de complejos, ya que en ese punto el antígeno y el anticuerpo
están en proporciones iguales. Esta es conocida como la zona de equivalencia. Generalmente
toma de 24 a 48 horas para que ocurra la difusión óptima y la precipitación se haga evidente.
Para cada antígeno, se formará una precipitación final en anillo de cierto diámetro