LABORATORIO #2

EXAMEN DE LA CÉLULA BACTERIANA CON COLORACIÓN DE GRAM

1. INTRODUCCIÓN

Las tinciones en microbiología constituyen una herramienta fundamental que se utiliza en

el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas y en la caracterización
de las especies ya sean, bacterianas, micóticas y/o protozoarios.

En el área de bacteriología existen una gran variedad de coloraciones que se han ido
desarrollando para evidenciar las bacterias, de acuerdo a la afinidad de los colorantes por
sus componentes estructurales. El Gram es una de las coloraciones diferenciales más
usadas y se basa en la reacción química que existe entre colorante, mordiente y
decolorante, con los componentes que forman la pared celular. Las bacterias se pueden
dividir así en dos grupos de acuerdo a su capacidad para retener o no el colorante
primario (cristal violeta), en Gram positivas y Gram negativas.

Aunque es un instrumento de identificación de gran valor, la información que podemos

hallar a través de éste se limita a una clasificación por tamaño, forma, agrupación y
“color”, sin embargo, representa un importante paso inicial para, a partir de él, encaminar
la ruta de los análisis posteriores, en pro de caracterizar y determinar género y especie
del microorganismo en estudio.

Esta práctica aporta las pautas para el desarrollo estricto de la técnica de la coloración de
Gram, lo cual cobra vital importancia si atendemos al hecho de que es el punto de partida
para la ejecución de todo un análisis que culmina con la confirmación de un diagnóstico y
en la responsabilidad que tiene el bacteriólogo en la consecución de resultados
confiables, ya que esto puede afectar la calidad de vida de un paciente, en clínica, o
puede incidir en la calidad del producto de un proceso industrial, si fuera el caso. Por lo
tanto se hace imprescindible la apropiación a conciencia, por parte de los estudiantes de
bacteriología, del conocimiento de cada proceso básico.
 2. OBJETIVOS

 Asimilar y practicar los procedimientos de preparación, fijación y tinción de diferentes

muestras con la técnica de Gram, a partir de medios de cultivos líquidos y sólidos.

 Reconocer las características tintoriales y morfológicas bacterianas, por medio de la

observación al microscopio, con lentes de bajo (10x) y alto poder (100x).

 Aprender a realizar el reporte correcto de cada uno de los tipos celulares observados
en la práctica.
 3. RESULTADOS

3.1 Observación con objetivo de alto poder (100X)

Tabla 1. Características bacterianas observadas

Staphylococcus Bacillus cereus Proteus mirabilis

aureus
Gram + + -
Forma Cocos Bacilos Bacilos
Extremos rectos redondeados
Lados regulares paralelos Paralelos
Eje rectos rectos
Tamaño mediano grandes pequeño
Largo largos Cortos
Ancho anchos medianos
Pleomórficos no no si
Arreglos racimos cadenas grupos pequeños

Observamos que Staphylococcus aureus y Bacillus cereus mantienen unas características

predominantes, mientras que Proteus mirabilis es pleomórfico pues se encontraron formas
bacilares pequeñas que no eran uniformes, algunos parecían cocobacilos, y a veces se
encontraban solos o en grupos reducidos, también se encontraron bacilos alargados, que
posiblemente correspondían a células en proceso de división.

Se observó en Bacillus cereus la presencia de un espacio claro el centro de la célula,

correspondiente a la espora.

Otro aspecto observado es que aunque se observaron las mismas formas para las dos
muestras de cada bacteria estudiada, las que provenían de cultivo sólido mostraban los
arreglos o disposiciones bien definidas, mientras que las que provenían de cultivo líquido
se veían más dispersas.

 Rodríguez, E., Gamboa, M., Hernández, F., & García, J. (2005). Bacteriología general:
Principios y prácticas de laboratorio. Costa Rica: Editorial Universidad de Costa Rica.
Consultado el 18 de febrero de 2017, en:
https://investigaciones.uniandes.edu.co/es/microscopio-electronico-de-barrido-meb/