Criterios de muestreo y de interpretación de análisis de

micotoxinas en granos forrajeros.

Maíz, Sorgo y otros granos forrajeros:

Criterio del Departamento de Agricultura de USA

Independientemente del tamaño del lote a considerar, se deben tomar con el

calador de longitud adecuada, 10 submuestras como mínimo, de una libra cada una. De
modo tal que el peso de la muestra será por lo menos de 10 lbs. El total de la muestra
se somete a molienda, debe pasar a través de malla 20. Se homogeniza por cuarteo y
se envían al laboratorio 50 g para la cuantificación analítica.

Criterio de NUTEK S.A. de C.V.

Para obtener una muestra representativa en un furgón, es necesario tomar 11

submuestras de 2 kg apróx. de peso. La muestra total es de 22 kg por lo menos. Esta
muestra se reduce de tamaño por cuarteo a 5.5 kg. Se somete a molienda y se vuelve a
cuartear, se envía al laboratorio un kg de muestra. La determinación analítica se realiza
con 50 g. El diagrama especifica las zonas de muestreo.

x x x x

x x x

x x x x

Criterio del Departamento de Agricultura de USA

Se debe obtener una submuestra por cada 225 kg del producto. Por ejemplo si el
embarque es de 25,000 kg es necesario obtener 111 submuestras. La muestra total se
divide en tres submuestras de 48 lb (21.8 kg). Que se someten al proceso de molienda
y se envía al laboratorio 1,100 g se utilizan para la determinación analítica. La muestra
debe pasar a través de una malla con orificios de 3 mm de diámetro.

La muestra molida se procesa de acuerdo al método AOAC 970.45, utilizando

para el ensayo los 1,100 g. Del extracto se toman dos alícuotas que se cuantifican,
visualmente, por cromatografía de capa fina. Los resultados se promedian y se reportan
 como ng de aflatoxinas por g de muestra, ppb. Si el resultado es menor o igual a 8 ppb
se acepta el producto. Si es mayor a 45 ppb se rechaza el embarque.
Si el resultado queda comprendido entre 8 a 45 ppb, se somete a molienda otra de las
submuestras de 21.8 y una porción de 1,100 se analiza. Si el resultado promedio es
menor a 12 ppb se acepta el producto y si es mayor de 23 ppb se rechaza el lote.
Si el resultado queda comprendido entre 12 y 23 ppb, se procesa la tercera submuestra
de 21.8 kg y se vuelve a obtener una muestra de 1,100 g que se cuantifica. Se
promedian todos los resultados, si el promedio indica que la concentración de
aflatoxinas es menor o igual a 15 ppb, el lote se acepta. Si es mayor se rechaza.

Criterio del Reino Unido

La muestra representativa debe ser tomada de por lo menos 30 puntos de

muestreo. El peso de la muestra debe ser de 10 kg. Sólo se obtiene una muestra. Esta
muestra se somete al proceso de molienda y se homogeniza. Se toman 3 submuestras
de 50 g que se someten a los ensayos analíticos por HPLC. El lote se acepta si el
promedio de los tres ensayos es menor o igual a 10 ppb.

Criterio de Holanda

La muestra representativa debe obtenerse de por lo menos 100 zonas de

muestreo y el peso debe ser cercano a los 40 kg. Se reduce de tamaño la muestra por
cuarteo. Se somete a molienda de modo tal que por lo menos el 80 % pase a través de
una malla de 1 mm. Se toman 4 submuestras de 50 g que se somenten a un ensayo
analítico por HPLC. Si los 4 resultados indican una concentración menor de 3 ppb de
aflatoxina B1, el lote se acepta. Si uno de los cuatro resultados indica una concentración
superior a 3 ppb de aflatoxina B1 el lote se rechaza.

Referencia:
Whitaker et al.: Journal Of AOAC International Vol.78, No.4, 1996

CRITERIOS DE ACEPTACION DE CACAHUATES, POR CONTAMINACION

CON AFLATOXINAS
País Lim. Max. No. de Peso Zonas de Peso muestra Método
en ppb muestras muestra muestreo analítica en g. de
en kg. ensayo
USA 15 3 21.8 1 por 225 kg 1,100 TLC
UK 10 1 10.0 30 50 HPLC
Hol. 5 4 7.5 100 50 HPLC
UK = Reino Unido
Hol. = Holanda
TLC = Cromatografía de capa fina
HPLC = Cromatografía de líquidos
 EFECTO DEL PESO DE LA MUESTRA SOBRE
LOS ANALISIS DE AFLATOXINAS EN MAIZ.

IDENTIFICACION Muestras de 1 lb Muestras de 5 lb

No. 1 < 20 ppb 98 ppb

No. 2 < 20 ppb 60 ppb
No. 3 < 20 ppb 50 ppb
No. 4 < 20 ppb 67 ppb
No. 5 < 20 ppb 43 ppb
No. 6 < 20 ppb 27 ppb
No. 7 < 20 ppb 7 ppb
No. 8 < 20 ppb 37 ppb
No. 9 < 20 ppb 42 ppb
No. 10 < 20 ppb 60 ppb
No. 11 > 20 ppb 105 ppb
No. 12 < 20 ppb 33 ppb

Mycotoxin. Litigation/Regulation Conference Handbook, 1996.

 EFECTO DEL PESO DE LA MUESTRA
Y DEL METODO ANALITICO
EN LOS ANALISIS DE AFLATOXINAS EN MAIZ.

Identificación Resultados < 20 ppb Resultados > 20 ppb

Laboratorio No. 1 11 1
(Muestra de 1 lb)
Laboratorio No. 2 2 10
(Muestra de 5 lb)
Laboratorio No. 3 1 11
(Muestra de 5 lb)
Laboratorio No. 1 Sistema ELISA
Laboratorio No. 2 TLC
Laboratorio No. 3 HPLC
Mycotoxin. Litigation/Regulation Conference Handbook. 1996

EL EFECTO DEL TAMAÑO Y LA PREPARACION DE LAS MUESTRAS SE HA

ESTUDIADO EN DIFERENTES CEREALES Y CON DISTINTAS MICOTOXINAS:

Maíz: Aflatoxinas, Vomitoxina, Fumonisina, Zearalenona

Trigo: Vomitoxina, Zearalenona

Cebada: Vomitoxina, Zearalenona, Ocratoxina

Harinolina: Aflatoxinas, Tricotecenos

Mycotoxin. Litigation/Regulation Conference Handbook. 1996
 EFECTO DEL PESO DE MUESTRA Y DE LA
COMPOSICION DEL EXTRACTANTE EN EL ANALISIS
DE AFLATOXINAS EN MAIZ

CONCENTRACION DE AFLATOXINAS EN CONCENTRACION DE AFLATOXINAS EN

ppb. ppb.
Muestras de 0.5 kg, extraídas con Muestras de 5.0 kg, extraídas con
metanol-agua (80:20). acetonitrilo-agua (90-10)

15 70
10 52
5 28
25 140
<1 10
6 28
19 100
12 55
30 140
<1 12
Referencia: Lab. de Química de NUTEK, S.A. de C.V.
Congreso AMVEC, 1996
 Limites de tolerancia para Aflatoxinas

País Lím. max. en Producto

ppb
México 20 Maíz y sorgo
USA (FDA, 20 Todos los alimentos para consumo humano.
1996) 20 Todos los alimentos para animales.
15 Cacahuate (para exportación).
100 Cacahuate para dietas de animales reproductores (cerdos y
vacuno).
100 Cacahuate para dietas de aves adultas.
200 Cacahuate para dietas de cerdos en finalización.
300 Cacahuate para dietas de ganado vacuno en engorda
300 Harinolina en dietas para todas las especies de animales.
100 Maíz para dietas de animales reproductores (cerdos y vacuno).
Maíz para dietas de aves adultas.
100 Maíz para dietas de cerdos en finalización.
200 Maíz para ganado vacuno de engorda
300
CEE (1987) 10 Alimentos para vacas
Aflatoxina 10 Alimentos para todas las especies que no se especifican.
B1 20 Alimentos para aves y cerdos adultos.
50 Alimentos para bovinos y caprinos.
China
Af. B1 50 Arroz, sorgo, trigo, maíz, cebada y avena
Francia 10 Alimentos para consumo humano
10 Alimentos para consumo animal
5 Alimentos infantiles
Reino 10 Cacahuate
Unido 10 Alimentos para consumo humano
Chile 5 Alimentos para animales
Afla. b1 20 Ingredientes para la elaboración de alimentos
Aflatoxinas. 20 Alimentos para animales
50 Ingredientes para la elaboración de alimentos
Holanda 5 Cacahuate
 Limites de tolerancia para diversas Micotoxinas

Deoxinivalenol (Vomitoxina, DON)

País Lím. máx. Producto
en ppm
USA (FDA, 1 Productos derivados del trigo para consumo humano
1996) (germen, harina, salvado).
5 Alimentos para ganado vacuno y aves mayores de 4 meses.
1 Alimentos para cerdos.
2 Alimentos para animales no especificados
0.3 Granos para alimentos de aves (indicador de fusariotoxicosis;
Wyatt, 1989).
Hungría
(1990) 0.4 Alimentos para cerdos, gansos, patos y pavos.
Austria 0.1 Alimentos para cerdos
(1990)
Cánada
(1987) 0 Cereales para alimentos infantiles.

Ocratoxina A
País Lím. máx. Producto
en ppb
Hungría 10 Alimento para ponedoras
(1990) 100 Alimentos para rumiantes en crecimiento
25 Alimentos para otras especies
Belgica 0 Alimentos para consumo humano
Rumania 5 Alimentos para consumo humano
Brasil 50 Arroz, maíz, avena, frijol
Reino
Unido 10 Cereales
Ex-URSS
(1987) 25 Alimentos para consumo humano
Noruega
(1996) 2 Alimentos para consumo humano
ZEARALENONA (Toxina F-2)
País Lím. máx. Producto
en ppb
Hungría 2,000 Alimentos para rumiantes, no reproductores.
(1990) 500 Alimentos para pollos de engorda, pavos, ponedoras, patos y
cerdos en engorda.
80 Alimentos para reproductores y animales en crecimiento
(cerdos, pavos, gansos, ovejas, patos y ganado vacuno).
Brasil (1987) 200 Maíz
USA (1989) 250 Granos empleados en alimentos para aves (indicador de
fusariotoxicosis).
Austria (1990) 50 Alimentos para cerdos
Bélgica (1987) 0 Alimentos para consumo humano

FUMONISINAS
País Lím. máx. en Producto
ppm
USA 5 Maíz
USA 5 Alimento para caballos
10 Alimento para cerdos
50 Alimento para aves

Límites máximos de Micotoxinas permitidos

en dietas de animales
(Hungarian Feed Code, 1990)

Micotoxina LMP en mg/kg Tipo de alimento

(ppm)
Zearalenona 2.0 Alimentos para rumiantes, no reproductores.
Alimentos para pollos de engorda, pavos,
0.5 ponedoras, gansos, patos y cerdos en
engorda.
Alimentos para reproductores y animales en
0.08 crecimiento (cerdos, pavos, gansos, ovejas,
patos y vacuno)

Vomitoxina 0.4 Alimentos para cerdos, gansos, patos y

(DON, deoxinivalenol) pavos
Toxina T-2 2.0 Alimentos para rumiantes no productores de
leche, ponedoras y pollos
Diacetoxiscir-penol 0.5 Alimentos para pollos de engorda
(DAS)
Nivalenol (NIV) 0.3 Alimentos para aves ponedoras y cerdos.
Ocratoxina A 0.01 Alimentos para ponedoras
0.1 Alimentos para rumiantes en crecimiento
0.025 Alimentos para otras especies
 Límites de tolerancia de Micotoxinas en
dietas de cerdos, ppb

Iniciación Finalización Reproducción

Aflatoxinas 10 19 20
B1,B2,G1,G2
Zearalenona 5,000 10,000 500
Diacetoxiscirpenol 500 200 6,000
DAS
Toxina T-2 2,000 5,000 8,000
*Fumonisina B1 10,000 10,000 10,000
Vomitoxina, DON 100 600 500
Ocratoxina A 25 20 50

Límites de tolerancia de Micotoxinas en

dietas de aves, ppb

Pavos Pollos Ponedora

Aflatoxinas 5 10 20
B1,B2,G1,G2
Zearalenona 15,000 30,000 250,000
Diacetoxiscirpenol 1,000 1,000 2,000
Toxina T-2 500 1,000 2,000
Vomitoxina, DON 750 750 1,000
*Fumonisina B1 50,000 50,000 50,000
Ocratoxina A 25 50 75
Citrinina 25,000 40,000 50,000

Coelho M., 1990

* Truckness 1996