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19 DE FEBRERO DE 2018
ELIZABETH AGUILAR SERNA
LABORATORIO DE METABOLISMO INTERMEDIARIO
Objetivo
Determinar el consumo de consumo (Velocidad de la respiración) durante la respiración de
semillas de frijol.
Introducción
El proceso por el cual las células degradan las moléculas de alimento para obtener energía recibe el
nombre de RESPIRACIÓN CELULAR. La respiración celular es una reacción exergónica, donde parte
de la energía contenida en las moléculas de alimento es utilizada por la célula para sintetizar ATP.
Decimos parte de la energía porque no toda es utilizada, sino que una parte se pierde.
Aproximadamente el 40% de la energía libre emitida por la oxidación de la glucosa se conserva en
forma de ATP. Cerca del 75% de la energía de la nafta se pierde como calor de un auto; solo el 25%
se convierte en formas útiles de energía. La célula es mucho más eficiente. La respiración celular es
una combustión biológica y puede compararse con la combustión de carbón, bencina, leña. En
ambos casos moléculas ricas en energía son degradadas a moléculas más sencillas con la
consiguiente liberación de energía. Tanto la respiración como la combustión son reacciones
exergónicas. Sin embargo, existen importantes diferencias entre ambos procesos. En primer lugar,
la combustión es un fenómeno incontrolado en el que todos los enlaces químicos se rompen al
mismo tiempo y liberan la energía en forma súbita; por el contrario, la respiración es la degradación
del alimento con la liberación paulatina de energía. Este control está ejercido por enzimas
específicas. En segundo lugar, la combustión produce calor y algo de luz. Este proceso transforma
energía química en calórica y luminosa. En cambio, la energía liberada durante la respiración es
utilizada fundamentalmente para la formación de nuevos enlaces químicos (ATP).
La respiración celular puede ser considerada como una serie de reacciones de óxido-reducción en
las cuales las moléculas combustibles son paulatinamente oxidadas y degradadas liberando energía.
Los protones perdidos por el alimento son captados por coenzimas. La respiración ocurre en
distintas estructuras celulares. La primera de ellas es la glucólisis que ocurre en el citoplasma. La
segunda etapa dependerá de la presencia o ausencia de O2 en el medio, determinando en el primer
caso la respiración aeróbica (ocurre en las mitocondrias), y en el segundo caso la respiración
anaeróbica o fermentación (ocurre en el citoplasma).
GLUCÓLISIS
La glucólisis, lisis o escisión de la glucosa, tiene lugar en una serie de nueve reacciones, cada una
catalizada por una enzima específica, hasta formar dos moléculas de ácido pirúvico, con la
producción concomitante de ATP. La ganancia neta es de dos moléculas de ATP, y dos de NADH por
cada molécula de glucosa. Las reacciones de la glucólisis se realizan en el citoplasma, como ya
adelantáramos y pueden darse en condiciones anaerobias; es decir en ausencia de oxígeno. Los
primeros cuatro pasos de la glucólisis sirven para fosforilar (incorporar fosfatos) a la glucosa y
convertirla en dos moléculas del compuesto de 3 carbonos gliceraldehído fosfato (PGAL). En estas
reacciones se invierten dos moléculas de ATP a fin de activar la molécula de glucosa y prepararla
para su ruptura.
VÍAS ANAERÓBICAS
El ácido pirúvico puede tomar por una de varias vías. Dos son anaeróbicas (sin oxígeno) y se
denomina FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA y FERMENTACIÓN LÁCTICA. A la falta de oxígeno, el ácido
pirúvico puede convertirse en etanol (alcohol etílico) o ácido láctico según el tipo de célula. Por
ejemplo, las células de las levaduras pueden crecer con oxígeno o sin él. Al extraer jugos azucarados
de las uvas y al almacenarlos en forma anaerobia, las células de las levaduras convierten el jugo de
la fruta en vino al convertir la glucosa en etanol. Cuando el azúcar se agota las levaduras dejan de
fermentar y en este punto la concentración de alcohol está entre un 12 y un 17 % según sea la
variedad de la uva y la época en que fue cosechada. La formación de alcohol a partir del azúcar se
llama fermentación.
Fermentación alcohólica
Fermentación láctica
En esta reacción el NADH se oxida y el ácido pirúvico se reduce transformándose en ácido láctico.
En matraces Erlenmeyer, agregar una capa de algodon y humedecer con NaOH 0.25M
Colocar solucion de rojo de congo en el extremo libre del tubo colocado previamente en la
tapa del matraz.
Resultados
Tiempo Semillas germinadas hervidas Semillas Semillas germinadas + Semillas germinadas +inhibidor
germinadas inhibidor (Azida de Na) (Arsenito de Na)
1 0 0.2 0 0.2
2 0 0.6 0.3 1.7
3 0 2.8 0.6 2.7
4 0 5.3 0.7 3.3
5 0 6.7 1 4.5
6 0 8 1.4 5
7 0 9.4 1.6 5.8
8 0 10 1.6 6.5
9 0 10 1.6 7.7
10 0 10 1.6 8.2
11 0 10 1.6 8.6
12 0 10 1.6 9.4
13 0 10 1.6 9.6
14 0 10 1.6 10
15 0 10 1.6 10
16 0 10 1.2 8.8
17 0 10 0.7 7
18 0 10 0.3 5.8
19 0 10 0.3 4.6
20 0 10 0.5 4.6
Discusión de resultados
Para poder realizar esta práctica es muy importante poner a germinar las semillas ya que lo
que vamos a medir es la velocidad de respiración o el consumo de oxigeno del frijol, como
sabemos una semilla no respira por tal motivo deben estar germinadas para llevar la
práctica a cabo, mientras más germinadas estén las semilla será mejor y más precisa la
medición del consumo de oxígeno, en la practica la gota de colorante se dirige en dirección
hacia el matraz ya que es ahí donde está contenido todo el oxígeno que están requiriendo
las semillas para llevar a cabo la respiración, en los casos donde la semilla no esté
consumiendo oxígeno, la gota puede ir en sentido contrario. En este caso se esperaba que
en el matraz de las semillas hervidas, ya que era el control, la gota de colorante se fuera
rápidamente hacia el fondo del matraz por el alto consumo de oxigeno de las semillas al
momento de respirar, pero hubo ciertos errores en el procedimiento que hicieron que la
gota nunca se moviera, como se muestra en el grafico anterior, el problema pudo ser que
no se selló completamente el matraz y el oxígeno escapara, por otra parte en los matraces
con la presencia de los inhibidores se pudo observar cómo es que actuaron en cuestión del
tiempo ya que inhiben la cadena respiratoria y por consecuencia el consumo de oxígeno, lo
que provocó que la gota de colorante en cierto tiempo se detuviera. Estos inhibidores
catalizan las reacciones que se llevan a cabo en la cadena transportadora de electrones, por
lo tanto, se puede hacer una comparación entre las diferentes muestras que se prepararon
en el matraz, de igual manera pudimos notar como es que en las semillas que no tuvieron
ningún tipo de tratamiento, la gota de colorante recorría el tubo de manera muy lenta así
que con eso podemos decir que el consumo de oxigeno se llevaba a cabo de manera más
lenta. Durante la metodología un factor muy importante es sellar bien los matraces ya que
con cualquier fuga de oxigeno se pueden alterar los resultados de la investigación.
Conclusión
Con los datos obtenidos durante el análisis de los ejemplares de semilla de frijol, podemos
concluir que el consumo de oxigeno o velocidad de respiración, depende de las condiciones
en las que se encuentre el organismo y la manera en que la lleva a cabo.
Comentarios personales
Para este tipo de prácticas es importante tener una buena introducción y conocimientos de
lo que ocurre en las semillas germinadas y sin germinar, ya que esta experimentación nos
puede dar mucha información si la sabemos deducir con lo que vemos y los datos que vamos
recabando a lo largo de la práctica. Hubo varias equivocaciones en el desarrollo de la
técnica, pero lo importante es saber en qué se falló y que repercusión tiene en los
resultados que obtenemos.
Bibliografía
http://www.medigraphic.com/pdfs/neumo/nt-2006/nt062c.pdf
http://www.genomasur.com/lecturas/Guia09.htm