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LABORATORIO DE BIOQUIMICA CLINICA PRÁCTICA No.

PRÁCTICA No.2

“METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS”

GENERALIDADES

La glucosa es una fuente importante de energía para la mayoría de las células del cuerpo,
incluyendo a las del cerebro. Los carbohidratos se encuentran en las frutas, los cereales, el
pan, la pasta y el arroz. Se transforman rápidamente en glucosa en el cuerpo. Esto eleva su
nivel de glucosa en la sangre.

Las hormonas producidas en el cuerpo (insulina y glucagón), ayudan a controlar el nivel de


glucosa en la sangre.

El médico puede solicitar un examen de glucosa si se tienen signos de diabetes. Lo más


probable es que el médico ordene una prueba en ayunas.

El examen de glucemia o de glucosa también se utiliza para monitorear a personas que


padecen diabetes.

También se puede hacer si se presentan:

 Un aumento en la frecuencia de la necesidad de orinar


 Visión borrosa
 Confusión o un cambio en la forma como usted normalmente habla o se comporta
 Episodios de desmayo
 Convulsiones (por primera vez)

La prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un examen de sangre para la diabetes tipo


2 y prediabetes. Mide el nivel promedio de glucosa o azúcar en la sangre durante los últimos
tres meses. Los médicos pueden usar la prueba HbA1c sola o en combinación con otras
pruebas de diabetes para hacer un diagnóstico. También utilizan la HbA1c para ver lo bien
que está manejando su diabetes. Esta prueba es diferente a los controles de azúcar en la
sangre que las personas con diabetes se hacen todos los días.

El resultado de su prueba HbA1c se entrega en porcentajes. Mientras más alto sea el


porcentaje, mayor es su nivel de azúcar en la sangre:

 Un nivel de HbA1c normal es menor al 5,7 por ciento


 La prediabetes se ubica entre 5,7 a 6,4 por ciento. Tener prediabetes es un factor de
riesgo para desarrollar diabetes tipo 2. Las personas con prediabetes pueden necesitar
repetir las pruebas cada año
 La diabetes tipo 2 se ubica por encima del 6,5 por ciento
Si se tiene ya diabetes, se debe someterse a la prueba HbA1c por lo menos dos veces al año.
Para muchas personas con diabetes, la meta de HbA1c es un porcentaje inferior a siete.

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Puede ser diferente para usted. Si el resultado de HbA1c es demasiado alto, es posible que
tenga que cambiar su plan de cuidado de la diabetes.

METODO

 Enzimático-colorimétrico.
 Trinder-cinético.
PRINCIPIO

La determinación enzimática de glucosa de acuerdo a las siguientes reacciones:

La enzima glucooxidasa cataliza la oxidación de glucosa a gluconato y peróxido de


hidrógeno. La concentración de glucosa es proporcional al H2O2, este puede medirse
apareándolo con un indicador de peroxidasa.
La determinación de glucosa se efectúa mediante el método de Trinder según las
siguientes reacciones:
GOD
Glucosa + O2 + H2O H2O2 + Gluconato
POD
2H2O2 + Fenol + 4-AF Quinona + 4H2O .
GOD = Glucosa oxidasa
POD = Peroxidasa
4-AF = 4-aminofenazona

MATERIAL

 Glucosa (*marca)
 Torundas
 Jeringas y agujas G21
 Tubos para suero
 Centrífuga
 Termo Block
 Espectrofotómetro
 Micropipetas
 Agua destilada
 6 Tubos eppendorf (por pareja)

PROCEDIMIENTO

1. Obtener suero mediante extracción sanguínea.

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Condiciones:
Longitud de onda: 500nm
Temperatura: 37°C
2. Leer contra blanco de reactivo.

3. Procedimiento de un reactivo:

GLUCOSA

BLANCO CALIBRACIÓN PRUEBA


Reactivo de 1 mL 1 mL 1 mL
Trabajo
Agua destilada 10µL - -
Estándar - 10µL -
Muestra - - 10µL

4. Mezclar y medir la variación de absorbancia (ΔA) durante 75 segundos

OBSERVACIONES

 Se modificaron los valores de la tabla de glucosa como se muestra en este reporte.


 Se leyeron las muestras en un espectrofotómetro más complejo que los actuales.
 Se hizo una prueba de glucemia basal y de glucemia al azar
 La pruebas de glucemia basal y al azar se hicieron por separado, es decir, la manejaron
equipos diferentes.
 La temperatura no fue exactamente 37ºC, fue un poco más baja.
 No se tomaron en cuenta los 75 segundos del procedimiento al leer las absorbancias.
 Los valores de la glucemia basal y al azar son pacientes diferentes.

RESULTADOS

𝐴𝑏𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 0.135 𝑚𝑔


𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = 𝐴𝑏𝑠 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ° [𝑆𝑡𝑑] = ° [100 𝑚𝑔/𝑑𝐿] = 105.46 𝑚𝐿 (𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑏𝑎𝑠𝑎𝑙)(
0.128

0.173 𝑚𝑔
𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 = ° [100 𝑚𝑔/𝑑𝐿] = 135.15 (𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑎𝑙 𝑎𝑧𝑎𝑟)
0.128 𝑚𝐿

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VALORES DE REFERENCIA

 GLUCEMIA BASAL
<126 mg/mL
 GLUCEMIA AL AZAR
<200 mg/mL
 GLUCEMIA EN SUERO
<200 mg/mL

DISCUSION DE RESULTADOS/CONCLUSIONES

Los resultados fueron los esperados ya que, al parecer, el paciente de la glucemia basal no
era diabético y el paciente al de la glucemia al azar resulto un poco alto de 120 mg/mL, lo
cual es normal. En todo esto se deben tomar en cuenta las observaciones que se registraron
como la temperatura, el espectrofotómetro y la variación de los dos equipos que trabajaron.

Como conclusión de la práctica, notamos como esta prueba es sumamente importante, no


solo para el diagnóstico de la diabetes en donde se también se debe de tomar en cuenta la
tolerancia de la glucosa y la hemoglobina glicosilada, si no para asegurarnos un buen
tratamiento de la diabetes, algún otro trastorno metabólico, etc., por lo cual es necesario
llevar no dejar esta prueba de lado.

CUESTIONARIO

1. Mencione las indicaciones para el paciente para la determinación de glucosa.

o El examen se puede hacer de las siguientes maneras:

a. Después de no haber comido nada (en ayunas) durante al menos 8 horas


b. En cualquier momento del día (aleatorio)
c. Dos horas después de tomar cierta cantidad de glucosa (prueba oral de
tolerancia a la glucosa)

2. Mencione 4 causas de niveles disminuidos de HbA1c:

o Anemia hemolítica
o Sangrados crónicos
o Hipoglucemia
o Cambios bruscos en la alimentación (abstinencia de carbohidratos).

3. ¿En qué casos está indicada la solicitud de glucosa en sangre?

o Principalmente para detectar casos de diabetes tipo 2 (diabetes mellitus)

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o Cuando ya se tiene diabetes, analizar el control de la enfermedad.

4. Explique detalladamente la glucólisis (imagen).

5. Mencione los 3 criterios de diagnóstico de la diabetes mellitus:

 Nivel de glucemia en ayunas.


i. Se diagnostica diabetes si el resultado es mayor a 126 mg/dl (7.0
mmol/l) en dos momentos diferentes.
 Examen de hemoglobina A1c.
i. Se diagnostica diabetes si el resultado del examen es 6.5% o superior.
 Prueba de tolerancia a la glucosa oral.
i. Se diagnostica diabetes si el nivel de glucosa es superior a 200 mg/dl
(11.1 mmol/l) 2 horas después de ingerir una bebida azucarada especial.

REFERENCIAS

MedlinePlus. 2016. Examen de Glucemia. 05 de Marzo de 2017. NIH: Biblioteca


Nacional de Medicina de los EE. UU.:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003482.htm

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MedlinePlus. 2017. Prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c). 05 de Marzo de 2017.


NIH: Biblioteca Nacional de Medicina de los EE. UU.:
https://medlineplus.gov/spanish/a1c.html
Macarulla J. 1994. Bioquimica humana 2da. Ed. Barcelona: Reverte.
Universidad Autonoma de Baja Califormia. (2009). Manual de Practicas: Bioquimica. 05
de Marzo de 2017. UNAM:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf

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