Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Práctica 5.4 Efecto de la temperatura sobre la velocidad Bioquímica General

de la reacción catalizada por invertasa

Introducción 0.7
La velocidad de una reacción enzimática varía al aumentar la 0.6
temperatura. Esto es, la velocidad de una reacción enzimática se 0.5

Velocidad (U.I.)
incrementa al aumentar la temperatura dentro de un determinado
0.4
rango, alcanzando un valor máximo a la denominada temperatura
óptima. A valores superiores la actividad disminuye debido a que la 0.3
enzima, como cualquier otra proteína, sufre procesos de 0.2
desnaturalización y, por lo tanto, de inactivación.
0.1
Objetivos 0
 Demostrar cual es el efecto de la temperatura sobre las -0.1 0 20 40 60 80 100
reacciones enzimáticas. Temperatura (°C)
 Calcular el valor de la energía de activación (Ɛa) de la reacción
catalizada por la invertasa.
 Calcular el valor de Q10, a diferentes intervalos para la reacción
catalizada por la invertasa.
1/T (K)
Resultados 0
0.003 0.0032 0.0034 0.0036 0.0038
Tabla 1. Resultados del comportamiento de la actividad enzimática contra la -0.5
temperatura
Tubo ln(V0) -1
1 2 3 4 5 6
problema
-1.5
Temperatura
0 17 37 50 75 92
(°C)
-2
Absorbencia 0.088 0.244 0.616 0.823 0.021 0
Azúcar -2.5
reductor 1.431 3.832 9.560 12.747 0.399 0
[µ moles] -3
Velocidad
(Unidades de 0.071 0.191 0.478 0.637 0.019 0
Invertasa)
Discusión de resultados
Tabla 2. Resultados (comparación entre absorbencias de los tubos testigo)
Tubo testigo 1 2 3 4 5 6 Al aumentar la temperatura de la reacción catalizada por la
Temperatura
(°C)
0 17 37 50 75 92 enzima invertasa se observa un incremento de la velocidad de
Absorbencia -0.001 0 -0.017 -0.018 -0.010 0.051
reacción hasta llegar a los 50°C donde se observa su máxima
actividad, sin embargo al sobre pasar esta temperatura ésta
Cálculos decae abruptamente; esto debido a que, como se sabe, las
enzimas son proteínas y estas a cierta temperatura se
El valor que se obtiene de la lectura de absorbencia en cada tubo
desnaturalizan y en caso de las enzimas pierden su función.
corresponde a un valor específico de concentración de azúcar reductor
producido por la acción de la enzima invertasa. Dicho valor de Conclusiones
concentración es calculado al interpolar los valores de absorbencia de
esta práctica con los obtenidos en la gráfica curva tipo de azucares
Las enzimas aumentan su actividad al aumentar la temperatura
reductores. Dicha grafica corresponde a una tendencia lineal entre los
hasta llegar a su temperatura optima, al sobrepasar dicha
valores de absorbencia y concentración de azúcares reductores [AR],
por lo que dicha grafica corresponde a la ecuación: temperatura comienzan a desanturalizarse y pierden actividad.

[𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝐴𝑅] = [(−0.00495)(𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎)] + 0.06495 Bibliografía

De donde solo se sustituye el valor de absorbencia obtenido para 1. Manual de experimentos de laboratorio para bioquímica,
obtener el valor de [𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝐴𝑅]. Quesada S., Editorial EUNED, Costa Rica, 2007, págs. 40-42.
2. Fundamentos de bioquímica (2° edición), Voet P., Voet J.,
Finalmente para calcular la velocidad en Unidades de Invertasa (U.I.) se Pratt C., Editorial medica panamericana, Argentina, 2009,
[𝐴𝑅]

aplica la siguiente formula: 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 (𝑈. 𝐼. ) = 2 𝑚𝐿

. págs. 100-103.
10

Temperatura
0 10 20 30 40 50
(°C)
1/T (K) 0.0036 0.0035 0.0034 0.0033 0.0031 0.0030
ln(V0) (U.I.) -2.637 -2.138 -1.672 -1.238 -0.831 -0.450