METODO PARA DETERMINACIÓN DE BACTERIAS LÁCTICAS ( LEVADURA)

ENSAYO 1 (23/05/09)

EQUIPO.

1.-Tubos de cultivo
2.-Botella con capacidad aprox 500ml
3.-incubadora a 30ºC
4.-Pipetas de 2 y 5ml
5.-Placas petri

MEDIOS.

1.-Agar MRS
2.-Agar jugo de tomate (MRS-TJA)
3.-Buffer soya tripticasa sin dextrosa (BTSB w/o D)
4.Agua peptonada (BPW)
5.-Agua de dilución ( NaCl con peptona) (PSDF)
6.-Actidion
7.-HCl 0.2 N y NaOH 1N

NOTA : La bacto – peptona se sustituyó por peptona de soya.

Desarrollo.

Las muestras utilizadas para el desarrollo de la práctica fueron:

Muestra Número de
comercial
Cremas sin
ácido 436
Crema con
ácido 433
Levadura en
pasta 433
Levadura seca 431
Cultivo con
ácido 57
Cultivo sin
ácido 57

1.-Se fundió el agar MRS-TJA para mantenerlo a temperatura de aprox 44 ºC.

2.-Se marcó placas y tubos para realizar la identificación de muestras y diluciones
requeridas.
3.-Para las muestras de levadura seca y fresca se pesaron 10 g en 90 ml y se ajustó a un
pH de 6.0 aprox. con HCl 0.2N
4.-Para las muestras de levadura seca y fresca se partió de la dilución 10-1 y se sembró
hasta dilución 10 -5
5.-Las muestras de levadura en crema así como cultivos se realizó la siembra directa
hasta 10-5.
6.- Todas las placas se incubaron a 30 ºC. A las 48 h no se observa crecimiento.

RESULTADOS.

CANTIDAD DE PROBABLES
MUESTRA COMERCIAL BACTERIAS BACTERIAS
MESÓFILICAS LÁCTICAS
CULTIVO
C/A 57 NO SE IDENTIFICÓ LA ----------
MUESTRA

CULTIVO
S/A 57 80
10

CREMA C/A 433

2
2

CREMA S/A 436

158-101
48-10 2

PASTA 433

0 0

SECA 431 11 -10 3

36- 103

*Bacilos en cadena gruesos G+

*CATALASA (Negativo)

ENSAYO 2 (27/05/09)

CANTIDAD DE PROBABLES
MUESTRA COMERCIAL BACTERIAS BACTERIAS
MESÓFILICAS ( CTB
CON ACTIDION) LÁCTICAS
CULTIVO
C/A 60 0 0

CULTIVO 568 – 102

S/A 60
460-103
CREMA C/A 445
0
0

CREMA S/A 445 31-10 4

 51-104

PASTA 441

0 0

SECA 437 2 -10 2

2
4- 10

*Bacilos en cadena (2 y 3), gruesos G+

*CATALASA (Negativo)

ENSAYO 3 (12/06/09)

*Se realizó el método para la determinación de bacterias lácticas (BL) y no lácticas

(BNL), para las BL el método fue el mismo ( mencionado en la primera parte).

Para la determinación de BNL se preparó agar – peptona al igual como lo marca

método, modificando peptona simple por peptona de soya. Y dilución de todas las
muestras hasta 10-4
Para inhibir a las BL se adicionó Bencilpenicilina sódica 1,000,000 U ( según método
Penicilina de sodio G o Nisaplin) :

150mg --- 100 ml de agua esteril

0.3 g en 200 ml de agua esteril. Dil final : 1500UI /ml

0.1 en 10 ml Dil final : 15 UI/ml.

Resultados:

BACTERIAS
CANTIDAD DE NO PROBABLES
MUESTRA COMERCIAL BACTERIAS LÁCTICAS BACTERIAS
MESÓFILICAS ( CTB (Bencilpenicilina)
CON ACTIDION) LÁCTICAS
CULTIVO 0
C/A 65 0 0

CULTIVO 0
S/A 65 136800
96000
CREMA C/A 488 1200
3700

5000
CREMA S/A 494 0
33200 10900
PASTA 492 0
0

0
SECA 488 3600 490 4200

BL (MEDIO MRS) : CATALAS NEGATIVOS

GRAM: POSITIVAS

ENSAYO 3 (O1/07)
BACTERIAS
NO PROBABLES
MUESTRA COMERCIAL CANTIDAD DE BACTERIAS LÁCTICAS BACTERIAS
(Bencilpenicilina)
MESÓFILICAS ( CTB S/ACT) LÁCTICAS
CULTIVO C/A 72 0 0 0

CULTIVO S/A 73 0 0 0

CREMA C/A 543 0 0 0

CREMA S/A 535 0 0 36

PASTA 539 0 0 0

SECA 532 97000 200 70000

CATALASA: NEGATIVO
GRAM : POSITIVAS