Guia Laboratorio

Guía Laboratorio
Universidad de Talca
Departamento de Estomatología
Módulo Patología Humana
2018
La comprensión de los procesos microscópicos a áreas de una placa virtual comprimida en un
nivel celular y de los tejidos es uno de los computador o dispositivo de visualización. La
aspectos más importantes que cualquier microscopía virtual además de emular el uso del
profesional de la salud en su ciclo básico debe microscopio tradicional, aportan las ventajas de
conocer. Es, en este sentido, que el accesibilidad, eficiencia y versatilidad pedagógica
entendimiento de cómo se alteran las células y que aporta a la enseñanza el uso de
los tejidos morfológicamente a nivel computadores e internet.
microscópico sirve para conocer y comprender la
fisiopatología de toda enfermedad en post de El propósito de esta guía es entregar una visión
poder curarla o minimizar sus dolencias. sintética con respecto a un tema a tratar en el
módulo de Patología Humana. Además busca
En el módulo de Patología Humana que usted como alumno investigue y profundice
complementamos la enseñanza de la patología en la bibliografía entregada y prepare sus
con la realización de laboratorios de microscopía actividades de laboratorio.
convencional, donde usted podrá observar
diferentes preparados histológicos que Por lo anterior, se recomienda repasar las bases
evidencian los cambios morfológicos asociados a morfológicas e histológicas por anticipado a la
diversas enfermedades. sesión para sacar el mayor provecho del paso
práctico.
Siempre con el afán de facilitar su aprendizaje,
hemos ido incluyendo nuevos recursos que Esperamos facilitar su estudio y la comprensión
mejoren y perfeccionen sus actividades de distintas materias, que en un futuro
prácticas. Entre ellos se destaca la microscopía respaldarán su práctica clínica.
virtual. Un microscopio virtual es un sistema que
Los autores
emula un microscopio óptico convencional, cuyo
objetivo es visualizar y desplegar diferentes
áreas de una placa virtual comprimida en un
computador o dispositivo de visualización. La
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microscopía virtual además de emular el uso del
INDICE
Normas de trabajo en el laboratorio 04
Consideraciones generales 05
Capítulo 1: 10
Citología y Procesamiento Histológico
Laboratorio 1
Microscopía Virtual 1
Capítulo 2: 17
Lesión celular e Inflamación
Laboratorio 2 y 3
Microscopía Virtual 2 y 3
Capítulo 3: 27
Reparación
Laboratorio 4
Capítulo 4: 34
Alteraciones Circulatorias
Laboratorio 5
Capítulo 5: 39
Trastornos Genéticos
Laboratorio 6
Capítulo 6: 44
Inmunología
Laboratorio 7
Capítulo 7: 50
Neoplasias
Laboratorio 8 y 9
Capítulo 8: 60
Patología de Sistemas
Laboratorio 10 y 11
Capítulo 9: 67
Semiología
Laboratorio 12
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NORMAS DE TRABAJO
La bioseguridad se define en líneas generales como las medidas preventivas

establecidas que tienden a brindar protección al personal ante riesgos potenciales
que causan agentes químicos, físicos y biológicos en el laboratorio y por extensión, al
medio ambiente. Para ello debe existir un programa que contemple las políticas sobre
el tema, un comité que vele por su implementación y un supervisor que sea
responsable por el cumplimiento de lo establecido.
El funcionamiento del laboratorio de histopatología no es posible sin la concurrencia

de tres elementos que interactúan con el personal: 1) existencia y- empleo Ipsum de
reactivos químicos, 2) presencia de muestras biológicas y sus respectivos desechos y
3) equipos.
Las sesiones prácticas de laboratorio son herramientas indispensables para el

desarrollo integral del módulo, por eso es necesario seguir algunas indicaciones, que
se detallan a continuación, para lograr un buen desarrollo de las mismas:
- Mantener en todo momento una actitud respetuosa, responsable y crítica. Si tiene
dudas siempre consulte previamente.
- Leer cuidadosamente la guía de laboratorio previo a la actividad, ya que esta será

evaluada.
- Usar a lo largo de toda la actividad delantal blanco. Si tiene pelo largo debe
amarrarlo. Evite el uso de sandalias, pantalones cortos o faldas.
- Al realizar las actividades completar el informe correspondiente. Para ello debe

contar con lápices de colores de acuerdo a la actividad (morado, rosado, rojo, azul) y
su guía de laboratorio.
- Dejar en el lugar que se le indique sus pertenencias, de tal manera de no

entorpecer la circulación en el laboratorio.
- NO consumir alimentos ni ingerir líquidos durante las actividades.
- Informar el daño o deterioro del material o equipo al docente responsable, el

causante debe responder por el daño ocasionado.
- No eliminar químicos de ningún tipo al desagüe sin previa consulta.
- Avisar al docente a cargo si ocurre algún accidente (cortes, quemaduras u otro).
- Al finalizar las actividades entregar el material de trabajo al docente y dejar el

microscopio utilizado con su funda puesta y guardado.
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CONSIDERACIONES GENERALES
En cada sesión práctica se observarán una serie de preparados a analizar. Se debe

comenzar el estudio con el objetivo de menor aumento (lupa), lo que permitirá
hacernos una idea aproximada de los tejidos a estudiar.
Posteriormente se pasará a visualizar el preparado a mayores aumentos, centrando la

observación en los distintos campos motivos de estudio. Si bien la temática de la
práctica orientará los objetivos fundamentales a conseguir sobre un tejido específico,
la interrelación con otros tejidos de vecindad suministrarán información
complementaria.
En todas las placas a observar son parámetros a estudiar, genéricamente, para

facilitarnos el reconocimiento de las diferentes estructuras los siguientes elementos:
- La existencia de los tejidos básicos, sus características fundamentales y los criterios

de clasificación de cada uno de ellos.
- La celularidad, si existe un sólo tipo o varios tipos celulares; la forma de las células
y su tamaño; las características nucleares, las diferenciaciones celulares de superficie
y su relación con las células vecinas.
- La existencia o ausencia de matriz extracelular; la naturaleza y cuantía en relación

con la celularidad y la disposición espacial de sus componentes.
- Las adaptaciones funcionales de los conjuntos celulares.
- No olvidar que se trata de cortes histológicos y hay que pensar en la estructura

tridimensional y como esta puede mostrar distintos aspectos según la sección, así
como la indeseable presencia de artefactos de la técnica histológica.
En base a lo anteriormente expuesto es importante que usted recuerde aspectos

básicos de histología para poder orientar mejor su práctica de laboratorio. A
continuación se resumen algunos aspectos esenciales que usted puede complementar
con sus conocimientos previos.
Los tejidos se pueden definir como un conjunto de células y su sustancia fundamental,

que durante su proceso de diferenciación, han adquirido formas semejantes para
desempeñar una misma función.
Según su función y características, existen diversos tipos de tejidos. La clasificación

más difundida, es aquella que se ha hecho con un criterio morfológico y funcional,
agrupándolos en 4 grandes grupos:
- Tejido epitelial
- Tejido conectivo
- Tejido muscular
- Tejido nervioso
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En base a su grado de diferenciación los tejidos se pueden clasificar en:
- Lábiles
- Estables
- Perennes o permanentes
Esta última clasificación tiene importancia porque el poder de regeneración de un

tejido es inversamente proporcional a su grado de diferenciación.
Los tejidos pueden desarrollar diversas adaptaciones como respuesta a distintos

estímulos. En estas respuestas las células alcanzan un nuevo, aunque alterado, estado
de equilibrio. Algunas de estas adaptaciones implican cambios en el crecimiento de
un tejido como en la hiperplasia, donde existe un crecimiento por aumento del
número de células que lo constituyen, o bien por hipertrofia, que corresponde a un
aumento del tamaño de las células que lo conforman. Se llama metaplasia a la
alteración de la diferenciación celular. Este proceso tiene un carácter patológico. La
atrofia corresponde a una disminución importante del tamaño de la célula y del
órgano del que forma parte comprometiendo la función.
En este apartado veremos con mayor detalle características del tejido epitelial y
conjuntivo, dado que estos serán vistos con mayor frecuencia en los preparados de
las prácticas de laboratorio.
Tejido Epitelial
Es aquel tejido que está constituido por células en yuxtaposición. Se clasifican en 2
grupos principales:
- Epitelios de revestimiento: su función primordial es revestir una superficie, pero en
su gran mayoría cumplen otras funciones como protección, secreción y absorción.
- Epitelios glandulares: es aquel tejido destinado a sintetizar sustancias específicas
que serán utilizadas por otras células del organismo.
Epitelios de revestimiento
Las células que los constituyen pueden tener forma plana, cúbica o cilíndrica. Pueden
disponerse en una sola capa celular o bien en varios estratos.
En los epitelios monoestratificados el nombre está dado por la forma de las células que
los constituyen, en el caso de los epitelios estratificados por la forma de las células más
externas.
Los epitelios de revestimiento carecen de irrigación. La nutrición la obtienen desde los

vasos sanguíneos del tejido conjuntivo subepitelial, para ello el tejido conectivo emite
evaginaciones (papilas del corión) que se insinúan en el espesor del epitelio.
Los epitelios se implantan en una formación extracelular llamada membrana basal, que
los une al tejido conectivo subyacente. La membrana basal está constituida por
mucopolisacáridos, proteínas, fibras reticulares y colágeno tipo IV. Las funciones que
cumplen las membranas basales son:
- Unión firme entre el epitelio y conjuntivo.
- Actuar como barrera al paso de sustancias.
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Las células epiteliales frecuentemente presentan en su superficie libre una
especialización o diferenciación. En algunas oportunidades el nombre del epitelio se
completa con alguna de las siguientes características:
- Microvellosidades
- Estereocilios
- Cilios y Flagelos
- Cornificación
Las células de un epitelio se mantienen unidas entre sí mediante varios mecanismos,

entre los que se encuentran:
- Zona ocluyente (Zónula occludens)
- Zona adherente (Zónula adherens)
- Desmosomas
- Nexos
La morfología de los epitelios de revestimiento está dada por la función que deben
desempeñar. Si se necesita un epitelio de simple revestimiento tendremos un epitelio
conformado por una sola capa de células, como por ejemplo, el endotelio de los vasos
sanguíneos. Esta característica permite el paso de gases, líquidos y partículas pequeñas.
En otras ocasiones al papel de revestimiento se suma la función de secreción o
absorción, por lo que el epitelio estará constituido por células cilíndricas con
microvellosidades.
Epitelio Glandular
Tejido epitelial destinado a sintetizar sustancias específicas. La célula glandular elabora la
secreción mediante un proceso activo en el que participan todos sus organoides. Las
características morfológicas de las células secretoras dependerán de las sustancias
encargadas de secretar:
- Secreción de proteínas: Generalmente son células prismáticas con un núcleo
central o desplazado hacia la zona basal. La secreción producida por estas
células se denomina secreción serosa por su parecido al suero sanguíneo.
- Secreción de carbohidratos: En oportunidades la acumulación de este tipo de

secreción provoca el rechazo del núcleo hacia la porción basal.
Los epitelios glandulares se pueden agrupar de acuerdo a su modalidad de secreción en:

- Merocrinos: La secreción se efectúa mediante gránulos de secreción.
- Holocrinos: La glándula completa se transforma en secreción.
- Apocrinos: Se efectúa por gránulos de secreción que se acumulan en el polo
apical de la célula, el cual se desprende con la secreción.
Las glándulas son entidades constituidas por un parénquima comprendido por un

epitelio glandular; y un estroma, que está formado por tejido conectivo que sirve de
sostén.
Si la glándula vierte su secreción a la superficie de origen por un conducto excretor se

denomina exocrina, si la vierte a los vasos sanguíneos y linfáticos se considera
endocrina.
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Tejido Conectivo
Tejido de origen mesenquimático constituido por células, sustancia fundamental y
fibras. El porcentaje de estos tres componentes determina la clasificación del tejido
conjuntivo.
Su función primordial es dar soporte al componente funcional de los tejidos. También

participa en el almacenamiento de metabolitos, en la respuesta inflamatoria e
inmunitaria y en la reparación tisular tras alguna lesión.
Entre las células que podemos distinguir en este tejido se encuentran:

- Células principales:
▪ Fibroblastos
▪ Macrófagos
▪ Células mesenquimáticas
- Células secundarias:
▪ Plasmocitos
▪ Mastocitos
▪ Adipocitos
▪ Melanocitos
▪ Leucocitos (células migratorias)
Las fibras colágenas son las estructuras más características y abundantes de un tejido
conectivo. Están dispuestas en todas direcciones. Las fibras elásticas son menos
abundantes que las colágenas y están distribuidas constituyendo una red.
La sustancia fundamental es elaborada por el fibroblasto. Sus componentes

principales son: agua, sales, metabolitos, proteínas y mucopolisacáridos. Los
mucopolisacáridos son responsables de las propiedades físico químicas de la matriz
extracelular. Las macromoléculas de mucopolisacáridos son capaces de
polimerizarse, lo que es de gran importancia para la fisiología del tejido conectivo.
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Tejido Conectivo
Tejido de origen mesenquimático constituido por células, sustancia fundamental y
fibras. El porcentaje de estos tres componentes determina la clasificación del tejido
conjuntivo.
Su función primordial es dar soporte al componente funcional de los tejidos. También

participa en el almacenamiento de metabolitos, en la respuesta inflamatoria e
inmunitaria y en la reparación tisular tras alguna lesión.
Entre las células que podemos distinguir en este tejido se encuentran:

- Células principales:
▪ Fibroblastos
▪ Macrófagos
▪ Células mesenquimáticas
- Células secundarias:
▪ Plasmocitos
▪ Mastocitos
▪ Adipocitos
▪ Melanocitos
▪ Leucocitos (células migratorias)
Las fibras colágenas son las estructuras más características y abundantes de un tejido
conectivo. Están dispuestas en todas direcciones. Las fibras elásticas son menos
abundantes que las colágenas y están distribuidas constituyendo una red.
La sustancia fundamental es elaborada por el fibroblasto. Sus componentes

principales son: agua, sales, metabolitos, proteínas y mucopolisacáridos. Los
mucopolisacáridos son responsables de las propiedades físico químicas de la matriz
extracelular. Las macromoléculas de mucopolisacáridos son capaces de
polimerizarse, lo que es de gran importancia para la fisiología del tejido conectivo.
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CAPÍTULO 1: CITOLOGÍA Y PROCESAMIENTO
Citología
La citología exfoliativa es un proceso simple y no invasivo, que permite estudiar las
células epiteliales de las superficies mucosas. Este examen, conocido como frotis
citológico convencional, fue originalmente ideado para la detección precoz de células
cervicales cancerosas. Su aplicación en la práctica de la medicina oral ha sido
restringida, ya que los cambios iniciales de la mucosa oral que indican malignidad se
detectan preferentemente con la inspección oral y la biopsia. Además, la gran
variación en la calidad técnica de los frotis citológicos aumenta la probabilidad de
fallos de diagnóstico en el examen microscópico. No obstante, el frotis citológico se
ha usado en el diagnóstico de ciertos tipos de lesiones orales, la mayor parte de ellas
provenientes de enfermedades causadas por virus u hongos.
La realización del frotis tiene por objeto obtener un preparado con una delgada
película de muestra en donde se aprecie idealmente una monocapa de células
adherida al portaobjetos que permita una adecuada observación al microscopio
óptico.
Preparación del Frotis

Frotis convencional:
Si el material obtenido es mediante raspado o cepillado de la zona con lesión, se debe
realizar inmediatamente la extensión de la muestra sobre un portaobjetos limpio y
seco, se deben realizar en la medida de lo posible más de un frotis, entre 3-5.
Posteriormente se procede a fijar la muestra con la inmersión en alcohol etílico 95%,
por aproximadamente 5 segundos, se deja secar a temperatura ambiente, se rotula
adecuadamente (lápiz gráfito) con los datos del paciente y luego se procede con el
esquema de tinción.
Frotis en Cruz:
Si el material que se obtiene es viscoso o espeso, como por ejemplo el obtenido
mediante el procedimiento de punción aspirativa con aguja fina (PAAF) se efectúa un
extendido entre dos portaobjetos o frotis en cruz, ya que tiene mayor fuerza de
separación celular que las otras técnicas.
Para realizar un frotis utilizando esta técnica se deben seguir los pasos que a
continuación se describen:
- Las dos laminillas se mantienen en forma de cruz y sin ejercer presión.
- La laminilla superior se desliza para efectuar el extendido de la célula y el
frotis se obtiene en la laminilla o portaobjetos inferior.
- Los frotis se secan a temperatura ambiente para la posterior fijación en
alcohol etílico 95%.
Tinción Hematoxilina – Eosina

La hematoxilina es un colorante natural que en combinación con sales de hierro,
aluminio, cromo, cobre o tungsteno es una tinción nuclear excelente. El agente
colorante activo es la hemateína que se obtiene por oxidación de la hematoxilina.
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El proceso, anteriormente nombrado, es conocido como “maduración” y puede
ocurrir de forma espontánea. Para contrastar con las demás estructuras presentes en
células y tejidos se utiliza eosina un fluorocromo aniónico que tiene afinidad con
estructuras presentes en el citoplasma celular además de colágeno y fibras
musculares.
Esquema tinción Hematoxilina-Eosina
TINCIÓN TIEMPO
Hematoxilina de Harris 7 minutos
Sumergir en agua de la llave
Agua amoniacal 30 segundos
Sumergir en agua de llave
Eosina 4 minutos
Sumergir en agua de llave 2 minutos
Escurrir el exceso de agua
Alcohol 70% 1 segundo
Alcohol 90% 2 segundos
Alcohol 95% 3 segundos
Alcohol 100% 1 minuto
Alcohol 100% 1 minuto
Escurrir el exceso
Xileno 2 minutos
Xileno 2 minutos
Xileno 2 minutos
Montar la lámina en medio resinoso dejar secar y observar al microscopio.
Azul o púrpura intenso: Núcleos.
Rosado o rojo brillante: Citoplasma y mayoría de los tejidos.
Procesamiento Histológico
El procesamiento histológico (tejidos) incluye las siguientes etapas:
Fijación:
La fijación tiene por objetivo preservar los tejidos para mantener lo más intactas
posibles las características in vivo, evitando la autolisis, además permite que los
tejidos permanezcan sin cambios luego de los subsecuentes tratamientos propios del
procesamiento histológico. Existe una amplia variedad de fijadores, el uso de uno u
otro va a depender de los estudios que se quiera realizar. Los fijadores utilizados en
nuestro laboratorio son la formalina neutra 10% estabilizada y la formalina 10%
tamponada. El tiempo mínimo requerido para fijar los tejidos es de 4 horas para
muestras de rutina con tinciones histoquímicas. Y para estudios de
inmunohistoquímica el tiempo mínimo de fijación es de 4 horas y el tiempo máximo
es de 24 horas.
Descalcificación:
Consiste en el retiro de las sales de Calcio a través de la inmersión del tejido en
estudio en agentes que desestabilizan el material inorgánico con el fin de lograr
extraer los minerales presentes en la muestra.
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extraer los minerales presentes en la muestra, los agentes empleados pueden ser
ácidos débiles, fuertes o agentes quelantes.
Deshidratación:
Consiste en el retiro gradual del agua presente en los tejidos, mediante la inmersión a
determinados tiempos en alcohol etílico u otro, en concentraciones crecientes. Los
tiempos varían de acuerdo al tamaño y tipo de muestra, para aquellas que
habitualmente son procesadas en el laboratorio de Patología Oral, los tiempos
fluctúan entre 40-60 minutos en cada alcohol etílico (70%, 90%, 95%, 100%).
Aclaramiento:
Este paso tiene por objetivo la preparación del tejido para recibir la parafina en la cual
será embebida la muestra. Esta solución debe ser miscible tanto en las soluciones
deshidratantes así como en la parafina, algunos de los solventes utilizados son el
xileno, benceno, cloroformo, entre otros. El utilizado en nuestro laboratorio es el
xileno. El tiempo empleado varía entre los 30-40 minutos en cada una de las 3
cubetas.
Inclusión y confección del bloque:

Tiene por finalidad proporcionar un soporte sólido a la muestra para prevenir la
distorsión de las estructuras durante la microtomía. En nuestro laboratorio la parafina
se mantiene fundida en la estufa a 60°C, y el tiempo de impregnación es de entre 30-
40 minutos en cada una de las 2 cubetas.
La confección del bloque se realiza con unas placas metálicas en forma de L y que
permiten finalmente obtener un bloque o taco cúbico.
Microtomía:
Consiste en el corte en delgadas secciones de la muestra incluida en parafina (bloque
o taco), para la observación a microscopía de luz. Existen el micrótomo rotatorio, en
el cual se desliza el bloque, y el micrótomo deslizante, en el cual la navaja es la que se
desliza. En nuestro laboratorio se cuenta con un micrótomo rotatorio y los cortes que
se realizan para tinciones de rutina como Hematoxilina–Eosina (HE) fluctúan entre 3-6
µm.
Rebanamiento del bloque y flotación de la cinta:

El baño de flotación debe estar a una temperatura de unos cuantos grados por debajo
del punto de fusión de la parafina (42°C). El uso de agua destilada en el baño de agua
ayuda a eliminar burbujas de aire. La cinta (rebanada del taco o bloque de parafina
con la muestra) se coloca suavemente en el baño de flotación para eliminar arrugas y
aire atrapado bajo ella. La lámina impregnada con adhesivo albúmina de Mayer, poli-
L-lisina, cola fría al 1%, se coloca bajo el tejido y se retira gentilmente por debajo de la
cinta que se encuentra flotando en el agua.
Desparafinación del corte:

Una vez seca la lámina, ésta debe ser sometida a la desparafinación, tal cual su
palabra lo indica, consiste en el retiro de la parafina del tejido en estudio, para ello el
corte será sometido en estufa a 62°C por 20 minutos, para luego continuar con las
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inmersiones sucesivas en xileno, luego rehidratarla paulatinamente con alcoholes en
concentraciones decrecientes y finalmente una última inmersión en agua para lograr
la completa hidratación de la muestra con la finalidad de lograr las óptimas
condiciones para ser teñida de acuerdo al estudio posterior que se desee realizar.
Tinción:
Dependiendo del estudio que se planifique será la tinción que se empleará. De éstas
existen muchas y variadas, la que se utiliza de rutina en nuestro laboratorio
corresponde a la Tinción H-E (Hematoxilina- Eosina), y también existen otras como
PAS (Ácido periódico de Shiff), PAS-Azul Alcian, Van Gieson, Tricrómico de Masson-
Golden, Metenamina de Gomori y AgNORs, entre otras.
ESQUEMA DE PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO
REACTIVO TIEMPO
Alcohol 70% 40-60 minutos
Xileno 30-40 minutos
Parafina 30-40 minutos
Parafina 30-40 minutos
ESQUEMA DE DESPARAFINACIÓN POSTERIOR AL CORTE
REACTIVO TIEMPO
Estufa a 65 °C 20 minutos
Xileno 5 minutos
Xileno 5 minutos
Xileno 10 minutos
Alcohol 100 5 minutos
Agua de la llave 5 minutos
Realizar esquema de tinción según lo requerido
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LABORATORIO 1
Objetivo: Conocer el fundamento y esquema para la preparación de un frotis para

examen citológico de muestras de la cavidad oral.
1.- Realizar frotis de una muestra de la cavidad oral, fijación, tinción y observación al
microscopio óptico.
2.- Ilustre e identifique lo que observa con aumento 40X.
Descripción:
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MICROSCOPÍA VIRTUAL
Los microscopios virtuales han comenzado a ser parte del trabajo habitual de
laboratorios clínicos y son de gran ayuda en la enseñanza de la microscopía,
posicionándose como una herramienta muy importante en la educación, investigación
y diagnóstico. Esta clase de sistemas tiene la ventaja que puede adaptarse a diversas
condiciones que implican la utilización simultánea por múltiples usuarios y tipos de
imágenes, caracterizándose por tener un manejo fácil e intuitivo, resultando ser una
herramienta amigable para diferentes tipos de usuarios .
La información virtual siempre está disponible para ser utilizada por múltiples
usuarios, se transporta fácilmente, la exploración se puede estandarizar mediante la
implantación de guías virtuales y es flexible ya que se puede tener acceso a las
mismas solo contando con un dispositivo digital. Otra ventaja de tener las placas
digitalizadas, es la posibilidad de hacer anotaciones, marcar regiones de interés,
utilizar técnicas de segmentación de imágenes y reconocimiento de patrones, así
como hacer posible el análisis, la comparación y las medición entre las imágenes para
ayudar en el diagnóstico.
Hasta ahora la utilización de microscopios virtuales se ha difundido a nivel mundial

para actividades de enseñanza, como complemento de los cursos de histopatología y
de los seminarios de patología convencionales para los estudiantes de ciencias de la
salud. El impacto de estos sistemas en la educación ha ido creciendo rápidamente y
hasta el momento hay disponible una gran cantidad de implementos y programa
computacionales comerciales.
Otra de las ventajas es que los estudiantes pueden acceder a los preparados no
solamente en el aula, sino que en cualquier momento del día, ya sea desde el hogar o
en cualquier lugar a través de un dispositivo electrónico.
El objetivo de este taller de microscopía virtual es que usted pueda resolver guías de
trabajo prácticas, identificar áreas específicas de las muestras o preparaciones
histopatológicas a observar y completar su análisis con información clínica e
imagenológica entregada por el docente a cargo de la actividad. Esto buscar que
usted pueda interactuar de una manera más real con toda la información que un
profesional del área de la salud cuenta al momento de hacer un diagnóstico, planificar
el tratamiento y dar un pronóstico.
Para poder aplicar esta metodología necesitamos que usted lleve a la actividad un
computador para tener acceso a las colecciones histológicas. Si por razones técnicas
esto no es factible traspasaremos la información de las placas histopatológicas a los
computadores personales a través de pendrives. El docente a cargo entregará
información clínica con respecto al caso y usted deberá realizar la guía de trabajo
indicada para esa actividad. Luego se hará una retroalimentación de la sesión. Se
busca un trabajo autónomo aunque estará permitido trabajar con un compañero.
Las imágenes observadas podrán ser utilizadas en diversas evaluaciones, por lo que le
aconsejamos sacar el mayor provecho a la actividad, de tal forma que no implique una
carga extra a su trabajo no presencial.
Por ser una actividad práctica, al igual que los seminarios y el laboratorio, tiene una
asistencia obligatoria. Cada cierta cantidad de talleres se realizará una evaluación. No
existen instancias de recuperación para esta actividad.
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DESARROLLO GUÍA 1 MICROSCOPÍA VIRTUAL
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CAPÍTULO 2: LESIÓN CELULAR – INFLAMACIÓN
La célula responde frente a un agente injuriante (noxa) mediante un mecanismo

denominado lesión celular, en el cual la célula sufre cambios bioquímicos y
estructurales, dependientes del tipo de estímulo, de su exposición a la misma entre
otros factores. La lesión puede ser reversible o llegar hasta un punto en el cual la
célula ya no resiste el ataque y su adaptación es insuficiente conduciéndose a la
irreversibilidad o muerte celular. Este punto que se debe atravesar para llegar a la
muerte se denomina punto de no retorno.
La muerte celular puede ser una muerte programada denominada APOPTOSIS que
puede ser tanto fisiológica como patológica, en ella se generaran poros en la
membrana mitocondrial externa producto de la activación de fosfolipasas
dependientes de calcio, que permite el escape del citocromo c que desencadena la
activación de proteasas denominadas caspasas que degradan todo el material
proteico celular, y que pueden ser activadas también por factores externos como la
molécula FasL (Fas ligando) que se une a un receptor Fas de membrana que se activa
intracelularmente, activando así a las caspasas. La NECROSIS es una muerte
patológica y acompañada de un marcado proceso inflamatorio. Un efecto
característico de la necrosis es la liberación de las enzimas lisosomales, por ruptura de
su membrana, lo que genera un gran daño celular por destrucción de estructuras
citosólicas que terminan con la ruptura y escape de estas enzimas activas al espacio
tisular donde se genera daño.
La necrosis puede clasificarse en:

- Necrosis Coagulativa: La necrosis coagulativa se produce en todas las muertes
hipóxicas, excepto en las del SNC.
- Necrosis Licuefactiva: En este tipo de necrosis existe una agresión bacteriana

o fúngica con pérdida de citoplasma y reclutamiento de leucocitos que
degradan el material, por lo se presenta con pus, que son restos de células
fagocitadas y productos de la fagocitosis.
- Necrosis Caseosa: Es un tipo de necrosis coagulativa en la que se produce un

tejido necrótico de aspecto semisólido parecido al queso.
- Necrosis Grasa: La necrosis grasa se produce en la pancreatitis aguda, en

donde la lipasa pancreática degrada grasa del mesenterio y aparecen
saponificaciones sobre el mismo por conjugación de los lípidos con el calcio.
Son visibles macroscópicamente. La inflamación es una reacción biológica
compleja, que es dirigida por un tejido vascularizado en respuesta a una noxa
como por ejemplo traumas, microorganismos, agentes químicos, cuerpos
extraños, etc.
Las mismas noxas que provocan lesión celular pueden dar lugar también a una
reacción compleja en el tejido vascularizado que se denomina inflamación.
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La respuesta inflamatoria es de carácter inespecífico y defensivo, pues permite
destruir, atenuar o mantener localizado al agente agresor. La inflamación en algunas
oportunidades es un proceso dañino, ya que puede provocar muchos síntomas y
complicaciones en varias patologías, como por ejemplo, la artritis.
La respuesta inflamatoria está muy relacionada con el proceso de reparación, este

último permite que el tejido lesionado, sea sustituido por regeneración de las células
parenquimatosas, por cicatrización o con mayor frecuencia, por la combinación de
ambos procesos. La reparación comienza en una fase temprana de la inflamación,
pero continúa y termina después que se ha eliminado el agente agresor.
En el proceso inflamatorio participan:

- Células sanguíneas y del tejido conectivo
- Vasos sanguíneos y linfáticos
- Mediadores químicos
- Matriz extracelular
La inflamación puede ser aguda o crónica, cualquiera sea el tipo, o la causa que la
produce para la nomenclatura se utiliza el sufijo “itis”.
El proceso inflamatorio puede producir signos y síntomas locales, regionales y

sistémicos, la aparición de alteraciones sistémicas se observa generalmente en
cuadros más grave que no sólo comprometen localmente al tejido injuriado.
Entre los cambios locales están los denominados signos cardinales de la inflamación
como son:
- Rubor
- Tumor
- Calor
- Dolor
- Impotencia funcional
Si el proceso inflamatorio es más grave se observan signos y síntomas generales como

son: fiebre, decaimiento, pérdida del apetito, alteraciones en el hemograma y en las
proteínas séricas.
Modalidades de Inflamación
- Inflamación Aguda: Es una respuesta inmediata o inicial al agente injuriante.

Esta respuesta es relativamente inespecífica y sus funciones primordiales son:
eliminar tejidos muertos, proteger frente a la infección local y facilitar el
acceso del sistema inmune al área afectada.
- Inflamación Crónica: Es una inflamación de duración prolongada (semanas o

meses) y en la que puede observarse simultáneamente, signos de inflamación
activa, de destrucción tisular e intentos de reparación.
18
Inflamación Aguda
En la inflamación aguda ocurren cambios a nivel:
- Vascular
- Celular
Cambios Vasculares
- Modificación del calibre de los vasos: Lo primero que sucede después de la
lesión de los tejidos es una vasocontricción fugaz. Enseguida hay una
vasodilatación de la arteriola y apertura de los esfínteres precapilares como
resultado de la relajación de los músculos de la arteriola y del esfínter.
- Cambios de flujo: Aumenta también el flujo sanguíneo, produciéndose el llene
de los vasos activos e inactivos. Este proceso se conoce con el nombre de
hiperemia activa, así como aumenta el flujo aumenta también la presión
hidrostática intravascular
- Alteraciones en la permeabilidad que permiten la salida de proteínas
plasmáticas: Se produce un aumento de la permeabilidad a nivel del capilar y
de vénula. Esto se ve favorecido por acción de mediadores químicos como la
histamina. Los mediadores químicos actúan sobre las células endoteliales,
ellas se contraen produciéndose brechas intercelulares.
La vasodilatación, el aumento del flujo sanguíneo, más el aumento de la

permeabilidad vascular incrementan el paso de líquido desde los vasos hacia el tejido.
Si el líquido no es totalmente drenado por los linfáticos se produce el edema, lo que
clínicamente se ve como un aumento de volumen.
Como consecuencia de la salida de líquido desde los vasos al intersticio, se va a

producir un espesamiento de la sangre de modo que la circulación se enlentece
(Estasis Sanguíneo).
Cambios Celulares
Luego de los cambios vasculares se ve la segunda fase de la respuesta inflamatoria
aguda, esto es la acumulación de leucocitos polimorfos nucleares (LPN)
principalmente neutrófilos, y de monocitos en el foco inflamatorio. El objetivo que
tienen estas células en el foco inflamatorio es fagocitar al agente agresor, como
también los restos de tejidos dañados, entonces cumplen una función defensiva.
La secuencia en el transporte de leucocitos hacia el sitio de la lesión es la siguiente.
- Rodamiento, activación y adhesión
- Migración
- Quimiotaxis
- Fagocitosis y degradación intracelular
La inflamación aguda puede evolucionar a:

- Reparación del tejido.
- Generalización del proceso, luego se resuelve y repara.
- Instalación de una inflamación crónica.
19
Inflamación Crónica
Es de menor sintomatología que la inflamación aguda. Presenta menor vasodilatación
y formación de exudado. Es de curso prolongado en el tiempo (semanas, meses e
incluso años).
La inflamación crónica puede evolucionar de una inflamación aguda, cuando el

proceso agudo no es capaz de eliminar al agente causal, o se ve impedido el proceso
de reparación.
La inflamación crónica se puede iniciar como un proceso primario. Los agentes

etiológicos son de baja toxicidad, en relación a los que originan inflamaciones agudas.
Existen diversos agentes como:
- Microorganismos intracelulares ejemplo el bacilo de Kock (Tuberculosis) o el
Treponema pallidum (Sífilis).
- Sustancia o materiales inertes como por ejemplo la sílice, carbón, etc.
- Enfermedades inmunitarias.
En la inflamación crónica hay un predominio de células mononucleares como son:

linfocitos, plasmocitos y macrófagos. Además existen dos tipos de células
características de la inflamación crónica: células epiteloideas y células gigantes
multinucleadas.
Esta inflamación se caracteriza porque el exudado es muy escaso, aparecen cambios

proliferativos tanto de células endoteliales para formar nuevos vasos, como también
de fibroblastos que secretan fibras de colágenas, lo que se conoce como tejido de
granulación.
20
LABORATORIO 2
Objetivo: Identificación de los distintos tipos celulares participantes de la inflamación

aguda.
Placa 1
1.- Revise la placa histológica entregada en el microscopio óptico con aumento lupa.
2.- Ilustre e identifique lo que observa con aumento 10X en el círculo más grande. En
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje la célula característica de este
proceso inflamatorio.
10X
40X
Descripción:
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
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LABORATORIO 2

aguda.
Placa 2
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje la célula característica de este
10X
40X
Descripción:
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
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LABORATORIO 3

crónica.
Placa 1
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje las células característica de este
10X
40X
Descripción:
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
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LABORATORIO 3

crónica.
Placa 2
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje las células característica de este
10X
40X
Descripción:
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
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DESARROLLO GUÍA 3 MICROSCOPIA VIRTUAL
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______________________________________________________________________
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DESARROLLO GUÍA 2 MICROSCOPIA VIRTUAL
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26
CAPÍTULO 3: REPARACIÓN
La restauración de la integridad de los tejidos, posterior a una resección quirúrgica,

trauma u otro tipo de lesión crónica, constituye un proceso esencial en la respuesta
defensiva del organismo, lo que le permite sobrevivir.
Cuando la restitución del tejido ocurre de manera que el resultado final obtenido es
indistinguible, desde un punto de vista estructural y funcional, con respecto al tejido
de origen dañado, estamos frente a una regeneración. Aquí se produce un
crecimiento de células y tejidos con el fin de reemplazar las estructuras perdidas.
En general, en la regeneración se produce un reemplazo del tejido lesionado por

tejido que cumple la misma función. Esta capacidad es variable para diferentes tipos
de células y especies, encontrándose limitada en el hombre, donde tenemos células
lábiles, que se caracterizan por una vida corta y multiplicación constante, como en los
epitelios de revestimiento y células de la médula ósea hematopoyética, células
estables con baja capacidad de multiplicarse como los hepatocitos, células del
páncreas y túbulos renales, y células permanentes sin ninguna capacidad de
multiplicarse, como las neuronas.
La regeneración puede realizarse en diversos niveles de organización del individuo:

pueden regenerarse células aisladas, tejidos, partes de un órgano y, en animales
inferiores, segmentos corporales. El concepto puede extenderse al nivel subcelular,
en particular a los organelos, y así se habla, por ejemplo, de una regeneración de
mitocondrias. En la regeneración, a diferencia del crecimiento neoplásico, se tiende a
preservar el plan de organización normal del organismo. En este sentido, la
neoformación regenerativa aparece como un fenómeno regulado y no autónomo,
como la neoformación tumoral. Así por ejemplo, en hepatectomía parcial el proceso
regenerativo tiene lugar hasta que el hígado recupera la masa normal. A excepción
del hueso y del tejido hepático, es raro que en los mamíferos se produzca una
regeneración de tejidos y órganos completos, ya que en la mayoría de los casos el
organismo responde mediante una cicatrización por sobre una regeneración.
Si por el contrario, el tejido formado tiene menor presencia celular que el tejido
original, restableciéndose la integridad por medio de tejido cicatrizal fibroso estamos
en presencia de una cicatrización, en la que se produce una substitución de partes del
organismo por una cicatriz.
La capacidad de un tejido para repararse depende, principalmente, de la extensión de

la pérdida, del tipo de tejido involucrado y de la naturaleza de la injuria. Así, por
ejemplo, el tejido conectivo normal presenta una capacidad regenerativa
relativamente baja, ya que pertenece a los tejidos estables, pudiendo sufrir cualquiera
de ambos procesos. Así cuando la extensión es muy grande, el proceso reparativo no
alcanza a cubrir la pérdida antes de que se desarrollen otros procesos que perturban
o impiden la regeneración.
27
Para entender más claramente el proceso de la reparación, término en el que
incluimos tanto la regeneración como la cicatrización, se plantea el siguiente ejemplo
que señala lo que sucede en la piel cuando nos herimos. Primero hay hemorragia que
formará un coágulo, al cual llegan los leucocitos para fagocitar los detritos. En el
tejido vecino se observarán signos histológicos propios de un proceso inflamatorio
agudo. Con el transcurso de los días el coágulo se reseca y forma una costra que
protege el tejido dañado; los macrófagos y PMN han eliminado detritos y comienzan a
eliminar la costra; simultáneamente aparecen numerosos brotes de capilares desde
los vasos sanguíneos periféricos, estimulados por el factor de angiogénesis, producido
por los macrófagos; en este tejido, denominado tejido de granulación, por su aspecto
granuloso otorgado por los brotes capilares, aparecen fibroblastos que inician la
formación de colágeno y sustancia fundamental, que a medida que aumentan
provocan el remodelamiento vascular y estrechamiento de sus lúmenes, lo que es
parte de la organización.
Tipos de cicatrización
La cicatrización de las heridas es un fenómeno complejo que presenta varios procesos
secuenciales en su desarrollo. Es un proceso dinámico y variable que se divide en
fases en base a las modificaciones morfológicas presentes en el proceso de curación.
La cicatrización puede tener variantes de acuerdo, especialmente, a la cercanía de los

extremos, así tenemos:
- Cicatrización por primera intención: Se denomina Cicatrización por Primera

Intención o Unión Primaria, a aquella que se produce en una herida quirúrgica
limpia, no infectada, aproximada por suturas quirúrgicas, en donde cada uno
de los distintos planos se pone en contacto con los del lado opuesto. Hay
poca destrucción de tejido y prácticamente ha existido pérdida
exclusivamente de epitelio y de pequeñas zonas del corion, o dermis papilar
en el caso de tratarse de heridas de piel.
- Cicatrización por segunda intención: En ciertas ocasiones hay gran pérdida

de tejidos, los bordes quedan muy distantes, y en este caso tenemos la
reparación por segunda intención. Se genera en heridas o pérdidas de
sustancia de la piel en que los bordes no se han puesto en contacto (no
suturada) y/o hay una pérdida o falta de piel y tejido celular subcutáneo. Aquí
se produce un proceso de cicatrización caracterizado por ser concéntrico
(desde los bordes al centro). Es un proceso progresivo, comenzando desde los
bordes con tejido conjuntivo cubierto por epitelio. Hacia el centro hay una
zona de tejido de granulación. Esta cicatrización por segunda intención se
caracteriza porque en mayor o menor grado genera una cicatriz anormal, por
un lado tenemos el desarrollo progresivo y estímulos de la zona central con
fenómenos de autolisis, reabsorción y exudación que hacen que se estimulen
la producción de fibras colágenas y por otro lado tenemos el tejido de
granulación que se desarrolla irregularmente, ambos factores hacen que este
tipo de cicatrización de lugar a cicatrices más fibrosas y de epitelio más
delgado, brillante y menos resistente.
28
Factores que afectan la reparación de las heridas.
Nutrición: La reparación de las heridas es un proceso anabólico que requiere un
adecuado suministro calórico. Por ejemplo, la deficiencia de Vitamina C inhibe la
síntesis de colágeno y retrasan el proceso de reparación, ya que ésta es necesaria
para la hidroxilación de los aminoácidos precursores del procolágeno. Minerales
trazas, tales como el zinc, aminoácidos esenciales como la arginina y glutamina, son
elementos necesarios para otorgar los suministros necesarios para que se lleven a
cabo adecuadas reacciones tisulares.
Estado metabólico: La diabetes mellitus se asocia a un retraso en la reparación,

debido a la microangiopatía característica de esta enfermedad.
Arteriosclerosis: Un riego sanguíneo inadecuado retarda el drenaje venoso, lo que

altera la reparación.
Corticoesteroides: Tanto los corticoides tópicos como sistémicos afectan la

cicatrización, sobre todo si se administra los 3 primeros días, porque reducen la
inflamación, síntesis de colágeno y la contracción.
Infección: Esta genera un desbalance entre la respuesta del hospedero y los

microorganismos. Así en el sitio de la herida el infiltrado inflamatorio agudo y crónico
retrasa la proliferación de fibroblastos, así como también el depósito de matriz
extracelular.
Cuerpos extraños: Fragmentos de acero, vidrio, hueso, entre otros constituyen un

retraso en el proceso de cicatrización.
Tamaño, localización y tipo de lesión: Las lesiones en sectores vascularizados, se

recuperan más rápidamente que aquellas localizadas en sectores pobremente
vascularizados. Lesiones de menor tamaño curan más rápidamente y con menor
formación de cicatriz, que las lesiones amplias.
Oxígeno y perfusión: Heridas isquémicas cicatrizan pobremente, y con altos índices

de infección. La isquemia se puede deber a una serie de factores entre los que se
encuentran: oclusión vascular, vasoconstricción e hipovolemia.
Radioterapia y quimioterapia: Afecta la división celular de células endoteliales,

fibroblastos, queratinocitos, con un retraso en el proceso de cicatrización.
Complicaciones en la curación de las heridas

Estas pueden surgir por alteraciones o anomalías en cualquiera de los componentes
estructurales de la reparación y consisten basicamente en :
- Formación deficiente de una cicatriz, lo que puede provocar una deshicencia
de la herida y ulceración.
- Formación excesiva de componentes de reparación, las cantidades excesivas

de colágeno dan lugar a cicatrices sobreelevadas conocidas como cicatrices
hipertróficas. También a la formación de queloides . Por otro lado la impide la
- Formación de contracturas, la contracción en el tamaño de la herida es una

29
parte importante en el proceso normal de curación, esto provoca
formación excesiva de tejido de granulación impide la reepitelización, lo que
impide la restauración de la continuidad del epitelio.
- Formación de contracturas, la contracción en el tamaño de la herida es una

parte importante en el proceso normal de curación, esto provoca
deformidades en la herida y en los tejidos circundantes, lo que puede impedir
el normal funcionamiento de los tejidos y estructuras.
30
LABORATORIO 4
Objetivo: Identificación de las características observables al microscopio de luz de

una alteración del proceso reparativo.
Placa 1
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje la célula característica de esta
muestra.
10X
40X
Descripción:
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LABORATORIO 4
Objetivo: Identificación de las características observables al microscopio de luz de

una alteración del proceso reparativo con tinción Tricrómico de Masson.
Placa 2
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje la célula característica de esta
muestra.
10X
40X
Descripción y justifique la utilización de esta tinción:

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CAPÍTULO 4: ALTERACIONES CIRCULATORIAS
La homeostasis celular depende de la integridad de la circulación sanguínea y de un

normal comportamiento de los líquidos corporales. Los trastornos asociados a la
hemodinamia y riego sanguíneo son causa de gran morbilidad y mortalidad.
Los trastornos que veremos a continuación son importantes en la etiopatogenia de

un amplio grupo de enfermedades:
Edema
El edema se debe a un aumento de las fuerzas que permiten el movimiento de los
líquidos desde el compartimiento intravascular hacia el intersticio. El intercambio
normal es regulado por las presiones hidrostáticas y la presión osmótica dentro y
fuera del compartimiento vascular.
El edema se puede clasificar de origen inflamatorio o no. El edema que no es

inflamatorio es un transudado, que tiene pocas proteínas, mientras que edema
inflamatorio es rico en proteínas y se conoce como exudado.
El edema puede ser localizado o generalizado. El término anasarca se utiliza para un

edema generalizado severo. Cuando existe un edema en cavidades, recibe diferente
nombres, tales como hidrotórax, hidroperitoneo, hidropericardio.
El aumento de la presión hidrostática puede producir edema localizado,

especialmente en las extremidades inferiores, debido a un flujo venoso alterado.
También puede ocasionar edema generalizado especialmente cuando existe una falla
cardíaca congestiva.
La disminución de la presión osmótica del plasma debido a una pérdida excesiva o

síntesis disminuida de albúmina sérica también es causa de edema. La causa más
importante de pérdida de albúmina es el síndrome nefrótico. La síntesis disminuida
de proteínas se observa en enfermedades hepáticas, especialmente en cirrosis o en
cuadros de desnutrición.
Un drenaje linfático alterado puede llevar a la formación de linfo-edema,

normalmente es localizado y puede ser por inflamación, obstrucción o tumores en los
ganglios linfáticos.
Hiperemia y Congestión
Corresponde al aumento de volumen sanguíneo en un órgano o tejido y puede
clasificarse en pasiva (congestión) y activa (hiperemia). La hiperemia se ocasiona por
una dilatación arterial o arteriolar que ocasiona aumento del flujo sanguíneo. La
congestión se produce por una falla del retorno venoso.
34
Hemorragia
Salida de sangre por ruptura de vasos sanguíneos debido a injuria. Cuando se produce
una hemorragia y la sangre queda bien localizada en los tejidos le denominamos
hematoma. Hemorragias pequeñas en la piel o mucosas se conocen como petequias.
Una hemorragia de más de 1-2 cm, subcutánea se denomina equimosis. Cuando la
sangre se acumula en una cavidad se denomina de diversas formas hemotórax,
hemopericardio, hemoperitoneo, etc.
Trombosis
Proceso patológico donde se produce formación de un coagulo (trombo) dentro de
los vasos sin solución de continuidad. Los factores asociados a trombosis son:
alteraciones endoteliales, alteraciones en el flujo sanguíneo e hipercoagulabilidad.
Embolia
Un émbolo es un elemento intravascular sólido, líquido o gaseoso, el cual puede ser
llevado por el torrente sanguíneo a un sitio alejado desde su sitio de origen y puede
provocar obstrucción vascular y producir un infarto.
Infarto
Un infarto es una zona de necrosis isquémica en un órgano o tejido, producido por la
oclusión ya sea de una arteria o del retorno venoso. Casi todos los infartos (99%) se
originan por oclusión embólica o trombótica, y casi todos son el resultado de oclusión
arterial.
Los principales factores que determinan los efectos de un infarto son: a) naturaleza
del aporte vascular, b) velocidad del desarrollo de la oclusión, y c) vulnerabilidad del
tejido ante la hipoxia. El factor más importante que influye en el daño en el tejido es
la presencia de un aporte sanguíneo colateral o alternativo.
Shock
Corresponde a un volumen circulatorio inadecuado debido a reducción del riego
sanguíneo (hipoperfusión). Debido a esto en los tejidos se produce una insuficiencia
de oxígeno y nutrientes con acumulo de metabolitos. La hipoxia celular puede llevar a
necrosis del tejido o incluso la muerte del paciente por falla multiorgánica. Las causas
de shock pueden ser diversas pero las más frecuentes hacen referencia a trastornos
cardiacos (distribución), hipovolemia y sepsis.
35
LABORATORIO 5
Objetivo: Identificación de las características observables al microscopio de luz de 2

trastornos circulatorios.
Placa 1
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje una zona representativa de la
muestra.
10X
40X
Descripción:
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LABORATORIO 5
Objetivo: Identificación de las características observables al microscopio de luz de 2

trastornos circulatorios.
Placa 2
el círculo más pequeño con aumento 40X dibuje una zona representativa de la
muestra.
10X
40X
Descripción:
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38
CAPÍTULO 5: TRASTORNOS GENÉTICOS
Se considera como trastorno genético a toda desviación del estado de salud debido
total o parcialmente a la constitución genética del individuo, en el que factores
ambientales pueden cumplir una función importante en la expresión y gravedad de
los signos o síntomas.
Existen tres tipos de enfermedades genéticas:

1. Trastornos monogénicos (o enfermedades mendelianas): solo un gen está
alterado, y estas condiciones se heredan en forma autosómica o ligada al sexo,
dominante o recesiva, de acuerdo a las leyes de Mendel. A veces puede ser el
gen alterado una mutación “de novo”.
2. Trastornos multigénicos: Son debidas a la interacción de varios genes con el

medio ambiente, el cual influye en la expresión poligénica.
3. Trastornos cromosómicos: Se producen ya sea por que existe mucho o poco

material cromosómico, en el primer caso como por ejemplo en el síndrome de
Down, y en el segundo caso como en el Síndrome de Turner.
Para el estudio de una enfermedad genética es muy importante la anamnesis familiar.

Esta historia familiar debe completarse con un árbol genealógico el cual permite
determinar algún padrón de herencia mendeliana, si es que hubiera. Además es muy
importante el examen físico, que debe ser lo más objetivo posible. Esto debemos
complementarlo con exámenes de laboratorio, radiografías, estudios bioquímicos,
citogenéticos, e inmunológicos. Finalmente debe haber un conocimiento previo de los
patrones de transmisión genética, la etiología y fisiopatología de la condición para
explicárselas al paciente y su familia.
Trastornos Monogénicos
Se debe a mutaciones de genes aislados pero que tienen una repercsusión
importante. Algunas mutaciones se expresan de forma parcial en los heterocigotos y
de forma completa el los homocigotos.
Patrones de transmisión de los trastornos monogénicos
- Trastornos autosómicos dominantes: Se manifiestan en el estado hetrocigoto.

La enfemedad suele estar presente en un progenitor, pero también puede ser
una mutación “de novo”.
Las características clínicas de estos trastornos suelen tener un comienzo

tardío. La mayoría de las mutaciones autosómicas dominantes producen una
pérdida de función.
- Trastonos autosómicos recesivos: Comprenden la mayoría de los errores

innatos del metabolismo.
39
La expresión de la enfermedad tiende a ser más uniforme, se presenta
tempranamente y se afectan con más frecuencia las proteínas estructurales.
- Trastornos ligados a X: La mayoría son recesivos. Se expresan completamente

en los hombres, dado que los hombres son hemicigotos respecto al gen
mutado ligado al cromosoma X. Las mujeres heterocigotas no suelen expresar
la enfermedad.
Trastornos Multigénicos
Se deben a una interacción de múltiples genes y factores ambientales. Constituyen en
los humanos la principal etiología de los defectos localizados de la morfogénesis. Este
tipo de herencia se caracteriza por presentarse más en algunas familias, más que en la
población normal. También se le conoce como herencia multifactorial.
Trastornos Cromosómicos
Pueden deberse a alteraciones en el numero o en la estructura de los cromosomas.
Los trastornos numéricos se deben a errores ocurridos durante la división celular.
La monosomía (asociada a un cromosoma normal menos) y la trisomía (un

cromosoma extra) suelen deberse a que no se separan los cromosomas durante la
primera división meiótica. La monosomía suele ser incompatible con la vida o dar
lugar a abortos espontáneos, mientras que las trisomías pueden tolerarse mejor.
40
LABORATORIO 6
Objetivo: Identificación de las características histológicas al microscopio de dos

lesiones asociadas a trastornos genéticos.
Placa 1:
2.- Ilustre e identifique lo que observa con aumento 10X y 40X.
10X
40X
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LABORATORIO 6

lesiones asociadas a trastornos genéticos.
Placa 2:
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40X
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CAPÍTULO 6: INMUNOLOGÍA
El sistema inmune posee una serie de naturalezas duales, siendo la más importante la
capacidad de reconocer lo propio y lo no propio. El reconocimiento de lo anterior es
posible gracias a la existencia de marcadores conocidos como complejo mayor de
histocompatibilidad (MHC). Cualquier célula que no posea este marcador es
considerada como extraña y, por tanto, atacada.
A veces el proceso falla y el sistema inmune ataca células propias. Esto es lo que
sucede en las enfermedades autoinmunes. Hay veces en que la respuesta inmune
frente a sustancias inocuas es inapropiada, este es el caso de las alergias. El sistema
inmune también puede presentar ciertas deficiencias que predisponen al organismo a
enfermar.
Inmunidad innata
La inmunidad innata es virtualmente instantánea y todos los antígenos son atacados
por igual con similar intensidad, dañando indiscriminadamente a los tejidos. Hay
ciertas interacciones que permiten a la respuesta innata erradicar agentes infecciosos,
pero todas ellas requieren de la superficie del microorganismo. La respuesta, por
tanto, está confinada a microorganismos extracelulares, principalmente bacterias.
Constituyentes del sistema inmune innato

- Barreras fisicoquímicas: La primera y, probablemente, barrera más
importante es la piel. Esta no puede ser penetrada por los microorganismos a
menos que ya presente una solución de continuidad. Los patógenos son
mecánicamente expulsados de los pulmones por los cilios. La tos y el
estornudo pueden expulsar abruptamente objetos vivos o inertes del sistema
respiratorio. El flujo de las lágrimas, saliva y orina también fuerzan a los
patógenos del mismo modo como lo hace la descamación de la piel. El mucus
en los tractos respiratorio y gastrointestinal atrapa muchos microorganismos.
El pH ácido (< 7,0) de las secreciones cutáneas inhibe el crecimiento
bacteriano. Los folículos pilosos secretan sebo que contiene ácido láctico y
ácidos grasos que inhiben el crecimiento de algunas bacterias y hongos
patogénicos.
- Células fagocíticas con capacidad destructiva (neutrófilos, macrófagos,NK).
- Factores y moléculas solubles: El sistema del complemento es la mayor

cascada enzimática activada en el plasma. Cubren a los microorganismos con
moléculas que los hacen más susceptibles a ser fagocitados.
Cada una de las células en el sistema inmune innato se une a los antígenos usando
receptores que poseen un determinado patrón de reconocimiento. Estos receptores
son codificados en la línea germinal de cada persona. En el curso del desarrollo
humano estos receptores para patrones moleculares asociados a patógenos han
evolucionado por selección natural para ser específicos para ciertas características de
amplias clases de microorganismos infecciosos.
44
Inmunidad adquirida
La respuesta inmune adquirida es anticipatoria. Los linfocitos se dividen en dos tipos:
células T y células B. Las células B se producen en las células madre de la médula ósea.
Ellas producen anticuerpos y modulan la inmunidad humoral. Las células T son
producidos en la médula ósea pero sensibilizadas en el timo y constituyen la base de
la inmunidad mediada por células.
Para que las células trabajen efectivamente ellas necesitan ser reclutadas a los sitios
de inflamación y allí ser activadas. Esto se lleva a cabo por la interacción de
receptores celulares y factores externos, como las citoquinas, que son capaces de
unirse a los receptores y con otras moléculas de adhesión.
Inmunidad mediada por células

Los macrófagos fagocitan antígenos, los procesan internamente y entonces presentan
partes de ellos en su superficie junto con moléculas propias.
El gran número de moléculas en la superficie de los linfocitos permite una variabilidad

en la forma de los receptores. Ellos son producidos en configuraciones aleatorias en
sus superficies. Hay alrededor de 1018 receptores distintos diferentes
estructuralmente. Esencialmente, un antígeno puede unirse muy perfectamente con
una muy pequeña cantidad de linfocitos.
La unión del antígeno a receptores específicos de las células T o B inducen las

respuestas efectoras en dos etapas. Primero, el antígeno es presentado y reconocido
por una célula T o B lo que lleva al cebamiento o preparación, activación y
diferenciación, lo cual normalmente ocurre dentro de compartimentos especializados
del tejido linfoide. En segundo lugar, la respuesta efectora tiene lugar debido a células
T activadas que dejan el tejido linfoide y vuelven al sitio de la enfermedad o debido a
la liberación de anticuerpos por células B activadas (plasmocitos) a la sangre o los
fluidos tisulares.
Las células T se diferencian en el timo, al que llegan tempranamente después de

haber sido producidas en la médula ósea, donde sufren dos procesos de selección. El
primero es un proceso de selección positiva, donde sólo sobreviven aquellas células T
con el correcto set de receptores que pueden reconocer moléculas MHC responsables
del autorreconocimiento. Luego comienza un proceso de selección negativa donde
sólo células T que reconocen moléculas MHC acomplejadas con péptidos foráneos se
les permite salir fuera del timo.
Las células T y B son capaces de responder a su antígeno e inducir una respuesta

inmune. Sin embargo, la activación celular está finamente regulada para asegurar que
sólo antígenos dañinos desencadenen la reacción o respuesta. Tal regulación
particularmente tiene que ver con la iniciación de la activación de los linfocitos T.
El antígeno es llevado al tejido linfoide directamente en los linfáticos o dentro de una

célula dendrítica que ha endocitado el antígeno. Si hay una inflamación en un tejido,
las células dendríticas pueden dejar ese sitio y migrar al linfonodo más cercano. Los
antígenos en la sangre son llevados al bazo, los que están en los tejidos hacia los
45
linfonodos y los que están en la mucosa, al tejido linfoide asociado a las mucosas.
Las células T citotóxicas (CD8+) hacen su trabajo liberando linfotoxinas, las que causan
la lisis celular. Las células T helper (CD4+) sirven como coordinadores, directores de la
respuesta inmune, reconociendo antígenos foráneos. Ellos pueden secretar
substancias químicas conocidas como linfoquinas que estimulan a las células
citotóxicas y a las células B para crecer y dividirse, atraer neutrófilos y estimular la
capacidad de los macrófagos para fagocitar y destruir microorganismos. Las células T
supresoras inhiben la producción de células T citotóxicas una vez que ellas ya no son
necesarias.
Inmunidad humoral
Un linfocito B inmunocompetente pero aún inmaduro es estimulado a madurar
cuando un antígeno se une a sus receptores de superficie y hay una célula T helper
cerca (para liberar citoquinas). Esto sensibiliza a las células B y experimentan una
selección clonal lo que significa que se multiplica por mitosis. La mayor parte de los
clones de la familia llegan a ser células plasmáticas.
Los anticuerpos, también llamados inmunoglobulinas (Ig), constituyen la porción

gammaglobulina de las proteínas sanguíneas. Ellas son proteínas solubles secretadas
por clones de células plasmáticas activadas. Los anticuerpos inactivan antígenos por:
- fijación del complemento
- neutralización (unión a sitios específicos para impedir su adhesión)
- aglutinación
- precipitación
- opsonización
- sensibilización de células tumorales e infectadas a una citotoxicidad
dependiente de anticuerpos.
-
Aunque el anticuerpo es un producto de secreción de células B activadas con las
funciones ya mencionadas, durante las primeras etapas de desarrollo de la célula B es
una molécula de membrana que actúa como un receptor de célula B.
46
LABORATORIO 7

patologías inmunológicas.
Placa 1:
10X
40X
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LABORATORIO 7

patologías inmunológicas.
Placa 2:
10X
40X
Descripción:
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CAPÍTULO 7: NEOPLASIAS
La palabra neoplasia significa literalmente nuevo crecimiento. Genera una alteración

de la proliferación y, muchas veces, de la diferenciación celular, que se manifiesta por
la formación de una masa o tumor.
Una definición de neoplasia más específica, fue la realizada por Willis, oncólogo
británico, en la que la describe como una masa anormal de tejido cuyo crecimiento,
excede al de los tejidos normales y persiste, aún, una vez retirado el estímulo que le
dio el origen, debido a que las alteraciones genéticas de las células son hereditarias,
transmitiéndose a la progenie tumoral, por lo que se denominan clonales.
Características generales
La ciencia que se encarga de estudiar las lesiones neoplásicas se denominada
Oncología, que deriva del griego oncos, que significa tumor, por lo que éste término
suele utilizarse como sinónimo de neoplasia, no siendo lo más adecuado.
Los cambios genéticos experimentados, debido a múltiples factores, como agentes

físicos, químicos, biológicos, así como predisposiciones genéticas, permiten una
proliferación excesiva y no regulada, que se hace autónoma e independiente del
estímulo fisiológico de crecimiento. La nutrición e irrigación siguen dependiendo del
huésped.
La mayoría de las neoplasias se manifiestan macroscópicamente por una masa

localizada, más o menos delimitada, que altera la arquitectura del tejido u órgano
afectado. Aún cuando éstas no son visibles clínicamente, al examen microscópico se
observa una alteración de la estructura y organización local.
Estructura y composición
Todas las neoplasias, ya sean benignas o malignas están compuestas, básicamente,
por dos elementos: el parénquima, constituido por las células neoplásicas
proliferantes con caracteres comunes, y una amplia gama de trastornos morfológicos
y funcionales, del cual deriva su conducta biológica y el estroma constituido por
células no neoplásicas, derivado del huésped y formado por tejido conectivo, vasos
sanguíneos y linfáticos, imprescindible para el crecimiento del tumor, del cual
depende la proliferación, crecimiento y evolución de las mismas.
Clasificación de las neoplasias

Las neoplasias según su evolución se clasifican en benignas y malignas. Las neoplasias
benignas producen sólo alteración local; las malignas, por el contrario, producen
destrucción local y a distancia a través del proceso de metástasis, lo que se acompaña
de trastornos metabólicos generales. Estas reciben en conjunto el nombre de cáncer.
Provocan la muerte si no son tratadas proceso de metástasis, lo que se acompaña de
trastornos metabólicos generales. Estas reciben en conjunto el nombre de cáncer.
Provocan la muerte si no son tratadas adecuadamente y en el momento oportuno.
Estas últimas constituyen la segunda causa de mortalidad en Chile después de las
enfermedades cardiovasculares. microscópico.
50
Las neoplasias benignas se caracterizan por presentar un crecimiento lento de meses
o años, que dan origen a lesiones tumorales de bordes más bien definidos y
delimitados, a veces, capsulados. Se caracterizan por tener, en su mayoría, una
etiología desconocida, salvo algunas excepciones de tumores asociados a síndromes
genéticos. Las neoplasias benignas crecen solamente en el sitio donde se inician, por
lo tanto no infiltran los tejidos vecinos, no dan metástasis y generalmente son
asintomáticas. Las neoplasias benignas se parecen mucho al tejido del cual se
originan y por eso decimos que tienen un alto grado de diferenciación, vale decir, las
células presentan características similares a las de origen, observándose escasas
mitosis. Pueden ser extirpadas quirúrgicamente por completo, siendo su recidiva nula
o escasa.
Por el contrario las neoplasias malignas se caracterizan por un crecimiento rápido,

semanas a meses. Presenta límites irregulares y mal definidos, lo que genera
infiltración de los tejidos adyacentes y propagación a sitios distantes, a través, del
proceso de metástasis, pudiendo causar la muerte. Las células observadas presentan
un amplio margen de diferenciación, desde bien diferenciadas a completamente
indiferenciadas, dependiendo de su desviación con respecto a la normalidad. Se
observan mitosis abundantes, necrosis, por crecimiento discordante entre
parénquima y estroma y úlceras (tumores ulcerados). Comúnmente están asociadas a
letalidad, aunque hoy en día ha mejorado mucho la sobrevida debido a las nuevas
posibilidades de tratamiento y cura.
Nomenclatura
Neoplasias benignas
Se designan añadiendo el sufijo oma a la célula de origen. Con respecto a la
denominación de neoplasias de origen mesenquimal, por ejemplo, la derivada de
células cartilaginosas se denomina condroma y la derivada de osteoblastos osteoma.
Por otro lado las neoplasias de origen epitelial presentan una denominación más
compleja se clasifican en base a variados factores: células de origen, arquitectura
microscópica y patrones macróscopicos.
Neoplasias malignas
La nomenclatura de los tumores malignos es bastante similar a la de las neoplasias
benignas, así los tumores de origen mesenquimal se denomina Sarcomas, como el
fibrosarcoma ó el leiomiosarcoma (neoplasia maligna de la musculatura lisa). Las
neoplasias malignas de origen epitelial derivadas de cualquiera de las tres capas
germinales reciben el nombre de Carcinomas. Un carcinoma con un patrón de
crecimiento glandular se denomina Adenocarcinoma y el que se genera de células
escamosas originadas en cualquier epitelio del cuerpo se denomina carcinoma
escamoso o epidermoide. Cuando una neoplasia maligna está compuesta de células
indiferenciadas de origen desconocido recibe el nombre de tumor maligno
indiferenciado. En las neoplasias benignas y malignas diferenciadas, las células del
parénquima, presentan bastante similitudes entre si, como si derivarán de una única
célula. De forma más infrecuente neoplasias con diferenciación divergente desde una
única línea de células parenquimatosas a otro tejido origina lo que se conoce como
tumores mixtos, como el tumor mixto de las glándulas salivales, que presentan
presentan componentes epiteliales dispersos dentro de un estroma mixoide, incluso
con islotes de cartílago o hueso. 51
componentes epiteliales dispersos dentro de un estroma mixoide, incluso con islotes
de cartílago o hueso.
Metástasis
Una diferencia fundamental entre neoplasia benigna y maligna es la capacidad que
tienen estas últimas de diseminarse a distancia (o sea dar metástasis), lo cual se inicia
con la invasión local, que prácticamente no ocurre en neoplasias benignas, las cuales
normalmente tienen una cápsula de tejido fibroso o al menos un límite neto que las
separa del tejido vecino. El crecimiento en el cáncer se acompaña, además de esta
infiltración local, de destrucción de tejidos vecinos.
La estructura responsable de regular los procesos de invasión y metástasis es la

membrana basal subepitelial, principal y primera barrera que deben atravesar las
células tumorales.
La invasión a través de la matriz extracelular, representada por la membrana basal y

el estroma intersticial, es el primer paso de un complejo proceso que antecede al
crecimiento e invasión. Las células tumorales deben establecer interacciones con la
matriz extracelular en varias fases de la cascada metastásica; ya que primero deben
degradar la membrana basal, luego atravesar el tejido conjuntivo intersticial y por
último, acceder a la circulación a través de la membrana basal de los vasos.
El proceso de invasión depende de múltiples factores, que incluyen propiedades tanto

de la matriz como de los elementos celulares. Involucra una serie de eventos
bioquímicos, facilitados por receptores y enzimas proteolíticas presentes a este nivel,
definiéndose como un proceso activo en el que distinguen los siguientes pasos:
separación de las células tumorales del resto de la masa tumoral, fijación a los
componentes de la matriz extracelular de la membrana basal, degradación de la
matriz extracelular de la membrana basal y, finalmente, migración de las células
tumorales.
Vías de diseminación
El cáncer se disemina por:
- Vía linfática: Vía preferida de diseminación de los carcinomas. Los ganglios
linfáticos son órganos de defensa y pueden actuar deteniendo, aunque sea
temporalmente, el avance de las células neoplásicas. Los ganglios linfáticos
comprometidos con metástasis están generalmente de acuerdo a la ubicación
del tumor primario, por ejemplo un carcinoma del borde derecho de la
lengua, es probable que se disemine inicialmente a los ganglios
submandibulares de ese lado. En muchas ocasiones un paciente que tiene
aumento de tamaño de los ganglios regionales puede ser debido a hiperplasia
reaccional y no necesariamente a la presencia de células neoplásicas.
- Vía sanguínea: Vía más común de invasión de los sarcomas, tumores que al
estar tan en contacto con vasos sanguíneos, rápidamente los pueden infiltrar.
Los órganos donde más frecuentemente se encuentran las metástasis son
pulmón e hígado.
52
Estadificación clínica y clasificación histológica:
Las neoplasias presentan diversas características histológicas y clínicas que nos

permiten estatificarlas. Lo anterior es fundamental no solo para definir el
tratamiento sino también para determinar el pronóstico. Desde el punto de vista
histológico tenemos actualmente dos clasificaciones utilizadas: la clasificación
histológica internacional de tumores y el sistema de graduación del Frente de Invasión
Tumoral o FIT. El primero clasifica las lesiones de acuerdo al grado de diferenciación,
vale decir, en que proporción las células que constituyen el tumor mantienen o no sus
características con respecto a las de origen y el segundo en base a la evaluación del
grado de queratinización, polimorfismo nuclear, respuesta inmune y patrón de
invasión de aquella zona mas profunda del tumor que se determina como la mas
representativa, debido a la mayor desviación con respecto a la normalidad.
Clínicamente se consideran 3 aspectos: tamaño del tumor primario, ausencia o

presencia de nódulos linfáticos, con su correspondiente localización y presencia o
ausencia de metástasis. Lo anterior da origen al sistema TNM.
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LABORATORIO 8

patologías neoplásicas.
Placa 1:
10X
40X
Descripción:
Descripción:
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LABORATORIO 8

Placa 2:
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40X
Descripción:
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LABORATORIO 9

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Descripción:
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LABORATORIO 9

Placa 2:
10X
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Descripción:
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CAPÍTULO 9: PATOLOGÍA DE SISTEMAS
La modalidad de trabajo de este laboratorio varia en relación a los realizados

anteriormente. En este taller se requerirá su activa participación puesto que el trabajo se
basará en la observación de diversos preparados histológicos en relación a patología de
sistemas.
Para trabajar con la patología de sistemas, es necesario conocer la morfología y fisiología

normal de los órganos, la cual deberá repasar previo a la realización del taller, para ello
puede consultar la bibliografía entregada en su syllabus.
La evaluación incluirá la lectura de 2 papers en relación a los temas a tratar. Los papers
serán subidos a su plataforma EDUCANDUS previo al laboratorio.
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LABORATORIO 10

patologías de sistemas.
Placa 1:
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LABORATORIO 10

Placa 2:
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Descripción:
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LABORATORIO 11

Placa 1:
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LABORATORIO 11

Placa 2:
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66
CAPÍTULO 10: SEMIOLOGÍA
La modalidad de trabajo de este laboratorio varia en relación a los realizados
anteriormente. En este taller se requerirá su activa participación puesto que el trabajo se
basará en la observación de diversas imágenes que usted deberá describir, para lo cual
debe leer la guía de lesiones básicas que será subida oportunamente a la plataforma
EDUCANDUS. La evaluación será en base a esta guía.
67
LABORATORIO 12
Lesión 1: ____________________
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Lesión 2:
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Lesión 3:
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Lesión 4:
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Lesión 5:
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Lesión 6:
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Lesión 7:
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Lesión 8:
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Lesión 9:
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70

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