Selectivos este es aquel que solo permite
Medios de cultivos
selectivos y diferenciales
Resumen:
Se analizó y se cultivó las bacterias
presentes en diferentes caldos dentro de
tubos de ensayos, dichas bacterias se
observaron al microscopio para identificar
si eran cocos o bacilos y fueron sometidas
a tinción Gram para determinar si eran
positivas o negativas y dependiendo de
ello se las sembraron en los diferentes
medios de cultivo disponibles.
Introducción:
Un medio de cultivo es aquella solución
de nutrientes esenciales o propicios para
un microrganismo en específico, esto
hace que su reconocimiento sea mucho
más fácil.
Podemos clasificarlos según su origen
pueden ser naturales, sintéticos o
semisinteticos, pero también según su
consistencia sea liquida, solida o semi-
solida. Cabe aclarar que aquí lo más
importante es la composición pues
definirá el crecimiento de los
microorganismos.
Podemos encontrar
Comunes o universales que son aquellos
que permiten el crecimiento de cualquier
población, aquí podemos encontrar al
agar nutritivo.
Enriquecidos que son aquellos que tienen
un agar predeterminado y le podemos
agregar un exceso de nutrientes
específicos para el beneficio de
crecimiento de un organismo
determinado, generalmente lo
encontramos en medios líquidos.
el crecimiento de algunos
microorganismos mientras inhibe el
desarrollo de otros microorganismos este
generalmente es sólido y se obtiene
gracias a la manipulación de algunos
elementos como la temperatura, el pH,
algunos nutrientes, entre otras cosas. En
este medio podemos encontrar los
utilizados en laboratorio como el EMB,
Sal manitol, Saboreau.
EMB (eosina y azul de metileno): es la
composición de sustancia Levine más el
de Holt-Harris y Teague, esta contiene
carbohidratos como sacarosa y lactosa.
Sal manitol: Polipeptona, Cloruro de
sodio, Manitol, Rojo de fenol, Agar.
Saboreau: a pluripeptona, cloranfenicol y
el pH ácido, favorecen el crecimiento de
hongos.
Metodología:
Se tomaron 5 tubos de ensayo que
contenían las siguientes bacterias:
Escherichia coli, Staphylococcus,
Klepsiella spp., Sacharomyces,
posteriormente se hizo la clasificación y
se puso en un medio determinado de
cultivo cada una de las bacterias.
Por otra parte se tomaron 5 tubos de
ensayo con microorganismos
desconocidos A1, EST, B, Col, C, y
posteriormente se hicieron las tinciones
para determinar qué tipo de cultivo era
propicio para el crecimiento de cada uno
de estos, se observó en el objetivo de
100x.
Una vez reconocido el microorganismo si
era Gram positivo o negativo y si era
bacillo o cocos se hizo el respectivo
cultivo escogiendo el agar más adecuado
para asegurar su crecimiento y
posteriormente, ocho días después se hizo
la observación de las colonias conocidas
y desconocidas para finalmente se
anotaron los resultados.
Discusión y resultados:
CULTIVOS CONOCIDOS:
Cultivo de Estafilococo de que tipo???
En un tubo con cultivo de estafilococo se
observaron bacterias en forma de cocos
con tendencia a agruparse en racimos a
los cuales se le hizo una tinción Gram
donde presentaron una tonalidad morada
que indica ser Gram positivos, estas
fueron cultivadas en agar manitol el cual
tenía una coloración rosada, este medio es
el adecuado para cultivo de cocos ya que
el agar sal manitol contiene peptonas y
extractos de carne bovina, que
suministran los nutrientes esenciales,
además de que la presencia de cloruro
sódico inhibe organismos bacterianos
diferentes a los estafilococos. En este
caso las colonias formadas fueron de
color amarillo y el color del agar se tornó
amarillo evidenciando la fermentación del
manitol característico de los estafilococos
Gram positivos.
Las colonias son de coloración amarilla,
puntiforme, consistencia cremosa, textura
lisa, elevación cóncava, borde redondeado
y opaco.
Figura N°1: Staphylococcus
Cultivo de Klebsiella spp.
En un cultivo en caldo ya preparado se
encontró Klebsiella spp. Que es una
bacteria perteneciente a las endobacterias
en forma de bastón las cuales pueden
poseer o no capsula, son Gram negativa,
no forman endoesporas, no poseen
flagelos por lo tanto son inmóviles y son
bacterias gastrointestinales.
Cabe destacar que Klebsiella tienen la
enzima de catalasa y ureasa, por esta
razón fermenta muchos carbohidratos,
como la lactosa, por lo tanto son capaces
de formar ácidos fuertes en sus procesos
metabólicos. (1)
Teniendo en cuenta esto se realizó un
cultivo en Agar EMB, ya que este es un
medio ligeramente selectivo y de
diferenciación para el aislamiento y la
diferenciación de bacilos Gram negativos
entéricos (Enterobacteriaceae y diversos
bacilos Gram negativos). Este cultivo
contiene colorantes de azul de metileno y
eosina lo cuales inhiben las bacterias
Gram-positivas en cierto grado. Los
colorantes también actúan como
indicadores diferenciales en respuesta a la
fermentación de la lactosa o la sacarosa
por parte de los microorganismos. (2)

Después de realizar el cultivo se
realizaron las siguientes observaciones:
El cultivo presentaba una coloración
violeta metálica, lo cual indica que son
lactosas positivas (3), son translucidas, de
consistencia cremosa, de superficie lisa,
de forma irregular, con borde ondulado y
con una elevación de colonia cóncava.
Figura N° 2: Klebsiella spp en Agar
EMB
CULTIVOS DESCONOCIDOS:
Con respecto a su morfología pudimos
determinar que en el cultivo se
encontraban dos especies de colonias, una
de ellas presento una coloración amarilla,
tuvo una superficie lisa, era traslucida,
circular, de borde liso y presento volumen
cóncavo y la otra colonia torno una
coloración rosa también presento los
anteriores parámetros pero se
diferenciaron en color .
Lo que permitió reconocer en la literatura
que son varios tipos de Staphylococcus
diferentes pues por las condiciones
presentadas en el agar era propicio el
crecimiento de ambos. Los positivos
como el Staphylococcus aereus que
presento una coloración amarilla y para
otro tipo de Staphylococcus que eran los
negativos en este caso presentaron
coloración rosa.
Podemos decir que en esta identificación
se reconocieron dos grupos que son los
filmicutes Gram positivos y los
gracilicutes Gram negativos.

Tubo COL: Figura N°?

En el cultivo liquido COL observado en

microscopio era un cultivo impuro pues
se apreciaban bacterias tanto Gram
negativas como Gram positivas, las
cuales se sembró en dos tipos de agares
el EMB (Gram negativas) y Sal manitol
(Gram positivas) pero en la literatura se
conoció que el agar de sal manitol
Figura N°?
funciona para bacterias tanto Gram
negativas como Gram positivas, lo que
sucede es que el medio de cultivo en unas
bacterias es asimilado de manera más
efectiva mientras que en otras bacterias
no actúa de este modo debido a que
tardan un poco más en tomar los
nutrientes presentados en este.
Para determinar lo observado en los
cultivos es importante aplicar pruebas
bioquímicas o moleculares.
Tubo B:
Su contenido era desconocido, al hacerle
la tinción Gram se observó la presencia
de bacilos Gram positivos por su
tonalidad morada, se los sembró en agar
nutritivo ya que puede ser utilizado para
sembrar todo tipo de bacterias. Las
colonias presentaron un color blanco,
forma irregular, una consistencia
cremosa, textura rugosa, elevación plana,
borde lobulado y traslucido; teniendo en
cuenta estas características, en la
literatura coincidió con Bacillus spp. Que
es una bacteria aerobia Gram positiva. (4)
Figura N°?: Bacillus spp.
Tubo EST:
En el siguiente ensayo se tomó un cultivo
en caldo de un tubo de ensayo rotulado
con las letras EST, el cual contenía una
bacteria de tipo desconocido, la cual iba
a hacer cultivada, antes de esto se le
aplicaron pruebas bioquímicas, en este
caso una tinción de Gram, con el fin de
saber la morfología y tipo de Gram que
esta presentaba para poder ser sembrada
en un cultivo de Agar conveniente para el
desarrollo o crecimiento de la colonia.
Al realizar la tinción de Gram se logró
detallar que la bacteria era en forma de
bacilo y poseía un espora dentro de ella,
por lo tanto la tinción es Gram positiva;
sin embargo la tinción se realizó de una
manera inadecuada y sus resultados
fueron falsos negativos, es decir que se
observó una tinción Gram negativa.
Figura N°? Tinción Gram tubo EST
Ya conociendo que se tenía una bacteria
en forma de bacilo formadora de espora y
Gram positiva, se prosiguió a sembrarla
en un cultivo de Agar nutritivo, ya que en
esos momentos no teníamos el
conocimiento necesario para saber en qué
otro cultivo la bacteria podría formar
colonias de igual manera que en este
cultivo.
Pasada una semana se realizó la
respectiva observación en la cual se
detalló que la bacteria tenía una
coloración blanca, no permitía mucho el
paso de la luz, por lo tanto era opaca, de
consistencia cremosa, de forma irregular,
con superficie lisa, con una elevación
plana y un borde ondulado.
Figura N°? EST en cultivo Agar CONCLUSIONES:
nutritivo
Para el reconocimiento de bacterias de
tipo desconocido se tiene que tener en
cuenta un criterio de tipo morfológico y
bioquímico como por ejemplo el de
tuición Gram, con el fin de investigar en
que medio Agar de cultivo su colonia se
desarrollaría mejor. Cabe destacar que en
el cultivo de Agar nutritivo cualquier tipo
de bacteria desarrollaría con facilidad sus
colonias, ya que este presenta los
Con estas características logramos nutrientes necesarios para cualquier
descubrir que la bacteria que estábamos bacteria.
aislando era Clostridium difficile, la cual
es una especie bacteriana del género
Clostridium, que son bacilos Gram BIBLIOGRAFIA:
positivos formadores de esporas
termorresistentes, anaerobios estrictos. (5) (1)https://www.msdmanuals.com/es-
co/hogar/infecciones/infecciones-
Ya conociendo mejor que tipo de bacteria bacterianas/infecciones-por
fue aislada, podemos preparar un cultivo klebsiella,enterobacter-y-serratia
propio para la C. difficile, el cual tendría:
(2)Farmer III, J.J. 2003.
 Peptona de carne 40,0 Enterobacteriaceae: introduction and
identification. In: Murray, P. R., E. J.
 Fosfato sódico 12,6
Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller,
 Fosfato potásico 1,0
and R. H. Yolken (ed.). Manual of
 Sulfato Magnesio 0,1
clinical microbiology, 8th ed.
 Cloruro sódico 2,0 American Society for
 Fructosa 6,0 Microbiology,Washington, D.C.
 Sangre de carnero 70 ml
 Cicloserina 0,5 (3)http://www.probiotek.com/productos/r
 Cefoxitina 0,016 eactivos/medios-de-
 Anfotericina B 0,008 cultivoreactivos/agar-con-eosina-y
 Agar bacteriológico 15,0 azul-de metileno-emb/
 Fórmula (en g/l):
 pH: 7.2 ± 0.2 (4)http://wineserver.ucdavis.edu/industry/
enology/winemicro/winebacteria/bacill
us.html
(5)http://www.medioscultivo.com/clostrii
um-difficile-agar/