Calibración y

estandarización
Calibración

Es el proceso que permite confirmar que la señal medida por un

instrumento es correcta.

Garantiza que el equipo o los instrumentos utilizados para medir la

señal funcionan correctamente, que puede comprobarse
utilizando una referencia conocida que produce una señal
exacta.
Calibración de balanzas
Calibración de material volumétrico
Estandarización
Proceso por el que se determina experimentalmente la relación
entre la señal y la cantidad de analito, es decir el valor de “K” en
las ecuaciones.

SA = KnA Técnica de análisis total

SA = KcA Técnica de análisis de concentración

Donde:
SA = Señal proporcionada por el analito
K = Constante de proporcionalidad
nA = Moles o gramos de analito en la muestra
CA = Concentración del analito en la muestra
…Estandarización
Debe determinarse el valor de “K”, midiendo la señal de una o más
referencias , cada una de las cuales tiene una cantidad de
analito conocida

Formas para realizar una estandarización

1. Proceso de estandarización con un punto
2. Proceso de estandarización con varios puntos
Estandarización con un punto
Es la forma más sencilla de determinar el valor de “K”

Se prepara un solo patrón que contiene una concentración

conocida de analito y se mide la señal

K= Sref
Cs
Sref = Señal
Cs = Concentración de analito
Estandarización con un punto

2.50
y = 0.4x
R² = 1
2.00

1.50
Señal

1.00

0.50

0.00
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
Concentración (ppm)

Desventaja:
- Lleva implicitos todos los errores sistemáticos y aleatorios
Estandarización con dos puntos
Estandarización en la que se emplean dos o más patrones con
cantidades conocidas de analito

Para ello se visualiza el resultado representando la “S” medida en

relación con la concentración del analito en las referencias, a lo que
se le llama Curva de calibración.

Curva de calibración
Resultado de una estandarización que muestra gráficamente la forma
en que la señal de un método cambia según la cantidad de analito
Estandarización con dos puntos
Los patrones se eligen de forma tal que abarquen el rango previsto de
concentraciones

0.25

Concentración Señal 0.20

0.00 0.00 0.15

Absorbancia
1.50 0.05
0.10
3.00 0.10
0.05
4.50 0.16
0.00
6.00 0.21
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00
-0.05
Concentración
Estandarización con dos puntos
Es deseable que el gráfico tienda a una línea recta, pero no todos
los caen exactamente en la recta, lo cual se debe a errores
aleatorios al proceso de medición. Por lo tanto debe trazarse la
mejor línea recta a través de los puntos.

Debe utilizarse la técnica estadística conocida como “Análisis de

regresión”, la cual proporciona los medios para la elaboración
objetiva de una ecuación para esta recta.
Estandarización con dos puntos
Suposiciones del análisis de regresión lineal o de mínimos cuadrados

1. Existe una relación lineal entre la variable medida (y) y la concentración del
analito (x). La relación matemática que describe esta suposición se denomina
“Modelo de regresión”
y = mx + b
Donde:
m = pendiente
B = intersección en “y”

2. Cualquier desviación de los puntos individuales respecto a la recta es

consecuencia del error en la medición; se da por hecho que no existe error en los
valores de “x”, pues se supone que la concentración de patrones se conoce
exactamente.
Estandarización con dos puntos

0.25
Concentración Señal
0.20 R² = 0.998
0.00 0.00 y = 0.034x - 0.002
0.15
1.50 0.05

Señal
3.00 0.10 0.10

4.50 0.16 0.05

6.00 0.21 0.00

0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00
-0.05
Concentración
Curva de calibración
Curva de calibración
Estandarización con dos puntos
Concentración Señal

0.00 0.00
0.50
1.50 0.05
0.45
3.00 0.10 0.40

4.50 0.16 0.35

0.30
6.00 0.21
0.25
7.50 0.25 0.20

9.00 0.29 0.15

0.10
10.50 0.33
0.05
12.00 0.38 0.00
13.50 0.41 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00

15.00 0.43

16.50 0.44

18.00 0.45
Preparación de soluciones patrón
Se pueden preparar:
1. Si el rango de las soluciones se limita a uno dos órdenes de
magnitud, lo mejor es pesar el soluto para cada una de ellas y
luego afora

2. Cuando se trabaja con soluciones de más de dos órdenes de

magnitud, se preparan los patrones mediante disoluciones en
serie a partir de una “Solución madre”
Preparación de soluciones patrón