INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD

“DETERMINACION DEL VOLUMEN DE LECTURA. OBSERVACION DEL EFECTO

MENISCO Y EVALUACION DEL EFECTO DE ARRASTRE Y ACARREO”

PROFESORA :M. en C. MONICA RIVERA ROSAS

ALUMNA: CABRERA RENDÓN CITLALLI ODALIZ

EQUIPO: 2 SECCIÓN: II

GRUPO: 5QV2

FECHAS DE REALIZACIÓN: 3 DE ABRIL DE 2108.

FECHA DE ENTREGA: 10 DE ABRIL DE 2018.

Introducción:
En las determinaciones fotométricas es de vital importancia que el volumen que se deposita
en la celda de lectura sea el adecuado para asegurar que el rayo de luz atraviese
completamente la solución. Por ello el manejo de volúmenes inferiores al volumen mínimo
requerido ocasiona lecturas erróneas y como consecuencia resultados incorrectos.
Cuando se coloca una cantidad insuficiente de solución en la celda, el rayo de luz
atraviesa por el menisco de la misma y por efecto de difracción se obtienen lecturas
elevadas, este se conoce como efecto menisco, este es un término utilizado para describir
la curvatura en la superficie del líquido, esta curvatura resulta de la relación entre las fuerzas
de cohesión y adhesión; este efecto produce error en la lectura espectrofotométrica ya que
el rayo incidente pasa por una zona de solución y otra de aire elevando las lecturas por la
difracción de luz incidente, por lo cual es importante conocer el volumen mínimo de lectura.

El efecto acarreo es otro de los errores al tratar una muestra en una sola celda, sin mantener
limpia la misma, al no estar completamente limpia el efecto surge en la siguiente
determinación donde hace una variación de la concentración original y arroja resultados
erróneos.

Objetivos:

 Determinar el volumen mínimo que un fotómetro puede utilizar, para obtener lecturas
confiables.
 Evaluar el efecto que el menisco provoca en las mediciones cuando se utilizan
volúmenes inferiores al mínimo.
 Determinar si un sistema analítico o equipo presenta o no el efecto acarreo, a partir de
empleo de soluciones coloridas de dos diferentes concentraciones, mediante un
procedimiento sencillo.

Fundamento:

El compartimiento de la muestra es un compartimiento ajustado a la luz con una tapa que

da seguridad sosteniendo una o más celdas con la muestra. La radiación trasmitida por el
selector de longitud (o de una fuente en un espectrofotómetro multicanal) es dirigida a la
celda que contiene la muestra. Por lo tanto dichas celdas o cubetas que contienen la
muestra deben fabricarse de un material que no interfiera con la radiación que estamos
utilizando, por lo que es importante conocer el volumen mínimo en cada equipo a utilizar,
evitando de esta manera el efecto menisco por la difracción de la luz.
Metodología:
Resultados:

BITÁCORA DE RESULTADOS Fecha:03 de Abril de 2018

Determinación del volumen mínimo de lectura, evaluación y observación del efecto
acarreo
Efecto menisco

Tabla 1. Determinacion del volumen minimo de lectura.

CELDA DE VOL. COMPLETO CELDA DE VOL. SEMIREDUCIDO

Vol. (µL) Absorbencia Vol. (µL) Absorbencia
(500nm) (500nm)
100 0.051 50 0.04
200 0.051 100 0.04
300 0.051 150 0.04
400 0.053 200 0.04
500 0.082 250 0.042
600 0.195 300 0.042
700 0.301 350 0.292
800 0.360 400 0.393
900 0.299 450 0.290
1000 0.298 500 0.290
1100 0.298 550 0.290
1200 0.298 600 0.290
1300 0.298
Espectrofotómetro utilizado: Genesys 20 de la marca Thermo Scientific
Reactivo utilizado: Dicromato de Potasio (K2Cr2O4) al 0.08%
Longitud de onda las que se hicieron las lecturas: 500nm
CELDA VOL. COMPLETO: Volumen seleccionado:100 Unidades: µL
CELDA VOL. SEMI-REDUCIDO: Volumen seleccionado: 50 Unidades: µL
Absorbancia a la que se observó el efecto menisco:
CELDA VOL. COMPLETO: 0.36
CELDA VOL. SEMI-REDUCIDO: 0.290
Volumen mínimo:
CELDA VOL. COMPLETO: 800µL
CELDA VOL. SEMI-REDUCIDO: 450µL
Volumen necesario para obtener lecturas adecuadas:
CELDA VOL. COMPLETO: 1000µL
CELDA VOL. SEMI-REDUCIDO: 500µL
%Error
CELDA VOL. COMPLETO: 43.88%
CELDA VOL. SEMI-REDUCIDO: 39.97%
 0.4
Efecto menisco
0.35

0.3

0.25
Absorbancia

0.2 Volumen mínimo

0.15
de lectura

0.1

0.05

0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
µL de K2Cr2O7

Fig. 1 Grafico del efecto menisco, en donde se muestra en el eje de las abscisas la concentración
de K2Cr2O7 en µL y en el eje de las ordenadas la absorbancia a 500 nm, utilizando una celda de
volumen completo.

0.45
0.4 Efecto menisco
0.35
0.3
Absorbancia

0.25
0.2
Volumen mínimo
0.15 de lectura
0.1
0.05
0
0 100 200 300 400 500 600 700
µL de K2Cr2O7

Fig. 2 Grafico del efecto menisco, en donde se muestra en el eje de las abscisas la concentración
de K2Cr2O7 en µL y en el eje de las ordenadas la absorbancia a 500 nm, utilizando una celda de
volumen semireducido.
 Efecto acarreo

Tabla 2. Valores de absorbancias de las soluciones A y B, asi como tambien los valores de
desviacion estandar y coeficiente de variacion para ambas. Soluciones sin intercalar.

Solución A Absorbencia Solución B Absorbencia

Tubo A Absorbancia Tubo B Absorbancia
1 0.266 1 1.001
2 0.266 2 1.003
3 0.267 3 1.002
4 0.266 4 1.002
5 0.268 5 1.003
̅
𝑿 0.266 ̅
𝑿 1.002
SD 0.0008944 SD 0.0008367
CV 0.33549 CV 0.08348

Reactivo utilizado: Dicromato de potasio al 8%

Longitud de onda a la que se hicieron las lecturas: 500nm
Concentración de la solución A: 0.08%
Concentración de la solución B: 0.32%
Formula del coeficiente de variación:
𝑫𝑺
𝑪𝑽 =
𝑿̅

 Cálculos solución A
Concentración de la solución A
𝟖
8% en 1mL, por lo tanto al diluirlo en 100mL  𝟏𝟎𝟎
= 𝟎. 𝟎𝟖%

Coeficiente de variación
𝟖. 𝟗𝟒𝟒𝒙𝟏𝟎−𝟒
𝑪𝑽 = 𝒙𝟏𝟎𝟎 = 𝟎. 𝟑𝟑𝟓𝟒𝟗
𝟎. 𝟐𝟔𝟔

 Concentración de la solución B
(𝟖)(𝟒)
8%  1mL (𝟏)
= 𝟑𝟐% 32% en 4 mL, por lo tanto al diluirlo
𝟑𝟐
X%  4mL en 100mL  𝟏𝟎𝟎
𝟎. 𝟑𝟐%

Coeficiente de variación
0.0008367
𝑪𝑽 = 𝒙𝟏𝟎𝟎 = 𝟎. 𝟎𝟖𝟑𝟒𝟖
𝟏. 𝟎𝟎𝟐

Tabla 3.valores de absorbancia de las soluciones A y B. Soluciones intercaladas.

Solución A Absorbencia Solución B Absorbencia

1 0.268 1 0.998
2 0.387 2 1.025
3 0.378 3 1.023
4 0.422 4 0.945
 5 0.348 5 0.998
̅
𝑿 0.3606 ̅
𝑿 0.9978
SD 0.0581 SD 0.03225
CV 16.112 CV 3.2321
%Error 35.3383 %Error -0.499

Tabla 4. Valores de la Media, coeficiente de variación y porcentajes de error de las soluciones A

y B, intercaladas y sin intercalar.

Soluciones sin intercalar Soluciones intercaladas

Sol. A Sol B. Sol. A Sol. B
̅
𝑿 0.266 1.002 0.360 0.997
CV 0.3362 0.08348 16.112 3.2321
%Error - - 35.3383 -0.499

Cálculos:

Soluciones intercaladas
 Solución A
𝑫𝑺 𝟎.𝟎𝟓𝟖𝟏
Coeficiente de variación: 𝑪𝑽 = 𝑿̅ = 𝟎.𝟎𝟑𝟔𝟎 𝒙𝟏𝟎𝟎 = 𝟏𝟔. 𝟏𝟏𝟐

𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒐𝒃𝒔𝒆𝒓𝒗𝒂𝒅𝒐 −𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒓𝒆𝒂𝒍 𝟎.𝟑𝟔𝟎−𝟎.𝟐𝟔𝟔

%Error= 𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒓𝒆𝒂𝒍
= 𝟎.𝟐𝟔𝟔
𝒙𝟏𝟎𝟎 = 𝟑𝟓. 𝟑𝟑𝟖𝟑
 Solución B

𝑫𝑺 𝟎.𝟎𝟑𝟐𝟐𝟓
Coeficiente de variación: 𝑪𝑽 = ̅ = 𝒙𝟏𝟎𝟎 = 𝟑. 𝟐𝟑𝟐𝟏
𝑿 𝟎.𝟗𝟗𝟕𝟖

𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒐𝒃𝒔𝒆𝒓𝒗𝒂𝒅𝒐 −𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒓𝒆𝒂𝒍 𝟎.𝟗𝟗𝟕−𝟏.𝟎𝟎𝟐

%Error= 𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝒓𝒆𝒂𝒍
= 𝟏.𝟎𝟎𝟐
𝒙𝟏𝟎𝟎 = −𝟎. 𝟒𝟗𝟗

Sol A sin intercalar Sol B sin intercalar Sol A intercalada Sol B intercalada

1.2

1
ABSORBANCIA

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 1 2 3 4 5 6
NO. DE TUBO

Fig. 3. Gráfico de las absorbancias obtenidas de la soluciones sin intercalar e intercaladas de A y

B. en donde la solución A intercalada presenta incremento en su absorbancia y la solución B
intercalada presenta un aumento de la absorbancia solo en los primeros tubos, después se
observa una disminución de esta.
Discusión:
De acuerdo a nuestros resultados, se puede observar (figura 1) que el efecto menisco fue
mayormente reflejado en la celda de volumen completo, pues él % de error que se presentó
fue de 43.88%, siendo mayor al que presento la celda de volumen semireducido,
indicándonos que se requiere el doble de gasto de muestra y reactivo en este tipo de celdas,
respecto a las de volumen semireducido. Por lo tanto encontrando que en la celda de
volumen completo las lecturas estables se presentaron hasta los 1000 microlitros de
dicromato de potasio, y en las celdas de volumen semireducido las lecturas estables se
vieron reflejadas hasta los 450 microlitros de dicromato de potasio, lo cual nos indica que
estos son volúmenes habituales para estos tipos de celdas. Sin embargo es recomendable
hacer las lecturas a un volumen de 1100 µL y 500 µL, puesto que nos cerciorarnos de que
algún otro factor pueda afectar el volumen. Esto demuestra lo importante de conocer el
volumen mínimo de nuestras celdas para trabajar ya que es una fuente de error muy alto,
puesto que al dispersar el haz de luz, la radiación que llega al detector disminuye arrojando
valores altos de absorbancia. Explicando con esto el porqué del cambio busco observado
en la figura 1 y 2 y la estabilidad después de este punto.

Con respecto al efecto acarreo, se tienen determinaciones en las mismas condiciones las
cuales se utilizaron como valor real para así comparar con las determinaciones intercaladas
realizadas en una celda de volumen semireducido. Estas determinaciones para que sean
de utilidad deben de tener un CV% muy bajo, de lo contrario no sería posible cuantificar
algún efecto de acarreo existente. Por tanto, de acuerdo con esto, se logra observar que en
la figura 3, el efecto acarreo se manifestó en nuestras determinaciones, aumentando la
absorbancia promedio en las lecturas de la solución A, lo cual, nos habla del efecto que
tienen los residuos que quedaron en la celda de nuestras determinaciones con la solución
B que está mucho más concentrada. Lo contrario ocurre con nuestras determinaciones de
la solución B (Mayor concentración) en donde las absorbancias disminuyeron, producto de
la presencia de residuos de la solución A. verificando de esta manera que el efecto acarreo
afecta mucho más a soluciones poco concentradas respecto a una concentrada,
comportamiento que se esperaba dadas las condiciones de la práctica. Por lo tanto conocer
el volumen mínimo de nuestras celdas de trabajo es muy importante para evitar enormes
errores debido al efecto menisco. Así como también para evitar error causado por el efecto
de acarreo se recomienda no utilizar la misma celda para diferentes determinaciones, y de
ser necesario, no realizar determinaciones donde se manejen soluciones con grandes
diferencias de concentración, evitando que se pueda presentar el fenómeno de acarreo de
la muestra o en los casos en lo que no se cuente con celdas sufientes es recomendable
enjuagar entre cada lectura.

Conclusiones:

 El efecto menisco es un fuente muy grande de error en cualquier determinación

fotométrica.
 El volumen mínimo de lectura que se requiere para una celda de volumen completo en
el espectrofotómetro Genesys 20 es de 1000 µL y para una celda de volumen semi
reducido es de 500 µL.
 Para evitar el efecto acarreo es preferible utilizar las celdas necesarias para cada
solución a analizar.
 El efecto menisco es un fuente muy grande de error en cualquier determinación
fotométrica.

 El efecto acarreo afecta en mayor proporción a soluciones poco concentradas respecto

a las muy concentradas.
Bibliografía:

 C. Harris Daniel 2013 “Análisis químico cuantitativo.” Editorial REVERTE 3ra edición,
México 407-46.
 INTI “Medición de pequeños volúmenes en laboratorios” 2013 Disponible en:
https://www.inti.gob.ar.
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