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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL


ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS


PRIMER LABORATORIO DEL CURSO
MICROBIOLOGÍA SANITARIA I – SA323
KELVIN BRIAN PAITAN CALDERON – 20161295G
DOCENTE: ING. JORGE TELLO CABREROS

Lima, Perú
2018
MICROBIOLOGÍA SANITARIA I FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

INDICE

CONTENIDO

Resumen ............................................................................................................. 3
Introducción ......................................................................................................... 4
Objetivos ............................................................................................................. 5
Marco teórico ....................................................................................................... 6
Cultivo de bacterias .......................................................................................... 6
Medios de cultivos: ....................................................................................... 8
Preparacion de las placas petri ...................................................................... 12
Resultados......................................................................................................... 15
Discusión de resultados ..................................................................................... 21
Conclusiones ..................................................................................................... 24
Recomendaciones ............................................................................................. 25
Fuentes de información ..................................................................................... 33
Anexos .............................................................................................................. 34
Cuestionario ......................................................... Error! Bookmark not defined.

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RESUMEN

Los microorganismos son seres vivos invisibles al ojo humano. Pueden ser parte
de distintas clases, abarcado a las bacterias, hongos, bacterias, algas, protozoos,
etc. Puede decirse que algunos de ellos son los primeros seres vivos en aparecer
sobre la faz de la tierra y hay algunas teorías que incluso estipulan el origen de la
vida fuera de ésta, pero para su crecimiento requieren de condiciones óptimas las
cuales les permitan vivir. En esta práctica se llevó a cabo el cultivo y el aislamiento
de diferentes bacterias, para ello se empleó distintos medios de cultivo cada uno
de ellos con propiedades desiguales, por otra parte para llevar a fin dicha siembra
se realizaron diferentes métodos de cultivo en este caso en agar nutritivo y agar
sabouraud. Todo esto se realizó con la finalidad de identificar las particularidades
de crecimiento de algunos microorganismos dependiendo del medio de cultivo, los
medios de cultivo se dividen dependiendo del propósito, en este caso era para
observar que bacterias pueden crecer en los diferentes agares. Todo esto con el
fin poder llevar a cabo las distintas comparaciones de medios de cultivo y de esta
manera poder corroborarlo con la teoría.

Además en el presente informe tendrá recomendaciones y conclusiones


respectivas durante el experimento realizado en el laboratorio.

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INTRODUCCIÓN

El concepto de microorganismo es operativo y carece de cualquier


implicación taxonómica o filogenética dado que engloba organismos unicelulares
y pluricelulares no relacionados evolutivamente entre sí, con microorganismos
provenientes del exterior de la misma. Este tipo de formas de vida en general se
componen de una sola célula, aunque también existen organismos con más de
una.

Los microbios tienen múltiples formas y tamaños. Si un virus de tamaño promedio


tuviera el tamaño de una pelota de tenis, una bacteria sería del tamaño de media
cancha de tenis y una célula eucariota sería como un estadio entero de fútbol.

Algunos microorganismos son patógenos y causan enfermedades a personas,


animales y plantas, algunas de las cuales han sido un azote para
la humanidad desde tiempos inmemoriales. No obstante, la inmensa mayoría de
los microbios no son en absoluto perjudiciales y bastantes juegan un papel clave
en la biosfera al proporcionar oxígeno (algas y cianobacterias), y, otros,
descomponer la materia orgánica, mineralizarla y hacerla de nuevo accesible a
los productores, cerrando el ciclo de la materia.

En conclusión, Para realizar este experimento de laboratorio usaremos el agar, en


este caso el agar nutritivo, el agar es un elemento solidificante muy empleado para
la preparación de medios de cultivo. Si el agua se está hirviendo y al enfriarse a
29 °. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las
bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.

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OBJETIVOS

El presente informe de monográfico tiene como fin poner en práctica lo que viene
a ser la importancia de los microorganismos no solamente como productores de
enfermedades, lo que viene a ser la exposición del agar nutritivo a diferentes
condiciones de localización como componentes imprescindibles de los
ecosistemas. Identificar las principales características de la organización
procariota. Los componentes de los virus y las diferentes morfologías que puede
presentar, en síntesis poner en una tabla los resultados del aumento bacteriano
en agar con sus respectivas características.

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MARCO TEÓRICO

CULTIVO DE BACTERIAS

Un cultivo es un método para la multiplicación de


microorganismos, tales como lo son bacterias en
el que se prepara un medio óptimo para favorecer
el proceso deseado. Un cultivo es empleado
Como un método fundamental para el estudio de
las bacterias y otros microorganismos que causan
enfermedades en medicina humana.
 CARACTERISTICAS
Un microorganismo se puede sembrar en un
medio líquido o en la superficie de un medio sólido de agar. Los medios de cultivo
contienen distintos nutrientes que van, desde azúcares simples hasta sustancias
complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne.
La principal diferencia entre un medio de cultivo sólido y uno líquido es que el
medio de cultivo sólido contiene un 1,5% - 2% de agar-agar, mientras que el medio
líquido no contiene agar-agar.

A la izquierda, placas de Petri con cultivos bacterianos en medio sólido. A la


derecha, tubos con cultivos en medio líquido inoculados con puntas de micro-
pipeta.

 INDICACIONES

Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfológicamente que es


imposible diferenciarlas sólo con el uso
del microscopio. En este caso, para
identificar cada tipo de bacteria, se
estudian sus características bioquímicas
sembrándolas en medios de cultivo
especiales. Así, algunos medios
contienen un producto que inhibe el
crecimiento de la mayoría de las
especies bacterianas, pero no la del tipo
que se desea averiguar si está presente.

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Otras veces, el medio de cultivo contiene determinados azúcares especiales que


sólo pueden utilizar algunas bacterias. En algunos medios se añaden indicadores
de pH que cambian de color cuando uno de los nutrientes del medio es fermentado
y se generan catabolismos ácidos.

Los diferentes medios y técnicas de cultivo son esenciales en un laboratorio de


microbiología, pues sirven para identificar las bacterias causantes de las
enfermedades infecciosas y los antibióticos a los que son sensibles esas
bacterias. Los cultivos suelen usarse en medicina para determinar la presencia de
agentes patógenos en fluidos corporales.
Uno de los sistemas más importantes
para la identificación de
microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio.
El material alimenticio en el que crecen
los microorganismos es el Medio de
Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad
y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios
de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se
solidifica al enfriarse a 30 grados.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas
bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH
básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya
que impide el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-positivas).

Referencia:
Enfermedades infecciosas 6. Ed. Escrito por Ángela Restrepo M., p. 14

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Medios de cultivos:

Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio (véase microbiología) que


consta de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para
permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas.
Según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones.
Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes
de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado sólido,
semisólido o líquido. El objetivo último del cultivo es variado: antibiograma,
identificación, multiplicación.

CLASIFICACIÓN

Según sus cualidades físicas

 líquidos

 semisólidos

 sólidos

 Gaseosos

Según su origen

 Naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen


animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya
composición química no se conoce exactamente.

 Sintéticos: son los medios que contienen una composición química


definida cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener
resultados reproducibles.

 Semisintéticos: son los sintéticos a los que se les añaden factores de


crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por
ejemplo extracto de levadura.

Referencia:

«Medidas de crecimiento». Consultado el 8 de septiembre de 2011.

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Tenemos 3 tipos de medios de cultivos:

 Agar nutritivo:

El agar nutritivo es un medio de cultivo usado


normalmente como rutina para todo tipo de bacteria.
Es muy útil porque permanece sólido incluso a
relativamente altas temperaturas. Además, el
crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la
superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeñas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el
líquido, y aparece como una sustancia espesa, con
colonias difícilmente observables.
El agar nutritivo contiene normalmente:
0,5% de peptona;
0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
1,5% de agar;
Su almacenamiento es a 2°C - 30°C
Es muy higroscópico y PH casi neutro (6,8 ± 0,2) a 25 °C.

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 Caldo nutritivo:

Es un medio líquido compuesto por una infusión de carne, ClNa, peptona,


extracto de levadura y también fosfato disódico. Es usado como base para
otros caldos que puedan contener más nutrientes.

El caldo nutritivo contiene:


0,5% de peptona;
0.3% de extracto de carne
PH final: 6,9 ± 0,2
Si es necesario se puede calentar hasta disolver.
Distribuir en tubos y luego esterilizar.
Reacciona de 118°C hasta 121°C durante 15 minutos.
Es un producto muy higroscópico.
Conservar el envase completamente cerrado al abrigo
de la luz en un lugar frio y seco.

 Agar sabouraud:

Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de


hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de
levaduras.
Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos,
particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.).
En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para
el desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la
presencia de cloranfenicol y el pH ácido, favorecen el crecimiento de
hongos por sobre el de bacterias. Además, al medio de cultivo, pueden
agregarse otros agentes selectivos de crecimiento.

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El agar sabouraud contiene:


15% de agar
40% de dextrosa
10% de peptona

Su pH final es de 5,6 ± 0.2 a 25°C


Almacenamiento de 2°C – 30°C
Muy higroscópico
Autoclave a 121°C por 15 minutos.
Referencia:
American Public Health Association, American Chemical Society,
Association of Official Agricultural Chemists (1920). Standard Methods for
the Examination of Water and Sewage. American public health association.
pp. p. 95

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PREPARACION DE LAS PLACAS PETRI

Prepara el agar.

El agar es una sustancia gelatinosa que se usa para cultivar bacterias. Está hecho
de un tipo de alga roja que proporciona una superficie de crecimiento ideal para
muchos tipos distintos de bacterias. Algunos tipos de agar contienen nutrientes
añadidos (como la sangre de oveja), lo cual ayuda a promover un crecimiento
bacteriano más sólido.

 El tipo de agar más fácil de usar para este experimento es el agar nutritivo
que viene en forma de polvo. Necesitarás 1,2 g (aproximadamente 1/2
cucharadita) de polvo de agar para cada placa de Petri de 10 cm (4
pulgadas) que deseas usar.
 En un plato o bol resistente al calor, mezcla 1/2 cucharadita de agar
nutritivo en polvo con 60 ml (aproximadamente 1/4 taza) de agua caliente.
Multiplica estas cantidades por la cantidad de placas de Petri que planeas
usar.
 Coloca el bol o plato en el microondas y ponlo a hervir durante 1 minuto,
vigilándolo para asegurarte de que la solución de agar no hierva en exceso.
 Una vez que la solución esté lista, el polvo de agar debe estar disuelto por
completo y el líquido debe ser claro.
 Deja enfriar la solución de agar durante varios minutos antes de proseguir.

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Prepara las placas de Petri.

 Las placas de Petri deben estar bien esterilizadas antes de usarlas para
cultivar bacterias; de otro modo, los resultados del experimento podrían
verse afectados. Las placas de Petri recién compradas deben venir
esterilizadas y selladas en empaques de plástico.
 Saca la placa de Petri de su paquete y
separa las dos mitades. Con mucho
cuidado, vierte la solución de agar
caliente en la mitad inferior de la placa
de Petri, solo lo suficiente para formar
una capa por encima del fondo de la
placa.
 Vuelve a colocar rápido la mitad superior de la placa de Petri para evitar
que las bacterias transmitidas por el aire contaminen el experimento.
Reserva la placa de Petri durante 30 minutos a 2 horas, hasta que la
solución de agar se enfríe y se endurezca (cuando esté lista, se parecerá
a gelatina cuajada).

Refrigera las placas de Petri hasta que estén listas para su uso.

Las placas de Petri llenas de agar, debes almacenarlas en el refrigerador hasta


que estés listo para continuar con el experimento.

 Al momento de guardar las placas de Petri en el refrigerador, debes


colocarlas boca abajo. Esto ayudará a evitar que cualquier condensación
de agua en la tapa gotee sobre el agar e interrumpa la superficie en
crecimiento.
 Las placas de Petri llenas de agar se conservarán el refrigerador hasta un
par de meses. Cuando estés listo para usarlas, retíralas del refrigerador y
deja que alcancen la temperatura ambiente antes de introducir tus
muestras.

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Coloca las placas de Petri en un lugar oscuro y cálido.


Deja las placas de Petri en un lugar oscuro y cálido donde las bacterias puedan
desarrollarse sin perturbaciones, durante varios días. No olvides almacenarlas
boca abajo, de modo que las gotas de agua no interrumpan el crecimiento de las
bacterias.
 La temperatura ideal para el crecimiento de las bacterias es entre 20 y 37
°C. Si es necesario, puedes colocar las placas de Petri en un lugar frío,
pero las bacterias crecerán con mayor lentitud.
 Deja que las bacterias se desarrollen durante 4 a 6 días, ya que eso les
dará a los cultivos suficiente tiempo para crecer. Una vez que las bacterias
empiecen a crecer, podrías notar un olor particular que proviene de las
placas.

Referencias
1. ↑ http://www.stevespanglerscience.com/lab/experiments/growing-bacteria
2. ↑ http://www.scienceenterprises.com/growingbacteria.aspx

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RESULTADOS
 Datos del Grupo 01:

Procedimiento A: Colonias de Bacterias desarrolladas en placas en medio


Agar Nutritivo
Tabla 1

Placa N°1 Placa N°2 Placa N°3 Placa N°4


Grupo
Estéril Estéril Estéril NO Estéril
Sector C Sector D
Ambiente: Aula (261)vacía Sector A Sector B
1 (2do piso ) Pelo Huella
I. Estéril I. NO NO abrir NO abrir
estéril
N° de
12 4 35 1 1 3 2
Colonias

X1=1mm , x10=2mm
X2=1,4mm, x3=1,5mm
X4=2mm, x11=1mm X1= 1mm X=0.8m X1=1mm
X5=2,8mm, X2=1mm m(33) X2=1mm X1=1mm
Tamaño X1=2mm X1=1mm
X6=3mm, x12=2mm X3=1mm X=3mm X3=1mm X2=1mm
X7=6mm, X4=1mm (2)
X8=1mm
X9=1mm

Todas
Todas son Todas son
Margen o son de Borde Todas son
Liso de borde Borde Liso de borde
borde borde Liso de borde liso
Liso Liso
Liso
X1=convexa x7=plana
X2=convexa x8=convexa
Todas
X3=plana x9=convexa Todas son Todas son Todas son
Elevación son plana plana
X4=convexa x10=convexa planas planas planas
planas
X5=convexa x11=plana
X6=convexa x12=c0nvexa
Todos
Todos son
Todas de color crema son de crema
Pigmentación de color Crema Blancas Blancas
color
blancos
crema
Todas
Todas son Todas son Todas son 1 translucido
C. Óptico Todas son opacas son opaca
opacas opaca Opacas 1 opaco
opacas

Ambiente Aula(261)vacía (2do piso)


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 2días (48 horas)
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

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Ambiente: Baño de hombres 1piso


# de hongos 6
Tipos de hongos Aspergillus(2), alternarías(2), levadura(2)
Características Alternaría: opacos de color verde oliva y
consistencia lanosa en los bordes , borde
circular y elevación convexa
Rhizopus: colonia algodonosa de color
blanca que alcanza el borde de la placa Petri.
Aspergillus: opacas de color verde oliva y
filamentoso, borde circular liso y elevación
convexa

Ambiente Baño de hombres 1 piso


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 5días (120 horas)
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas Flujo constante de personas
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

Características del baño de hombres 1 piso:

 El piso se encontraba húmedo al momento de exposición de la placa.


 La muestra se encontraba al costado del baño.
 Flujo constante de personas en el baño, específicamente 10 personas mientras
estuvo la placa.
 La puerta estaba abierta.
 Con poca iluminación.
 Sin ventanas.
 No ingresaba la radiación.
Características del Aula vacía (2 piso) del 261:

 La muestra se encontraba en una carpeta libre de objetos.


 Solo se encontraba el que tenía la muestra.
 Con poca iluminación.
 2 ventanas abiertas y 2 no cerradas.
 Con la puerta abierta.
 Poca ventilación.
 Mo entraba la radiación.

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Esquema de la posición de la placa en el baño

 Datos del grupo N°2:

Procedimiento B: Crecimiento de Bacterias en Caldo de Cultivo

Tabla 2
GRUPO N° 2 Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril
Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril
Cantidad de Abundante Abundante Abundante
crecimiento
Distribución Película Sedimento Turbidez
Olor Imperceptible Aromático Pútrido

Ambiente Biblioteca FIA


Ubicación Al centro de la biblioteca(cubículo)
Exposición al ambiente 15minutos
Cantidad de personas 15 personas(20% de la capacidad de la biblioteca)
Características  Corría viento moderado.
 Lo dejamos en un cubículo.
 Sobre iluminación.
# de hongos 21
Tipos de hongos  Alternaria sp (2)
 Levaduras (15)
 Rhizopus (4)

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 Datos del Grupo N°3 :

Procedimiento A: Colonias de Bacterias desarrolladas en placas en medio


Agar Nutritivo:
Tabla 3
Placa N°1 Placa N°2 Placa N°3 Placa N°4
Grupo
Estéril Estéril Estéril No Estéril
Sector Sector Sector Sector
3 Lab. Micro A B C D NO abrir NO abrir
(PELO) (Huella) (I. NO Estéril) (I. Estéril)
24
2 6
N° De colonias 52 53 (alrededor 29 39
Ino. estéril I. no estéril
huella)
X=1mm(31) X=1mm(1) X=1mm(10)
X=1mm(8)
X=2mm(14) X=1mm(4) X=2mm(5) X=2mm(20)
X=1mm(16) X=2mm(14)
Tamaño X=0.5mm(20) X=2mm(2) X=3mm(7)
X=0,5mm(37) X=3mm(3)
X=3mm(7) X=4mm(2)
X=4mm(4)

Liso(26) Liso(4)
Liso circular(3) Liso(21)
Lobular(13) Ondulante(6) Lobular(4)
Margen o borde Lisas(53) Ondulante(21) Ondulantes(2) lobular(16)
Ondulante(13) Ondulante(31)
irregular Ondulante(9)
todas son Planas(4) Plana(38)
Plana(22)
Elevación planas(52) Planas(53) Planas(24) Planas(2) Convexas(2) Convexa(1)
Convexa(7)

Blanca(36)
Todos son Todas son Blancas Todas son Todas son
Pigmentación Amarilla(14)
blancas blancas tenues(2) Blanca(3) blanca Blancas(29) blancas(39)
Naranja(2)
tenue(3)
Opaca(2)
Opacas(8)
Caracteres Opacos Opacas(17) Opacas(24) Translucido(1) Translucido(4) Opacas(26)
Translucidas(31)
ópticos Traslucidos Traslucidas(36) Opaca(1) Translucidas(3)

GRUPO 3
AMBIENTE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
N° DE HONGOS 23
TIPOS DE HONGOS RHIZOPUS (3)
NIGNCONS
OFFERNORIO(2)
SP
CARACTERÍSTICAS  Las alternarias sp son de color negro con marrón
 Los Rihizopus nigncons son de color blanco como el
algodón
 Rojo 2mm (convexa semiesfera)
 Amarilla (1 amarillo fuerte, 1 amarillos claro, 1 crema
hueso)
 Liso 2mm (3) son blancos
1mm (1)
 Irregulares, ondulantes como lechuga
 Elevación: plana

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 Tabla de datos del Grupo 4:

Procedimiento B: Crecimiento de Bacterias en Caldo de Cultivo

Tabla 4 B

Pipeta estéril Pipeta no estéril Pipeta estéril


Tubo estéril Tubo estéril Tubo no estéril
Cantidad de Escaso Escaso Moderado
crecimiento
Distribución Sedimento Sedimento Sedimento
de
crecimiento
Olor Pútrido Pútrido Pútrido

Procedimiento C: Crecimiento de Bacterias en Caldo de Cultivo

Tabla 4 C
Centro de estudiantes

N° DE MOHOS 8
TIPOS DE MOHOS 3 Aspergillus
5 Rhizopus
N° DE LEVADURAS 19
CARACTERÍSTICAS Levadura:
Circular, blancos y pequeños
Rhizopus:
Forma ondulante, marrón claro
Aspergillus:
Forma irregular, núcleo oscuro,
Bordes blancos

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 Tabla de datos del Grupo 5:

Ambiente Laboratorio de química


Observación Expuesto al ambiente durante 15 minutos
Hora 1:15pm
Fecha de exposición Martes 20/03/18
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 6 días

Tipos de hongos Asperguillus flayus (5)


Levadura (70)
Características macroscópicas  Asperguillus flayus: son colonias de
crecimiento rápido, de 3 a 5 días,
comienzan con una tonalidad blanco
amarillento algodonada, con el tiempo
son tonalidades verdosas o verde
amarillenta.
 Levadura: son muy parecidos
macroscópicamente pero son mas
cremosas y los colores que presentan
son blancos, algunas son rosadas o
rojas porque presentan carotinoides.
Características microscópicas  Asperguillus flayus: presentan un
micelio pectado, hialino, ramificado, con
conidio fones langas, cenocíticos, cerca
de la vesícula de forma una parte
rugosa las vesículas son esféricas,
cubiertas en 360° y contienen de 1 a 2
series de filiados.

Características del ambiente:


 Había mucha ventilación.
 La placa se ubicó cerca de la puerta (la puerta estaba abierta).
 Había iluminación.

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Con respecto al grupo N°1:

 En el baño se posaba con frecuencia la humedad. Así como en el agua,


como en las tuberías, en el piso.
 En el baño se encontró con una puerta abierta y poca iluminación en el
ambiente de abundante humedad.
 En el baño había un Flujo constante de personas, específicamente 10
personas mientras estuvo la placa.
 También se encontró en el aula vacía, 9 tipos de hongos como los
Penicillium (2), Aspergillus (3), alternarias (2), levadura (2), a una
temperatura de ambiente.

 En el aula vacía. La muestra se encontraba en una carpeta libre de


objetos y con poca iluminación.
Solo se encontraba el que tenía la muestra.
 En esta muestra del aula vacía, se encontraba con la puerta abierta y con
2 ventanas abiertas y 2 no cerradas.

ESQUEMA DE LA POSICIÓN DE LA PLACA EN EL BAÑO:

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Con respecto al Grupo N°2:

 En el grupo 2 se observó que la placa Petri estéril N°1, en la biblioteca FIA,


se demoró en la exposición, unos 15 minutos, con una cantidad de 15
personas.
 También se observó que corría un viento moderado en un cubículo, sobre
iluminación.
 En una pipeta estéril de tubo estéril con pipeta estéril, da como resultado
abundante, con una distribución de película y un olor imperceptible.
 En una pipeta no estéril de tubo estéril con pipeta estéril, da como resultado
abundante, con una distribución de sedimento y un olor aromático.
 En una pipeta estéril de tubo estéril con pipeta estéril, da como resultado
abundante, con una distribución de turbidez y un olor pútrido.

Con respecto a los del grupo 03 en agar nutritivo

 En este grupo, se puede notar que en la placa N°1 se puede ver que
existen 52 colonias de márgenes lisos, lobular, ondulantes con elevaciones
planas, de colores opacos translucidos.

 Por otra parte, en la placa N° 2, en la sección A (pelo) de 53 colonias. se


sabe que las 53 son lisas y planas, de una pigmentación blancas humo de
color opacas translucidas.
 En la placa N°2 de la sección B (alrededor de la huella), de 24 colonias de
márgenes de lisos ondulante irregular, planas de color blancas humo y
opacas.
 Por consiguiente, En la placa N°2 de la sección C (I. Estéril), de 2 colonias
ondulantes y plana, de color blanco tenue opaca translucida.
 También, En la placa N°2 de la sección D (I.NO Estéril), de 6 colonias, de
márgenes ondulantes, plana convexa y de colores blancas opacas
translucidas.
 En la placa N°3, de 29 colonias, de márgenes liso lobular ondulante, plana
convexa, de color blancas opacas translucidas.

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 Por último tenemos a la placa N°4,de 37 colonias, de márgenes liso lobular


ondulatoria, plana convexa.

Con respecto a los del Grupo N° 4:

 En este grupo, plantearemos que la cantidad de crecimiento de la pipeta


estéril, con tubo estéril, es escaso, con una distribución de crecimiento
formando sedimento, de olor pútrido.
 También comentaremos que cantidad de crecimiento de la pipeta no
estéril, con tubo estéril, es escaso, con una distribución de crecimiento
formando sedimento, de olor pútrido.
 Luego, fomentaremos que la cantidad de crecimiento de la pipeta estéril,
con tubo no estéril, es moderado, con una distribución de crecimiento
formando sedimento, de olor pútrido.
 Por último comentamos que la cantidad de mohos son 8 (3 Aspergillus
5 Rhizopus), con 19 de levaduras Circular, blancos y pequeños
Rhizopus (Forma ondulante, marrón claro). Aspergillus(Forma irregular,
núcleo oscuro, Bordes blancos).

Con respecto a los del Grupo N° 5:

 En este procedimiento daremos a conocer que en el ambiente de aquel


experimento se realizó en el laboratorio de química, en un tiempo a
aproximado de 15 minutos de observación y con los tiempos de
crecimiento micro bacteriano de 6 días.
 También se dio a conocer tipos de hongos como: Asperguillus flayus (5)
Levadura (70).
 En el lugar de dicho experimento, había mucha ventilación con poca
iluminación en el ambiente.

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CONCLUSIONES

 Con respecto al baño de la FIA, se puede comentar que así como las
bacterias y los hongos son muy propensas en esos lugares por la gran
cantidad de humedad que se posa en ese ambiente.
 En el Centro de Estudiantes, la gran cantidad de microorganismos
localizados en el laboratorio se debe en mayor parte a la temperatura con
respecto al medio ambiente
 En cuanto al agar nutritivo, así como la peptona, son de fuente principal de
nitrógeno orgánico del extracto de carne que contiene sustancias solubles
en agua de tejidos de animales; bajo determinados medios bacteriológicos
como es la temperatura, presión, etc.
 Por último, mencionaremos la gran cantidad de colonias por parte del
análisis del ambiente de la Sala de Tesis, esto se debe que con mayor
presencia diaria de alumnos con lo que se da un aumento por la mala
ventilación en la sala de tesis.

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RECOMENDACIONES

Para dar aquellas recomendaciones, se plantea conocer algunas propiedades


físicas que nos difundirán, como aquellos microorganismos se incremente de una
mayor manera. Ahora se comentara como debemos hacer un uso de cultivo de
microorganismos que son aquellas bacterias para nuestro informe.
1.- Deben aplicarse preferiblemente en horas de la tarde, cuando el sol comienza
a ocultarse.
2.- Si desafortunadamente, la incidencia de la enfermedad es muy elevada, lo
más recomendable es alternar con algún fungicida, y posteriormente, aplicar el
controlador biológico.
3.- .- Deben emplearse, preferiblemente, de manera preventiva y no “curativa”,
ya que una de las principales estrategias que emplean estos microorganismos,
es el de la competencia por el medio en el que se desarrollan. Por ejemplo,
resulta más fácil para Trichoderma o Bacillus colonizar toda la rizosfera sin tener
que competir con otro microorganismo por este espacio.

4.- A pesar que algunas casa comerciales indican que estos pueden ser
combinados con otros productos, incluyendo algunos fungicidas, lo más
recomendable es realizar las aspersiones de manera individual.
5.- Debemos tener una asperjadora exclusivamente para la aplicación de
controladores biológicos, ya que, la mayoría de los ingredientes activos de los
productos químicos podrían quedar adheridos a las paredes de las asperjadoras.
6.- El uso de estos de estos microorganismos, no solamente ayuda al manejo de
enfermedades, también se han reportado efectos como estimulantes en la
germinación de semillas y promotor del crecimiento de las raíces y del follaje.

Citado:
Por.Ing. Agr. J. AlbertoYépez/ yepezalberto@gmail.com/ twitter:@yepezzalberto

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CUESTIONARIO

1. ¿Qué factores influyen en la flora microbacteriana del aire?


. Factores que influyen en los microorganismos del aire:
 Materia orgánica: La materia orgánica que se encuentra sobre el suelo
influye en la riqueza microbiana del mismo, por lo que así será la riqueza
del aire, en dependencia de la fertilidad del suelo.
 Humedad y precipitaciones atmosféricas: La atmósfera húmeda
contiene menos microorganismos que la seca, debido a que las gotas de
humedad los hacen bajar al suelo.
 Corrientes de aire: Un ambiente activo contiene más bacterias que otro
seco más sosegado, por otra parte, las bacterias permanecen en el aire
durante lapsos variables, según la velocidad de las corrientes.
 Tamaño de las partículas: La permanencia de los microorganismos en el
aire depende del tamaño de las partículas donde se fijan, depositándose
con más rapidez las adheridas a las partículas mayores.
 Luz solar, temperatura y desecación: El destino de los microorganismos
del aire depende entre otros factores atmosféricos, de la luz solar, pues la
acción directa de los rayos solares tiene efectos perjudiciales en los
microorganismos; igualmente la temperatura y la desecación directamente
relacionadas con la luz solar (con los rayos infrarrojos), actúan como
agentes antimicrobianos importantes.

2. describa cuatro enfermedades que son transmitidas por el aire.

TUBERCULOSIS

DEFINICIÓN: Es una enfermedad crónica infecciosa de larga duración y todavía


es de las primeras causas de muerte en muchos países en vías de desarrollo.
SINTOMAS:
-Fiebre;
-Sudoración por la noche;
-Cansancio permanente;
-Pérdida de peso;
-Falta de apetito;
-El síntoma principal es la tos persistente por más de 15 días.

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CAUSAS: La tuberculosis es una enfermedad causada por Mycobacterium


tuberculosis, una bacteria que casi siempre afecta a los pulmones.
TRATAMIENTOS: Detectar la tuberculosis en forma temprana es una de las
principales herramientas para combatir la enfermedad. Con el tratamiento
adecuado durante el tiempo indicado por el médico, la persona enferma logra
curarse sin contagiar a otros.

DIFTERIA

DEFINICIÓN: Es una infección febril aguda producida por Corynebacterium


diohtheriae conocido como bacilo de Klebs-Loeffler.
SINTOMAS:
-Fiebre y escalofríos
-Dolor de garganta, ronquera
-Dolor al deglutir
-Tos similar a la de crup (perruna)
CAUSAS: La bacteria que causa la difteria se propaga a través de las gotitas
respiratorias, como las que se producen con la tos o los estornudos, de una
persona infectada o de alguien que porte la bacteria pero que no tenga ningún
síntoma.
TRATAMIENTOS: La antitoxina diftérica se administra como inyección
intramuscular o a través de una IV (línea intravenosa).

FIEBRE REUMÁTICA

DEFINICIÓN: Es una enfermedad inflamatoria que se puede presentar después


de una infección con las bacterias estreptococos del grupo A.
SINTOMAS: La fiebre reumática se presenta después de infecciones con un
gérmen o bacteria llamado Estreptococo pyogenes o estreptococo del grupo A.
CAUSAS:
-Fiebre
-Hemorragias nasales
-Dolor en el abdomen
-Problemas en el corazón, que pueden no tener síntomas, o que pueden derivar
en falta de aliento y dolor en el pecho.
TRATAMIENTOS: El objetivo de esto es eliminar todas las bacterias estreptococo
del cuerpo. Después del primer tratamiento, se prescriben más antibióticos.

FARINGITIS

DEFINICIÓN: Es la inflamación de la garganta o faringe a menudo causada por una


infección bacteriana o vírica. Provoca molestia, dolor o carraspera en esta región, lo
que a menudo da lugar a dificultades a la hora de tragar o hablar.
SINTOMAS:
 Dolor que empeora al tragar o hablar (odinofagia).
 Sequedad de la garganta.
 Fiebre.

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 Dolor de cabeza.
 Erupciones cutáneas.
 Amigdalitis o amígdalas rojas e inflamadas.
 Dolores musculares o articulares.
 Voz ronca.
 Ganglios inflamados en el cuello.

CAUSAS: La mayoría de los dolores de garganta vienen provocados por virus que
provocan resfriados comunes o a la gripe. En un menor número de casos, el dolor viene
causado por infecciones bacterianas.

TRATAMIENTOS: El paciente deberá completar el tratamiento para que resulte


efectivo, según las indicaciones del especialista. Si no se toman todos los
medicamentos, se puede producir un empeoramiento o que la infección se extienda a
las regiones colindantes.

3. ¿Qué grupos de agentes causa la mayor incidencia de


enfermedades respiratorias?
Con respecto a las enfermedades respiratorias, pues aparecen muchas
personas en muy poco tiempo. Los microorganismos causantes se transmiten
principalmente en forma directa por las secreciones de la nariz y la garganta
de los infectados, las cuales son diseminadas por la tos, los estornudaos y la
conversación, o indirectamente por medio de los objetos contaminados como
los vasos, cubiertos y pañuelos.

Factores que contribuyan a la mala calidad del aire en edificios (%).

Polvo en suspensión en el aire 24


Bacterias patógenos o 16.2
alergénicas 12.2
Humedad relativa baja 11.4
Formaldehido 6.7
Fibra de vidrio 4.7
Gases de escape de vehículos 4.3
Compuestos volátiles 3.2
orgánicos 2.2
Humo de tabaco 2.2
Humedad relativa alta 0.5

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4. Describa las principales características de Rhizopus nigricans,


Alternaria, Aspergillus,Penicillium y Sacharomyces cerevisae.

Rhizopus nigricans:

 La reproducción sexual en Rhyzopus se lleva a cabo por zigosporas,


producidas después de la fusión de dos micelios compatibles.
 Los hongos pertenecientes al filo zygomycota se caracterizan por
formar zigosporas con gruesas paredes, de origen sexual y
esporangiosporas no nadadoras, de origen asexual.
 Este moho es conocido como el moho negro del pan, pero no solo
afecta a este alimento, sino que también es causante de la
podredumbre blanda de frutas y hortalizas frescas, la pudrición en
tomates y la decoloración de cereales y granos.
 Su temperatura óptima de crecimiento se encuentra entre los 25-26ºC,
siendo la mínima de alrededor de 4,5-5ºC y la máxima entre 32-33ºC.
Estudios apuntan que sus esporas son susceptibles a las bajas
temperaturas y no pueden desarrollarse por debajo de los 2ºC.

Alternaria:

 La Alternaria es un hongo ascomiceto, esto es, del filo de las


Ascomycotas.
 Son conocidas comúnmente como alérgenos en los humanos, y,
dentro de casa, pueden causar rinitis alérgica o reacciones de
hipersensibilidad que, en ocasiones, pueden producir ataques de
asma.
 Sus esporas son las causantes de la alergia, y, al igual que los pólenes,
son transportadas por el aire hasta la nariz o bronquios del alérgico,
causando la rinitis o asma.
 Son una especie omnipresente en el ambiente y parte fundamental en
la flora de hongos en cualquier sitio. Son agentes activos en la
descomposición.

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 Sus esporas están en suspensión en el aire, sobre el suelo, sobre los


objetos y en el agua, tanto fuera, como dentro de casa.
 Las esporas se pueden distribuir de una en una, o en largas cadenas,
y pueden crecer en colonias visibles, de color negro o gris.
Aspergillus:
 El hongo Aspergillus se caracteriza por estar formado por hifas
septadas hialinas. Las hifas fértiles o conidióforos terminan en una
vesícula de la que surgen las células conidiógenas intermedias
(métulas) o terminales (fiálides). De las fiálides salen las conidias
(esporas asexuales externas) que forman largas cadenas. Por lo
tanto, puede tener reproducción sexual (con formación de
ascosporas en el interior de ascas) y asexual (con formación de
conidios).
 El Aspergillus es el principal causante de la aspergilosis pero
también pueden provocar otras enfermedades como onicomicosis,
otomicosis y sinusitis. Para su tratamiento puede llegar a ser
necesaria la intervención quirúrgica (en caso de aspergilomas)
aunque también puede tratarse con antifúngicos como la
anfotericina B, el voriconazol o el itraconazol.

 Existen más de 600 especies de Aspergillus que se diferencian en tamaño,


tasa de crecimiento, textura (aterciopelada, granular, algodonosa) y color
de la colonia: verde-amarillento (A. flavus), negro (A. niger), marrón (A.
terreus). La coloración suele aparecer en todas las estructuras aéreas,
tanto en el micelio como en las cabezas conidiales.

Penicillium:
 Se caracterizan por formar conidios mediante una estructura
ramificada que recuerda la forma de un pincel, las
ramificaciones terminan en unas células que se conocen como
fialides. Las fiálides originan las esporas.
 Cuando existe solamente un verticilo se denomina
monoverticilado y si existen varios biverticilado, terverticilado o
poliverticilado.

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 esta toxina ha provocado enfermedad aguda en humanos que


han consumido arroz contaminado por el hongo.
Sacharomyces cerevisae:
 La levadura de cerveza (Saccharomyces cerevisiae) es un hongo
unicelular, un tipo de levadura utilizado industrialmente en la
fabricación de pan, cerveza y vino.
 En su ciclo de vida alternan dos formas, una haploide y otra diploide.
Ambas formas se reproducen de forma asexual por gemación.
 En condiciones muy determinadas la forma diploide es capaz de
reproducirse sexualmente. En estos casos se produce la meiosis en la
célula formándose un asca que contiene cuatro ascosporas haploides.
 Además de su rápido crecimiento, la dispersión de las células y la
facilidad con que se replican cultivos y aíslan mutantes, destaca por
un sencillo y versátil sistema de transformación de ADN.
 Por otro lado, la ausencia de patogenicidad permite su manipulación
con las mínimas precauciones.

5. A.- ¿Cuáles son los ingredientes del agar nutritivo, caldo nutritivo y
agar sabourand?
B.- ¿Qué clase de nutrientes proporciona cada uno de los
ingredientes?
A) SOLUCIÓN

INGREDIENTES DEL CALDO Y AGAR NUTRITIVO

AGAR CANTIDAD CALDO CANTIDAD AGAR CANTIDAD


NUTRITIVO NUTRITIVO SABOURAND
extracto de 3g extracto de 3g Glucosa 40 g/L
carne carne
peptona 5g peptona 5g Pluripeptona 10 g/L
agar 15 g agar 15 g agar 15 g/L
agua 1L - - pH 5.6

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B) SOLUCIÓN

MATERIAL VALOR NUTRITIVO


Extracto de carne Estas son sustancias solubles en
agua de tejidos animales, entre ellas
carbohidratos, compuestos orgánicos
nitrogenados, vitaminas solubles en
agua y sales. Es un caldo de carne muy
concentrado, normalmente de vacuno.
Se usa para dar sabor a carne a diversas
recetas, y para elaborar consomés y
sopas

Peptona La peptona se presenta como un polvo


amorfo, o bien como escamas o masas
irregulares, esponjosas, de color
blanco amarillento o amarillo
parduzco; con olor característico que
recuerda al de la carne asada; de
sabor amargo (peptona pancreática) o
amargo y salado (peptona péptica).
Fuente principal de nitrógeno orgánico

Agar El agar nutritivo contiene normalmente


(p/v):10,5% de peptona;0,3% de
extracto de carne/extracto de
levadura;
 1,5% de agar;
 0,5% de cloruro de sodio;
 agua destilada;
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.
Se usa como agente solidificante de
los medios de cultivo, se disuelve en
solución acuosa, gelifica cuando la
temperatura baja de 45°C; no se
considera al agar como nutriente para
las bacterias.

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MICROBIOLOGÍA SANITARIA I FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

FUENTES DE INFORMACIÓN

https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tem
a_5_Cultivo.pdf

American Public Health Association, American Chemical Society, Association of


Official Agricultural Chemists (1920). Standard Methods for the Examination of
Water and Sewage. American public health association. pp. p. 95.

Pelczar, cuarta edición, editorial McGraw-Hill

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ANEXOS

Anexo 2
Anexo 1 Anexo 1

Anexo 4
Anexo 3

Anexo 5

34
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I. APENDICE

 DIAGRAMA DE FLUJO

Apéndice 1 Apéndice 2
Anexo 1

Apéndice 4
Apéndice 3

Apéndice 5

35
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 DATOS ORIGINALES Y OBSERVACIONES


Ambiente Aula(261)vacía (2do piso)
Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 2días (48 horas)
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

Ambiente: Baño de hombres 1piso


# de hongos 6
Tipos de hongos Aspergillus(2), alternarías(2), levadura(2)
Características Alternaría: opacos de color verde oliva y
consistencia lanosa en los bordes , borde
circular y elevación convexa
Rhizopus: colonia algodonosa de color
blanca que alcanza el borde de la placa Petri.
Aspergillus: opacas de color verde oliva y
filamentoso, borde circular liso y elevación
convexa

Ambiente Baño de hombres 1 piso


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 5días (120 horas)
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas Flujo constante de personas
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

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 DATOS CALCULADOS

Ambiente Aula(261)vacía (2do piso)


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 2días (48 horas)
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

Ambiente Aula(261)vacía (2do piso)


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 2días (48 horas)
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)

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