Color objetivo y decoloración interna

Cáliz y color de la carne en la fruta de fresa se mantuvo similarmente durante el almacenamiento

con ligeras diferencias entre los tratamientos de CA (datos no presentados). En general, L * de la
pulpa de fresa fue la más baja para la fruta tratada con aire (42.45), mientras que la mitad de las
fresas tratadas con AC tuvieron una L * mayor (44.76). Ambas frutas tratadas con CA fueron más
vívidas en comparación con el control, como se indica por valores C * más altos en general (53
frente a 50, respectivamente). Hubo una interacción significativa entre el tratamiento y el tiempo
para el cáliz de fresa h °. Al final del almacenamiento, ambas frutas tratadas con CA tuvieron
valores de h ° similares, mientras que h ° para las fresas de control disminuyó significativamente
(106 vs.111) al final del almacenamiento indicando un cáliz menos verde.

Durante el almacenamiento de aguacate a 20 y 5 ° C, se observó una disminución lenta en los

valores de color (h °, L * y C *), indicativo de maduración (Fig. 6a). A 20 ° C, el aguacate tratado con
CA tardía parecía estar en un estado menos maduro en comparación con los almacenados en el
aire ya que los valores de h ° eran más altos en los días 2 (antes de la aplicación CA), 7 y 9. Esto
también coincidió con un mayor valores para L * y C * (color más brillante e intenso). Por el
contrario, las primeras frutas tratadas con CA parecían estar en una etapa más avanzada de
maduración, como lo indican los valores bajos de h °, L * y C * (menos verdes, más oscuros y de
apariencia más opaca), del día 5 al 9, en comparación con el aire almacenado fruta. La aplicación
de CA después de 1,5 d (tratamiento medio) mostró valores similares a los controles. El aguacate
tratado con CA media y tardía y posteriormente almacenado a 5 ° C pareció estar menos maduro
en comparación con el control en los días 20 a 30, como lo indica la mayor h ° y valores globales
más altos para C * y L * (Fig. 6b). En contraste, los primeros frutos tratados con CA
experimentaron una disminución más rápida con valores similares al control la mayoría de los días
durante el almacenamiento, excepto en los días 20 y 30. Sin embargo, una vez que todas las
muestras se transfirieron a condiciones de vida útil (4 días a 20 ° C), el color se volvió similar a los
controles.

3.5. Firmeza

La firmeza de la fresa tendió a aumentar durante o después del tratamiento con CA, mientras que
no hubo una diferencia significativa en la firmeza durante todo el almacenamiento para la fruta de
control (Fig. 7a). Durante los primeros 2 días de almacenamiento, no se encontraron diferencias
significativas para ninguno de los tratamientos (alrededor de 1.2-1.3 N). Sin embargo, desde el día
4 en adelante, las frutas tempranas tratadas con CA fueron significativamente más firmes (hasta
aproximadamente 0,6 N) en comparación con el control durante el resto del período de
almacenamiento; mientras que la fruta mediana tratada con CA fue significativamente más firme
desde el día 8 en adelante (hasta aproximadamente 0,8 N). Los valores iniciales de firmeza para
aguacate pre-climatérico fueron aprox. 220 N antes de disminuir rápidamente durante 2 días de
almacenamiento a 20 ° C (Fig. 7b). La firmeza en el tiempo cero estuvo de acuerdo con los
reportados por Meyer y Terry (2010) y Meyer et al. (2017) sobre el aguacate 'Hass' pre-
climatérico. Los primeros frutos de aguacate tratados con CA fueron más firmes
(aproximadamente 97 N) que el resto de la fruta evaluada (aproximadamente 40-50 N) después de
2 días a 20 ° C (Fig. 7b). Para el día 4, ya no había diferencias significativas entre los tratamientos y
el control. Cuando se almacenó a 5 ° C, el tratamiento CA inicial fue la única aplicación que resultó
significativamente en una mejor firmeza general retenida (114,8 N) en comparación con el control
(97,3 N). La firmeza para los otros dos tratamientos CA fue estadísticamente similar al control
(datos no mostrados). La firmeza del aguacate pre-climatérico (antes de la aplicación CA)
cosechada en diciembre (prueba a 5 ° C) fue similar (alrededor de 225 N) a la observada para los
aguacates cosechados un mes antes (prueba a 20 ° C). Además, la fruta templada tratada con CA
mostró la firmeza más alta hasta 20 d de almacenamiento en frío, en comparación con el control,
después del cual no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos en
almacenamiento en frío o el período de maduración (figura 7c).

Descolonización

Se encontró que la decoloración interna evaluada el día 5 y 7 de almacenamiento a 20 ° C era

similar en los aguacates tratados con CA en comparación con el control (Tabla 1). En contraste,
después de 9 días de almacenamiento a 20 ° C, los aguacates tempranos tratados con CA tuvieron
un porcentaje de decoloración significativamente más alto en comparación con el control y los
tratamientos de Ca medio / tardío. Para el aguacate almacenado a 5 ° C, se observó una
decoloración mínima (aproximadamente 4%) después de 5 días de almacenamiento en frío (datos
no mostrados). Solo a los 20 días se observaron diferencias significativas entre la fruta mediana
tratada con AC que tenía una decoloración significativamente menor en comparación con los otros
tratamientos y el control (Tabla 1). Sin embargo, a partir de los 25 días de almacenamiento a 5 ° C,
no se observaron diferencias en la decoloración del aguacate entre los tratamientos.

Discusión

4.1. Ventajas de las mediciones de la tasa de respiración en tiempo real in situ bajo CA condiciones

La configuración in situ automatizada utilizada en este documento permite la grabación continua

de mediciones de respiración en tiempo real sin interrupción del entorno de CA. Esto se consideró
esencial para obtener información más precisa y prácticamente útil comparable a las condiciones
de la industria de la vida real. Además, los efectos fisiológicos no fueron influenciados por la
manipulación o cambios en la temperatura y / o CA. Esto es mejor que otro flujo a través de
configuraciones que se consideran insuficientemente precisas para medir bajas tasas de
respiración (Fonseca et al., 2002); en el presente estudio, los detectores de CO2 utilizados fueron
capaces de medir con precisión hasta 1 μL L-1. Además, se conectaron cámaras múltiples a la
configuración, lo que permite que las réplicas se almacenen en diferentes condiciones de CA para
análisis simultáneos en ciclos, proporcionando conjuntos de datos en tiempo real sin
interrupciones en el tiempo. Estos puntos de datos podrían trazarse y alisarse para proporcionar
cambios informados en la tasa de respiración cada hora bajo condiciones específicas de CA.

4.2. Efecto diferencial de CA sobre los cambios metabólicos y fisiológicos durante el

almacenamiento

Se determinó que la velocidad metabólica de la fresa y el aguacate se ve afectada de manera

diferencial por el tiempo de CA según el tipo de producto. La fruta de fresa experimentó ráfagas
en la tasa de respiración mientras estaba sujeta a ambientes CA. Esto está en contraste con la
literatura que sugiere que los altos niveles de CO2 reducen las tasas de respiración de la fresa
(Fonseca et al., 2002; Almenar et al., 2006). La monitorización continua en un entorno CA permitió
la detección de cambios fisiológicos durante el almacenamiento. Por lo tanto, el aumento
transitorio de RR detectado inmediatamente después de la exposición a CA para fresa y aguacate
pre-climatérico puede no haber sido capturado utilizando métodos convencionales, donde la tasa
de respiración normalmente se registra de forma discreta y después de la aclimatación de la fruta .
Una tasa de respiración mejorada generalmente acompaña a una alta producción de etileno
(Merchante et al., 2013); sin embargo, esto no se replicó para la fruta tratada con CA de fresa (no
climatérica) en comparación con el control. Se hipotetiza que el potencial aumento de etileno que
precede al pico en la producción de CO2 puede haber ocurrido durante el almacenamiento de CA
y, por lo tanto, antes de las mediciones de etileno. Además, se ha demostrado que los efectos de
la CA en los cambios fisiológicos varían dependiendo del cultivar de fresa, que también podría
afectar de forma diferente la tasa metabólica (Watkins et al., 1999). Este fenómeno puede explicar
las discrepancias observadas en la literatura. La reducción del tiempo de exposición a altos niveles
de CO2 puede beneficiar la calidad de la fruta de fresa ya que los productos de fermentación
(acetaldehído, etanol y acetato de etilo) pueden acumularse después de solo un día de
almacenamiento bajo alto CO2 (20 kPa) (Watkins et al., 1999; Fernández-Trujillo et al. al., 2007).
Por lo tanto, el almacenamiento de fresas bajo altas emisiones de CO2 durante períodos cortos
puede beneficiar la preservación de la calidad de la fresa.

En contraste, el RR de aguacate almacenado a 20 ° C se redujo en condiciones de CA como se

informó anteriormente (Meir et al., 1995, Hertog et al., 2003). Esta reducción en la tasa
metabólica se observó a través de índices de calidad, como el ablandamiento diferido en la fruta
temprana tratada con CA. Sin embargo, cuando se eliminó la exposición a CA, la respiración volvió
a niveles similares antes del inicio de la AC. Se ha demostrado anteriormente que el tratamiento
previo del aguacate con altos niveles de CO2 durante 48 h antes del almacenamiento en frío (2-5 °
C) retrasa la maduración y reduce la incidencia de la lesión por frío (IC) (Thompson, 2003). Por el
contrario, la exposición del aguacate al 3% de O2 y al 97% de nitrógeno durante 24 h (a 17 ° C)
disminuyó el IC y redujo la producción de RR y etileno durante el almacenamiento posterior a 2 ° C
(Pesis et al., 1994). Se han realizado pocos estudios centrados en los impactos de CA en el
aguacate, con la mayoría enfocados hacia la prolongación de la vida de almacenamiento pre-
climatérica (Meir et al., 1995; Prabath et al., 2013; Basuki et al., 2016). Sin embargo, los
mecanismos subyacentes responsables de los cambios metabólicos observados durante la CA aún
no se conocen por completo. La fresa y el aguacate pre-climatérico parecieron reaccionar de
manera similar en la colocación inicial bajo condiciones de CA, donde la fruta mostró una
respuesta de estrés reflejada como un aumento sustancial en la producción de CO2. Este
comportamiento difiere de los aguacates post-climaterio, donde la respiración disminuyó desde el
momento en que fueron sometidos a CA. Esto concuerda con estudios previos, donde la aplicación
de tratamientos abióticos indujo respuestas de estrés en tomates y mangos pre-climatéricos que
condujeron a aumentos en la expresión génica relacionada con el estrés y la tasa de respiración,
respectivamente (Rothan et al., 1997; Rees et al., 2012 ) Se ha informado que niveles más bajos de
etileno reducen la senescencia y retrasan la maduración en el aguacate (Meyer y Terry, 2010). Los
cambios en la tasa metabólica no se evalúan ampliamente durante el almacenamiento de CA, ya
que muchos estudios se centran en los cambios fisiológicos durante la maduración. Basuki et al.
(2016) midieron la respiración y el etileno durante la maduración a 20 ° C después de la remoción
de CA. Sin embargo, los cambios en tiempo real en la tasa metabólica durante la CA podrían
proporcionar información adicional sobre la capacidad de almacenamiento de determinados lotes
de productos. Para la producción de etileno, se registraron niveles más altos el día 3 durante 20 ° C
en aguacates tempranos tratados con CA, pero en general, los valores fueron similares a los
controles. Para los aguacates almacenados a 5 ° C, el efecto beneficioso del tratamiento dirigido
central de CA se ve respaldado por una menor producción de etileno, mientras que previene un
aumento en el RR.

4.3. Efecto del tiempo de CA en la maduración y la senescencia

A pesar de las ráfagas rápidas en la respiración después del tratamiento con CA, la CA aplicada a la
mitad del almacenamiento de fresa mostró un color de carne más vibrante, mientras que el color
del cáliz permaneció más verde en comparación con el control. Estudios previos han reportado un
color de fruta más claro después del almacenamiento a niveles altos de CO2 (20 kPa) cuando se
aplica al comienzo del almacenamiento (Watkins et al., 1999). Además, después de 8 d de
almacenamiento a 5 ° C e independientemente del tiempo de aplicación, las fresas tratadas con CA
(15 kPa CO2 + 5 kPa O2) fueron más firmes en comparación con las muestras de control. Muchos
estudios han demostrado previamente un aumento en la firmeza de la fruta de fresa después de
los tratamientos previos con alto contenido de CO2 antes del almacenamiento (Watkins et al.,
1999; Harker et al., 2000; Hwang et al.,2012). Por ejemplo, Harker et al. (2000) aplicaron altas
concentraciones de CO2 (10 kPa) (no se dieron niveles de O2) a las fresas cv. Pájaro durante 3 días
iniciales antes de la transferencia a niveles atmosféricos (3 semanas a 0 ° C). La firmeza se vio
potenciada por el elevado tratamiento con CO2 que se sugirió debido a los cambios en la adhesión
célula a célula potenciadora del pH del apoplasto. El mecanismo para aumentar la firmeza fue
investigado adicionalmente por Hwang et al. (2012), quien sugirió que esto fue causado por la
polimerización de pectina mediada por calcio. La incidencia de la enfermedad en la fresa también
se vio afectada por el momento de la CA, que no se había examinado previamente. Se demostró
que un tratamiento CA continuo de alto contenido de CO2 (15 kPa para 5 o 14 días a 5 ° C) solo es
efectivo para reducir la podredumbre de Botrytis (Wszelaki y Mitcham, 2003). Sin embargo, el
presente estudio mostró que solo 2,5 d de CA fue suficiente para extender la vida útil de las fresas
(en función de la incidencia de la enfermedad) en 3 d adicionales. Menores valores de etileno y
tasa de respiración en aguacate CA almacenado la fruta podría indicar una sensibilidad reducida al
almacenamiento en frío (5 ° C), ya que se postula que un aumento en el RR después del
almacenamiento se desencadena por el enfriamiento y coincide con la incidencia de IC; los
síntomas incluyen cambios / patrones inusuales en la tasa de respiración y la producción de
etileno, así como la incapacidad de ablandarse y madurar normalmente después del
almacenamiento en frío (Basuki et al., 2016). Sin embargo, a pesar del ablandamiento normal de la
fruta, se observó una decoloración interna del mesocarpio en todas las muestras, incluido el
control, hacia el final del almacenamiento en frío. Por lo tanto, el almacenamiento de CA no
aceleró el IC a 5 ° C. También se observó un aumento en la producción de etileno durante el
almacenamiento del aguacate a 5 ° C en el almacenamiento final, momento en el que los cambios
de color y firmeza ya eran evidentes. Por lo tanto, los aumentos en el etileno podrían haberse
atribuido a la aparición de decoloración interna al final del almacenamiento. La aplicación de AC
temprana al aguacate durante el almacenamiento (a 20 ° C) retrasó el pico climatérico en la
respiración, que coincidió con niveles de firmeza más altos, una indicación de que estos frutos
estaban menos maduros; sin embargo, esto no se reflejó en las mediciones de color que
mostraron que estas frutas eran de color más oscuro. Es posible que los valores más altos de
etileno registrados en el día 3 en las primeras frutas tratadas con AC solamente, puedan haber
acelerado el cambio de color; ya que se informa que el cambio de color del aguacate es altamente
sensible al etileno (Meyer y Terry, 2010). Sin embargo, junto con el hecho de que se mantuvo la
firmeza y el porcentaje de decoloración interna de los aguacates tempranos tratados con CA fue el
más alto entre los tratamientos, el tratamiento inicial con CA pareció acelerar la sensibilidad a la
IC. El trabajo previo también informó una mayor incidencia de decoloración del mesocarpio en
aguacates almacenados en CA en comparación con el almacenamiento regular de aire (Eksteen et
al., 1998). La decoloración de Mesocarp fue más severa en muestras sometidas a almacenamiento
prolongado a 5 ° C durante 30 d (tiempo de almacenamiento total de 8 semanas [incluido el
período de transporte]) en comparación con las muestras almacenadas inmediatamente a 20 ° C
(tiempo total de almacenamiento 5 semanas). De acuerdo con Woolf et al. (2005), 7 semanas se
considera un largo tiempo de almacenamiento y puede ser un desafío significativo en términos de
gestión de la calidad. Si bien no son raras las 4 semanas para las exportaciones del hemisferio sur
al hemisferio norte, trastornos como la decoloración del mesocarpio pueden convertirse en un
problema. No se encontró que la incorporación de CA objetivo redujera la incidencia de IC
(decoloración mesocarpética) y, por lo tanto, no extendió el período de almacenamiento más allá
de 3 semanas adicionales. También se encontró que la aplicación de diferentes regímenes de
programación de CA durante el almacenamiento en frío mantiene el color. Además, retrasar el
inicio del almacenamiento de CA (es decir, medio CA) fue más eficaz para frenar el cambio de color
asociado con la maduración y reducir la incidencia de decoloración del mesocarpio hasta 20 d de
almacenamiento en comparación con CA inicial y tardía. Hallazgos similares se informaron en
cebolla donde la CA diferida fue tan beneficiosa para prevenir el crecimiento de brotes como CA
continua (Chope et al., 2007). Sin embargo, para el experimento en este documento, se
requerirían evaluaciones de vida útil adicionales en este punto de tiempo para confirmar los
beneficios comerciales potenciales de CA objetivo a través del almacenamiento en frío.