MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN DE

FITOPLANCTON

Método de
Grupo Análisis Análisis
Tipo de colector cuantificación
Planctónico Cuantitativo Cualitativo
más frecuente

Utermöhl (Rytter
X
Toma 1978)
X directa/Botellas Sedgewick-Rafter
Fitoplancton X muestreadoras Palmer Maloney
X Hemocitometro
Redes
X Semina (1978)
Planctónicas
IMPORTANTE:

ANTES DE IMPLEMENTAR CUALQUIER SISTEMA DE

CUANTIFICACIÓN REALIZAR UNA REVISIÓN DE LA
MUESTRA QUE PERMITA LA IDENTIFICACIÓN
TAXONÓMICA DE LAS ESPECIES PRESENTES PUESTO QUE
EL CONTAJE UNA VEZ INICIADO NO DEBE SUSPENDERSE
HASTA CONCLUIR CON LA SUBMUESTRA
 MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN DE
FITOPLANCTON EN ESTANQUES DE CULTIVO
Cultivos y altas
concentraciones de
algas de pequeño
tamaño
Método de
Grupo Análisis Análisis
Tipo de colector cuantificación
Planctónico Cuantitativo Cualitativo
más frecuente

Utermöhl (Rytter
X
Toma 1978)
X directa/Botellas Sedgewick-Rafter
Fitoplancton X muestreadoras Palmer Maloney
X Hemocitometro
Redes
X Semina (1978)
Planctónicas
 ANÁLISIS CUANTITATIVOS MEDIANTE CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

El retículo facilita el contaje de muestras con

algas de pequeño tamaño en cultivos

No son apropiadas para muestras de

campo con bajas concentraciones algales

Es una cámara de 0.1 mm de profundidad

con una reglilla que consta de 9 cuadros
con lados de 1 mm
Área total de recuento = 0.9 mm cada uno
de los cuales corresponde a un volumen de
0.1 µL

Fuente: Arredondo, B., y D. Voltolina. 2007. Métodos y Herramientas analíticas en la evaluación de la biomasa
microalgal. Centro de investigaciones marinas del Noroeste. La Paz, Baja California Sur. México.
 ANÁLISIS CUANTITATIVOS MEDIANTE CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

A B
Reglilla de 9 cuadros con lados de 1 mm
Los cuatro extremos están subdivididos en
en 16 cuadros pequeños (A, B, C. D).
El cuadro central posee 25 cuadros cada X
uno con un área de 0.04 mm2 (0.2 mm x
0.2 mm), a su vez divididos en 16 cuadros
más pequeños (X) C D

1 mm
 ANÁLISIS CUANTITATIVOS MEDIANTE CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

Para células mayores a 6 µm y cultivos

relativamente poco concentrados se
aconseja hacer el recuentro en los 4 A B
extremos (A, B, C y D).

Cálculo:
C = N *104 * dil X

Donde:
C = cel.ml-1 C D
N = promedio de células contadas en 1 mm
(0.1 µl)
Dil= factor de dilución cuando se ha realizado
1 mm
diluciones (Ej: 1 ml de muestra y 9 ml de agua sin
células es un volumen de 10 ml y el factor de
1mm= 0.001 ml
dilución es 10)
104= factor de conversión de 0.1 µl a 1 ml
(valor constante)
 EJEMPLO DE CUANTIFICACIÓN CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

Se cuenta una muestra con células de más de 6

µm, obteniéndose:
Cuadro A: 8 N. longissima y 3 Navicula sp.
Cuadro B: 6 N. longissima y 2 S. tenera A B
Cuadro C: 2 Navicula sp y 5 S. tenera
Cuadro D: 5 N. Longissima y 3 S. tenera X
Cálculo:
C = N * 104 * dil

Desarrollo: C D
N = promedio de células contadas en 1 mm2
(0.1 µl) (11+8+7+8)/4= 34/4= 8.5
Dil= factor de dilución cuando se ha realizado
1 mm
diluciones (no se ha efectuado dilución)

C = 8.5 * 104 No se incluye el factor de dilución porque no se ha

C = 85000 cel.ml-1 efectuado ninguna dilución se trabajo con la
concentración real del fitoplancton en la muestra
de agua
 ANÁLISIS CUANTITATIVOS MEDIANTE CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

Cuando las células son pequeñas y la

concentración de los cultivos muy alta, es
preferible utilizar cinco cuadros menores A B
del cuadro central marcado con la X

X
Cálculo:
C = [N/ (4* 10-6)]* dil

Donde:
C = cel.ml-1
C D
N = promedio de células presentes en los 5 cuadros
pequeños del cuadro central
4*10-6= corresponde al volumen de la muestra
expresado en cm3 (ml) sobre el área de los cuadros
pequeños la cual equivale a 0.004 mm3 (0.004 µl)
1 mm3 = 0.001 ml
(0.2x0.2x0.1) 10-6= factor de conversión de mm3
4*10-6= 0,000004 ml y a ml (valor constante) cuando se
Dil= factor de dilución cuando se ha realizado cuenta cuadros interiores
diluciones (Ej: 1 ml de muestra y 9 ml de agua sin
células es un volumen de 10 ml y el factor de dilución
es 10)
 EJEMPLO DE CUANTIFICACIÓN CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

Se cuenta una muestra con células de menos

de 6 µm y de alta concentración,
obteniéndose: A B
Cuadro 1x: 18 Chlorela sp.
Cuadro 2x: 20 Chlorela sp.
X
Cuadro 3x: 35 Chlorela sp.
Cuadro 4x: 25Chlorela sp.
Cuadro 5x: 30 Chlorela sp.
Cálculo: C D
C = [N/ (4* 10-6)]* dil
Desarrollo:
N = promedio de células presentes en los 5 cuadros
pequeños del cuadro central (18+20+35+25+30)/5 =
128/5 = 25.6
4*10-6= 0,000004 ml C = 25.6 /0.000004
Dil= factor de dilución cuando se ha realizado C = 6´400 000 cel.ml-1
diluciones (no se ha realizado dilución)
ANÁLISIS CUANTITATIVOS MEDIANTE CÁMARA DE NEUBAUER (HEMOCITOMETRO)

PRECISIÓN DEL CONTAJE

µ=𝑥 ±2 𝑥

Donde:
µ= Media poblacional
x = promedio de células contadas en un mm2
Si el promedio de células contadas es 25

µ = 25 ± 2 25

µ = 25 ± 10
 TALLER
Realice los siguientes ejercicios y establezca la abundancia total y por especie
Se cuenta una muestra de una piscina camaronera con células de más de 6
µm, obteniéndose:
Cuadro A: 18 N. longissima y 4 Navicula sp.
Cuadro B: 9 N. longissima y 6 S. tenera
Cuadro C: 5 Navicula sp y 9 S. tenera
Cuadro D: 3 N. Longissima y 2 S. tenera

Se cuenta una muestra de un cultivo de Scenedesmus quadricuada con células

de menos de 6 µm y de alta concentración, obteniéndose:
Cuadro 1x: 215 células, Cuadro 2x: 162 células, Cuadro 3x: 258 células, Cuadro
4x: 230 células y Cuadro 5x: 180 células
 DEBER
Realice los siguientes ejercicios y establezca la abundancia total y por especie
Se cuenta una muestra de una piscina camaronera con células de más de 6
µm, obteniéndose:
Cuadro A: 22 N. longissima, 2 Navicula sp., y 5 S. tenera
Cuadro B: 4 N. longissima y 1 S. tenera
Cuadro C: 15 Navicula sp
Cuadro D: 3 N. Longissima

Se cuenta una muestra de un cultivo de Scenedesmus quadricuada con células

de menos de 6 µm y de alta concentración, obteniéndose:
Cuadro 1x: 228 células, Cuadro 2x: 126 células, Cuadro 3x: 208 células, Cuadro
4x: 239 células y Cuadro 5x: 160 células

Fecha de entrega: 5 de febrero 2018