UNIVERSIDAD NACIONAL

AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD: Industrias Alimentarias

PROFESOR: Juscamaita Morales, Juan Gabriel

CURSO: Laboratorio de Microbiología

PRÁCTICA N° 5 : Identificación de Hongos Medio ambientales

GRUPO: B

MESA: 3

INTEGRANTES: -ChillJimenez, Kevin (20120434)

- MartinezQuispialaya, Sofia (20120453)

- Ruiz Llacsahuanga, Blanca (20120418)

- Valverde Ayllon, Maria Claudia (20120466)

2014
I. INTRODUCCIÓN

El mayor porcentaje que existen de los hongos viven libres y abundantes en el

suelo, vegetación, en el agua y obtienen su energía por respiración o
fermentación de materiales orgánicos solubles presentes en estos ambientes,
por ello son llamados los descomponedores. En la siguiente práctica se realizó
la observación de los diversos géneros de hongos que se pueden encontrar en
el ambiente de la Universidad, en el cual se expusieron placas Petri con Agar
Saboraud, como nutriente para el desarrollo de los hongos captados en el aire.
Cabe resaltar que en el aire no se desarrollan estos microorganismos sino que
se cargan en él entre polvo y gotitas de agua.
Algunos de los géneros más comúnmente aislados del aire son Penicillium,
Aspergillus, Rhizopus, Mucor y Cladosporium, entre otros.
La gran mayoría de hongos se reproducen por esporulación. Cuando la espora
se encuentra en un medio nutritivo adecuado, se hincha y germina emitiendo
uno o más tubos germinativos que se alargan distalmente hasta constituir
filamentos delgados y largos que se denominan HIFAS, las cuales pueden
ramificarse después.
En algunas especies se forman septas a lo largo de la hifa, quedando entonces
dividida en pequeños compartimentos como una caña de bambú llamándose
entonces HIFA SEPTADA, otras veces no hay septación y el protoplasma fluye
continuamente a lo largo de la hifa, describiéndose entonces como HIFA NO
SEPTADA ó CENOCITICA. En la mayoría de los hongos las hifas son
septadas. A medida que las hifas se siguen dividiendo se forma un crecimiento
algodonoso o filamentoso de hifas entrelazadas llamado MICELIO. Estas
fueron las características observadas en el microscopio.
De todos los géneros que se encontraron en las placas se eligieron dos para
cultivarlos en cámara húmeda, el cual es un sistema esterilizado que consta de
una placa Petri conteniendo un pedazo de papel filtro en forma circular y una
varilla en forma de U la cual soporta las láminas porta y cubreobjetos.
Finalmente se realizaron dos observación a los cultivos a 48 y 96 horas de
realizada la siembra.
II. MATERIALES Y MÉTODOS
Se necesitó:
- Aislamientos de hongos medio ambientales en placas de Agar
Saboraud
- Laminas porta y cubreobjetos
- Asa de Kölle o estilete
- Mechero de alcohol.
- Dispositivo para cultivo en cámara húmeda
- Agua destilada Estéril

Para el ejercicio 1

- Se dejaron las placas Petri expuestas al ambiente por un tiempo de 5

minutos aproximadamente. Las placas se abrieron en los baños del
módulo azul y otro en el restaurant EL POINT.
- Se incubaron las placas en el laboratorio en una estufa a 30°C por 6
días.

Para el ejercicio 2

- Utilizando el asa de Kölle, se picó una de las colonias y se extrajo una

fracción muy pequeña de micelio
- En forma aséptica se depositó esta fracción sobre la porción de agar
dispuesta en el portaobjeto de la cámara húmeda.
- Con ayuda de una pinza estéril se cubrió cuidadosamente la
preparación con la lamina cubre objetos.
- Se humedeció el papel filtro de la placa con agua destilada estéril.
- Se incubó la placa a temperatura ambiente (20-25°C)
- Se examinó diariamente al microscopio la lámina sembrada hasta
verificar el completo desarrollo del hongo.
- Con ayuda de un Manual de identificación de Hongos, se determinó el
género correspondiente.
III. RESULTADOS Y DISCUSIONES

-Placa Petri “Baño del módulo Azul”

Se obtuvo un total de 30 colonias, de las cuales 18 eran de color negro, 1 era
roja, 10 eran cremas, 1 era blanca. El resto de colonias no se pudieron
identificar, además se observaron colonias de bacterias invadiendo la placa.

-Placa Petri “Restaurant EL POINT”

Se obtuvo un total de 32 colonias, de los cuales 4 eran negras, 20 eran negras,
7 eran cremas, y una estaba aislada, era blanca.

Figura 1: Curvularia sp Figura 2: Placa Petri: R. POINT

Figura 3: Placa: “Baños M. Azul” Figura 4: Placa: Tacho del M. Azul

Macroscópicamente, se pudo observar que los hongos del genero Penicillium
son filamentosos de apariencia y de color blanco, algunos presentaban
diversos colores en la parte central, esto es debido a las esporas que se han
formado y que son propias de cada especie.
Los Cladosporium encontrados son filamentosos, planos y poseían colores
amarillo y verde oscuro.
Los de genero Aspergillus presentaban apariencia algodonosa, eran de color
blanco, algunas presentaban esporas, las cuales se localizaban en casi todo el
hongo y además les daban colores negro y gris.
Microscopicamente, se pudo observar que los géneros Penicillium,
Cladosporium y Aspergillus presentaban micelio vegetativo y sus respectivas
conidias.

Comparando la figura 1 versus el anexo 1, se pueden identificar las conidias de

los hongos conocidos como Curvularia sp., los cuales tienen conidios
multicelulares, con septos transversales solamente (MIER,T;
TORIELLO,C;ULLOA, M. 2002)

Revisión a 48 horas:

Se encontró que el hongo ya había generado ramificaciones de hifas, aun no

se podía decidir qué genero era pero si podíamos diferenciar que era septado
(Figura 5).

Figura 5: Hongo extraido de placa de tacho M.azul

 Revisión a 96 horas:

En esta imagen (Figura 6), se logra identificar algunas estructuras

reproductivas y esporas, lo cual confirma un éxito en el sembrado y además
permitió identificarlo.

Figura 6: hongo extraído de la Figura 7: hongo extraído de la

muestra del baño M. azules muestra de R. POINT

Para la identificación de hongos es necesaria la observación de sus

estructuras somáticas y reproductivas. Mediante la técnica de cámara húmeda
y/o aislamiento es posible inducir la aparición de estas estructuras. La
observación de las características de las estructuras producidas y el uso de
claves taxonómicas son necesarios para determinar el género y la especie del
hongo patógeno (Carrillo, 1996).

IV. CONCLUSIONES

 Los hongos están presentes en cada lugar donde uno se encuentre, en

forma de esporas de diferentes tipos de estos, por ello se pudo estudiar
cada uno de estos encontrados.
 El aislamiento de los hongos permite el mejor estudio de estos y la
determinación de estos, ya que no se presentaran contaminaciones que
afecten al mismo hongo.
  Se pudo determinar el crecimiento continuo y la diferenciación en
tiempos periódicos.

V. CUESTIONARIO

1. Haga una descripción morfológica de 5 géneros de hongos del medio

ambiente

PENICILLIUM. Este género se caracteriza por

formar conidios en una estructura ramificada
semejante a un pincel que termina en células
conidiógenas llamadas fiálides. En la figura 8 se
esquematizan los tipos de conidióforos del
género Penicillium, cuyas ramificaciones se
ubican formando verticilos. Si hay sólo un
verticilo de fiálides el pincel es monoverticilado.
Las ramificaciones de un pincel poliverticilado Figura 8: Aspecto de penicilios.

sonramas, rámulas, métulas y fiálides. Los conidios generados en fiálides suelen

llamarse fialoconidios para indicar su origen. En la fiálide, al dividirse el núcleo, se
extiende simultáneamente el extremo apical que luego se estrangula separando a la
espora recién formada. Se llama conectivo a la porción de pared que une entre sí a los
conidios permitiendo la formación de cadenas, y en algunas especies se aprecia
claramente con el microscopio óptico

Las colonias de Penicillium son circulares si no hay impedimento alguno para su

crecimiento, con un borde neto muchas veces sin fructificación y mostrando el color
del micelio. Éste es generalmente blanco, pero en algunas especies es amarillo,
anaranjado, púrpura o pardo claro. La superfice de la colonia madura, o sea con sus
conidios formados, puede ser: aterciopelada, ligeramente algodonosa o con pequeños
haces (fascículos) de conidióforos. En unos pocos casos los haces miden varios
milímetros (coremios) con el extremo constituido por las cadenas de esporas
(CARRILLO- penicillium)
ASPERGILLUS. El color es la principal
característica macroscópica para la identificación de
los grupos de aspergilos. Poseen distintos tonos de
verde, pardo, amarillo, blanco, gris y negro. Las
cabezas conidiales presentan bajo el microscopio
cuatro formas básicas: globosa, radiada, columnar o
claviforme (figura 9) y a simple vista las más
grandes suelen parecer diminutas alfileres sobre el
substrato.

El volumen de medio vaciado en la caja de Petri

influye sobre el diámetro de las colonias y otras Figura 9: Aspecto de
características macroscópicas por ejemplo, en aspergillus.
Czapek-Levadura, un espesor mayor hace que A. flavus produzca más esclerocios y
el reverso de la colonia sea más obscuro mientras A. terreus esporula menos. Un
volumen mayor de Malta-Glucosa mejora el crecimiento micelial de A. terreus y A.
versicolor en detrimento de la esporulación. (CARRILLO- aspergillus)

FUSARIUM. La forma y tamaño de las esporas es la

característica principal para el reconocimiento de los
fusarios. Las esporas están dispersas en el micelio aéreo o
en esporodoquios o masas limosas (pionotos). Los
macroconidios son curvados, pluriseptados, con una célula
apical más o menos puntiaguda y en muchas especies con
una célula basal en forma de pie (Figura 10)

Las colonias de los distintos fusarios que crecen moderada

a profusamente, tienen diversos colores (blanco, rosado
pálido, rojo, anaranjado, púrpura, celeste, verde aceituna
Figura 10: Aspecto de fusarium
o pardo), especialmente en el el reverso de la colonia,
excepto pardo obscuro o negro. El micelio es ralo o denso, ya sea algodonoso, como
un fieltro o con una zona central de funículos, pero en algunos casos es limoso. Hay
fusarios con pionotos de color anaranjado. Los pigmentos que difunden en el agar
suelen variar de color o tono con el pH. Algunas especies presentan zonas
concéntricas de distinta morfología macroscópica debido a la secuencia luz –
oscuridad (CARRILLO- fusarium)
ALTERNARIA Los conidios de Alternaria tienen septos transversales y longitudinales
y se los conoce como dictiosporas, además son pardos y picudos. La especie A.
infectoria tiene un estado perfecto que pertenece al género Pleospora. Éste forma
pseudotecios sobre el tallo de cereales o hierbas con ascas bitunicadas cilíndricas en
los lóculos del estroma, dentro de las cuales hay 8 ascosporas provistas de septos
transversales y longitudinales. La especie predominante en Argentina es A. alternata

A. alternata forma colonias algodonosas, elevadas, con micelio gris verdoso y esporos
negro parduzco. A. infectoria tiene colonias pardas aceituna a negro parduzco, chatas
y algodonosas, a veces con fasciculos y esporulación moderada mostrando el micelio
gris y con frecuencia un pigmento soluble verde amarillento. Otras especies casi no
presentan esporulación sobre este medio (CARRILLO- alternaria)

CURVULARIA. Hifas septadas dematiáceas.Conidióforos rectos, cafés, multicelulares,

simples o ramificados, doblados en__los puntos donde se originan las conidias (célula
conidiógena tipo porógena), con crecimiento proliferativo simpodial.__Conidias de 8.14
x 21-35 µm, dematiáceas, multicelulares, elipsoidales, curvadas en la célula central,
con 3 a 4 septos__transversales.Cultivo deCurvularia spp. Colonias algodonosas, de
color blanco que se torna verde oliva. (TANGARIFE,2011)

2. Los nombres genéricos de muchos hongos son derivados de características

morfológicas. ¿De Cuáles derivan los nombres Penicillium, Aspergillus y
Rhizopus?

Penicillium El nombre deriva del término latino “penicillus”, en referencia a las

ramificaciones que se producen en los extremos de los conidióforos dando lugar a una
estructura semejante a un pincel. (PATIÑO 2009)

Aspergillus proviene de “aspergere”= diseminar. El hongo fue bautizado así debido a

la fragilidad de su conidióforos, de los que se desprenden las esporas con gran
facilidad. (GARROCHO 1995)

Otra fuente dice que el nombre de Aspergillus tiene su origen en el nombre latino
“aspergillum” y hace referencia a la forma del conidióforo maduro, mecanismo de
reproducción asexual del género parecido a un aspersor de agua bendita. (PATIÑO
2009)

Rhizopus proviene del griego rhíza “raíz” y pous “pie”. Esta palabra describe la forma
de los conidiófors del hongo y de los seudópodos de la mayoría de las amibas de vida
libre (pie en forma de raíz) (GARROCHO 1995)
En el caso de Rhizopusstolonifer proviene del griego rhíza (raíz) y poûs (pie) y del latín
stolo-onis (vástago, retoño) y fero (portar) que significa en el pie de la raíz lleva un
vástago (REV IBEROAM MICOL. 2002)

3. Existen diferencias entre los hongos a nivel de crecimiento y diferenciación

del micelio? Explique.

No se presentan diferencias morfológicas en estas etapas ya que en el nivel de

crecimiento las hifas son la forma característica de los hongos filamentosos; estás
conectan a la enorme cantidad de células vegetativas que constituye a estos
microorganismos, estos hifas son estructuras tubulares microscópicas, de diámetro y
longitud característicos, dependientes de la especie y las condiciones del medio;
dichas estructuras tubulares se encuentran formadas por quitina como el componente
principal, que las hacen lo suficientemente fuertes como para atravesar la pared
celular de las plantas (REYES, I. 2006).

Según GONZÁLES, M. (2005) la diferenciación de micelio se da a consecuencia del

incremento en las ramificaciones de las hifas, lo que genera un aumento en el
número de ápices y produce el incremento de la biomasa del hongo, por lo cual la
diferencia solo se da en la diferentes ramificaciones que presenta cada hongo, más
no en la morfología.
VI. BIBLIOFRAFIA:

 ÁNGEL, D. 2006. Evaluación de técnicas de conservación para hongos

filamentosos y levaduriformes en el cepario de la pontificia universidad
javeriana. Tesis PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA. Colombia.
 CARRILLO L. Los hongos de los alimentos y forrajes. Penicillium.
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/05htextopenicilios.pdf
 CARRILLO L. Los hongos de los alimentos y forrajes.Aspergillus.
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/04htextoaspergilos.pdf
 CARRILLO L. Los hongos de los alimentos y forrajes. Fusarium
http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/06htextofusarios.pdf
 CARRILLO L. Los hongos de los alimentos y forrajes.
Alternariahttp://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/07htextoalternaria.pdf
 GARROCHO C. 1995. El lenguaje de la infectología. Las palabras y su
origen. Tomado de:
http://books.google.com.pe/books?id=bsYMB5DbPmgC&pg=PA138&lp
g=PA138&dq=rhizopus+griego&source=bl&ots=bI-
kOYdku0&sig=pNF08qo7DaBNYj9ik9yVbbvcYJA&hl=es&sa=X&ei=L75
dU4SKKMfgsASDwoHwAg&ved=0CEEQ6AEwAw#v=onepage&q=penic
illium&f=false
 GONZÁLES, M. 2005. Estudio de los mecanismos implicados en la
homeostasis de materiales pesados en el hongo formador de micorrizas
arbusculares glomus intraradices. Tesis Universidad de Granada
Consejo Superior de Investigaciones científicas.
 MIER,T; TORIELLO, C; ULLOA,M. 2002. Hongos microscópicos,
saprobios y parásitos: Métodos de laboratorio. Primera edición. Editorial
universidad autónoma metropolitana. México
 PATIÑO B. 2009. Técnicas básicas de Microbiología Observación de
hongos filamentosos.
http://revistareduca.es/index.php/biologia/article/viewFile/800/816
 REV IBEROAM MICOL. 2002. Rhizopusstoloniferhttp://hongos-
alergenicos.reviberoammicol.com/files/038.PDF
  REYES, I. 2006. Difusión y Crecimiento Microbiano de Aspergillus niger
sobre un Medio Sólido Tesis UNIVERSIDAD AUTÓNOMA
METROPOLITANA.
 TANGARIFE,V. 2011. Curvularia sp. Escuela de Microbiología
Universidad de Antioquia
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/resource/view.php?i
npopup=true&id=100837

VII. ANEXOS

Anexo 1: Conidios de curvularia.

Fuente: MIER,T . 2002

Anexo 2: Caracteristicas macroscopicas, microscopicas y niveles de
seguridad de las cepas a evaluar en su mantenimiento.

Fuente: ÁNGEL, D. 2006