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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

PRIMER LABORATORIO DEL CURSO MICROBIOLOGÍA – SA323K

DAVILA HUALPA LUIS – 20162647D

DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS

Lima, Perú
2018
Contenido
RESUMEN .............................................................................................................................. 3
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................... 4
OBJETIVOS ............................................................................................................................ 5
MARCO TEÓRICO ................................................................................................................ 6
BACTERIAS ........................................................................................................................ 6
Características Generales. ........................................................................................... 6
Nutrición y Crecimiento bacterianos. ..................................................................... 7
Clasificación de las bacterias. .................................................................................. 8
Respiración de las bacterias. ................................................................................... 8
HONGOS........................................................................................................................... 10
Características Generales. ......................................................................................... 10
Clasificación de los Hongos. ...................................................................................... 11
Respiración de los hongos. .................................................................................... 12
MEDIOS DE CULTIVO.................................................................................................... 14
RESULTADOS: .................................................................................................................... 17
DISCUSION DE RESULTADOS ....................................................................................... 26
CONCLUSIONES ................................................................................................................ 27
RECOMENDACIONES ....................................................................................................... 28
CUESTIONARIO .................................................................................................................. 29
FUENTES DE INFORMACIÓN.......................................................................................... 35
ANEXO .................................................................................................................................. 36
APENDICE ............................................................................................................................ 37

2
RESUMEN

Con el objetivo de dar a conocer los principales aspectos que han de tenerse en
cuenta para la conservación de microorganismos, se presenta una comunicación
breve. En ella se expone la importancia de los microorganismos para la sociedad,
los objetivos de un buen método de preservación y los criterios a considerar para la
elección de la(s) técnica(s) más apropiada(s).

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INTRODUCCIÓN

Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el


desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un
cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que
los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias. Los
microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en
condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una
amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes
para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e
hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de
crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre
otros.

4
OBJETIVOS

1. Aprender el correcto manejo de los instrumentos y equipos del laboratorio


para el experimento correspondiente.

2. Preparar y conocer en qué medios de cultivos se desarrollan ciertos


organismos.

3. Evidenciar la presencia de diversos tipos de microorganismos, dependiendo


de las condiciones del entorno al que se somete.

4. Conocer las características de las colonias bacterias desarrolladas en los


medios de cultivo.

5. Describir los factores que afectan al desarrollo de microorganismos, en


específico de las bacterias y hongos, ya sea el agar nutritivo y el agar
sabouraud, para esto hay dos procedimientos a seguir.
 En el procedimiento A, determinar las características observadas en
cada una de las placas de agar nutritivo, expuestas a diferentes medios.
 En el procedimiento C, identificar el cultivo de hongos desarrollado en
las placas de agar sabouraud, expuesta a diferentes ambientes.

5
MARCO TEÓRICO
Los ambientes capaces de albergar vida microbiana reflejan el amplio espectro de la
evolución de estos organismos. Se han encontrado especies que viven a
temperaturas comprendidas entre el punto de congelación y el punto de ebullición
del agua, en agua salada y en agua dulce, en presencia y en ausencia de aire.
Algunos han desarrollado ciclos de vida que incluyen una fase de latencia en
respuesta a la falta de nutrientes. Los microorganismos se hallan capacitados para
acometer una extensa gama de reacciones metabólicas y adaptarse a muchos
ambientes diferentes. Por su poco peso pueden ser transportados por las corrientes
de aire y estar en todas partes, pero las características del ambiente determinan
cuáles especies pueden multiplicarse.

BACTERIAS
Las bacterias son organismos microscópicos,
unicelulares y procariotas, a veces provistos de
órganos locomotores llamados cilios y flagelos.
Poseen una pared celular compuesta de
peptidoglicano que les sirve como protección.
Son organismos cosmopolitas y con una gran
diversidad de formas, funcionan como reguladoras
en los ambientes, produciendo oxígeno y fijando
nitrógeno y carbono, degradando materia orgánica
en descomposición y controlando las poblaciones
de organismos ya que producen enfermedades. Fig. 1 Bacteria

Características Generales.
 Constan de material genético, ADN
circular, llamado nucleoide, embebido en el
citoplasma.
 Plásmidos.
 Ribosomas.
 Membrana plasmática.
 Pared celular.
 Cápsula (glucocalix).
 Pili
 Apéndices locomotores (cilios y flagelos).
Fig.2 Partes de una bacteria

6
Nutrición y Crecimiento bacterianos.
Las bacterias necesitan de un aporte energético para desarollarse.
· Se distinguen distintos tipos nutricionales según la fuente de energía
utilizada: las bacterias que utilizan la luz son fotótrofas y las que utilizan los
procesos de oxirreducción son quimiótrofas. Las bacterias pueden utilizar un
sustrato mineral (litótrofas) u orgánico (organótrofas). Las bacterias
patógenas que viven a expensas de la materia orgánica son
quimioorganótrofas.

· La energía en un sustrato orgánico es liberada en la oxidación del mismo


mediante sucesivas deshidrogenaciones. El aceptor final del hidrógeno
puede ser el oxígeno: se trata entonces de una respiración. Cuando el
aceptor de hidrógeno es una sustancia orgánica (fermentación) o una
sustancia inorgánica, estamos frente a una anaerobiosis.

· Además de los elementos indispensables para la síntesis de sus


constituyentes y de una fuente de energía, ciertas bacterias precisan de
unas sustancias específicas: los factores de crecimiento. Son éstos unos
elementos indispensables para el crecimiento de un organismo incapaz de
llevar a cabo su síntesis. Las bacterias que precisan de factores de
crecimiento se llaman "autótrofas".

· Se puede medir el crecimiento de las bacterias siguiendo la evolución a lo


largo del tiempo del número de bacterias por unidad de volumen. Se utilizan
métodos directos como pueden ser el contaje de gérmenes mediante el
microscopio o el contaje de colonias presentes después de un cultivo de una
dilución de una muestra dada en un intervalo de tiempo determinado.

· Igualmente se utilizan métodos indirectos (densidad óptica más que técnicas


bioquímicas).

· Existen seis fases en las curvas de crecimiento. Las más importantes son la
fase de latencia (que depende del estado fisiológico de los gérmenes
estudiados) y la fase exponencial, en la que la tasa de crecimiento es
máxima.

7
Clasificación de las bacterias.

Esta identificación se realiza a base de modelos, agrupados en familias y especies


en la clasificación bacteriológica. Las bacterias se reúnen en 11 órdenes:

 Las eubacteriales, esféricas o


bacilares, que comprenden casi
todas las bacterias patógenas y
las formas fotótrofas.

 Las pseudomonadales
(Pseudomonae y
las Spirillacae).

 Las espiroquetales
(treponemas, leptospiras).

 Las actinomicetales
(micobacterias, actinomicetes).

 Las rickettsiales.

 Las micoplasmales.

 Las clamidobacteriales.

 Las hifomicrobiales.
Fig 3 Clases de bacterias
 Las beggiatoales.

Respiración de las bacterias.


Las bacterias poseen respiración celular aerobia y anaerobia, en el aeróbico caso
utilizan el O2 debido a que poseen las enzimas y sistemas multienzimáticos
involucradas en la cadena oxidativa asociada a la membrana plasmática, esta
membrana en las aerobias se invagina formando el MESOSOMA, destinado a la
respiración de las bacterias, en el anaeróbico no pueden utilizar el O2 atmosférico,
siendo anaerobias obligadas o facultativas ( pueden en condiciones favorables
utilizar el O2 atmosférico).

Las bacterias que son utilizadas en la Industria son las fermentadoras, que son
utilizadas en Biotecnología, como las bacterias que provocan la fermentación de la
leche cultivada o las utilizadas en la elaboración del Yogurth, la especie
Lactobacilus casei utilizada en la elaboración del ACTIMEL para reforzar la flora
intestinal y las defensas naturales.

8
Las bacterias y el medio ambiente.

Las bacterias desempeñan un papel importante en el reciclado de muchos


elementos y compuestos químicos en la naturaleza. En ausencia de dichas
actividades bacterianas, la vida en la Tierra no sería posible. Las basuras y los
desperdicios nos inundarían si las bacterias no acelerasen la descomposición de las
plantas y animales muertos.
Como resultado de su actividad, los restos de sustancias orgánicas de las plantas y
los animales se descomponen en partículas inorgánicas. Este mecanismo es una
fuente importante de alimento para las plantas.
Además, las leguminosas enriquecen el suelo al incrementar el contenido de
nitrógeno gracias a la ayuda de la especie Rhizobium radicicola y de otra bacteria
que infecta las raíces de las plantas y origina nódulos de fijación de nitrógeno. El
proceso fotosintético en que se basan las plantas fue, casi con certeza, desarrollado
en primer lugar en las bacterias.
Importancia de las bacterias.
A menudo desconocemos la vital relación que hay entre todos los seres que
coexisten y menospreciamos la función de alguno de ellos, e incluso en ocasiones
alteramos el equilibrio natural de los ecosistemas creyendo que de esta manera
hacemos lo correcto. La importancia de las bacterias es fundamental para mantener
el equilibrio del que hablamos.
Si bien algunas son responsables de causar enfermedades, la mayoría nos proveen
muchos beneficios, ya que cuando están en perfecto equilibrio, las bacterias
fermentan los residuos de nuestra dieta, transforman la energía, producen ácidos
grasos, nos protegen de las bacterias que nos enferman incluso estimulando
nuestras defensas o formando barreras, producen la vitamina B y K y colaboran
evitando la pérdida de minerales en nuestro cuerpo.
Su acción fuera de nuestro organismo es igual de importante, pues colaboran con la
biodegradación de los residuos, son vitales para fertilizar la tierra e incluso para
combatir ciertas plagas.
Podemos concluir entonces que su acción benéfica o perjudicial dependerá del
estado de equilibrio o desequilibrio del medio en el que se desenvuelven todos los
organismos, incluso nosotros.

9
HONGOS
Los hongos no son plantas ni
animales, aunque se parezcan en
algunas de sus características tanto a
las unas como a los otros. A las
plantas, por ser organismos
sedentarios que se encuentran fijos a
un sustrato y, mientras están vivos, no
cesan de crecer.
A los animales, pues, aunque las
células de los hongos poseen pared
como las de las plantas, las paredes
celulares fúngicas son ricas en quitina,
la misma sustancia que hace duro el
esqueleto externo de los insectos.
En realidad, los organismos que
conocemos como hongos tienen
diferentes orígenes en el árbol de la
vida, razón por la cual se distribuyen
Fig. 4 Hongos
en tres distintos reinos. La mayoría,
los más familiares y reconocibles,
conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungi o Eumycota). Otros se ubican
en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoa, como es el caso de los
hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan ciertos mohos
acuáticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado
Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscópicas de curiosa
simetría.
Características Generales.
Son plantas talofitas sin clorofila y, por lo tanto, heterótrofas. Viven parásitos,
saprofitos o simbióticos. El tallo suele estar formado por filamentos llamados hifas.
El aparato vegetativo se denomina micelio. Se reproducen, casi siempre, por
esporas, que pueden ser exógenas o endógenas. Pero el aparato esporífero puede
ser de cuatro tipos:
 Conidios o esporas exógenas en forma de rosario producidas por gemación
en el extremo de unahifa (Penicillium).
 Esporangios o masas de esporas endógenas que se forman también en el
extremo de una hifa (Mucor).
 Basidios son células especiales que originan por gemación esporas
exógenas -basiodiosporas- (en número de cuatro) (Champiñón).
 Ascas o sea células especiales productoras de esporas endógenas
ascosporas- (en número deocho) (Cornezuelo).

10
Fig. 5 Partes de hongos

Clasificación de los Hongos.


Ascomycota
Es el grupo más grande. Estos hongos poseen formas muy variadas: de copa,
botón, disco, colmena y dedos, entre otras. La característica principal, además de su
forma, es la presencia de estructuras reproductoras microscópicas llamadas ascas,
que dan origen a las esporas. Las ascas están formadas por una célula
especializada con forma de saco en cuyo interior se forman las esporas. A las
esporas producidas por los ascos también se les llama ascosporas.

Basidiomycota
Incluye aquellos hongos con forma de sombrilla, de coral, las orejas de palo, los
gelatinosos, globosos y algunas levaduras, entre otros. También incluye los que
tienen aspecto polvoriento o como manchas y crecen sobre diversas estructuras de
las plantas (flores, frutos, hojas, tallo o raíces).
A nivel microscópico su característica principal es la presencia de estructuras
reproductoras especializadas o basidios, las cuales dan origen a las esporas pero
en forma externa, generalmente en grupos de cuatro, aunque en algunas especies
pueden encontrarse dos y seis esporas por basidio. Las esporas se conocen como
basidiósporas.
Chytridiomycota
Grupo formado principalmente por hongos acuáticos microscópicos, aunque algunos
pueden crecer también sobre materia orgánica en descomposición u organismos
vivos como gusanos, insectos, plantas y otros hongos. En este caso, las esporas,
llamadas "zoosporas", poseen flagelos que les permiten moverse en medios
líquidos.
Zygomycota

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Compuesto por hongos microscópicos que pueden desarrollarse sobre materia
orgánica en descomposición, aunque también se pueden encontrar en el tracto
digestivo de algunas especies de artrópodos, como los insectos.

Fig. 6 Clasificación de los hongos

Respiración de los hongos.


Algunos hongos tienen respiración anaeróbica que se realiza sin presencia del
oxígeno libre (lo toman de algún compuestos) y otros tienen respiración aeróbica.
De los microorganismos aeróbicos estrictos se encuentran a los Estreptomicetos,
que son hongos microscópicos productores de antibiótico. También son aeróbicos la
mayoría de los hongos filamentosos, como el Penicillum Notatum, productor de la
penicilina.
Las LEVADURAS son microorganismos facultativos que pueden respirar o
fermentar (anaerobio). El metabolismo anaeróbico, como la fermentación, es menos
eficiente que la respiración, ya que la primera no aprovecha toda la energía de las
moléculas como los azúcares. Algunos productos, como por ejemplo el alcohol
etílico, son excretados por la levadura como producto de desecho, ya que en
ausencia de oxígeno este producto no puede ser aprovechado en su totalidad.
Los hongos y el medio ambiente
Los hongos son organismos eucariontes y saprótrofos, es decir que se alimentan de
materia orgánica muerta: restos de plantas y animales, sustancias de desecho,
productos sintéticos y cualquier elemento soluble que difunda en el medio.
Necesitan compuestos carbonados ricos en energía elaborados por otros
organismos; son descomponedores por excelencia cumpliendo un papel muy
importante en los ciclos de los nutrientes junto con las bacterias, actinomycetes y
protozoos.
Cualquier especie fúngica es capaz de descomponer sólo ciertos compuestos
orgánicos (celulosa, quitina, queratina, lignina, proteínas, hidrcarburos, etc.) y un

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cierto número de microorganismos incluyendo a bacterias y protozoos, son
requeridos para llevar a cabo la completa descomposición del residuo, existiendo
una secuencia que depende de sus habilidades nutricionales.
Algunas especies inician el proceso de descomposición, pero su actividad se
detiene ante la acumulación de determinados metabolitos (productos del
metabolismo) o por la incapacidad de proseguir el desdoblamiento por falta de
enzimas adecuadas, siendo reemplazadas por otros que continúan y terminan el
proceso.
Asimismo, los hongos pueden vivir a expensas de tejidos vivos de un organismo,
absorbiendo azúcares y aminoácidos simples de las células vivas del hospedante
(biótrofos), por lo que ocasionan enfermedades; o bien le causan la muerte por
toxinas o la destrucción de tejidos por enzimas y luego utilizan la materia orgánica
(necrótrofos).
También pueden intercambiar sustancias asociándose con otros organismos
(simbiosis), tales como cianobacterias o algas verdes para formar los líquenes, o
pueden encontrarse en el suelo vinculados con raíces de plantas superiores,
formando micorrizas.
Reproducción de los hongos.
Los hongos se reproducen sobre todo por medio de esporas, las cuales se
dispersan en un estado latente, que se interrumpe sólo cuando se hallan
condiciones favorables para su germinación. Cuando estas condiciones se dan, la
espora germina, surgiendo de ella una primera hifa, por cuya extensión y
ramificación se va constituyendo un micelio. La velocidad de crecimiento de las hifas
de un hongo es verdaderamente espectacular: en un hongo tropical llega hasta los 5
mm por minuto. Se puede decir, sin exagerar, que algunos hongos se pueden ver
crecer bajo los propios ojos.
Las esporas de los hongos se producen en esporangios, ya sea asexualmente o
como resultado de un proceso de reproducción sexual. En este último caso la
producción de esporas es precedida por la meiosis de las células, de la cual se
originan las esporas mismas. Las esporas producidas a continuación de la meiosis
se denominan meiosporas.
Como la misma especie del hongo es capaz de reproducirse tanto asexual como
sexualmente, las meiosporas tienen una capacidad de resistencia que les permite
sobrevivir en las condiciones más adversas, mientras que las esporas producidas
asexualmente cumplen sobre todo con el objetivo de propagar el hongo con la
máxima rapidez y con la mayor extensión posible.
El micelio vegetativo de los hongos, o sea el que no cumple con las funciones
reproductivas, tiene un aspecto muy simple, porque no es más que un conjunto de
hifas dispuestas sin orden. La fantasía creativa de los hongos se manifiesta sólo en
la construcción de cuerpos fructíferos, los cuales, como indica el nombre, sirven
para portar los esporangios que producen las esporas.
TIPOS DE REPRODUCCION ASEXUAL
1) Artrosora - ejm: Geotricum

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2) Blastoospora – ejm: Levadura
3) clamidiospora – ejm: Candida Albicans
4) conidiospora – ejm: Penicilum/Aspergilus
5) Esporangiospora – ejm: Rhizopus

TIPOS DE REPRODUCCION SEXUAL


1) Ascomicetes – ejm: Morchella/Neurospora
2) Basidiomicetes – ejm: Amanita
3) Cigomicetes – ejm: Mucos/Rhizopus

MEDIOS DE CULTIVO
Crecimiento Microbiano
Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del número de
microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de
un único microorganismo que denominaremos ciclo celular, sino al demográfico de
una población.
El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos
los individuos de dicha población. Los cultivos de microorganismos de los que
hemos hablado son asincrónicos puesto que en ellos cada microorganismo se
encuentra en un punto diferente del ciclo celular.
Cultivo de Microorganismos
El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones físicas,
químicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada.
En general, podemos distinguir cultivos líquidos y sólidos en función de las
características del medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la
disponibilidad de nutrientes en el medio.
Métodos de aislamiento
El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayoría
de los casos, mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. El
crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran número de ellas a
partir de una única célula inicial de forma que, tras un periodo de incubación en las
condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple
vista y formada por individuos iguales (un clon bacteriano).
Sin embargo, no todos los microorganismos presentes en las muestras ambientales
son cultivables (microorganismos no cultivables). Esto es debido a dificultades
intrínsecas en el cultivo (microorganismos parásitos de otros), al desconocimiento
de los requerimientos específicos de cultivo, y a la existencia de grupos de

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microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder sobrevivir (casos
de sintrofía por ejemplo).
Se estima que en sólo en torno al 1% de las bacterias del suelo al 0,1 - 0,01 % de
las bacterias marinas son cultivables.

Factores físicos y químicos que influyen en el crecimiento


1.- Temperatura:
Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si
estudiamos la variación de la velocidad de crecimiento en función de la temperatura
de cultivo, podemos observar una temperatura mínima por debajo de la que no hay
crecimiento; a temperaturas mayores se produce un incremento lineal de la
velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo hasta que se alcanza la
temperatura óptima a la que la velocidad es máxima.
Por encima de esta temperatura óptima, la velocidad de crecimiento decae
bruscamente y se produce la muerte celular.
La falta de crecimiento a temperaturas muy bajas se debe a la reducción de la
velocidad de crecimiento por la reducción de la velocidad de reacción y al cambio de
estado de los lípidos de la membrana celular que pasan de ser fluidos a cristalinos
impidiendo el funcionamiento de la membrana celular.
2.- Actividad de agua:
Se denomina actividad de agua a la relación entre la presión de vapor de agua del
substrato de cultivo (P) y la presión de vapor de agua del agua pura(P0). El valor de
la actividad de agua está relacionado con el de la humedad relativa (HR). El valor de
la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible
metabólicamente.
Cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con una actividad de agua
demasiado baja, su crecimiento se detiene. Esta detención del crecimiento no suele
llevar asociada la muerte del microorganismo, sino que éste se mantiene en
condiciones de resistencia durante un tiempo más o menos largo.
3.- pH:
Es un parámetro crítico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de
microorganismo sólo puede crecer en un rango estrecho de pH fuera del cual
mueren rápidamente. El pH intracelular es ligeramente superior al del medio que
rodea las células ya que, en muchos casos, la obtención de energía metabólica
depende de la existencia de una diferencia en la concentración de protones a
ambos lados de la membrana citoplásmica.
El pH interno en la mayoría de los microorganismos está en el rango de 6.0 a 7.0.
Los rangos de pH tolerables por diferentes tipos de microorganismos son, también,
distintos. Hay microorganismos acidófilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros alcaló-
filos que toleran pH=10.0
4.- Potencial redox:

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Nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, esto es: sus
características oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el
potencial redox, aunque no el único, es la concentración de oxígeno [O2].
Hay microorganismos que requieren ambientes oxidantes para crecer, mientras que
otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos de
microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de condiciones
oxidantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o
ausencia de oxígeno para que se produzca el crecimiento.

5.- Esterilidad del medio:


Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la
aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos
medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que
utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante).
Microbiología del aire
El aire es una mezcla de gases, entre los que encontramos fundamentalmente N2 y
O2: también está compuesto por vapor de agua, CO2, SO2, etc. Y partículas sólidas
en suspensión.
En el aire encontramos la mayoría de microorganismos que se hallan en el suelo y
otros ambientes, y debido a su carácter contaminante, el estudio microbiológico del
mismo reviste gran importancia desde el punto de vista sanitario y agroindustrial.
El aire de por sí, no es un medio de cultivo para los microorganismos, sin embargo,
estos se suspenden con partículas de tierra o acuosas. Partículas menores a 0.1
mm quedan en suspensión en el aire y por lo tanto, los microbios también lo hacen,
e irán cayendo de acuerdo al diámetro de la partícula, densidad, etc.
La diversidad de microorganismos presentes en el aire es abundante, en forma
general podemos decir que en el aire se encuentran, asociados a las partículas en
suspensión, bacterias, hongos, esporas, virus y algas, entre otros.
Análisis del aire:
Una forma sencilla de analizar la composición microbiológica del aire es mediante la
apertura de cajas de Petri con medio de cultivo estéril en el lugar de estudio, un
determinado tiempo, a fin de que se depositen sobre la superficie las partículas
suspendidas. Luego se cierran las cajas y se colocan en estufas de cultivo para su
examen posterior.
Esta aproximación es una forma de conocer el grado de limpieza y/o efectividad del
control de microorganismos frente a un determinado producto, tal como sucede en
las plantas de selección, acondicionamiento y empaque de citrus y frutilla, en donde
se aplican fungicidas para determinados hongos, la presencia de los mismos en
cajas abiertas en ciertas áreas es indicadora de mal manejo sanitario o bien de baja
dosis de fungicida o resistencia al mismo

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RESULTADOS:
Procedimiento A
Grupo 01:
Tabla1: Colonias de Bacterias desarrolladas en placas en medio Agar Nutritivo.Tabla 1
Grupo Placa N°1 Placa N°2 Placa N°3 Placa N°4
Estéril Estéril Estéril NO Estéril

1 Ambiente baño varones Sector A Sector B Sector Sector D NO abrir NO abrir


FIA(2do piso) C
Pelo Huella I. NO
I. Estéril estéril

N° de 12 4 35 1 1 3 2
Colonias

X=6mm , x=1mm, Diámetro X=0.8mm X1=2m X1=1mm X1=1mm(3) X1=1mm(2)


X=3mm, x=1mm, 1mm (33) m
X=2.8mm, x=2mm,
X=3mm
Tamaño X=4mm, x=1.4mm,
(2)
X=1mm, x=2mm,
X=2mm, x=1.5mm

Margen Liso Liso Liso Liso Liso Liso Liso


o borde

Elevación 9 convexas 3 planas Todas son Todas son plana plana plana plana
planas planas

Pigmentaci Todas de color crema Todos son Todos son crema Crema Blanco humo Blanco humo
ón de color de color
blancos crema

C. opacas opacas opacas opaca opaca Opacas 1 translucido 1


Óptico opaco
Grupo 03:

Tabla 2: Colonias de Bacterias desarrolladas en placas en medio Agar Nutritivo

Grupo Placa N°1 Placa N°2 Placa Placa N°4


N°3
Estéril Estéril NO Estéril
Estéril

Ambiente baño Sector A Sector B Sector C Sector D NO abrir NO abrir


varones FIA
1 Pelo Huella I. Estéril I. NO
(2do piso) estéril

N° de 52 53 24 2 6 29 37
Colonias

x=1mm(31), x=1mm(16) X=1mm(4) x=2mm x=1mm(1) x=1mm(8), x=1mm(10),


x=2mm(14) x=2mm(14), x=2mm(202),
Tamaño x=0,5mm(37) X=0,5mm x=2mm(5) x=3mm(3), x=3mm(5), x=4mm(2)
x=3mm(7) (20) x=4mm(4)

Margen o Liso(26), Lobular(13) Liso(53) Liso circular(3) Ondulante Ondulante Liso(21), Liso, Lobular,
borde Lobular(16)
Ondulante(13) Ondulante Ondulante
irregular(21) Ondulante(9)

Elevación Planas Todas son planas Todas son planas Planas Planas Planas
planas
convexa convexa convexa

Pigmentació Blancas(36), Todos son de color Blanco tenue Blanco tenue Blanco tenue Blanco Blanco
n Amarillas(14) blancos
Naranja(2)

C. Óptico Opacas Opacas Opacas Translucido Translucido Opacas 1 opaco


Translucido Translucido Translucido Opacas Opacas Translucido

18
PROCEDIMIENTO B
Grupo 2
Crecimiento en Caldo Nutritivo.
Tabla3: Datos del Caldo Nutritivo

TUBO #1 TUBO #2 TUBO #3


GRUPO N°02 TUBO TUBO TUBO NO
ESTERIL/PIPETA ESTERIL/PIPETA ESTRIL/PIPETA
ESTRIL
ESTERIL NO ESTRIL

CANTIDAD DE ESCASO ESCASO ODERADO


CRECIMIENTO

DISTRIBUCION DE SEDIMENTO SEDEMINTO SEDIMENTO


CRECIMIENTO

OLOR IMPERCEPTIBLE PÚTRIDO PÚTRIDO


Grupo 2
Crecimiento en Caldo Nutritivo.
Tabla4: Datos del Caldo Nutritivo

TUBO #1 TUBO #2 TUBO #3


GRUPO N°04 TUBO TUBO TUBO NO
ESTERIL/PIPETA ESTERIL/PIPETA ESTRIL/PIPETA
ESTRIL
ESTERIL NO ESTRIL

CANTIDAD DE ESCASO ESCASO MODERADO


CRECIMIENTO

DISTRIBUCION DE SEDIMENTO SEDIMENTO SEDIMENTO


CRECIMIENTO

PÚTRIDO PÚTRIDO PÚTRIDO


OLOR

20
Procedimiento C: Cultivo de hongos en Agar Sabouroud

Grupo 1

Tabla6: Datos de la exposición de la placa

Ambiente Baño de hombres 1 piso


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/ Tiempo 15minutos / 5días (120 horas)
de cultivo
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas Flujo constante de personas
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
N° de hongos observados 6
Tipos de hongos Aspergillus(2), alternarías(2),
levadura(2)
Alternaría: opacos de color verde
Características
oliva y consistencia lanosa en los
bordes , borde circular y elevación
convexa
Rhizopus: colonia algodonosa de
color blanca que alcanza el borde de
la placa Petri.
Aspergillus: opacas de color verde
oliva y filamentoso, borde circular
liso y elevación convexa

Características del baño de hombres 1 piso:


 El piso se encontraba húmedo al momento de exposición de la placa.
 La muestra se encontraba al costado del baño.
 Flujo constante de personas en el baño, específicamente 10 personas
mientras estuvo la placa.
 La puerta estaba abierta.
 Con poca iluminación.
 Sin ventanas.
 No ingresaba la radiación.

21
Grupo 2
Tabla7: Datos de la exposición de la placa

Ambiente Biblioteca de la FIA


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/ Tiempo 15minutos / 2días (48 horas)
de cultivo
Tipo de Agar Agar sabouraud
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
N° de hongos observados 21
Tipos de hongos
Alternaria sp (2)
Levaduras(15)
Rhizopus(4)
Características Las colonias de hongos unas
predomina sobre las demás.
Se ve un color blanco en todos.

Características de la biblioteca de la FIA:


 La muestra se encontraba al centro de la biblioteca, en un cubículo de esta.
 En la biblioteca se encontraban 15 personas, al 20% de su capacidad.
 Sombre en su totalidad.
 No ingresaba la radiación.

22
Grupo 3
Tabla8: Datos de la exposición de la placa
Ambiente Laboratorio de micro
Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/ Tiempo de 15minutos / 7 días (48 horas)
cultivo
Tipo de Agar Agar sabouraud
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
N° de hongos observados 23
Tipos de hongos
Alternaria sp (2)
Rhizopus(3)
Características Las altenarias sp son de color negro con
marrón en cambio los rhizopus son de
color blanco como algodón

Características del Laboratorio de micro:


 30 personas mientras estuvo la placa.
 La puerta estaba abierta.
 Con poca iluminación.
 Sin ventanas.
 No ingresaba la radiación.
Grupo 4
Tabla9: Datos de la exposición de la placa

Ambiente Centro de Estudiantes


Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/ Tiempo 15minutos / 7días
de cultivo
Tipo de Agar Agar sabouraud
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
N° de hongos observados 8
Tipos de hongos
Aspergillus niger (4)
Levaduras(2)
Alternaria(2)
Características Cabezas negras, largas y
esporuladas, conidias negras.
Las alternarias presentan un color
marrón.

Características del Centro de Estudiantes:

 Iluminación (1 ventana)
 2 Personas
 Poca ventilación

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Grupo 05:
Tabla 10: Datos de la exposición de la placa
Ambiente Laboratorio de química
Día de exposición 20 de marzo 2018
Hora 13:15-13:30 pm
Tiempo de exposición/ Tiempo 15minutos / 6días
de cultivo
Tipo de Agar Agar sabouraud
Cantidad de personas 1 ( el encargado de la muestra )
Temperatura 25°C ( Temperatura de ambiente)
N° de hongos observados 5
Tipos de hongos
Aspergillus Llayur(5)
Levaduras(70)

Características Las colonias crecen rápido de 3 a5


días, predomina el color blanco.

Características del Centro de Estudiantes:

 Había mucha ventilación


 La placa se ubicó cerca a la puerta.
 Había iluminación.

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DISCUSION DE RESULTADOS
 Procedimiento A
Grupo uno la exposición del cultivo fue de los días reglamentarios para lograr
observar que hongos y levaduras hay. En cambio en el grupo 3 la exposición del
cultivo fue demasiada por ese factor en la placa se pudo observar una cantidad
mucho mayor de hongos mucho mayor de hongos.
 Procedimiento B
En el procedimiento B el grupo dos, en el tubo número uno la cantidad de
crecimiento debió ser nula, pero en este caso salió escaza lo cual nos indica que él
tuvo y pipeta no estaba bien esterilizado igualmente para el grupo cinco.

 Procedimiento C
En este procedimiento las colonias que más rápido crecieron fueron las que
estuvieron en el laboratorio de microbiología y el baño de hombres, lo cual nos
indica que esos sectores carecen de limpieza.

26
CONCLUSIONES

 Procedimiento A
- Se comprobó que los microorganismos se transportar en el aire, es
debido a ello que se expusieron las placas a diferentes ambientes.

- Notamos que no todas las especies bacterianas tienen pigmentación, ya


que algunas veces es retenido dentro de las células mientras que en
otros se excreta y colorea el medio de cultivo.

- Se comprobó la existencia de una gran variedad de microorganismos, en


este caso bacterias y hongos que se encuentran en el ambiente así
como las condiciones necesarias para obtener su desarrollo
(temperatura, humedad, ventilación, etc).

 Procedimiento B.
- Una prueba de que las bacterias son anaerobias, es la aparición de
sedimentos en los tubos de prueba.

 Procedimiento C
- Se utilizó el Agar Saboraud, para aislar hongos de ciertas levaduras ya
que es útil para el crecimiento de hongos patógenos.

27
RECOMENDACIONES

 Procedimiento A
- Tener sumo cuidado a la hora de manipular la materia.
- Lograr una esterilización optima en los proceso
- Al notar la formación de hongos y bacterias en los ambientes de la
facultad, se deberían tener los ambientes más limpios, para evitar
enfermedades.

 Procedimiento B.
- Tener sumo cuidado a la hora de manipular la materia.
- Lograr una esterilización optima en los proceso
- Antes de llevar a la incubadora, se debe esperar a que enfríe el caldo
nutritivo de manera que se pueda desarrollar hongos.

 Procedimiento C
- Tener sumo cuidado a la hora de manipular la materia.
- Cronometrar el tiempo de exposición de las muestras.
- Transportarlos con cuidado.

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CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
Materia orgánica: La materia orgánica que se encuentra sobre el suelo
influye en la riqueza microbiana del mismo, por lo que así será la riqueza del
aire, en dependencia de la fertilidad del suelo.
Humedad y precipitaciones atmosféricas: La atmósfera húmeda contiene
menos microbios que la seca, debido a que las gotas de humedad los hacen
bajar al suelo. Igualmente, después de las precipitaciones atmosféricas,
lluvias y nevadas, el aire en gran medida se purifica de microbios. A su
estancia contribuye un tiempo seco prolongado.
Corrientes de aire: Un ambiente activo contiene más bacterias que otro
seco más sosegado, por otra parte, las bacterias permanecen en el aire
durante lapsos variables, según la velocidad de las corrientes. La
importancia epizoótica de la transmisión por el aire contaminado aumenta
durante la ubicación conjunta de un gran número de animales en un área
pequeña y con poco espacio, sobre todo cuando hay ventilación deficiente,
la estabulación de los animales con las cabezas situadas unas frente a las
otras y con comederos centrales facilita esta vía de transmisión.
Tamaño de las partículas: La permanencia de los microorganismos en el
aire depende del tamaño de las partículas donde se fijan, depositándose con
más rapidez las adheridas a las partículas mayores.
Luz solar, temperatura y desecación: El destino de los microorganismos
del aire depende entre otros factores atmosféricos, de la luz solar, pues la
acción directa de los rayos solares tiene efectos perjudiciales en los
microorganismos; igualmente la temperatura y la desecación directamente
relacionadas con la luz solar (con los rayos infrarrojos), actúan como agentes
antimicrobianos importantes.
2. Describa cuatro enfermedades transmitidas por el aire
Asma
La polución del aire es una de las causas conocidas para el asma. Para
aquéllos que ya sufren de ataques de asma, la polución puede agravar la
condición y causar los ataques. Además, la gente que está sana puede
desarrollar esta condición tras años de trabajar o vivir en un área con un aire

29
muy contaminado. Este tipo de asma es conocido como "asma laboral" ya
que es el resultado de trabajar en una región particularmente contaminada.

Obstrucción pulmonar crónica (COPD, sus siglas en inglés) es una


condición asociada a la frecuente inflamación pulmonar e infecciones tales
como la bronquitis y neumonía. El fumar es una de las principales causas del
COPD, pero la prolongada exposición a un aire muy contaminado puede
causar esta enfermedad, también.

Enfisema
El enfisema es una enfermedad comúnmente asociada con el fumar, y éste
causa al menos un 80% de las enfermedades, pero la polución del aire en el
lugar de trabajo también puede causarla. Los contaminantes en el aire o el
humo se acumulan en los pulmones y dañan la capa de moco que recubre a
los pulmones y los mantiene sanos, llevando a inflamaciones, infecciones y
bloqueos.

Cáncer de pulmón
La contaminación del aire puede contribuir al cáncer pulmonar,
particularmente en personas que hayan crecido en áreas con una gran
cantidad de contaminantes en el aire, ya que la exposición a estas
substancias en los años de desarrollo puede tener un gran impacto en los
pulmones. La acumulación de pequeñas partículas del aire en los pulmones
puede llevar a crecimientos cancerígenos, y la polución del aire ha sido
determinada que puede aumentar el riesgo del cáncer de pulmones tanto
como el humo de segunda mano.

Enfermedades cardíacas
La contaminación del aire ha sido mostrada como un factor en el desarrollo
de las enfermedades cardíacas, incluyendo ataques al corazón y paros
cardíacos. Ha sido demostrado que el humo de segunda mano aumenta las
incidencias de los ataques cardíacos, y el monóxido de carbono y el dióxido
de nitrógeno son también contribuyentes. La contaminación del aire ha sido

30
demostrada causante de las enfermedades del corazón; cuando los
contaminantes entran a los pulmones y penetran en los torrentes
sanguíneos, producen inflamaciones y aumentan el ritmo cardíaco.
3. ¿Qué grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades
respiratorias?
La atmósfera no tiene una microbiota autóctona pero es un medio para la
dispersión de muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y
hongos), procedentes de otros ambientes. Algunos han creado adaptaciones

especializadas que favorecen su supervivencia y permanencia. Los


microorganismos dispersados por el aire tiene una gran importancia biológica
y económica. Producen enfermedades en plantas, animales y humanos,
causan alteración de alimentos y materiales orgánicos y contribuyen al
deterioro y corrosión de monumentos y metales. (M. C. DE LA ROSA, 2002)

4. Describa las principales características de Rhizopus nigricans, alternaría,


aspergillus, penicillum y sacchanomyce cerevisiae.
Rhizopus nigricans
Rhizopus nigricans es un tipo de moho inofensivo, hallable en crecimiento
en pan, conocido por "moho del pan". Es un miembro del género Rhizopus,
que se compone de hongos con esporangios columnares hemiséricos
aéreos, anclados al sustrato por rizoides. Puede causar infecciones si no se
tiene cuidado. Puede causar reacciones concretas alérgicas. Rhizopus
nigricans posee esporas que flotan alrededor en el aire.
En microbiología industrial, este moho es usado en
la bioconversión de progesterona en 11-alfa-Hidroxiprogesterona, una etapa
en la producción de cortisona.

Alternaría
La Alternaria es un hongo ascomiceto —esto es, del filo de las
Ascomycotas—. Las diferentes especies de este género son uno de los
mayores patógenos de plantas.
Son conocidas comúnmente como alérgenos en los humanos, y, dentro de
casa, pueden causar rinitis alérgica o reacciones de hipersensibilidad que, en
ocasiones, pueden producir ataques de asma. Sus esporas son las
causantes de la alergia, y, al igual que los pólenes, son transportadas por el

31
aire hasta la nariz o bronquios del alérgico, causando la rinitis o asma.
Existen esporas de alternaria todo el año y, por lo tanto, causan patología
alérgica perenne; aunque varíe la intensidad según las estaciones, suele
haber más en primavera y verano.
También aparecen infrecuentemente entre las infecciones oportunistas en
personas inmunodeprimidos, como por ejemplo, en personas afectadas por
el sida.
Hay cuarenta y cuatro especies conocidas, pero puede haber cientos de
ellas aún por descubrir. Son una especie omnipresente en el ambiente y
parte fundamental en la flora de hongos en cualquier sitio. Son agentes
activos en la descomposición.
Sus esporas están en suspensión en el aire, sobre el suelo, sobre los objetos
y en el agua, tanto fuera, como dentro de casa. Las esporas se pueden
distribuir de una en una, o en largas cadenas, y pueden crecer en colonias
visibles, de color negro o gris.
Penicillum
Es un género de hongos conocidos como mohos verdes o azules; de
algunas especies se obtiene la penicilina. El micelio del hongo, conjunto de
filamentos tubulares llamados hifas, crece en la superficie de frutas, pan,
quesos y otros alimentos. La reproducción asexual se produce en Penicillium
mediante unas células, los conidios, que se forman en el extremo de hifas
especializadas, los conidióforos. Éstos son ramificados y en forma de
abanico. Los órganos sexuales son gametangios arrollados en hélice. La
penicilina fue descubierta por Alexander Fleming en Penicillium notatum,
pero en la actualidad se obtiene de cepas de [Penicillium chrysogenicum]
que dan mayor rendimiento. En los quesos azules, Penicillium roqueforti da
sabor, y el color se debe a sus conidios.
Sacchanomyce cerevisiae

32
5. a) ¿Cuáles son los ingredientes del agar nutritivo caldo nutritivo y agar
Sabouraud?

Agar nutritivo

 0,5% de peptona;
 0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
 1,5% de agar;
 0,5% de cloruro de sodio;
 agua destilada;
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.

Caldo nutritivo

 0,5% de peptona;
 0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
 0,5% de cloruro de sodio;
 agua destilada;
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.

Agar Sabouraud

 0 g/L glucosa
 10 g/L pluripeptona
 15 g/L agar
 0,05 g/L [cloranfenicol]
 pH 5.6 como máximo

33
b) ¿Qué clase de nutrientes proporciona cada uno de los ingredientes?

Extracto de carne: Contiene las sustancias solubles en agua de tejidos animales,


entre ellas carbohidratos, compuestos orgánicos nitrogenados, vitaminas solubles
en agua y sales.

Peptona: Fuente principal de nitrógeno orgánico; puede contener también algunas


vitaminas y algunas veces carbohidratos, esto en relación con la clase de material
proteico digerido.

Agar: Se usa como agente solidificante de los medios de cultivo, se disuelve en


solución acuosa, gelifica cuando la temperatura baja de 45ºC; no se considera al
agar como nutriente para las bacterias.

Agar sabouraud: Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de


hongos, particularmente losasociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.).En
el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el desarrollo
demicroorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el
pH ácido,favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias. Además, al
medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de crecimiento.

34
FUENTES DE INFORMACIÓN

1. Pelczar,M. J., (1982), Microbiología / Michael J. Pelczar, Jr., Roger D. Reid,


E.C.S. Chan, Ciudad de México y México, 2a ed. en español.
2. Abrusci C, Allen N.S., del Amo A, Edge M, & MartínGonzález A. 2004b.
Biodegradation of motion picture films stocks. Journal of Film Preservation
67: 37- 54.
3. Antonioli P, Zapparoli G, Abbruscato P, Sorlini C, Ranalli G &Righetti PG.
2005. Art-loving bugs: the resurrection of Spinello Aretino from Pisa's
cemetery. Proteomics 5: 2453-2459.
4. Bastian F, Jurado V, Nováková A, Alabouvette C & SaizJimenez C. 2010.
The microbiology of Lascaux cave. Microbiology 156: 644-52.
5. Cappiteli F, Pasquarello G, Tarsitani G & Sorlini C. 2010. Scripta manent?
Assessing microbial risk to paper heritage. Trends in Microbiology18: 538-
542.
6. Cappitelli F, Zanardini E, Ranalli G, Mello E, Daffonchio D & Sorlini C. 2006.
Improved methodology for bioremoval of black crusts on hisrorical stone
artworks by use of sulphate-reducing bacteria. Applied and Environmental
Microbiology 72: 3733-3737.
7. Ciferri O. 1999. Microbial degradation of paintings. Applied and
Environmental Microbiology 65: 879-85.
8. Apellido, A. A. (Fecha). Título de la página. Lugar de publicación: Nombre de
la página web. dirección de donde se extrajo el documento (URL).
9. Desconocido, 20 de marzo. UNAVARRA. desconocido.
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.%20Cultivo%20de%2
0microorganismos.pdf
10. González, 20 de marzo. Libros laboratorio,
desconocido.https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-
cultivo-en-un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

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ANEXO

Fig. 1 Bacteria

Fig.2 Partes de una bacteria

Fig 3 Clases de bacterias


Fig 4 Hongos

Fig. 5 Partes de hongos Fig. 6 Clasificación de los hongos

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APENDICE

Para el procedimiento A

1. Vaciar cuidadosamente el agar nutritivo a las placas Petri numeradas (sin abrirlo
en su totalidad).
Petris estériles 1, 2 y 3 y la no estéril 4 como se indica en la imagen referencial.

2. Habiéndose solidificado el agar , se realiza :


 La placa N° 1 es abierta y expuesta en distintos ambientes durante 15
minutos.

 La placa N° 2 se divide en cuatro sectores :

Sector A: Pelo
Sector B: Huella digital
Sector C: Inoculador estéril
Sector D: Inoculador no estéril

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3. Las placas N° 3 y N° 4 no abrirlas.

4. Invertir las placas Petri y colocarlas en la incubadora a 37 °C aprox. por 4 o 5


días.

5. Después de haberse cumplido el tiempo de incubación, retirar y colocar en la


refrigeradora.

Procedimiento B
- En tubos caldo nutritivo estéril.

Tubo estéril + pipeta estéril


N°1 Tubo estéril + PipetaN°2
NO estéril Tubo NO estéril + Pipeta
N°3estéril

- Incubar todo a 35°C por 2 días (48 horas).

Procedimiento C
En la placa Petri estéril N°5 vertimos agar sabouraud y lo exponemos a diferentes
ambientes:

 Placa Petri G-1: Baño de hombres 1er piso


 Placa Petri G-2: Biblioteca FIA
 Placa Petri G-3: Laboratorio de Microbiología
 Placa Petri G-4: Centro de Estudiantes FIA (CEIA)
 Placa Petri G-5: Laboratorio de Química

38
Luego de ser expuestas, las placas serán dejadas cerradas en el laboratorio (T°
ambiente) por 48 horas o más dependiendo del grupo.

Diagrama de flujo

Procedimiento A Preparar el agar nutritivo en 4


tubos de ensayo.

Esperar que solidifique y llevar


Verter el agar en las placas
al ambiente establecido por 15
Petri.
minutos.

Llevar a la incubadora a una


temperatura de 37°C durante 48
horas. Retirar y llevar a la
refrigeradora.

39
Procedimiento B Preparar el caldo nutritivo en 3
tubos de ensayo.

 Tubo estéril + pipeta estéril


Pero con las siguientes
 Tubo estéril + Pipeta NO
restricciones
estéril
 Tubo NO estéril + Pipeta
estéril

Procedimiento C Preparar el agar sabouraud


en 5 tubos de ensayo.

Esperar que solidifique y llevar


al ambiente establecido por 15
Verter el agar en las
minutos.
placas Petri.

Dejar cultivar los hongos durante


72 horas a temperatura
ambiente.

40
DATOS ORIGINALES Y OBSERVACIONES
- Disolver 8gr de caldo nutritivo en 1L de agua destilada, y calentar si fuese
necesario.

- Luego, esterilizar en autoclave a 118°C durante 15minutos.

- Disolver 27gr de agar nutritivo en 1L de agua destilada, y calentar si fuese


necesario.

- Esterilizarlo en autoclave a 121°C.

- Preparar 8 tubos de agar nutritivo 15mL cada tubo.

- Preparar 6 tubos de caldo nutritivo 15mL cada tubo.

- Preparar 5 tubos de agar sabouraud 15mL cada tubo.

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