Impacto de la Obesidad y/o Sobrepeso: Evaluación Histopatológica y Anti-

obesidad de la Infusión Acuosa de la Cáscara de Cacahuate (Arachis hypogae) en

un Modelo in vivo en Ratón con Dieta Hipercalórica.
Lizbeth Hernández Jaimes.

Resumen

Como una posible alternativa contra la obesidad y el sobrepeso se evaluó una dieta
hipercalórica y las posibles repercusiones que esta pueda tener en los órganos como
corazón e hígado. Usando como base la medicina tradicional (infusión acuosa de
cascara de cáchuate) se analizó si esta es capaz de contrarrestar el daño causado por
la obesidad y sobrepeso en los órganos mencionados.

Introducción

Se estima que en México un 70% de su población padece sobrepeso y casi una tercera
parte padece obesidad, posicionándolo así como el primer país con sobrepeso y
obesidad a nivel mundial (ENSANUT, 2016).

La obesidad y el sobrepeso, son el resultado de un desequilibrio entre el consumo y

absorción de los alimentos y el gasto energético. En la mayoría de los individuos, la
obesidad aparece como una enfermedad genética y multifactorial, sin embargo, el 50%
del fenotipo obeso se debe a factores del entorno, principalmente una mala
alimentación y sedentarismo. La obesidad está relacionada a varias condiciones
debilitantes y crónicas, por lo que el desarrollo de medicamentos para mejorar o
prevenir estos padecimientos es emergente, sin embargo, su elaboración es de
elevados costos y en ocasiones deben ser considerados la eficacia y efectos adversos
que puedan provocar. Debido a ello, el uso etnomedicinal de muchas plantas, es una
opción a la que recurren muchos pacientes, por ser efectiva, económica y proveer
menores efectos secundarios.

Con el fin de analizar el impacto que ocasiona la obesidad y el sobrepeso a nivel

visceral, se evaluó a través de la técnica histológica, la acumulación de tejido adiposo
sobre los órganos corazón e hígado. Se evaluaron tres grupos experimentales (n=3) de
ratones stocks heterogéneos (Mus musculus), de los cuales, a dos de ellos se les
administró durante tres semanas una dieta hipercalórica adicionada con un 49% de
grasa (mantequilla de maní) de su alimentación habitual. La estrategia experimental de
acuerdo a los grupos de cada dieta fue la siguiente: Grupo I.- Control negativo (dieta
normal), grupo II.- Control positivo (dieta hipercalórica) y grupo III.- Experimental (dieta
hipercalórica + infusión acuosa de cascara de Arachis hypogae) 120 mg/kg de peso
corporal por día, durante 7 días.

Por medio de medidas zoometrícas (peso y perímetro abdominal) realizadas cada 72

horas, se determino el aumento de peso en los ratones. Al finalizar la parte
experimental, los ratones fueron eutanizados en cámara de CO2, y diseccionados para
la extracción de los órganos de interés. El corazón e hígado fueron perfundidos en
solución salina, y posteriormente se fijaron durante 12 horas con solución de formol al
10 %, después, se llevó a cabo la deshidratación con alcohol etílico a concentraciones
crecientes (70 a 96 %) de 6 a 24 horas; el tejido se aclaró con xilol, y se realizó la
inclusión con parafina durante un periodo de 1 a 6 horas, se realizó el desmontaje de
parafina con etanol para la realización dela microtomía. Los cortes realizados fueron de
aproximadamente 8-10 µ. Se llevó a cabo la tinción del tejido mediante la técnica de
hematoxilina-eosina, para su posterior observación microscópica. Como resultado se
pudo observar, que efectivamente la administración de la infusión acuosa de Arachis
hypogae disminuyó la adiposidad abdominal, en comparación con el grupo que no le
fue administrado dicha infusión.

Material y método
Se evaluaron tres grupos, cada uno con conformado por tres ratones el primer grupo
etiquetado como “experimental” se le administro la dieta hipercalórica (conejina +
mantequilla de maní) durante 4 semanas, posteriormente por 7 días (consumiendo aun
la dieta hipercalórica), por vía oral se trataron a los ratones con la infusión acuosa de
cascara de cacahuate. Al segundo grupo (positivo) se le administro solo la dieta
hipercalórica y al grupo “negativo se le dio una dieta normal (balanceada), por el mismo
tiempo.

Posteriormente de cada grupo de ratones, se realizo la técnica histológica que consiste

en la toma de muestra, el proceso de deshidratación y aclaración con alcoholes a
diferentes concentraciones y a distintos tiempos:

Pasos Sustancia Tiempo

(minutos)
1 Agua destilada 10
2 Alcohol 50% 45
3 Alcohol 70% 40
4 Alcohol 80% 40
5 Alcohol 85% 40
6 Alcohol 96% 40
7 Alcohol 96% 40
8 Alcohol 100% 40
9 Alcohol 100% 40
10 Alcohol-Xilol 50%-50% 40
11 Xilol 40
12 Xilol 40
13 Xilol Se queda

Inclusión y microtomía
 Se calienta la parafina y se coloca el tejido cardiaco y hepático sobre casets para
posteriormente dejarlos secar y poder proseguir a cortar en el micrótomo. Las muestras
se cortaron de 8-10 µ.

Tinción

Las muestras ya fijadas en el portaobjetos de los diferentes tipos de tejidos pasaron por
el tren de tinción con tiempos específicos cada uno para el teñido del corte histológico y
su posterior observación en el microscopio electrónico.

PASOS REACTIVO TIEMPO

1 XILOL 5 min
2 XILOL 5 min
3 ALCOHOL-XILOL 50/50 30 seg
4 ALCOHOL 100% 30 seg
5 ALCOHOL 96% 30 seg.
6 ALCOHOL 96% 30 seg.
7 AGUA DESTILADA 5 min.
8 HEMATOXILINA 2.5 min.
9 AGUA DESTILADA Entrada por salida
10 ALCOHOL ACIDO Entrada por salida
11 AGUA DESTILADA Entrada por salida
12 CARBONATO DE LITIO Entrada por salida
13 AGUA DESTILADA Entrada por salida
14 EOSINA 2.5 min.
15 ALCOHOL 96% Entrada por salida
16 ALCOHOL 96% Entrada por salida
17 ALCOHOL 100% Entrada por salida
18 ALCOHOL – XILOL 50/50 Entrada por salida
19 XILOL Entrada por salida
20 XILOL Entrada por salida

Resultados:

A) Gráfica de Peso (g) B) Medidas Zoométricas del C) Peso de Órganos y Grasa

Diámetro Abdominal (cm) Abdominal (g)
29.4 2.02
Despues de la dieta Despues de
34.8 1.9
29.8 la dieta Tejido adiposo 2.1
2.08 1.5
abdominal 1.2
Durante la dieta
29.4
35.2
29.8
Durante la
dieta
2.02

2.08
2.3 * Hígado
1.8
2.6
2.5
1
28.2 Antes de la 1.8 Corazón 0.5
Antes de la dieta 32.6 2.3 0.3
dieta
29.3 2.1
0 1 2 3
0 10 20 30 40 0 1 2 3 Dieta hipercalórica (positivo)
Dieta hipercalórica (positivo) Dieta hipercalórica (positivo) Dieta hiper/infusión (experimental)

Dieta hiper/infusión Dieta hiper/infusión (experimental) Sin dieta (negativo)

(experimental) Sin dieta (negativo)
Figura A, B, C. – Los histogramas A y B representan el promedio ± del peso en gramos y
diámetro abdominal, respectivamente, de los tres grupos de experimentación. En el histograma
A, al analizar los gráficos, se encontró una diferencia poco significativa en el grupo
Experimental después de la dieta hipercalórica y de la infusión (35.2 ± 1.4 vs 34.8 ± 1.6). El
gráfico B, muestra el mismo patrón, antes y después de la ingesta de la infusión (2.3± 1.4 vs 1.9
± 1.2 ). El gráfico C, muestra una diferencia significativa en el peso del corazón del grupo
experimental, contra el grupo positivo y negativo (1± 1.2 vs 0.5 ± 0.04 vs 0.3 ± 0.02 ). En
cuanto a la cantidad de tejido adiposo abdominal, existe una diferencia significativa entre el
grupo positivo y experimental, después de la administración de dicha infusión.

a) b) c)

Figuras A, B y C. - Mac: macrófagos, Er: eritrocitos, Lip: adipocitos, TMC: tejido muscular
cardíaco y Art: arteria. Todas las micrografías del órgano de corazón, fueron tomadas a objetivo
de 40X y los cortes fueron transversales. La fig. A muestra una hipertrofia de adipocitos y una
célula gigante de macrófagos. En cambio, la fig. B a pesar de mostrar la infiltración de
adipocitos, éstos presentan un menor tamaño. Por último, en la fig. C, no se encontró
infiltración de adipocitos.

d) e) f)
Figuras D, E Y F. - Mac: macrófagos, Er: eritrocitos, Lip: adipocitos, SIN: membrana sinusoide,
KPF: células de kupffler y VCLB: vena centrolobulillar. Todas las micrografías del órgano de
hígado, fueron tomadas a objetivo de 40X y los cortes fueron transversales. La fig. D muestra
una hipertrofia lipídica de adipocitos y una agrupación de células de Kupffler. La fig. E a pesar
de mostrar la infiltración de adipocitos, éstos presentan un menor tamaño con una deformación
en la membrana sinusoide. Por último, la fig. F presenta una vena centrolobulillar y no existe
una deformación de hepatocitos.

Discusión

El peso de los ratones no fue tan significativo en relación con la disminución de peso de
un antes y un después de la administración de la infusión acuosa, sin embargo en el
tamaño de los órganos y en el peso de los mismo se nota una gran diferencia entre los
grupos, siendo el grupo positivo el mas afectado por la adiposidad, a comparación con
el grupo experimental. En las muestras de los tejidos cardiaco y hepático se pueden
observar abundancia de macrófagos así como adipocitos muy grandes en el grupo
positivo, en el grupo experimental se observan menos macrófagos y los adipocitos de
un menor tamaño. Lo cual nos indica que posiblemente la infusión acuosa al tener una
concentración alta de polifenoles, responsables de inhibir la hormono lipasa
pancreática, la cual es esencial para la absorción de lípidos, redujo la problemática de
inflamación en el tejido adiposo por lo que hubo una disminución en el numero de
macrófagos.

Conclusión

Finalmente concluimos que, a pesar del poco tiempo que se trataron los ratones con la
cascara de cacahuate en infusión acuosa, se reflejo en las muestras al microscopio la
mejora en el estado de los tejidos de estos ratones, esto es por las propiedades
antiinflamatorias que posee Arachis hypogae, redujo el número de macrófagos en el
tejido adiposo de los órganos corazón e hígado. Por lo tanto, la cascara de cacahuate
es un posible candidato para el control y manejo de la obesidad.