Universidad de Especialidades Espíritu Santo

FORMATO PARA PRESENTACION DE TAREAS Versión: 1.0

Código: FORM-LAB
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Nombre: Freddy Obaco Obando

TEMA: TIPOS DE CENTRIFUGACIÓN
OBJETIVO: Conocer los distintos tipos de centrifugación en el laboratorio clínico
RESUMEN
La centrifugación se utiliza para separar partículas en suspensión en el seno de un líquido
o partículas en disolución, siendo éste el caso donde se encuentran más aplicaciones.
Así, se utiliza habitualmente en biología ya que permite separar células, orgánulos
subcelulares o macromoléculas.
ANALISIS:
La centrifugación se puede llevar a cabo a escala preparativa o escala analítica. La
primera se utiliza para aislar partículas para su aprovechamiento posterior y la segunda
permite determinar propiedades físicas como la velocidad de sedimentación o el peso
molecular.
La centrifugación preparativa se utiliza para separar partículas según la velocidad de
sedimentación (centrifugación diferencial), la masa (centrifugación zonal) o la densidad
(centrifugación isopícnica). En el primer caso se obtiene un líquido sobrenadante y un
materioal sedimentado. En los otros dos casos las patículas se distribuyen en fracciones
de diferentes densidades de un fluido líquido (centrifugación mediante un gradiente de
densidades).
Hay diferentes tipos de centrífugas según el rango de velocidades de giro:
A. Centrífugas de baja velocidad, de sobremesa o clínicas. De pequeño tamaño y sin
refrigeración. Alcanzan una velocidad máxima de 5000 rpm. Son Útiles para la
separación de partículas grandes como células o precipitados de sales insolubles.
+ Las centrífugas micrófugas son una variante de las anteriores que permiten llegar
a velocidades de más de 10.000 rpm, Los volúmenes de trabajo son muy pequeños. Son
útiles en el campo de la biología molecular.
B. Centrífugas de alta velocidad. Alcanzan velocidades de entre 18.000 y 25.000 rpm.
Son refrigeradas y algunas tienen sistema de vacío para evitar el calentamiento del rotor
a causa del rozamiento con el aire. Son útiles en la separación de fracciones celulares,
pero insuficientes para la separación de ribosomas, virus o macromoléculas en general.

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C. Ultracentrífugas. Superan las 50.000 rpm, por lo que tienen sistemas auxiliares de
refrigeración y de alto vacío. Hay ultracentrífugas analíticas que permiten la obtención
de datos precisos de propiedades de sedimentación (coeficientes de sedimentación,
pesos moleculares), y preparativas, útiles para aislar partículas de bajo coeficiente de
sedimentación (microsomas, virus, macromoléculas).
Centrifugación diferencial
Es el proceso que tiene como resultado la obtención de un sobrenadante y un material
sedimentado.
Centrifugación mediante un gradiente de densidades:
Este tipo de centrifugación es un proceso mediante el cual las partículas se distribuyen
en fracciones de diferentes densidades de un fluido líquido. El método es un poco más
elaborado que la centrifugación diferencial, no obstante presenta ventajas que
compensan el trabajo añadido. La técnica permite la separación de varios o todos los
componentes de la muestra y la realización de medidas analíticas. El método de
gradiente de densidades implica la utilización de un soporte fluido cuya densidad
aumenta desde la zona superior a la inferior. El gradiente se consigue con un soluto
preferiblemente de baja masa molecular, de tal manera que la muestra a analizar pueda
ser suspendida en la solución resultante. Como solutos se utilizan la sacarosa,
polisacáridos sintéticos, derivados yodados del ácido benzoico, o sales de metales
alcalinos pesados como el rubidio o el cesio, entre otros. La muestra se deposita en la
parte superior del gradiente como una fina banda y, tras centrifugar, la separación de
los componentes de la muestra se presenta como diferentes bandas o zonas que pueden
ser separadas (o fraccionadas).
Hay dos variantes de este método, la centrifugación zonal y la centrifugación isopícnica:
Centrifugación zonal
En la centrifugación zonal la muestra a analizar se deposita en la parte superior de un
gradiente de densidades previamente formado. A causa de la fuerza centrífuga las
partículas se mueven a velocidades que dependen de la masa y sedimentan en
diferentes zonas del gradiente. La densidad máxima del gradiente no ha de exceder a la
de las partículas a separar.
Centrifugación isopícnica
La centrifugación isopícnica separa les partículas en un gradiente de densidades en
función de la densidad de las mismas. Las partículas se mueven en el gradiente hasta
que llegan a un punto donde la densidad de éstas y la del gradiente son idénticas (de

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aquí el nombre de ‘isopícnico’). En este caso, es condición fundamental que la densidad

máxima del gradiente final ha de exceder siempre a la densidad de las partículas. Por
este motivo la sedimentación final no se produce si se controlan las condiciones de
centrifugación, ya que las partículas flotan sobre un "colchón" de material que posee
una densidad superior a la de éstas. Esta técnica se utiliza, por ejemplo, para separar
partículas similares en tamaño pero de diferente densidad. En este sentido, la
centrifugación isopícnica es un método adecuadov para separar ácidos nucleicos o
diferentes orgánulos celulares.

CONCLUSIONES:
Las partículas se pueden separar en función de la velocidad de sedimentación
(centrifugación diferencial), la masa (centrifugación zonal) o la densidad (centrifugación
isopícnica). La centrifugación zonal y la centrifugación isopícnica constituyen ejemplos
de centrifugación mediante un gradiente de densidades.

FIRMA DEL ESTUDIANTE: FECHA DE ENVIO:24/04/2018

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