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Bacteriología
Unidad Temática I
PLAN 2010
Segundo año
2017-2018
1
FACULTAD DE MEDICINA
2
ACTUALIZACIÓN Y REVISIÓN DE LOS GUIONES
Visión
3
DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA
Ubicación 2° año
Duración Anual
Carácter Obligatorio
Clave 1231
4
I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2017-2018
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2017-2018
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD
TEMÁTICA (Bacteriología)
8
I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2017-2018
PRESENTACIÓN
9
PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
ÍNDICE
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2017-2018
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
2. INTRODUCCIÓN A LA BACTERIOLOGÍA
Las bacterias son células procariotas y 2.4 Clasificación. La clasificación más importante
pequeñas que solo se pueden observar con la para el médico es la que permite hacer una
ayuda del microscopio, presentan diferentes pronta y correcta identificación del
formas, carecen de núcleo y de organelos microorganismo (morfología, agrupación, tipo
celulares. Tienen estructuras únicas como la pared de tinción, identificación serológica,
celular que contiene peptidoglicano con o sin metabolismo y genética).
lipopolisacáridos. Típicamente, el cromosoma
bacteriano es solo uno y es una molécula circular 2.5 Genética bacteriana
de ADN de doble cadena que contiene 2.5.1 Replicación del cromosoma
aproximadamente 5 millones de pares de bases. 2.5.2 Información genética: genes (estructura
Las bacterias tienen ribosomas 70S que son y función: transcripción, traducción).
diferentes a los de las células eucariotas pero que 2.5.3 Mecanismos de intercambio de
realizan la misma función. Aunque las bacterias se información genética entre las
dividen por fisión binaria, han desarrollado bacterias: conjugación, transformación,
mecanismos para intercambiar información transducción.
genética, lo que les ha permitido adaptarse mejor al 2.5.4. Rearreglos cromosómicos por
medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir transferencia horizontal de genes:
en medios hostiles como en los que la presión transposones, secuencias de inserción
osmótica es muy baja o en temperaturas extremas y eventos de recombinación.
y pueden usar diversas fuentes de energía para su 2.5.5 Tipos de mutaciones, factores físicos y
metabolismo. Es indudable que el conocimiento de químicos que intervienen en la
las bacterias, desde el punto de vista genético, inducción de mutaciones.
metabólico y estructural, constituye un elemento
fundamental para poder realizar una clasificación 2.6 Metabolismo bacteriano
útil en la práctica médica, así como comprender la 2.6.1 Autótrofos, Heterótrofos,
participación de la expresión de los factores de Quimiotótrofos y Litótrofos
patogenicidad en la relación huésped – bacteria. 2.6.2 Aerobios, Anaerobios, Facultativos y
Microaerofílicos
2.1 Antecedentes históricos de la Bacteriología 2.6.3 Metabolismo fermentativo y oxidativo
2.6.4 Cultivo de bacterias. Curva de
2.2 Formas bacterianas crecimiento bacteriano.
2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos
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3.6.3 Epidemiología
3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infección emergente (huésped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisión
3.6.4 Patogénesis
3.6.4.1 Iniciación del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y síntomas
3.6.4.2 Formas clínicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infección
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
3.6.5 Participación de la respuesta inmune
en el control de la infección
3.6.6 Diagnóstico diferencial
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M. avium. Destacar la
importancia de estas
micobacterias no tuberculosas
en pacientes
inmunodeprimidos por SIDA o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cáncer pulmonar y diabetes
3.6.7 Diagnóstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopía
3.6.7.2 Cultivo
3.6.7.3 Métodos moleculares
3.6.7.4 Valoración del PPD
3.6.7.5 Radiografía de tórax
3.6.7.6 Otras técnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema de tratamiento
antifímico (Norma Oficial
Mexicana)
3.6.9 Control y prevención
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevención
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6.2 Brucella
6.2.1 Características generales 6.3.4 Patogénesis
6.2.1.1 Morfología 6.3.4.1 Iniciación del proceso
6.2.1.2 Antígenos A y M. infeccioso y desarrollo de
6.2.1.3 Diferentes especies de signos y síntomas
Brucella y especificidad de 6.3.4.2 Ciclo de vida
huésped. 6.3.4.3 Tifo epidémico y Enfermedad
6.2.2 Factores de virulencia. de Brill-Zinsser
6.2.3 Epidemiología de la brucelosis 6.3.4.4 Complicaciones
6.2.3.1 Mecanismos de transmisión. 6.3.5 Participación de la respuesta inmune
6.2.3.2 Reservorios animales en el control de la enfermedad.
6.2.3.3 Distribución mundial y estado 6.3.6 Diagnóstico diferencial
actual en México. 6.3.6.1 Brucelosis
6.2.4 Patogénesis 6.3.6.2 Fiebre tifoidea
6.2.4.1 Iniciación del proceso 6.3.7 Diagnóstico de laboratorio
infeccioso y desarrollo de 6.3.7.1 Cultivo
signos y síntomas. 6.3.7.2 Pruebas serológicas
6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones 6.3.7.3 Pruebas moleculares
clínicas agudas, subagudas y 6.3.8 Estrategias de tratamiento
crónicas. 6.3.9 Prevención y control
6.2.4.3 Complicaciones: artritis,
osteomielitis, meningitis, 6.4 Leptospira interrogans
cistitis, nefritis, 6.4.1 Características del microorganismo
orquiepididimitis, endocarditis 6.4.1.1 Estructura
e hiperesplenismo. 6.4.1.2 Antígenos
6.2.5 Participación de la respuesta inmune 6.4.1.3 Serovares de Leptospira
en el control de la infección interrogans.
6.2.6 Diagnóstico diferencial 6.4.2 Factores de virulencia
6.2.6.1 Fiebre Tifoidea 6.4.3 Epidemiología
6.2.6.2 Tifo 6.4.4 Participación de la respuesta inmune
6.2.7 Diagnóstico de laboratorio en el control de la enfermedad.
6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula 6.4.5 Patogénesis
ósea o tejidos infectados. 6.4.5.1 Iniciación del proceso
6.2.7.2 Serología: Prueba de infeccioso y desarrollo de
aglutinación con rosa de signos y síntomas
Bengala, Prueba de 6.4.5.2 Leptospirosis anictérica e
Huddleson, ELISA (detección ictérica.
de anticuerpos IgM e IgG). 6.4.6 Diagnóstico diferencial.
6.2.8 Estrategias de Tratamiento 6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y
6.2.9 Prevención y control dengue
6.4.7 Diagnóstico de laboratorio
6.3 Rickettsia prowasekii 6.4.7.1 Microscopía. Tinción con
6.3.1 Características del microorganismo Giemsa o Wright
6.3.1.1 Estructura 6.4.7.2 Cultivo
6.3.1.2 Parásito intracelular 6.4.7.3 Serología.
6.3.2 Factores de virulencia 6.4.7.4 Prueba de ELISA (detección
6.3.3 Epidemiología de antígeno) y Western blot
6.3.3.1 Enfermedad re-emergente. (prueba confirmatoria).
6.3.3.2 Distribución geográfica a nivel 6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro
mundial y en México 6.4.7.6 Empleo de biología molecular
6.3.3.3 Estación del año 6.4.8 Estrategias de Tratamiento
6.3.3.4 Condiciones favorables para 6.4.9 Prevención y control
su transmisión
6.3.3.5 Reservorio y vector
6.3.3.6 Población susceptible
6.3.3.7 Vías de transmisión
6.3.3.8 Vías de entrada
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2017-2018
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
8.6.3 Epidemiología
8.6.3.1 Prevalencia y distribución.
8.6.3.2 Población en riesgo
8.6.3.3 Factores predisponentes para
adquirir la infección
8.6.4 Patogénesis
8.6.4.1 Iniciación del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y síntomas.
8.6.4.2 Vaginosis bacteriana
8.6.4.3 Infección de vías urinarias
8.6.5 Participación de la respuesta inmune en
el control de las infecciones
8.6.6 Diagnóstico de laboratorio
8.6.6.1 Cultivo e identificación bioquímica
8.6.6.2 Citología; células clave
8.6.6.3 Criterios de Amsel
8.6.7 Diagnóstico diferencial
8.6.7.1 Candidiasis
8.6.7.2 Tricomoniasis
8.6.7.3 Vaginitis atrófica
8.6.8 Estrategias de tratamiento
8.6.9 Prevención y control
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
11.6. La resistencia antimicrobiana como factor de 11.8.5. Síndrome de shock tóxico por
surgimiento de enfermedades reemergentes. Staphylococcus aureus.
35
11.9. Enfermedades re-emergentes por bacterias:
11.9.5.Peste por Francisella tularensis.
11.9.1.Cólera por V cholerae 01
11.9.6.Tuberculosis por M tuberculosis
11.9.2.Difteria por Corynebacterium diphtheriae. multiresistente.
36
GUIONES PRÁCTICOS
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Al finalizar el curso, el alumno sabrá cuáles son los Se sugiere la participación de los profesores
procedimientos que sigue el laboratorio de titulares durante la ejecución de la práctica en el
Bacteriología, Virología, Micología y Parasitología, laboratorio.
así como el tiempo que se requiere para llegar a la
identificación completa del microorganismo.
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
PRÁCTICA No. 1
BIOSEGURIDAD
5. Evite el contacto de la boca con las manos, 6. Inunde con solución desinfectante cualquier
comer o humedecer las etiquetas con la lengua. área donde haya ocurrido un derrame de
6. Informe inmediatamente al instructor de sangre o suero. Utilice guantes, toallas de
cualquier accidente tal como cortaduras, papel o gasa para absorber el líquido, y luego
quemaduras o derrame de cultivos. realice un lavado minucioso con agua. Guarde
7. Tome todas las precauciones posibles para en una bolsa todo el material empleado
evitar estos accidentes. contaminado, para eliminarlo como material
infeccioso.
Precauciones sistemáticas de seguridad
Manipulación de desperdicios
Agujas y material de vidrio
1. Reserve algunas de las piletas del laboratorio
1. Desechar todo material de vidrio que esté para eliminar muestras de sangre y orina. No
quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes permitir el lavado de manos en estas piletas.
adecuados. 2. Eliminar en recipientes adecuados y rotulados:
2. Recoger los vidrios rotos con escobillón y pala; tubos con sangre, pipetas, puntas y agujas.
no hacerlo con la mano. 3. El material de vidrio o cortante debe ser
3. Los artículos de vidrio no deben ser arrojados a eliminado en recipientes adecuados de
la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de paredes sólidas.
desperdicios en el que se arrojan artículos de 4. Llevar estos recipientes al área de desecho
papel. con la frecuencia necesaria para evitar su
4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse acumulación.
en recipientes para agujas usadas para ser 5. Sumerja el material de vidrio contaminado en
eliminados de manera adecuada. solución desinfectante. Enjuague
5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o minuciosamente con agua y esterilícelo antes
intercambiar las agujas de las jeringas. La de usarlo otra vez.
práctica de cambiar las agujas antes de
descartar la sangre extraída de la vena dentro
de la botella de cultivo ha sido abandonada por Desarrollo de la práctica
la mayoría de los hospitales. Sesión I
1. El profesor definirá el concepto de
Manejo de muestras y derrames bioseguridad.
2. Los alumnos, en grupos pequeños, revisarán
1. Las muestras se deben de recolectar en las normas a seguir en el laboratorio.
recipientes sólidos, con cierres adecuados para 3. El profesor dirigirá la discusión sobre:
evitar derrames y pérdidas. Todas las a) Manipulación de agujas y material de
muestras deben ser consideradas vidrio.
potencialmente peligrosas. b) Manejo de muestras y derrames
2. Las cortaduras en las manos deberán ser c) Manipulación de material infecto-
adecuadamente protegidas con tela adhesiva. contagioso.
Si la actividad laboral implica el manejo de
sangre, suero, plasma u otras muestras, se NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
debe de usar guantes desechables. están dirigidas al manejo adecuado de
3. Si una muestra presenta evidencia de rotura, productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
derrame o suciedad dentro del recipiente, Tóxico, Inflamables, Biológicos-infecciosos
ponerse guantes. (CRETIB) y Radioactivos con el fin de
4. Las muestras contaminadas con sangre deben evitar riesgos.
ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes.
Notificar este hecho como peligroso para la
salud.
5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y
jabón varias veces al día, en particular después
de manipular las muestras y antes de retirarse.
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
Resumen de la práctica
El profesor, junto con los alumnos, elaborará las
conclusiones sobre las medidas de seguridad que
se deben seguir en el laboratorio de Microbiología y
Parasitología.
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PRÁCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
Objetivos generales
Mencionar las partes fundamentales del
microscopio y sus funciones. 7. Si los objetivos de poco aumento se
manchan con aceite, limpiarlos
Señalar el manejo y los cuidados que se deben inmediatamente con papel seda.
tener con el microscopio compuesto. 8. Si el aceite se ha secado o endurecido en
las lentes, se puede limpiar con papel
Observación de preparaciones. humedecido con xilol. Tener precaución, ya
que al emplear un exceso de xilol podría
Antecedentes disolver el cemento que une las lentes.
El microscopio es un instrumento de gran utilidad 9. Las lentes de los objetivos, el condensador
en el estudio de la Microbiología y Parasitología; y los oculares han sido cuidadosamente
puede ser simple, cuando su sistema se basa en ajustados en la fábrica de origen, por lo
una lente biconvexa o compuesto cuando utiliza tanto, no deben ser desarmados por el
dos sistemas de lentes que se encuentran observador. Recuerde que el poder de
separados, consiguiendo con ello un mayor resolución del microscopio depende de que
aumento. Entre los microscopios compuestos el todas las lentes estén centradas y a la
más usado es el de luz, el cual emplea fotones de distancia correcta unas de otras.
luz visible para formar imágenes. Sin embargo, el 10. Los objetivos, el condensador y los
tipo de luz empleada y cómo se manipula puede oculares pueden limpiarse con agua
variar. Los tipos de microscopios de luz más destilada; la lente de inmersión y la parte
comunes son: campo brillante, campo oscuro, superior del condensador con xilol, pero
contraste de fase y de fluorescencia. con poca cantidad, humedeciendo
El microscopio de luz brillante se encuentra ligeramente un lienzo y pasándolo
constituido por tres sistemas: suavemente por la superficie del lente. No
usar este solvente en exceso, porque las
1. Óptico. lentes vienen montadas con bálsamo de
2. Mecánico Canadá, el cual puede disolverse.
3. Iluminación 11. Mantener seca y limpia la platina del
microscopio. Si se derrama sobre ella algún
Cuidados que hay que tener con el microscopio líquido, secarla con un paño. Si se mancha
con aceite, limpiarla con un paño
1. El microscopio debe guardarse protegido de la humedecido con xilol.
humedad y el polvo. 12. La superficie del microscopio se puede
2. Al trasladarlo, debe sujetarse de su brazo y del limpiar con un lienzo humedecido con agua.
soporte o base. La cremallera del tornillo macrométrico
3. Antes de usarlo, debe cerciorarse de que las debe limpiarse ocasionalmente con una
lentes accesibles (objetivos, oculares y pequeña cantidad de aceite o grasa
condensador) estén limpias, de no ser así, hay delgada. El tornillo micrométrico no
que limpiarlas con papel seda especial para necesita aceite.
evitar su deterioro. 13. No inclinar el microscopio cuando se está
4. No tocar nunca las lentes. trabajando con aceite de inmersión. Este
5. No dejar el portaobjeto puesto cuando no se puede caer al sistema mecánico de la
está usando el microscopio. platina donde es difícil limpiarlo, o puede
6. Al terminar la observación con el objetivo de gotear al condensador y ahí solidificarse.
inmersión debe retirarse el aceite utilizando 14. Cuando no se usa el microcopio, guardarlo
papel seda o un lienzo suave, limpio y seco, cubierto y en su caja.
porque de no hacerlo se reseca, dificultando su
limpieza y causando deterioro del lente.
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
Desarrollo de la práctica
Material
1. Microscopios compuestos.
2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos,
hongos y artrópodos de importancia
médica.
3. Tubo con cultivo de paja
4. Portaobjetos
5. Cubreobjetos
6. Aceite de inmersión
7. Papel seda
8. Disco
9. Pipetas Pasteur, bulbo
Método
1. El profesor explicará la diferencia entre una
preparación en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PRÁCTICA No. 3
INTRODUCCIÓN A LA BACTERIOLOGÍA
rectosigmoidoscopía. En casos de infecciones
de vías urinarias, la muestra útil es la orina
Objetivos generales recolectada en condiciones de esterilidad y, en
Establecer un marco de referencia en el estudio de la infecciones localizadas, como es el caso de
Bacteriología clínica. pústulas, forúnculos, fístulas, otitis, lesiones
oculares, etc., el producto a tomar será el
Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio de exudado de esas lesiones.
bacteriología para la realización de tinciones y cultivos En caso necesario, se empleará un medio de
bacteriológicos, empleados en la identificación de una transporte que permitirá sobrevivir a la bacteria
bacteria. antes de ser sembrada en un medio de cultivo.
B). Aislamiento: Proceso necesario para identificar al
Explicar la importancia que tiene el laboratorio de microorganismo. Para lo cual, se emplean
bacteriología clínica, en la determinación del diagnóstico diferentes medios de cultivo, que proporcionarán
etiológico correcto para establecer la terapia los requerimientos nutritivos necesarios
antimicrobiana específica. (carbono, nitrógeno, electrolitos, agua y, en
algunos casos, sustancias de enriquecimiento
Antecedentes como es la sangre) para el crecimiento y
El cuerpo humano se encuentra formado por 1014 reproducción de la bacteria.
células. De las que solo, aproximadamente, el 10% son Atendiendo a su estado físico, los medios de
humanas. El resto son microorganismos asociados. cultivo pueden ser líquidos, semisólidos y
Desde el momento de su nacimiento, el individuo sólidos. Los sólidos son empleados en el
establece una relación con microorganismos del aislamiento y caracterización de la morfología
ambiente que formarán la microbiota. Dependiendo del colonial del microorganismo.
sitio del cuerpo será el tipo de microorganismo que lo De acuerdo con su utilidad práctica, pueden ser
colonice. La microbiota es benéfica para el humano, selectivos, no selectivos, enriquecidos y para
salvo en el momento en que se presente algún factor de aislamiento especializado. Los selectivos son
oportunismo que favorezca el crecimiento inusual de los aquellos que promueven el desarrollo de ciertas
microorganismos y produzca daño. Por lo tanto, en la bacterias, inhibiendo otras. En tanto que los no
mayoría de los casos, esta interacción es benéfica. selectivos están libres de inhibidores lo cual,
El conocimiento de la microbiota permite diferenciar los permiten el desarrollo de una gran cantidad de
microorganismos patógenos de los no patógenos. Por bacterias.
otro lado, debido a que se han incrementado los factores Entre los empleados para la identificación se
de oportunismo que favorecen las patologías por estos cuenta con los medios diferenciales.
microorganismos, las infecciones que producen Métodos de aislamiento y observación de la
representan, en la actualidad, un problema de morfología colonial.
diagnóstico. La técnica de aislamiento más frecuentemente
En el estudio bacteriológico de un caso clínico, se sigue usada es por estrías en medio de cultivo sólido
la secuencia siguiente: en placa de petri. Con este procedimiento se
logra obtener un cultivo puro. Es decir, se logra
A). Toma de productos: Es importante el conocimiento separar un tipo de bacteria de otras presentes
del sitio de donde se tomará la muestra. A las en la misma muestra clínica. También se cuenta
bacterias se les puede aislar prácticamente de con el método de dilución con asa calibrada
cualquier sitio (piel, mucosas y secreciones), sin (cultivo de orina) o la de medición con pipeta
que estén produciendo procesos patológicos. En graduada.
otras ocasiones, se presenta la necesidad de
aislar bacterias a partir de tejidos lesionados o La inspección de las características
productos patológicos. En el caso de macroscópicas de las colonias (tamaño, forma,
infecciones de vías respiratorias, se tomará elevación, margen, color, superficie, densidad,
exudado faríngeo, nasal o muestras obtenidas consistencia, producción de pigmento y hemólisis
por lavado bronquial o esputo. En enfermos del en caso de haberse empleado agar sangre) se
tracto gastrointestinal, se tomará materia efectúa con el examen visual del desarrollo en la
fecal o bien muestras con hisopo estéril por vía superficie de las placas de agar. (Figura 1)
rectal o directamente utilizando
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
Resumen de la práctica:
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PRÁCTICA No. 4
CULTIVO DE MICROBIOTA BACTERIANA DE PIEL
Objetivos generales
Mencionar la microbiota normal de la piel y Material
mucosas. 1. Hisopo estéril
Identificar los principales agentes causantes de 2. Placa de agar nutritivo
infecciones oportunistas. 3. Tubo con agua destilada o solución salina
Revisar los recursos de laboratorio para el isotónica (SSI)
diagnóstico de las infecciones por microorganismos 4. Asa para siembra
oportunistas. 5. Mechero
6. Equipo para tinción de Gram
Antecedentes 7. Portaobjetos
Vivimos inmersos en un mundo de bacterias, las 8. Aceite de inmersión
que se encuentran por todos lados y nosotros no 9. Microscopio
somos la excepción. 10. Papel seda
Desde las pocas horas después del nacimiento 11. Gel para lavado de manos
somos colonizados por bacterias que vivirán con
nosotros durante toda la vida, las cuales colonizan Método
la piel, tracto digestivo, vías respiratorias altas, El profesor dividirá al grupo en tres secciones:
oídos y algunos otros tejidos constituyéndose en la manos sin lavar, manos lavadas y manos con gel
llamada microbiota normal o habitual. Su antibacterial.
permanencia en estos sitios, hacen que el huésped
se vea beneficiado por los nutrientes que algunas Sesión I
de ellas fabrican, por la inhibición del desarrollo de
microorganismos patógenos, porque estimulan el Manos sin lavar
desarrollo del sistema inmune y por otras funciones 1. Humedecer el hisopo estéril con el agua o
benéficas que realizan. Sin embargo, sabemos que SSI estéril.
algunas de estas bacterias pueden representar un 2. Con el hisopo humedecido, tomar la
riesgo para nuestra salud, principalmente en las muestra bacteriológica de los pliegues
siguientes situaciones; al multiplicarse de forma interdigitales, dorso y palmas.
anormalmente alta, al encontrarse en un sitio 3. Sembrar con el hisopo en un extremo de la
diferente al que les corresponde y cuando existen placa con agar nutritivo
bacterias en un sitio normalmente estéril. 4. Realizar el sembrado para obtener colonias
Como es de suponer, el cuerpo es un delicado aisladas.
ecosistema en donde viven simbióticamente un 5. Rotular la caja de Petri
gran número de bacterias y el huésped humano 6. Incubar a 35-36° C, durante 24-48 horas.
mantienen una relación en donde estas bacterias
representan un riesgo potencial cuando el equilibrio Manos lavadas
se rompe. El número y el tipo de bacteria pueden 1. Realizar el aseo de manos con agua y
ser modificados por diferentes factores como son jabón de manera tradicional
la temperatura, la humedad, el pH y la presencia de 2. Frotar las manos enjabonadas durante 30
determinados nutrientes o de sustancias segundos
inhibitorias. Algunos ejemplos de cuando se rompe 3. Humedecer el hisopo estéril con el agua o
este equilibrio pueden ser la presencia de diversos SSI estéril.
tipos de infecciones; caries, acné, etc. 4. Con el hisopo humedecido, tomar la
muestra bacteriológica de los pliegues
interdigitales, dorso y palmas.
Desarrollo de la práctica 5. Sembrar en la placa con agar nutritivo para
Sesión I: aislamiento de colonias.
El profesor de laboratorio conjuntamente con los 6. Rotular la caja de petri
alumnos revisará el tema. 7. Incubar a 35-37° C, durante 48 horas.
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PRACTICA No.5
INFECCIONES DE VÍAS RESPIRATORIAS
Objetivos generales b) Posibles diagnósticos clínicos.
Establecer un marco de referencia para el estudio c) Productos biológicos empleados para el
de las infecciones bacterianas de vías respiratorias. diagnóstico de laboratorio.
Identificar los principales agentes etiológicos que
producen infecciones de vías respiratorias. Material
Revisar los recursos de laboratorio para el 1. Placas de agar sangre, agar sal manitol y
diagnóstico de las infecciones bacterianas de vías tubos con Biggy
respiratorias. 2. Hisopos estériles
3. Abatelenguas estériles
Antecedentes 4. Asas bacteriológicas
Entre los microorganismos involucrados en 5. Mecheros
procesos infecciosos de vías respiratorias, se 6. Equipo de tinción de Gram
encuentra; Streptococcus pyogenes también 7. Aceite de inmersión
llamado Estreptococo beta hemolítico del grupo A 8. Papel seda
de Lancefield. Así como estreptococos del grupo C,
D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium Método
haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria 1. Se realizará exudado faríngeo de acuerdo a las
gonorrhoeae, Corynebacterium diphtheriae, indicaciones del profesor.
Haemophilus influenzae tipo b, Bordetella pertussis, 2. Rotar el hisopo empleado en el exudado faríngeo
Borrelia vincenti, Fusobacterium sp y en las placas de agar sangre y agar sal manitol,
Mycobacterium tuberculosis. Es importante así como en el tubo de Biggy.
mencionar que en caso de pacientes 3. Los medios de cultivo inoculados se incubaran a
inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella 37°C
pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. 4. Las lecturas se harán a las 24-48 horas de
Entre las infecciones por virus tenemos una alta incubación.
participación de Adenovirus, Epstein-Barr, 5. Realizaran frote con el hisopo empleado y tinción
Coxsackie A, Herpes simple 1 y 2, Virus de la de Gram.
Influenza A y B, Parainfluenza, Coronavirus y
Citomegalovirus. Sesión II
Las muestras que se emplean en infecciones de
vías respiratorias incluyen, exudado faríngeo, Material.
exudado nasal, exudado nasofaríngeo, lavado
nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras. 1. Placas sembradas por los alumnos.
2. Placas demostrativas
En el caso del exudado faríngeo, su indicación se 3. Asas bacteriológicas
encuentra dada con el fin de realizar la detección 4. Mecheros
del microorganismo involucrado en el proceso 5. Porta objetos
infeccioso de la región. Sin embargo, debemos 6. Equipos de tinción de Gram
considerar que siendo una región altamente 7. Aceite de inmersión
colonizada por microorganismos que forman parte 8. Papel seda
de la microbiota, la realización de la toma de
muestras debe ser la adecuada para la Método
recuperación y cultivo de los microorganismos
involucrados en el proceso infeccioso 1. Identificación macroscópica y microscópica
(cultivos demostrativos).
2. Interpretación Macro y Microscópica
a.- Observar la morfología colonial en los
Desarrollo de la práctica medios proporcionados.
Sesión I: b.- Observación de la morfología
El profesor de laboratorio conjuntamente con los microscópica
alumnos revisará un caso clínico de infección de
vías respiratorias e identificarán:
a) Datos relevantes del caso.
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I. BACTERIOLOGíA – SEGUNDO AÑO, 2015-2016
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
PRÁCTICA No.6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
Desarrollo de la práctica
Sesión I
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarán un caso clínico de
gastroenteritis bacteriana e identificarán: Metodología
a) Datos relevantes del caso. Los alumnos:
b) Posibles diagnósticos clínicos. 1. Observarán macroscópicamente los cultivos
c) Productos biológicos a utilizar para el (morfología colonial) y diferenciarán colonias
diagnóstico de laboratorio. lactosa positivas de las negativas.
d) Exámenes de laboratorio útiles para
confirmar el diagnóstico clínico. 2. Realizarán tinciones de Gram a partir de
2. Realizarán un coprocultivo. colonias previamente identificadas y anotarán
sus características tintoriales.
Material
3. Interpretarán las pruebas bioquímicas junto
1. Problema: con los demás datos para llegar al diagnóstico
Caldo nutritivo con bacteria pura etiológico.
Muestra de heces.
Interpretación de bioquímicas
2 Material
Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para
Medios: Agar EMB y SS diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato
Hisopos estériles como única fuente de carbono y energía.
Tiene como indicador, al colorante azul de
Asa bacteriológica
bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales
Juego de pruebas bioquímicas: Tubos de amonio, que hace que el medio vire a un color
de citrato de Simmons, Agar hierro azul, cuando es positivo.
triple azúcar (TSI), Agar hierro lisina
(LIA), Agar Movilidad Indol Ornitina TSI (Agar triple azúcar-hierro).Prueba que
(MIO) permite observar la fermentación de glucosa,
lactosa y sacarosa así como la producción de gas y
ácido sulfhídrico.
La fermentación acidifica el medio, haciendo que el
Método indicador (rojo de fenol) vire a amarillo. En tanto
1. Obtener una muestra de materia fecal en un que el tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de
frasco estéril y de aquí tomar una pequeña hidrógeno que reacciona con sales de hierro,
porción con un hisopo estéril, de preferencia proporcionando sulfuro de hierro de color negro.
de los sitios con moco y sangre.
2. Con el hisopo, inocular los siguientes medios: LIA (Agar hierro lisina). Prueba basada en la
EMB y SS, seguir el procedimiento por estrías descarboxilación y desaminación de lisina, así
en placa para el aislamiento de colonias como en la producción de ácido sulfhídrico.
3. Incubar a 37° C durante 24 horas Descarboxilación de la lisina positiva; Pico
4. Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/
MIO, la bacteria problema, como lo indique el fondo amarillo.
profesor, incubar a 37° C durante 24 horas. Desaminación de la lisina; Pico rojizo/fondo
5. Identificar al o los microorganismos con las amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y
pruebas bioquímicas Morganella sp
Producción de ácido sulfhídrico: Ennegrecimiento
Sesión II del medio (especialmente en el límite entre el pico y
Material el fondo.
1. Cultivos demostrativos y de la práctica anterior.
2. Pruebas bioquímicas demostrativas y de la
práctica anterior.
3. Reactivo de Kovac
4. Equipo para Gram
5. Portaobjetos
6. Papel seda
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Resumen de la práctica:
El profesor junto con los alumnos correlacionará el
caso clínico con el diagnóstico de laboratorio y
elaborarán un esquema gráfico
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2014-2015
PRÁCTICA No. 7
INFECCIONES DE VÍAS URINARIAS
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Transporte de muestras
Métodos de cultivo
1. Transportar la muestra al laboratorio tan pronto
1. Método de estriado en superficie con asa
como sea posible después de la colección.
2. Cultivar las muestras dentro de las dos horas calibrada.
posteriores a la colección, o refrigerarlas y Las asas calibradas presentan características
sembrarlas en un lapso no mayor de 8 horas. específicas que las habilitan para recoger, si
3. Se requiere tomar una nueva muestra de orina solo se introduce a la muestra la parte circular,
cuando no hay evidencia de refrigeración, ó el un volumen conocido de orina. La siembra se
método de colección no han sido el adecuado. realiza descargando su contenido en toda la
4. Si se trata de una muestra colectada, superficie del medio seleccionado.
transportada y manejada de manera Cabe señalar que la elección de los medios es
inadecuada y no puede ser reemplazada, se importante. No debe faltar una gelosa sangre u
documenta en el reporte final que la calidad de otro medio en el que pueda desarrollar el
la muestra no es la adecuada y se deberán agente etiológico, aunque este sea exigente en
tomar con reserva los resultados. cuanto a sus requerimientos nutricionales, y
5. La refrigeración no es necesaria si la muestra algunos otros medios con características
de orina es colectada en tubos de transporte diferenciales y/o selectivas, que permitan el
con preservativos. Colocar cuando menos 3 ml desarrollo de los patógenos, inhibiendo a los
de orina en el tubo para evitar un efecto contaminantes.
inhibitorio o diluyente en los microorganismos. Las placas sembradas se incuban a 35º C en
aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido
Análisis de las muestras. el tiempo, se analizan las características
Los métodos para el análisis de las muestras son macroscópicas obtenidas, poniendo especial
cuantitativos, debido a la elevada frecuencia con la cuidado en detectar si están presentes uno o
que estas se contaminan durante su obtención o más microorganismos diferentes y en realizar el
cualitativos en los casos de recolección recuento correspondiente.
suprapúbica. Como las asas comerciales más utilizadas son
las que recogen un volumen de 0.001 ml de
Detección de Bacteriuria orina, el número de colonias de cada caja
deberá multiplicarse por 1000 para conocer la
1. Tinción de Gram cantidad de microorganismos o de UFC que la
El método de tinción de Gram puede detectar la muestra contiene por mililitro.
presencia tanto de bacterias como leucocitos Adicionalmente, deben someterse a pruebas de
en muestras de orina identificación, tomando en cuenta que las
infecciones urinarias son causadas, en el 85 a
Técnica 90 % de los casos, por una sola especie
1. Colocar 10 microlitros de orina no centrifugada bacteriana.
y bien mezclada sobre un portaobjetos de vidrio
y dejar secar al aire sin extender
2. Fijar, teñir e identificar al microorganismo.
3. Determinar el número de microorganismos por
campo utilizando el objetivo de inmersión
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2014-2015
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Sesión II
Material
1. Cultivos demostrativos y de la práctica anterior
2. Equipo para tinción de Gram
Método
Los alumnos:
1. Observarán macroscópicamente los cultivos
(morfología colonial) y diferenciarán las
colonias.
2. Contarán el número de colonias que se
desarrollaron en las placas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el número de bacterias es ≥ 100 000
UFC/mL, se procederá a identificar él o los
microorganismos por los métodos usuales.
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2014-2015
PRÁCTICA No.8
INFECCIONES SISTÉMICAS
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
ANEXO
DETERMINACIÓN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
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I. BACTERIOLOGÍA – SEGUNDO AÑO, 2014-2015
Material
1. Cajas con gelosa Müeller-Hinton con 4 mm de
grosor.
2. Tubo MacFarland de 0.5
3. Tubos con solución salina estéril cada uno con 3
ml
4. Cultivos puro de 18 a 24 horas de las cepas
problemas en agar soya tripticasa.
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PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Primer día
Incubar a 37 ºC x 24 horas
Segundo día
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