TRANSCRIPCIÓN

BQ. PAMELA LUTTGES

Del DNA a la proteína: cómo leen el genoma las células

mRNA
tRNA
rRNA

La información genética controla la síntesis proteica

Los genes se pueden expresar con diferente eficiencia

Eficiencia de transcripción
La Transcripción produce una cadena de RNA
complementaria a la cadena de DNA
Las dos principales diferencias entre ARN y ADN
El uracilo se aparea con la Adenina

El RNA se puede aparear con el DNA

El RNA puede plegarse formando estructuras específicas

Interacciones
convencionales entre pares
de bases

Interacciones no convencionales entre

pares de bases
En las células se producen distintos tipos de RNA

(función catalítica)
El DNA es transcrito por RNA polimerasa a RNA

La hidrólisis de los NTP

aporta la energía necesaria
para la reacción.

En procariontes
Existe 1 RNA polimerasas:
La Transcripción es visible a la microscopia electrónica
 Señales en el DNA le dicen a la RNA polimerasa bacteriana
dónde comenzar y dónde terminar
Subunidad s que reconoce
la secuencia promotor

La pol desenrolla el ADN en la

posición donde comienza la
transcripción

Una vez que se han

sintetizado entre 7 y 10
nucleótidos se libera la
subunidad σ
 Los promotores y los terminadores bacterianos tienen secuencias
nucleotídicas específicas que son reconocidas por la RNA polimerasa
 Sitios Promotores de la transcripción de diferentes genes bacterianos

Hay una secuencia de bases más o menos en el -10/-35 que se

conoce como caja pribnow en bacterias y caja TATA en eucariontes

Hay otra secuencia en el -35 (secuencia consenso  TTGACA) en

procariontes, que en eucariontes se denomina CAAT box y puede o
no estar presente.

El promotor está río arriba del inicio de la transcripción.

La región promotora, que es asimétrica, determina cual de las hebras va
a ser transcrita.

La RNA polimerasa se une al promotor, que es asimétrico, en una sola posible orientación.
Tres principales etapas de la transcripción

INICIACIÓN:
-Polimerasa se une a secuencia promotora
-Polimerasa forma la burbuja de transcripción
-Polimerasa cataliza las uniones fosfodiester de
los nucleótidos

Tasa de error de
1/104
No tiene la
(30 NTP/seg) capacidad
autocorrectora
ELONGACIÓN (Polimerización):
-Polimerasa avanza en sentido 3´a 5

TERMINACIÓN:
-En el sitio de terminación de la transcripción,
polimerasa libera el ARN completo y se disocia
del ADN
Modelo de una “burbuja” de transcripción
Cadena codificante
o
con sentido

Rebobinando

Relajandose

Cadena templado
o
anti sentido
Híbrido RNA-DNA

La polimerasa añade ribonucleótidos en el extremo 3´ creciendo la cadena de ARN.

No son necesarios primers y la síntesis procede en dirección 5′ → 3′ .
 La cadena codificante es similar al la molécula de RNA transcrita, salvo que la timina
se reemplaza por uracilo

Cadena codificante o Cadena templado o

sentido anti- sentido

La doble hebra de ADN se desenrolla dejando entrar al complejo de la RNA polimerasa y se vuelve a enrollar cuando se aleja.
Una de las hebras del ADN funciona como un molde , y el mRNA se va construyendo a partir de este molde. Solo una de las
cadenas del ADN (templado) es transcrita. La secuencia del transcrito de RNA es complementaria a la cadena templada. La
cadena de ADN que no es transcrita se denomina cadena codificante y es similar a la cadena de ARN.
 La transcripción de los genes eucariontes es un
proceso complejo

1. Existen tres RNA polimerasas

2. Participan otras proteínas llamados factores generales de

transcripción

3. Proteínas represoras o activadoras pueden influir en la

transcripción.

4. Las regiones reguladoras están a grandes distancias del

promotor.

5. tomar en cuenta el empaquetamiento del DNA.

1.- Existen 3 RNA polimerasas
2.- Participan otras proteínas llamados factores generales de transcripción

 La transcripción
comienza en los
sitios de unión de la
ARN pol llamadas
PROMOTORES sobre
la cadena de ADN
templado.
 El promotor contiene
una secuencia TATA
box , donde se unen
los factores de
transcripción

Para empezar la transcripción la

RNApol requiere un número de
factores de transcripción generales.
2.- Participan otras proteínas llamados factores generales de transcripción

Para empezar la transcripción la

RNApol requiere un número de
factores de transcripción generales.

El ADN se desenrolla y se crea un

Complejo Abierto.

La Polimerasa se fosforila y comienza la

transcripción.

La elongación es acompañada por la

liberación de algunos factores e
intensificada por otros.
3.- Proteínas represoras o activadoras pueden influir en la transcripción.

Aumentadores de la
trascripción (Enhancers):
Incrementa la velocidad de
transcripción
Silenciadores de la
transcripción (Silencers):
Decrece la velocidad de
transcripción
Elementos de respuesta:
Secuencias blanco para las
moléculas de señalización

Secuencias de DNA que regulan la expresión de los genes.

4.- Las regiones reguladoras están a grandes distancias del promotor.
5.- Hay que tomar en cuenta el empaquetamiento del DNA.

Las regiones reguladoras están a

grandes distancias del promotor.

Enzimas modificadoras
de histonas, complejo
remodelador de la
cromatina y mediador
 Los RNA eucariontes son transcritos y procesados en el núcleo
La fosforilación de la RNA polimerasa II permite que las proteínas que procesan el
RNA se ensamblen en su cola

Procesamiento del RNA:

Capping:
Factores de
encapuchamiento

Splicing:
Factores de corte y
emplame

Poliadenilación:
Factores de
poliadenilación
 Los extremos del RNA eucarionte son modificados en el núcleo

Caperuza en el extremo 5´

Agrega una cola poliA en el extremo 3´

• Estabilidad del mRNA

• Ayudan a su exportación
• Indican que el mensaje está completo.
La caperuza se forma por unión covalente de la 7-metilguanosina al grupo
fosfato del extremo 5´P
 Los genes eucariontes están interrumpidos por secuencias no codificantes,
los procariontes no.

Los genes contienen largas secuencias de nucleótidos conocidas como INTRONES, que no codifican para ningún
polipéptido específico por el gen. Los intrones están insertos entre EXONES, secuencias mucho mas cortas en el
gen que codifica para porciones del polipéptido
 Los intrones son eliminados por el corte y empalme (splicing) del RNA

Secuencias especiales de nucleótidos indican el comienzo y el final de un intrón.

Mecanismo de maduración del RNA catalizada por snRNP.

Pequeñas partículas ribonucleoproteicas nucleares

Splicing
El proceso de Corte y Emplame se puede ver a la microscopia
electrónica: Spliceosoma
Maduración alternativa que da origen a distintas variantes de
una proteína
Resumen
TRADUCCIÓN

BQ. PAMELA LUTTGES

 Traducción o Síntesis Proteica
proceso por el cual la secuencia de nucleótidos de un mRNA es usada para ordenar y
unir los aminoácidos en una cadena polipeptídica
La secuencia de mRNA es decodificada en grupos de 3 nucleótidos

El Código Genético
Combinaciones posibles de 3
nucleótidos :4 x 4 x 4= 64

-Es de tripletes
-Es Universal
-Es degenerado
-Hay tripletes que no codifican a
ningún aminoácido

Es un código redundante: codones distintos pueden

CODON
codificar el mismo aminoácido
Una molécula de RNA puede ser traducida en 3 marcos de lectura posibles

Marco de lectura 1

Marco de lectura 2

Marco de lectura 3

Sólo uno codifica el mRNA correcto

Las moléculas de RNA de transferencia (tRNA) acoplan
aminoácidos con los codones de mRNA
Enzimas específicas acoplan los tRNA al aminoácido correcto

Las Aminoacil-tRNA sintetasas acoplan cada aa a su tRNA específico

Hay una sintetasa diferente para cada aa

El RNA mensajero es decodificado por los ribosomas

Ribosoma eucarionte
 RNA ribosomal (rRNA)
Comparación ribosomas procariótico y eucariótico
El ribosoma es una ribozima

Sitio A
(sitio aminoacil tRNA
Sitio E
(sitio de salida)

Sitio P
(sitio peptidil tRNA)
 La traducción se realiza en una serie de pasos
Unión de un nuevo amino acil-tRNA

Avanza subunidad menor del

ribosoma.

Formación de un nuevo
enlace peptídico

Salida del aminoacil-tRNA,

avanza subunidad mayor del
ribosoma.
Los codones del mRNA señalan dónde empieza y dónde termina la traducción

Factor de inicio se
une al sitio P de la
subunidad menor

Los codones del mRNA indican dónde comenzar y dónde finalizar

El inicio de la transcripción requiere energía y una serie de factores de inicio
Los codones del mRNA señalan dónde empieza y dónde termina la traducción

UAA, UAG o UGA

 Inicio de la síntesis proteica
EUCARIONTES: PROCARIONTES
- Codón de iniciación: AUG (metionina). - Codón de iniciación: AUG (metionina).
- Met-tRNAi. - fMet-tRNA.
- Secuencia KozaK. - Secuencia Shine-Dalgarno
- Ribosoma: 40S y 60S. - Ribosoma: 30S y 50S.
- Factores de iniciación - Factores de iniciación: IF-1, IF-2, IF-3.
- GTP y magnesio - GTP y magnesio

Secuencia Shine-Dalgarno
mRNA procarionte es policistrónico
Las proteínas son elaboradas por polirribosomas

Polirribosoma

Eucariontes
Procariontes
Síntesis de proteínas en ribosomas asociados a RER
 La degradación proteica controlada cuidadosamente ayuda a regular la
cantidad de cada proteína en la célula

Proteosoma Proteínas mal plegadas

Aa oxidados o alterados
Degradación de proteínas en citosol de los eucariontes. marcada covalentemente
con ubiquitina

Complejo de enzimas proteolíticas

Los inhibidores de la síntesis de proteínas procariontes se utilizan
como antibióticos
Hay muchos pasos entre el DNA y la Proteína