BIOTECNOLOGIA

MARINHA
Novos adesivos inspirados em
ouriços do mar
Romana Santos

Inves-gadora Principal

- Centro de Ciências do Mar e do Ambiente

Faculdade de Ciências da Universidade de Lisboa

rlasantos@fc.ul.pt
 c nol .
Biote

Azul

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 BIOMIMETISMO

BIOS + MIMESIS
vida+ imitar

Inovação inspirada na natureza

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 BIOMIMETISMO
“Those who are inspired by a model other than Nature, a
mistress above all masters, are laboring in vain”
Leonardo Da Vinci

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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

INDUSTRIA
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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

DESPORTO
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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

TRANSPORTES

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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

ENERGIA

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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO
NEEDLE SKIN

MEDICINA

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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

COMUNICAÇÃO

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EXEMPLOS DE BIOMIMETISMO

INVESTIGAÇÃO

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BIOMIMETISMO … UMA MAIS VALIA
Tirar par-do de milhões de
a n o s d e e v o l u ç ã o e
aperfeiçoamento

C o p i a r c a r a c t e r í s - c a s
adapta- v as altam e nte
especializadas
D e s e n v o l v e r s o l u ç õ e s
inovadoras e sustentáveis
para problemas globais
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DESAFIOS DA INDUSTRIA DOS ADESIVOS

Eficázes
Ecológicos

BiocompaYveis
Aplicação controlada
Reversíveis
Versáteis
BIOMIMETISMO
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QUE SOLUÇÕES HÁ NA NATUREZA?
Diversidade de bioadesivos

Adesivos estruturados Adesivos químicos

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QUE SOLUÇÕES HÁ NA NATUREZA?

Diversidade de bioadesivos

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QUE SOLUÇÕES HÁ NA NATUREZA?

Diversidade de bioadesivos

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 BIOADESIVOS ESTRUTURADOS

PATAS DAS OSGAS

E DE INSECTOS

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 BIOADESIVOS ESTRUTURADOS

ADESIVOS BIOMIMÉTICOS

•  Feitos em polímeros

•  Múl-plos contactos com a

superbcie

•  Eficaz em qualquer rugosidade

•  Não deixa resíduos

•  Múl-plas u-lizações

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 BIOADESIVOS ESTRUTURADOS
ADESIVOS BIOMIMÉTICOS

h@p://robotpig.net/engineering-news/gecko-project---biomimiJc-adhesives-_1883
h@p://news.mit.edu/2009/sJckybot-092509

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 BIOADESIVOS QUÍMICOS
Permanentes Transitórios Temporários Instantâneos

Mexilhão Cracas Lapas Ouriços Estrelas Pepinos

Tenacidade
(g/mm2)

75 52 23 54 20 14

Proteínas Proteínas + Glícidos

a.a de cadeia curta (Gly, Ala, Ser) => coesão

Composição
bioquímica

a.a com carga (Asp, Glu) + a.a. hidrofóbicos (Val, Ala) => adesão

Proteínas insolúveis (S-S)

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 BIOADESIVOS QUÍMICOS

ADESIVOS BIOMIMÉTICOS

•  Proteínas recombinantes

•  Pép-dos sinté-cos

•  L-DOPA
(L-3,4-dihidroxiphenilalanina)

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PORQUÊ OS OURIÇOS DO MAR?

Bioadesivo
químico

Órgãos adesivos
especializados

Pé ambulacrário

Adesivo
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PORQUÊ OS OURIÇOS DO MAR?

Vídeo disponível em: h@ps://www.youtube.com/watch?v=8JOxiT5_zpc

 COMO FUNCIONAM OS PÉS
AMBULACRÁRIOS?
Sistema reprodutor Sistema nervoso

Sistema diges-vo Sistema ambulacrário

Pé ambulacrário

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COMO FUNCIONAM OS PÉS
AMBULACRÁRIOS?

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 COMO FUNCIONAM OS PÉS
AMBULACRÁRIOS?

Alongar Retrair Oscilar

Pé ambulacrário

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& h@p://cronodon.com/BioTech/
 ABORDAGEM BIOMIMÉTICA

BIOTECNOLOGIA

BIOQUÍMICA
BIOLOGIA
BIOMECÂNICA MOLECULAR

MORFOLOGIA

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

0,3mm

1mm

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 COMO É SECRETADO O ADESIVO?

Caule
Grânulos
desadesivos Tipo 1
Tipo 2

Disco
Grânulos
adesivos

Célula de
suporte

Adesivo

Substrato

Epiderme duo-glandular
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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

Grânulos adesivos

Epiderme duo-glandular
Grânulos desadesivos

& SANTOS & FLAMMANG (2006) Biofouling

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

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COMO É SECRETADO O ADESIVO?

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QUÃO EFICÁZ É O ADESIVO?

Tenacidade (MPa)

Força (N)/Área(mm2)

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 QUÃO EFICÁZ É O ADESIVO?
TIPO DE TIPO DE TENACIDADE
ADESIVO INTERFACE (MPa)

temporário disco 0.5

NATURAL temporário disco 0.2

permanente placa 0.8

3.0
Proteínas
BIOMIMETIC modificadas
recombinantes
2.1

biológico fibrina 0.01

COMMERCIAL sinté-co acetato de vinilo 1.8
sinté-co cianoacrilato 10
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QUAL A COMPOSIÇÃO DO ADESIVO?

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QUAL A COMPOSIÇÃO DO ADESIVO?
PROTEOMA DIFERENCIAL
Disco adesivo
versus
Caule não adesivo

163 proteínas > 3x mais

sobre-expressas

1º MODELO MOLECULAR DE
ADESÃO REVERSÍVEL DO
OURIÇOS DO MAR
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 QUAL A COMPOSIÇÃO DO ADESIVO?
PROTEÍNA ADESIVA DISC

•  13 x mais sobre-expressa no disco

•  No embrião promove adesão célula/substrato

•  É secretada => componente do adesivo
ADHESIVE
•  6 domínios consecu-vos de ligação a açucares: SUBSTRATE
•  presentes no adesivo => coesão do adesivo SUBSTRATE
•  presentes na cuYcula que recobre a epiderme => adesão à epiderme

•  domínio de ligação a integrinas da epiderme => adesão à epiderme

•  a.a. de cadeia lateral curta (Ser, Gly, Ala) => > coesão do adesivo

•  a.a. polares (Ser, Thr) e hidrofóbicos (Leu, Val) => adesão ao substrato

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QUAL A COMPOSIÇÃO DO ADESIVO?
PROTEÍNA ADESIVA DISC

ADHESIVE

SUBSTRATE
SUBSTRATE

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QUAL A COMPOSIÇÃO DO DE-ADESIVO?

ENZIMAS DE-ADESIVAS
DISC
•  8 a 10 x mais sobre-expressas no disco

•  Proteases:
•  aminopep-dases => degradar as
proteínas do adesivo

•  Glicosilases: DE-ADHESIVE

•  asparaginase + sialidase => degradar a os ADHESIVE

açucares do adesivo SUBSTRATE
SUBSTRATE

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 O QUE DEVEMOS COPIAR?
Clonagem do gene que codifica a NecBn

•  2 sequências de mRNA que dão origem a 15 a.a. diferentes

Nec-n-1 Nec-n-1
Nec-n-2
Ovo + embrião
Pé ambulacrário
Adesivo

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 O QUE DEVEMOS COPIAR?
Clonagem do gene que codifica a NecBn

•  Ambas as variantes estão sobre-expressas no disco adesivo

•  Expressão do transcrito é menor em ouriços de ca-veiro do que em ouriços

selvagens => adaptação ao baixo hidrodinamismo => diminuição da adesão

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 O QUE DEVEMOS COPIAR?
Produção de Nec-n recombinante

•  Copiar os elementos-chave responsáveis pela adesão

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 DESENVOLVER ADESIVOS
BIOMIMÉTICOS

Proteínas adesivas recombinantes

Falta saber:

•  Produção e purificação
•  Se há + proteínas adesivas
=> transcriptoma •  Avaliação das propriedades adesivas

•  Que açucares há no adesivo? •  Biocompa-bilidade

•  Clonar e caracterizar as •  Propriedades an--coagulantes

enzimas desadesivas =>
adesivo reversível •  Propriedades an--bacterianas

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