PRACTICA N° 5: EFECTO DEL TIEMPO DE REACCION Y CONCENTRACION

DE ENZIMA

SEBASTIAN STEVEN BELTRAN JIMENEZ COD. 117003905

YEISON BERMEO RIVEROS COD. 117003906
LAURA KATHERIN BERNAL GUTIERREZ COD.117003907
GABRIELA MAITE CUAN MAMBY COD.117003913

PRESENTADO A:
ALEJANDRA GALAN CASTILLO

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS, VEREDA BARCELONA.

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES
ESCUELA DE INGENIERÍA EN CIENCIAS AGRÍCOLAS
PROGRAMA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
VILLAVICENCIO, COLOMBIA.
2018
EFECTO DEL TIEMPO DE REACCION Y CONCENTRACION DE ENZIMA

1. OBJETIVOS

 Determinar la actividad enzimática de la catalasa sobre el peróxido de

hidrogeno
 Observar el efecto del tiempo de reacción en la actividad catalítica
 Observar el efecto de la concentración de enzima sobre la actividad
catalítica

2. DATOS

Tabla 1. Evaluación del efecto de la concentración de la enzima

REACTIVO (mL) TUBO A TUBO B TUBO C TUBO D
Buffer Fosfato 10,2 10 9,5 8,5
H2O2 Buffer 2 2 2 2
Enzima 0,3 0,5 1 1
Tiempo (min) 1 1 1 1
H2SO4 2 2 2 2
Vol. KMnO4 gastado 4,5 7,7 3 1,3
µ mol H2O2 iniciales 225 385 150 65
µ mol H2O2 residual 56.25 96.25 37.5 16.25
µ mol H2O2 descompuesto 198.75 288.75 112.5 48.75
µ mol H2O2 desc/min/mL enzima

Tabla 2. Evaluación del tiempo de reacción

REACTIVO (mL) TUBO A TUBO B TUBO C TUBO D TUBO E
Buffer Fosfato 10 10 10 10 10
H2O2 Buffer 2 2 2 2 2
Enzima 0,5 0,5 0,5 0,5 0
Tiempo (min) 0 1 2 4 6
H2SO4 2 2 2 2 2
Vol. KMnO4 gastado 7,5 19,9 4,1 1,3 3,6
µ mol H2O2 iniciales 375 995 205 65 180
µ mol H2O2 residual 93.75 248.75 51.25 16.25 45
µ mol H2O2 descompuesto 281.25 746.25 153.75 48.75 135
µ mol H2O2 desc/min/mL enzima
 3. CALCULOS

𝟏𝑿𝟏𝟎𝟔 µ 𝐦𝐨𝐥
1) µ mol inicial H2O2= vol(L) * M H2O2 *
𝟏 𝒎𝒐𝒍

4.5 mL = 0.0045 L
mol 1𝑋106 µ mol
µ mol inicial H2O2= 0.0045 L KMnO4 * 0.05 H2O2 *
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
µ mol inicial H2O2= 225 µ mol
…(ASI CON LAS OTRAS)

𝟏𝑿𝟏𝟎𝟔 µ 𝐦𝐨𝐥
2) µ mol KMnO4= vol(L) * µ mol KMnO4 *
𝟏 𝒎𝒐𝒍

mol 1𝑋106 µ mol

µ mol KMnO4= 0.0045 L KMnO4 * 0.005 KMnO4 *
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
µ mol KMnO4= 22.5 µ mol
…(ASI CON LAS OTRAS)

𝟓 µ 𝐦𝐨𝐥 𝐇𝟐𝐎𝟐
3) µ mol residual H2O2= µ mol KMnO4 *
𝟐 𝒎𝒐𝒍 𝐊𝐌𝐧𝐎𝟒

5 µ mol H2O2
µ mol residual H2O2= 22.5 µ mol KMnO4 *
2 𝑚𝑜𝑙 KMnO4
µ mol residual H2O2= 26.25 µ mol
…(ASI CON LAS OTRAS)

4) µ mol descompuesta H2O2= µ mol inicial H202 - µ mol residual H2O2

µ mol descompuesta H2O2= 225 µ mol inicial H2O2 – 56.25 µ mol residual H2O2
µ mol descompuesta H2O2= 198.75 µ mol
…(ASI CON LAS OTRAS)

4. RESULTADOS

5. DISCUSION DE RESULTADOS
El H2O2 es tóxico para la mayoría de los organismos vivos. Muchos organismos
son capaces de destruir el H2O2 mediante la acción de enzimas antes de que pueda
realizar mucho daño. El H2O2 se convierte en oxígeno y agua según la siguiente
reacción: 2 H2O2 → 2 H2O + O2 Aunque esta reacción ocurre espontáneamente,
las enzimas incrementan la velocidad de reacción de forma considerable. Se conoce
que al menos dos enzimas diferentes catalizan esta reacción: a) catalasa, que se
encuentra en animales y protistas; b) peroxidasa, que se encuentra en las plantas.
Mucho se puede aprender sobre las enzimas mediante el estudio de la rapidez de
reacciones catalizadas por enzimas. La rapidez de una reacción puede estudiarse
de muy diversas formas como: • Midiendo la presión de los productos que aparecen
(en este caso, O2) • Midiendo la velocidad de desaparición del substrato (en este
caso, H2O2) • Midiendo la velocidad de aparición del producto (en este caso, O2
que se desprende como gas)
En razón a que las condiciones de pH y temperatura a los que trabaja la enzima son
muy importantes, la temperatura en la mayoría de los organismos oscila en un
intervalo en el cual sus enzimas sobreviven y funcionan; además si el ambiente
donde se encuentra la enzima es demasiado ácido o demasiado básico, ésta puede
desnaturalizarse de forma irreversible o transformarse de modo que su forma no le
permita realizar correctamente sus funciones catalíticas.
Al tratarse de la Catalasa, se sabe que ésta se encuentra en la sangre (en este caso
humana) a un pH neutro.Inicialmente se analizó el efecto que tiene la concentración
de la enzima en la descomposición del H2O2, a partir de lo cual se logró identificar
que la relación entre la concentración de enzima y las moles descompuestas por
minuto dado cada mL de enzima es directamente proporcional, pues a medida que
aumenta la concentración de catalasa existe una mayor cantidad de moles de H2O2
descompuestas por minuto sobre cada mL de ésta.
Posteriormente se analizó el efecto del tiempo en la descomposición del peróxido,
de lo cual se observó que a mayor tiempo de reacción es menor la actividad
enzimática, ya que las moles del sustrato residuales aumentan a medida que
aumenta el tiempo, pues dichas moles no reaccionan y las moles de sustrato
descompuestas disminuyen. De acuerdo a lo anterior se concluye que el tiempo
óptimo de reacción oscila en 1 a 2 minutos, pues es donde se registra la mayor
actividad enzimática.
El pH en la reacción o la cantidad de H+ incide en la velocidad de reacción. El pH
influye desnaturalizando la enzima, ya que si este pH es extremo cambia la
estructura de la enzima y por consiguiente las interacciones iónicas afectando la
estabilidad de la enzima.

6. CUESTIONARIO

7. CONCLUSIONES

8. BIBLIOGRAFIA