AMPK: un objetivo para las drogas y los productos naturales con efectos sobre la diabetes y el

cáncer

Abstracto
La proteína quinasa activada por AMP (AMPK) es un sensor de energía celular altamente
conservado que parece haber surgido en una etapa temprana durante la evolución
eucariótica. En 2001, se demostró que se activaba con la metformina, actualmente el
principal fármaco para el tratamiento de la diabetes tipo 2. Aunque los efectos metabólicos
conocidos de la activación de AMPK son consistentes con la idea de que media algunos de
los beneficios terapéuticos de la metformina, como se analiza a continuación, ahora parece
poco probable que AMPK sea el único objetivo del medicamento. AMPK también es
activado por varios productos vegetales naturales derivados de medicinas tradicionales, y se
discuten los mecanismos por los cuales activan AMPK. Uno de estos es el salicilato,
probablemente el agente medicinal más antiguo conocido por la humanidad. Se ha
demostrado que el salicilato profármaco salsalado mejora los parámetros metabólicos en
sujetos con resistencia a la insulina y prediabetes, y se discute si esto podría estar mediado
en parte por AMPK. Curiosamente, existe evidencia de que tanto la metformina como la
aspirina brindan cierta protección contra el desarrollo de cáncer en humanos, y también se
discute si la AMPK podría estar involucrada en estos efectos.

Proteína quinasa activada por AMP: antecedentes evolutivos

La proteína quinasa activada por AMP (AMPK) se definió originalmente como una proteína
quinasa del hígado de rata que fosforilaba e inactivaba dos enzimas clave de la síntesis de
ácidos grasos y esteroles de mamíferos, es decir, acetil-CoA carboxilasa-1 (ACC1) y 3-
hidroxi-3 -metilglutaril-CoA reductasa ( 1 ). Su activación requiere fosforilación por parte de
las quinasas cadena arriba en un residuo conservado de treonina dentro del dominio quinasa
(generalmente denominado Thr-172 debido a su posición en la secuencia de la rata [ 2 ]). La
fosforilación de este sitio y el sitio principal fosforilado en ACC1 ( 3 ), detectado usando
anticuerpos fosfoespecíficos, ahora se usan casi universalmente como biomarcadores para
monitorizar la activación de AMPK.
AMPK existe como heterotrímeros compuestos por una subunidad α catalítica y subunidades
β y γ reguladoras ( 4 , 5 ). En humanos, cada uno de estos ocurre como isoformas múltiples
codificadas por genes distintos ( Tabla 1).) de modo que haya al menos doce posibles
combinaciones heterotriméricas. Los genes que codifican las tres subunidades también se
reconocen fácilmente en los genomas de casi todos los eucariotas, desde simples protozoos
unicelulares hasta humanos. Con base en estudios genéticos en eucariotas inferiores, el papel
ancestral de esta vía conservada parece haber sido la respuesta a la inanición de la glucosa. La
vía de señalización AMPK representa un mecanismo para responder a niveles fluctuantes de
glucosa que parece haber evolucionado mucho antes que la vía de señalización de insulina,
que solo se encuentra en animales multicelulares. De particular interés, en el gusano
nematodo Caenorhabditis elegansAMPK es necesario para la extensión de la vida útil que
se observa en respuesta a la restricción calórica o a mutaciones que reducen la función de la
vía de señalización de la insulina ( 6 , 7 ).
Propiedades de las subunidades AMPK. Aunque las subunidades β2, γ2 y γ3 son las más
altamente expresadas en el músculo, se encuentran en niveles bajos en otros tejidos.

Regulación de AMPK por nucleótidos de adenina e iones de calcio

Las subunidades AMPK-γ contienen tres sitios que unen nucleótidos de adenina y confieren
la capacidad de la quinasa para actuar como un sensor de energía ( 8 - 10 ). En las células no
sujetas a estrés energético, el catabolismo mantiene la relación ATP: ADP en torno a 10: 1,
y esto impulsa la reacción de adenilato cinasa hacia la síntesis de ADP (ATP + AMP →
2ADP), por lo que las concentraciones de AMP son muy bajas; las proporciones típicas de
ATP: AMP: AMP en células no sometidas a tensión son alrededor de 100: 10: 1. Los sitios
de la subunidad γ parecen unirse a AMP, ADP y ATP con afinidad similar, pero
preferentemente se unen al ATP libre 4- en lugar del complejo Mg.ATP 2- ( 8) Debido a que
alrededor del 90% de ATP (pero no de ADP o AMP) está presente como complejo de
magnesio, las concentraciones celulares de ADP total y ATP libre 4 son comparables, lo que
permite que estos nucleótidos compitan entre sí por la unión a AMPK. Aunque la
concentración de AMP es al menos 10 veces menor que la de ADP o ATP libre en células no
tensionadas, aumenta marcadamente a medida que la relación ADP: ATP aumenta durante
el estrés energético, debido al desplazamiento de la reacción de la adenilato cinasa hacia
AMP: 2ADP → ATP + AMP. Bajo estas condiciones, AMP debería poder competir con ATP
o ADP en los sitios de unión de la subunidad AMPK-γ.
La unión de AMP o ADP (pero no de ATP) a la subunidad AMPK-γ provoca un cambio
conformacional que promueve la fosforilación de Thr-172 por las quinasas aguas arriba al
tiempo que inhibe la desfosforilación por fosfatasas aguas arriba ( 8 , 11 , 12 ). La
fosforilación estequiométrica de Thr-172 puede causar una activación> 100 veces mayor,
aunque Thr-172 solo puede ser parcialmente fosforilada in vivo incluso en células que
experimentan estrés metabólico. El efecto del aumento de la fosforilación se amplifica hasta
10 veces más por la activación alostérica, que es causada únicamente por la unión de
AMP. Este mecanismo tripartito ( Fig. 1 ) significa que puede haber grandes aumentos en la
actividad AMPK en respuesta a pequeños incrementos en las relaciones AMP: ATP o ADP:
ATP.
Mecanismo tripartito por el cual AMPK es activado por cambios en el estado de energía celular.
El desplazamiento de ATP por ADP y / o AMP en uno o más de los sitios en la subunidad AMPK-γ
provoca un cambio conformacional en el complejo heterotrimérico que 1 ) promueve la
fosforilación, y 2) inhibe la desfosforilación de Thr-172, causando una gran ( hasta 100 veces)
aumento en la actividad de quinasa. La unión de AMP, pero no ADP, causa 3) activación adicional
de la cinasa fosforilada de hasta 10 veces. La quinasa cadena arriba LKB1 parece ser
constitutivamente activa, y la fosforilación de Thr-172 aumentada en respuesta al estrés
energético normalmente no ocurre en las células tumorales que carecen de LKB1. Sin embargo,
AMPK también puede ser activado por Thr-172 fosforilación catalizada por CaMKKβ a través de
un mecanismo que requiere un aumento en el Ca 2+ intracelular, pero puede ser independiente
de los cambios en AMP y / o ADP.

La principal quinasa aguas arriba que fosforila Thr-172 en células de mamífero se identificó como
un complejo que contiene el supresor de tumor quinasa, quinasa de hígado B1 (LKB1) ( 13 - 15 ),
la introducción de un enlace tentadora entre AMPK y el cáncer, que se considera más adelante
. LKB1 parece ser constitutivamente activo, pero se requiere su alta actividad basal para que se
haga evidente el efecto de la unión de ADP o AMP a la subunidad γ en la fosforilación Thr-172
neta ( 13 ). Thr-172 también puede ser fosforilado por las quinasas cinasas dependientes de Ca 2+ /
calmodulina (CaMKK), especialmente CaMKKβ ( 16 - 18) Este mecanismo, que puede actuar
independientemente de los cambios en los nucleótidos de adenina, es responsable de la
activación de AMPK en respuesta a agonistas que aumentan el Ca 2+ intracelular, incluida la
trombina en las células endoteliales ( 19 ), el antígeno que se une al receptor de células T ( 20 ).
la hormona del hambre ghrelin actúa sobre las neuronas hipotalámicas ( 21 ) y los cannabinoides
actúan sobre los receptores CB2 ( 22 ).

consecuencias metabólicas de la activación de AMPK

Al detectar cambios en las proporciones de nucleótidos de adenina, AMPK se activa por
tensiones que deprimen el estado de energía celular. Estos incluyen los estreses que inhiben
la producción de ATP, como la hipoxia, la hipoglucemia o la adición de venenos
mitocondriales, así como los estreses que aceleran el consumo de ATP, como la contracción
muscular ( 23 ). Algunos de los principales cambios metabólicos provocados por la
activación de AMPK se resumen en la Tabla 2 ; el lector es referido a otras revisiones para
más detalles ( 4 , 5 ). En muchos casos, los efectos ocurren tanto de forma aguda a través de
la fosforilación directa de las enzimas metabólicas como crónicamente a través de la
fosforilación de factores de transcripción o coactivadores que modulan la expresión génica.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3712072/