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Facultad de Salud y Nutrición Curso: Microbiología Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana Docente: Roky
Facultad de Salud y Nutrición Curso: Microbiología Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana Docente: Roky

Facultad de Salud y Nutrición Curso: Microbiología

Facultad de Salud y Nutrición Curso: Microbiología Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana Docente: Roky Champi

Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana

Docente: Roky Champi Merino

de Salud y Nutrición Curso: Microbiología Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana Docente: Roky Champi Merino
de Salud y Nutrición Curso: Microbiología Clase 3. Metabolismo y nutrición bacteriana Docente: Roky Champi Merino
Contenido  Metabolismo bacteriano.  Tipos de nutrición  Nutrición microbiana, Requerimientos, agua,

Contenido

Metabolismo bacteriano. Tipos de nutrición

Nutrición microbiana, Requerimientos, agua, nutrientes.

Factores de crecimiento

Metabolismo

Enzimas, Cofactores y coenzimas

Fases del Crecimiento bacteriano

Medios de cultivo

Temperatura, pH, oxigeno

Metabolismo Bacteriano  Conjunto de reacciones bioquímicas catabólicas y anabólicas, que transforman las sustancias

Metabolismo Bacteriano

Conjunto de reacciones bioquímicas catabólicas y

anabólicas, que transforman las sustancias nutritivas para

obtener energía.

Anabolismo: reacciones de síntesis.

Catabolismo: degradación de compuestos orgánicos.

Funciones especificas:

1. Obtener energía química del entorno y almacenarla, para

funciones celulares.

2. Convertir nutrientes exógenos en unidades precursoras de macromoléculas.

3. Formar y degradar moléculas necesarias para funciones

especificas.

TIPOS DE NUTRICIÓN FUENTE DE CARBONO FUENTE DE ENERGÍA AUTÓTROFOS Obtienen el C celular por

TIPOS DE NUTRICIÓN

FUENTE DE CARBONO

FUENTE DE

ENERGÍA

TIPOS DE NUTRICIÓN FUENTE DE CARBONO FUENTE DE ENERGÍA AUTÓTROFOS Obtienen el C celular por fijación

AUTÓTROFOS

Obtienen el C celular por fijación del CO2

HETERÓTROFOS

Obtienen el C de Compuestos orgánicos

Tipos Nutricionales Tipo Fuente de energía Fuente de carbono Ejemplos Fotoautotrofas Luz CO2 Algas

Tipos Nutricionales

Tipo

Fuente de energía

Fuente de carbono

Ejemplos

Fotoautotrofas

Luz

CO2

Algas y cianobacterias

Fotoheterotrofas

Luz

Compuestos

Algas y bacterias fotosintéticas

orgánicos

Quimioautotrofas o Litotrofas

Química

Compuesto inorgánicos: H2, NH3, NO2, H2S,

Pocas bacterias

CO2

 

Química

Compuesto

La mayoría de bacterias

Quimioheterotrofas o Heterotrofas

 

orgánicos:

 

glucosa

 
Nutrición Microbiana  Las células están compuestas de: 1. Macromoléculas: polisacáridos, lípidos, ácidos

Nutrición Microbiana

Las células están compuestas de:

1. Macromoléculas: polisacáridos, lípidos, ácidos nucleicos y proteínas (Las proteínas

son las mas abundantes).

2. Agua.

Agua  El agua es el solvente ideal para los organismos vivos debido a su

Agua

El agua es el solvente ideal para los organismos vivos debido a su polaridad y a su cohesión

Es el principal componente del protoplasma bacteriano; el medio donde se producen las reacciones químicas y sus productos.

La

disponibilidad

se

mide

por

un

parámetro

denominado: actividad de agua (aw) o potencial

de agua. Valores normales entre 0.90- 0.99.

Requerimientos Nutricionales  Los microorganismos requieren para su desarrollo y actividad celular compuestos

Requerimientos Nutricionales

Los microorganismos requieren para su desarrollo y actividad celular compuestos químicos: nutrientes.

Dependiendo de las cantidades que se requieran se habla de macronutrientes, micronutrientes y factores de crecimiento.

Existen diferencias en cuanto a los requerimientos nutricionales de cada microorganismo.

 Nutrientes MACRONUTRIENTES   Carbono.  Nitrogeno.  Fosforo.  Azufre  Potasio 

Nutrientes

MACRONUTRIENTES

Carbono.

Nitrogeno.

Fosforo. Azufre

Potasio

Magnesio

Sodio

Calcio

Cloro

Hierro

 Magnesio  Sodio  Calcio  Cloro  Hierro MICRONUTRIENTES  Cromo  Cobalto 

MICRONUTRIENTES

Cromo

Cobalto

Cobre Manganeso

Molibdeno

Niquel

Selenio

Tungsteno

Vanadio y Zinc.

Factores de crecimiento  Se requieren en muy pocas cantidades y solo por algunas células:

Factores de crecimiento

Se requieren en muy pocas cantidades y solo por algunas células:

Vitaminas,

Aminoácidos,

purinas y pirimidinas.

La mayoría de los microorganismos son

capaces de sintetizarlos.

Nutrientes en solución

Moléculas

grandes

Factores de Crecimiento aa Pur, vit pir
Factores de
Crecimiento
aa
Pur,
vit
pir
Macro- nutrientes C, O, H, N. S, P, K, Ca, Mg, Fe.
Macro-
nutrientes
C, O, H, N. S, P, K,
Ca, Mg, Fe.
Micro- nutrientes Co, Cu, Mn, Se
Micro-
nutrientes
Co, Cu, Mn, Se
enzimas
enzimas

Auxotróficos

Mg, Fe. Micro- nutrientes Co, Cu, Mn, Se enzimas Auxotróficos MEMBRANA CELULAR: responsable del transporte selectivo

MEMBRANA

CELULAR:

responsable del transporte selectivo

  LOS NUTRIENTES PUEDEN SER:  
 

LOS NUTRIENTES PUEDEN SER:

 
 
  NUTRIENTE BENEFICIOSO . - Cuando el nutriente es  

NUTRIENTE BENEFICIOSO.-

Cuando

el

nutriente es

 
 

metabolizado por el microorganismo. Ej. E. coli crece de manera óptima en el medio de cultivo caldo glucosado de 5-10%

 

NUTRIENTE ADVERSO.-

Cuando

a

una

bacteria

se

le

 

adiciona

nutriente

en

mayores

cantidades

de

las que

necesita, entonces el nutriente inhibe su crecimiento.

Ejemplo: Cuando en medio glucosado al 40% de glucosa se siembra E. coli , entonces

Ejemplo: Cuando en medio glucosado al 40% de glucosa se siembra E. coli, entonces se inhibe su crecimiento, lo mismo pasa con los antibióticos.

     
 
 
 

NUTRIENTE

INDIFERENTE.-

Cuando

la

bacteria

no

 

metaboliza el nutriente y solo crecimiento. Ej. Agar-agar

le sirve de soporte para

su

LOS NUTRIENTES PUEDEN SER:  Nutriente beneficioso: Cuando el nutriente es metabolizado por el microorganismo.

LOS NUTRIENTES PUEDEN SER:

Nutriente beneficioso: Cuando el nutriente es metabolizado por el microorganismo. Ej. E. coli crece de manera óptima en el medio de cultivo caldo glucosado de 5-10% Nutriente adverso: al adicionar nutriente en mayores cantidades de las necesarias, entonces se inhibe su crecimiento. Ej. En medio glucosado al 40% se siembre E. coli, se inhibe su crecimiento.

Nutriente indiferente: cuando la bacteria no metaboliza

Nutriente indiferente: cuando la bacteria no metaboliza el nutriente y solo le sirve como soporte para
Nutriente indiferente: cuando la bacteria no metaboliza el nutriente y solo le sirve como soporte para
Nutriente indiferente: cuando la bacteria no metaboliza el nutriente y solo le sirve como soporte para

el nutriente y solo le sirve como soporte para su crecimiento. Ej. Agar- Agar.

Obtención de Energía  La transformación de la energía, generación de ATP, puede ser mediante

Obtención de Energía

La transformación de la energía, generación de

ATP, puede ser mediante 3 vías principales:

1. La respiración, que tiene lugar en presencia de

O2 y da como resultado:

proceso de oxidación.

CO2 y H2O, es un

2. La fermentación: en condiciones sin oxigeno.

3. La fotosíntesis: que obtiene la energía por

absorción de luz visible a través de la clorofila.

Metabolismo Catabolismo Anabolismo Generación d e energía Reacciones biosintéticas Fuente de Nutrientes energía

Metabolismo

Catabolismo

Anabolismo

Generación d e energía Reacciones biosintéticas Fuente de Nutrientes energía Precursores intracelulares ATP
Generación d e
energía
Reacciones
biosintéticas
Fuente de
Nutrientes
energía
Precursores intracelulares
ATP
Intermediarios biosintéticos
ADP
Biopolímeros
Productos
Estructuras
metabólicos
• Los nutrientes pueden someterse a 2 sistemas:

Los nutrientes pueden someterse a 2 sistemas:

 

SISTEMA ANABÓLICO: El cual conduce a la biosíntesis de nuevos constituyentes celulares.

 

SISTEMA CATABÓLICO: En el que se dan como resultado los compuestos de bajo peso molecular, que conforman los productos de desecho del metabolismo y que son

 

excretados, mientras otros van a servir como precursores

     

en las reacciones biosintéticas, para lo que el sistema proporciona energía (ATP).

 
 

El conjunto de estos 2 sistemas muy interrelacionados e

integrados, se conoce como METABOLISMO INTERMEDIO

METABOLISMO: Catabolismo y anabolismo NADH: Nicotín adenín dinucleótido NADPH: Nicotín adenín dinucleótido fosfato

METABOLISMO: Catabolismo y anabolismo

NADH: Nicotín adenín dinucleótido NADPH: Nicotín adenín dinucleótido fosfato FADH 2 : Flavín adenín dinuleótido

Nicotín adenín dinucleótido NADPH: Nicotín adenín dinucleótido fosfato FADH 2 : Flavín adenín dinuleótido
Enzimas  Catalizadores biológicos de naturaleza proteica.  Su accionar es esencial en el metabolismo

Enzimas

Catalizadores biológicos de naturaleza

proteica.

Su accionar es esencial en el metabolismo bacteriano.

Actúan de manera especifica a través de un

sitio activo, produciendo un efecto catalítico sobre las moléculas del sustrato,

convirtiéndola en un producto especifico.

Funcionan en forma secuencial: sistema multienzimatico.

Productos de desecho Nutrientes Anabolismo (biosíntesis) Energía para el desarrollo Energía para el movimiento,

Productos de desecho

Nutrientes

Anabolismo

(biosíntesis)

Energía para

el desarrollo

Energía para el

movimiento, transporte de nutrientes, etc

Componentes celulares

Catabolismo

Fuente de energía

Energía para el movimiento, transporte de nutrientes, etc Componentes celulares Catabolismo Fuente de energía
Enzimas Sustra to Enzim a Prod uc tos E n z i m a Complejo

Enzimas

Sustra to

Enzimas Sustra to Enzim a Prod uc tos E n z i m a Complejo Enzima-Sustrato

Enzim a

Enzimas Sustra to Enzim a Prod uc tos E n z i m a Complejo Enzima-Sustrato

Prod uc tos

Enzimas Sustra to Enzim a Prod uc tos E n z i m a Complejo Enzima-Sustrato

Enzim a

Complejo

Enzima-Sustrato

Catalizadores biológicos de naturaleza proteíca. Reducen la energía de activación de una reacción

química. Son específicos para un

sustrato.

Cofactores y coenzimas + Apoenzima (porción proteica) Cofactor o coenzima Holoenzima (toda la enzima) 

Cofactores y coenzimas

Cofactores y coenzimas + Apoenzima (porción proteica) Cofactor o coenzima Holoenzima (toda la enzima) 

+

Cofactores y coenzimas + Apoenzima (porción proteica) Cofactor o coenzima Holoenzima (toda la enzima) 

Apoenzima (porción proteica)

Apoenzima (porción proteica)

Cofactor o

coenzima

Holoenzima (toda la enzima)

Holoenzima (toda la enzima)

Moléculas no proteícas que pueden ser

orgánicas o

enzima y dan afinidad al sustrato con la

enzima para catalizar la reacción.

inorgánicas, se unen a la

Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 +

Cofactores

sustrato

Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 

Enzima

Co factor

Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 
Cofactores sustrato Enzima Co factor Algunas enzimas requieren cofactores:  Alcohol deshidrogenasa -Zn 2 + 

Algunas enzimas requieren cofactores:

Alcohol deshidrogenasa -Zn 2+ Ureasa -Ni 2+ Nitrogenasa -Mo Purivato cinasa -K + y Mg 2 +

Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una

Coenzimas

Sustrato

oxidado

Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión
Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión

Enzim a

Coenzima

reducida

Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión
Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión
Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión
Coenzimas Sustrato oxidado Enzim a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión

Sustrato

reducido

Coenzima

oxidada

a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión débil c o n
a Coenzima reducida Sustrato reducido Coenzima oxidada Las coenzimas tienen una unión débil c o n

Las coenzimas tienen una unión débil c o n la enzima. Coenzimas d e oxido-reducción: NAD, NADP, FAD, FMN. Otras coenzimas: CoA , Vitaminas.

NAD ↔ NADH Nicotinamida Adenina Di-nucleótido (NAD), es la principal coenzima de óxido-reducción.

NAD NADH

Nicotinamida Adenina Di-nucleótido (NAD), es la principal coenzima de óxido-reducción.
Nicotinamida Adenina Di-nucleótido (NAD), es la principal coenzima
de óxido-reducción.
Enzim a s - clasificación C la se Tipo de reacción que cataliza Eje mp

Enzim a s - clasificación

Enzim a s - clasificación C la se Tipo de reacción que cataliza Eje mp los

C la se

Tipo de reacción que cataliza

Eje mp los

Oxidoreductasa

Transferasa

Hidrolasa

Lia sa

Isome ra sa

Lig a sa

Oxido-reducción, donde oxígeno e

hidrógeno son ganados o perdidos.

Transferencia de grupos funcionales (amino, acetilo, fosfato)

Hidrólisis (adición d e a g u a )

Remoción d e grupos d e átomos sin hidrólisis.

Rearreglo d e átomos dentro d e una molécula.

Unión de dos moléculas (empleando

energía usualmente derivada del rompimiento de ATP.

Citocromo oxidasa. Lactato deshidrogenasa.

Acetato cinasa.

Alanina desaminasa.

Lipasa. Sucrasa.

Oxalato descarboxilasa. Isocitrato liasa.

Glucosa fosfato isomerasa. Alanina racemasa.

Acetil Co A sintetasa Ligasa.

Actividad enzimática E + S ↔ ES ↔ E + P  Una enzima, por

Actividad enzimática

E +

S ES E + P

Una enzima, por sí misma, no puede llevar

a cabo una reacción, su función es modificar

la velocidad de la reacción. La actividad enzimática es la cantidad de producto formado por unidad de tiempo.

La actividad de una enzima es modificada por factores que afectan a las proteínas,

ejemplo: la temperatura.

Modificación de la actividad enzimática El pH al influir sobre las cargas eléctricas, puede alterar

Modificación de la actividad enzimática

Modificación de la actividad enzimática El pH al influir sobre las cargas eléctricas, puede alterar la

El pH al influir sobre las cargas eléctricas, puede alterar la estructura

del centro activo y, lo

sobre la actividad enzimática.

que influirá

La temperatura elevada desnaturaliza las moléculas proteicasactivo y, lo sobre la actividad enzimática. que influirá por lo que los sitios activos se

por lo que los sitios activos se ven

modificados.

proteicas por lo que los sitios activos se ven modificados. La enzima se satura a cierta

La enzima se satura a cierta concentración del sustrato.

Actividad de la

enzima

Actividad de la enzima

Actividad de la enzima

sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración
sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración
sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración

pH

sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración
Temperatura
Temperatura
sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración
sustrato. Actividad de la enzima Actividad de la enzima Actividad de la enzima pH Temperatura Concentración

Concentración del sustrato

Fermentaciones  Una fermentación en una reacción de oxidación – reducción interna equilibrada en la

Fermentaciones

Una fermentación en una reacción de oxidación reducción interna equilibrada en la que algunos átomos de la fuente de energía (donador de electrones) se reducen, mientras otros se oxidan y la

energía se produce por fosforilación a

nivel de sustrato.

 Una ruta bioquimica muy usada para la fermentacion de la glucosa es la glucolisis,

Una ruta bioquimica muy usada para la

fermentacion de la glucosa es la glucolisis,tambien denominada via de Embden- Meyerhof .Es un proceso por el cual la

molécula de glucosa es convertida en 2 moléculas de piruvato, generando 2 ATP. Ocurre en el citosol de la célula. Comprende 10

reacciones enzimáticas

La glicolisis se puede dividir en 3 etapas

principales.

Compuestos fosforilados de alto contenido energético ATP ( trifosfato de adenosina )  ATP es

Compuestos fosforilados de alto contenido energético

ATP (trifosfato de adenosina)

ATP es la moneda de intercambio energético entre el catabolismo y

anabolismo

Células heterotróficas obtienen energía del catabolismo de los

nutrientes y lo usan para sintetizar ATP a partir de ADP + Pi

ATP dona la Energía Libre almacenada en sus enlaces fosfato de alta energía a los procesos endergónicos de síntesis (anabolismo), en el transporte a través de las membranas en contra gradientes de concentración

Transferencia de electrones: reacciones de óxido reducción 1. La transferencia de electrones es capaz de

Transferencia de electrones: reacciones de óxido reducción

1. La transferencia de electrones es capaz de hacer trabajo (ΔG)

2. Diferencia de potencial de reducción, que se mide en celdas voltaicas.

Compuesto que se oxida: pierde electrones

Compuesto que se reduce: gana electrones

Pares redox conjugados:

Fe +2 + Cu +2 Fe +3 + Cu +

Fe +2 Fe +3 + e -

Cu +2 + e - Cu +

La organización del anabolismo :

La organización

del anabolismo:

La organización del anabolismo :
Tres estados del catabolismo:

Tres estados

del catabolismo:

Tres estados del catabolismo:
Algunas Fermentaciones Microbianas más comunes:

Algunas Fermentaciones

Microbianas más

comunes:

Algunas Fermentaciones Microbianas más comunes:
A ↓ B ↓ C ↓ D ↓ E → F → G H ←
A ↓ B ↓ C ↓ D ↓ E → F → G H ←

A

B

C

D

E

→ F → G

H

Vías metabólicas forman una red compleja

Glucolisis Metabolismo aerobio de la glucosa. La máxima cantidad teórica de ATP que se puede

Glucolisis

Glucolisis Metabolismo aerobio de la glucosa. La máxima cantidad teórica de ATP que se puede obtener

Metabolismo aerobio de la glucosa. La máxima cantidad teórica de ATP que se puede obtener a partir de una molécula de glucosa es 38, aunque el rendimiento real depende del germen y de otras condiciones.

Interacciones Microbianas:

Interacciones Microbianas:

Interacciones Microbianas:
Interacciones Microbianas:
Interacciones Microbianas:

Interacciones Microbianas:

Interacciones Microbianas:
Interacciones Microbianas:
Interacciones Microbianas:

Sintrofía (Nutrición Mutua):

Sintrofía (Nutrición Mutua): Es el fenómeno por el cual dos microorganismos cooperan para degradar una sustancia

Es el fenómeno por el cual dos microorganismos cooperan para degradar una sustancia que ninguno de ellos puede degradar por separado.

FERMENTACIÓN DE ETANOL:

2CH3CH2OH + 2H2O 4H2 + 2CH3COO- + 2H+ +19.36kJ/reacción

METANOGÉNESIS: 4H2 + CO2  CH4 + 2H2O -130.69 kJ/reacción REACCIÓN ACOPLADA: 2CH3CH2OH + CO2
METANOGÉNESIS:
4H2 + CO2  CH4 + 2H2O -130.69 kJ/reacción
REACCIÓN ACOPLADA:
2CH3CH2OH + CO2  CH4 + 2CH3COO- + 2H+
-111.33 kJ/reacción
Crecimiento de poblaciones  Es el aumento en el numero de células de una población.

Crecimiento de poblaciones

Es el aumento en el numero de células de una población.

Velocidad de crecimiento es el cambio en el

numero de celulas o en la masa celular,

experimentado por unidad de tiempo.

Durante el ciclo de division celular, todos los componentes se duplican.

Tiempo de generación  Tiempo de generaci{on : es el tiempo que se requiere para

Tiempo de generación

Tiempo de generaci{on: es el tiempo que se requiere para que la poblacion se duplique. Los tiempos de generacion varian ampliamente entre las diferentes bacterias.

Ej. 1 a 3 horas, 10 min, o varios dias.

 Los tiempos de generacion varian ampliamente entre las diferentes bacterias. Ej. 1 a 3 horas,
Fases del Crecimiento bacteriano  Fase LAG : El crecimiento es lento al principio, mientras

Fases del Crecimiento bacteriano

Fase LAG: El crecimiento es lento al principio, mientras las bacterias se adaptan a los nutrientes que están en su nuevo ambiente.

Fase LOG: Una vez la maquinaria metabólica se ha

disparado, las bacterias se multiplican exponencialmente, doblando su número cada pocos minutos.

Fase ESTACIONARIA: Al haber más y más m.o. compitiendo por el alimento y los nutrientes, el crecimiento acelerado se detiene y el número de bacterias se estabiliza.

Fase de MUERTE: Se forman productos tóxicos de

desecho, la comida se agota y las bacterias

comienzan a morir.

Curva de Crecimiento bacteriano
Curva de Crecimiento bacteriano
Fase 1: de adaptación o latencia. El crecimiento de la población no inicia inmediatamente, sino

Fase 1: de adaptación o latencia.

El crecimiento de la población no inicia

inmediatamente, sino después de cierto

periodo de tiempo, el cual puede ser breve o largo, dependiendo de varios factores.

sino después de cierto periodo de tiempo, el cual puede ser breve o largo, dependiendo de
sino después de cierto periodo de tiempo, el cual puede ser breve o largo, dependiendo de
sino después de cierto periodo de tiempo, el cual puede ser breve o largo, dependiendo de
Fase 2: de crecimiento exponencial o logarítmico Es la consecuencia del hecho de que cada

Fase 2: de crecimiento exponencial o logarítmico

Es la consecuencia del hecho de que cada celula

se divide en dos. Las bacterias se encuentran en

un estado optimo.

Su velocidad esta influenciada por temperatura,

nutrientes.

en dos. Las bacterias se encuentran en un estado optimo. Su velocidad esta influenciada por temperatura,
Fase 3: estacionaria. El medio de cultivo no se renueva, comienzan a acumularse metabolitos tóxicos,

Fase 3: estacionaria.

El medio de cultivo no se renueva, comienzan

a acumularse metabolitos tóxicos, se modifica

el pH, los nutrientes se agotan, la velocidad de multiplicación se retrasa y hay un equilibrio

entre bacterias vivas y muertas.

los nutrientes se agotan, la velocidad de multiplicación se retrasa y hay un equilibrio entre bacterias
Fase 4: de Muerte. Cuando continua el crecimiento en el medio de cultivo viejo se

Fase 4: de Muerte.

Cuando continua el crecimiento en el medio de cultivo viejo

se produce una inversión numérica con respecto a la fase

exponencial. En este periodo son más las bacterias muertas que las vivas, hasta que se termina con la muerte de todas.

Si son bacterias con capacidad de esporular, se produce

la esporulación en esta fase.

se termina con la muerte de todas. Si son bacterias con capacidad de esporular, se produce
Medios de cultivo  Satisfacen las necesidades nutritivas de los microorganismos y pueden ser químicamente

Medios de cultivo

Satisfacen las necesidades nutritivas de los microorganismos y pueden ser

químicamente definidos o complejos.

Para el cultivo correcto de una bacteria es necesario conocer sus exigencias nutritivas.

Medio de Cultivo Agua + Nutrientes Apropiados  Medio de Cultivo •Fuente de energía o
Medio de Cultivo
Agua + Nutrientes Apropiados  Medio de Cultivo
•Fuente de energía o luz
•Fuente de carbono
•Fuente de Nitrógeno
*vitaminas
LÍQUIDO
Sin agar
SÓLIDO
SEMISÓLIDO
1.5% agar
0.4% agar
CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO: • Sólido POR SU ESTADO FÍSICO • Semisólido •
CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
• Sólido
POR SU ESTADO FÍSICO
• Semisólido
• Líquido
• M. comunes
• de enriquecimiento
M.
• selectivos
M.
POR SU UTILIZACIÓN
• M. diferenciales
 Medios de transporte, M. de identificación,
M.
inhbidores,etc.
POR SU COMPOSICIÓN
• M. simples
• M.complejos
• M. natural
• M. sintético
POR SU ORIGEN
• M. semisintético

REQUERIMIENTOS

REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES

NUTRICIONALES

Compuestos amino

nitrogenados

Factores de crecimiento

Fuentes de energía

Buffers

Sales minerales y metales

 
 

Agentes selectivos

 

Indicadores

 

Agentes gelificantes

FUENTES NUTRITIVAS

Peptona, hidrolizado de proteínas, infusiones,

extractos

Sangre, suero, extracto de levadura, vitaminas

Alcoholes, carbohidratos

Fosfatos, acetatos, citratos

Fosfato, sulfato, magnesio, calcio, hierro

Antimicrobianos, colorantes, químicos

Rojo de fenol, rojo neutro

Agar, gelatina, alginato, sílica gel

AGAR NUTRITIVO : Peptona de gelatina 5g Extracto de carne 3g Agar bacteriológico pH 6.8

AGAR NUTRITIVO:

Peptona de gelatina

5g

Extracto de carne

3g

Agar bacteriológico pH 6.8 +/- 0.2

15g

AGAR Mc CONKEY:

Agar bacteriológico pH 6.8 +/- 0.2 15g AGAR Mc CONKEY: Digerido pancreático de Peptona de gelatina

Digerido pancreático de Peptona de gelatina

17 g

Digerido péptico de tejido animal

1.5g

Digerido pancréatico de caseína

1.5g

Lactosa

10g

Rojo neutro Sales biliares Cloruro de sodio Agar bacteriológico Cristal violeta pH 7.1 +/- 0.2

0.03g, 1.5g, 5.0g 13.5g, 0.001g

Sales biliares Cloruro de sodio Agar bacteriológico Cristal violeta pH 7.1 +/- 0.2 0.03g, 1.5g, 5.0g
Sales biliares Cloruro de sodio Agar bacteriológico Cristal violeta pH 7.1 +/- 0.2 0.03g, 1.5g, 5.0g
Preparación de un Medio de Cultivo Pesar la cantidad necesaria de acuerdo al medio que

Preparación de un Medio de Cultivo

Pesar la cantidad necesaria de acuerdo al medio que se preparará

Reconstituir con agua destilada, si es necesario usar calor.

que se preparará Reconstituir con agua destilada, si es necesario usar calor. Esterilizar Plaquear o verter
que se preparará Reconstituir con agua destilada, si es necesario usar calor. Esterilizar Plaquear o verter
que se preparará Reconstituir con agua destilada, si es necesario usar calor. Esterilizar Plaquear o verter

Esterilizar

que se preparará Reconstituir con agua destilada, si es necesario usar calor. Esterilizar Plaquear o verter

Plaquear o verter en tubos

Preparación de un Medio de Cultivo

Preparación de un Medio de Cultivo

Preparación de un Medio de Cultivo
Siembra de microorganismos en medio sólido PRINCIPALES OBJETIVOS: • Aislamiento de colonias bacterianas •

Siembra de microorganismos en medio

sólido

PRINCIPALES OBJETIVOS:

Aislamiento de colonias bacterianas

Identificación bioquímica

ALGUNOS MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS: • AgarTripticasa de soya, Agar nutritivo • Agar Mc Conkey
ALGUNOS MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS:
• AgarTripticasa de soya, Agar nutritivo
• Agar Mc Conkey ( aislamiento de gram negativos)
• Agar Manitol salado (aislamiento de Staphylococcus)
Temperatura  La temperatura es un factor ambiental importante en el control de crecimiento microbiano.

Temperatura

La temperatura es un factor ambiental

importante en el control de crecimiento microbiano.

Los M.O pueden agruparse según los márgenes de temperatura que requieren.

Se distinguen 4 grupos:

1. Psicrofilos 3. Termofilos

2. Mesófilos 4. Hipertermofilos.

Clases de M.O. según la temperatura optima de crecimiento Tipo Rango de Temperatura M.O. Temperatura

Clases de M.O. según la temperatura optima de crecimiento

Tipo

Rango de

Temperatura

M.O.

Temperatura

Optima

Psicrofilo

0 - 20

15

Algas

Mesofilo

20

- 40

38

E. coli

Termofilo

40

- 70

60

Bacillus

 

stearothermophillus

Hipertermofilos

90

- 115

106

Thermus acuaticus

Temperatura Clases de m.o. según la temperatura
Temperatura
Clases de m.o. según la temperatura
pH  La acidez o alcalinidad de un medio tiene una gran importancia sobre el

pH

La acidez o alcalinidad de un medio tiene

una gran importancia sobre el crecimiento microbiano.

La mayoría crecen a un pH entre 6 y 8. El pH intracelular debe permanecer próximo a la neutralidad.

pH y Capacidad Tampón  La acidez o alcalinidad de un medio tiene gran influencia

pH y Capacidad Tampón

pH y Capacidad Tampón  La acidez o alcalinidad de un medio tiene gran influencia en

La acidez o alcalinidad de un medio tiene gran influencia en la estabilidad de macromoléculas tales como las enzimas

Las bacterias crecen con mayor rapidez en la escala de 6.0 8.0 Las levaduras entre 4.5 6.0

Los hongos filamentosos entre 3.5

4.0

Presión osmotica  Los solutos (sales y azúcares) disueltos se desplazan a zonas de menor

Presión osmotica

Los solutos (sales y azúcares) disueltos se desplazan a zonas de menor concentración.

El agua se desplaza a zonas de mayor

concentración de solutos

Una presión osmótica alta causa pérdida de agua y plasmólisis de la célula

Halófilas: bacterias que toleran altas concentraciones salinas

Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 % de sales

PRESENCIA DE OXÍGENO EN EL MEDIO  Los microorganismos pueden dividirse de acuerdo a las

PRESENCIA DE OXÍGENO EN EL MEDIO

PRESENCIA DE OXÍGENO EN EL MEDIO  Los microorganismos pueden dividirse de acuerdo a las necesidades

Los microorganismos pueden dividirse de acuerdo a las necesidades de O 2 en:

Los aerobios crecen con tensión de O 2 total. Los microaerófilos, pueden utilizar este gas sólo cuando su tensión es más baja que la del aire, por su limitada capacidad de respirar. Los anaerobios carecen de sistemas respiratorios y no pueden utilizar el

oxígeno como aceptor terminal de

electrones. Hay anaerobios facultativos o aerotolerantes y anaerobios estrictos.

el oxígeno como aceptor terminal de electrones. Hay anaerobios facultativos o aerotolerantes y anaerobios estrictos.
Oxigeno Los microorganismos son muy variables en cuanto a la necesidad del oxigeno. Se dividen

Oxigeno

Los microorganismos son muy variables en cuanto a la necesidad del oxigeno. Se dividen de acuerdo a las necesidades de O 2 :

1.Aerobios estrictos: los que requieren oxigeno como aceptor terminal de electrones, no proliferan en ausencia de O2. ej. Mycobacterium bovis.

2.Microaerofilos: utilizan O2 a niveles muy bajos. Un 12%. No proliferan en la superficie de medios sólidos. Usan O2 sólo cuando su tensión es más baja que la del aire, por su limitada capacidad de respirar. Ej. Campylobacter

Oxigeno 3. Anaerobios estrictos : no emplean oxigeno para su metabolismo, sino que obtienen su

Oxigeno

3. Anaerobios estrictos: no emplean oxigeno

para su metabolismo, sino que obtienen su

energía de reacciones fermentativas. Carecen de sistemas respiratorios y no

pueden utilizar el oxígeno como aceptor

terminal de electrones. Ej. Clostridium tetani

4. Anaerobios facultativos o aerotolerantes: pueden crecer en presencia o ausencia de oxigeno,

proliferan mediante procesos oxidativos, utilizando

oxigeno como aceptor terminal de electrones, o en anaerobiosis, empleando reacciones de fermentación para obtener energía. Ej.

Enterobacterias, Bacterias acidolacticas,

Streptococcus

Requerimientos de O 2 Aerobio Anaerobio obligado obligado Anaerobio facultativo Microaerofílico Carencia de

Requerimientos de O 2

Aerobio

Anaerobio

obligado

obligado

de O 2 Aerobio Anaerobio obligado obligado Anaerobio facultativo Microaerofílico Carencia de enzimas
de O 2 Aerobio Anaerobio obligado obligado Anaerobio facultativo Microaerofílico Carencia de enzimas

Anaerobio

facultativo

Anaerobio obligado obligado Anaerobio facultativo Microaerofílico Carencia de enzimas Implicaciones en los

Microaerofílico

obligado obligado Anaerobio facultativo Microaerofílico Carencia de enzimas Implicaciones en los procesos

Carencia de enzimas

Implicaciones en los procesos infecciosos y Dx por el laboratorio

Cultivo de microorganismos en el Laboratorio

Cultivo de microorganismos en el Laboratorio Roberto Koch Para estudiar un microorganismo debe estar en cultivo

Roberto Koch

Cultivo de microorganismos en el Laboratorio Roberto Koch Para estudiar un microorganismo debe estar en cultivo

Para estudiar un microorganismo debe estar en cultivo axénico

estudiar un microorganismo debe estar en cultivo axénico Para ello desarrollaron varios métodos ingeniosos para

Para ello desarrollaron varios métodos ingeniosos para obtenerlos, el más

útil es el aislamiento de colonias

individuales sobre medios sólidos

aislamiento de colonias individuales sobre medios sólidos “clon” a partir de un solo microorganismo se forma
aislamiento de colonias individuales sobre medios sólidos “clon” a partir de un solo microorganismo se forma

“clon” a partir de un solo microorganismo se forma una población

colonia

de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
de un solo microorganismo se forma una población colonia Se busca que las colonias estén separadas
Se busca que las colonias estén separadas unas de otras: “aislamiento”
Se busca que las
colonias estén separadas
unas de otras:
“aislamiento”

Medio de cultivo

Colonias microbianas

Colonias microbianas

Colonias microbianas
Colonias microbianas
Colonias microbianas
Colonias microbianas
Colonias microbianas
Colonias microbianas
Características de las colonias

Características de las colonias

OBSERVACIÓN: Se visualizan macroscópicamente
OBSERVACIÓN:
Se visualizan macroscópicamente
Características de las colonias OBSERVACIÓN: Se visualizan macroscópicamente
 Gracias por su atención 7 4

Gracias por su atención 74