Mini Luke

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BOLETÍN GRASEQA
SEGURIDAD ALIMENTARIA
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INVESTIGACIÓN GRASEQA: SEGURIDAD ALIMENTARIA

Veinte años de análisis de residuos de

plaguicidas en frutas y hortalizas
ANTONIA GARRIDO FRENICH*, ROBERTO ROMERO-‐GONZÁLEZ, PATRICIA PLAZA-‐BOLAÑOS Y
JOSÉ LUIS MARTÍNEZ-‐VIDAL
UNIVERSIDAD DE ALMERÍA, Departamento de Química y Física, Escuela Politécnica Superior y Facultad de
Ciencias Experimentales, Universidad de Almería, 04120 Almería. E-‐mail: agarrido@ual.es

El análisis de residuos de plaguicidas (RPs) en los últimos años ha experimentado un gran avance,
incrementando la capacidad de los laboratorios de análisis tanto en el número de muestras analizadas por
unidad de tiempo como en el de analitos determinados simultáneamente. A este avance ha contribuido por
un lado la simplificación de las etapas de tratamiento de la muestra, con la implementación de métodos de
extracción genéricos (por ejemplo QuEChERS), así como el acoplamiento de las técnicas cromatográficas, de
gases y/o de líquidos, con distintos analizadores de espectrometría de masas (MS), lo cual también ha
contribuido a la mejora en la seguridad de los procesos de identificación y confirmación. Dicho acoplamiento
ha permitido además llevar a cabo análisis retrospectivos así como identificar compuestos desconocidos o
no incluidos inicialmente en la lista objeto de análisis, ampliando de manera significativa las capacidades en
los laboratorios de rutina. En el presente artículo se pretende describir la situación actual del análisis de RPs
en vegetales, incidiendo en los principales avances llevados a cabo en los últimos 20 años y que han
supuesto un significativo impulso en este ámbito.

1. Introducción Hoy en día en la mayoría de países
desarrollados hay establecidos programas de
Como es bien sabido, una amplia variedad de control de residuos de plaguicidas (RPs), tanto
productos fitosanitarios se aplican en la en productos nacionales como importados,
producción hortofrutícola con el objetivo de los cuales son de interés mutuo para
incrementar la cantidad y calidad de los productores, comerciantes y consumidores.
productos. Sin embargo, los plaguicidas Los métodos de análisis utilizados para dicho
control deben de presentar una serie de
pueden permanecer como residuos en las
características, tales como (i) permitir la
frutas y hortalizas, incluso después de ser determinación simultánea de un gran número
lavadas, almacenadas y procesadas [1]. Por de plaguicidas, es decir métodos multi-‐
ello, a fin de garantizar la seguridad residuo (MMR); (ii) presentar alta sensibilidad
alimentaria, organizaciones internacionales y y selectividad; (iii) ofrecer confirmación de la
diversos países han establecido límites identidad; (iv) permitir la cuantificación de
máximos de residuos (LMRs) para una gran cualquier residuo detectado, y (v)
proporcionar información analítica en el
variedad de combinaciones plaguicida/matriz
menor tiempo posible. Para alcanzar este
[2,3]. Teniendo en cuenta el alto número de último objetivo es fundamental la reducción
plaguicidas aplicados en agricultura a nivel del tiempo tanto en la etapa de preparación
mundial, así como la diversidad de matrices, de la muestra como en la del análisis
no en todos los países están establecidos los instrumental por técnicas de cromatografía de
LMRs para todos los posibles binomios gases (GC) o de líquidos (LC). En este sentido,
dichos métodos deben de cumplir una serie
plaguicida/matriz. Para estos casos se ha
de requisitos en cuanto a su funcionamiento y
establecido un LMR por defecto, aunque
validación [5,6] y disponer de actividades de
dicho valor varía de un país a otro, siendo de control de calidad interno y externo y, los
0.01 mg/kg en la Unión Europea y Japón, y de laboratorios que los aplican, estar acreditados
0.1 mg/kg en Nueva Zelanda [4]. según la Norma UNE-‐EN ISO 17025 [7]. Todo
3

BOLETÍN GRASEQA Nº 7 – ENERO 2014
ello pretende asegurar la calidad y fiabilidad El aumento de la complejidad ha seguido una
del resultado analítico, y lleva asociado un doble pauta. Por una parte ha crecido el
considerable coste económico para los número de analitos y de familias de
laboratorios de ensayo. compuestos con diferentes características
físico-‐químicas objeto de análisis; por otra
Sin duda en las últimas dos décadas se ha parte, se ha ampliado el número de matrices
producido un gran avance en el campo del bajo control, de acuerdo con lo establecido
análisis de RPs en frutas y hortalizas. Dichos por la Guía SANCO [6], oscilando ampliamente
avances han ido de la mano del desarrollo y en cuanto a su contenido en agua, ácido y
mejora de la instrumentación analítica (fases grasa. La interacción entre esos dos factores
estacionarias, cromatógrafos, detectores, da lugar a un escenario complicado si se tiene
etc.). En consecuencia, en este trabajo se en cuenta que un MMR de amplio espectro
presenta la evolución en cuanto a: (a) debe de contar con cerca de 200 compuestos
métodos de extracción, observando un en GC-‐MS y de 300 en LC-‐MS.
cambio desde de técnicas clásicas como la
extracción sólido-‐líquido, que presentan un Los métodos de extracción y de limpieza han
gran consumo de disolventes orgánicos y tenido que hacer frente al reto descrito,
largos tiempos de procesado, a métodos acentuando el carácter genérico de los
genéricos como el QuEChERS (acrónimo de mismos, a fin de cubrir una amplia gama de
sus cualidades en inglés, rápido, fácil, barato, compuestos y matrices y experimentando una
efectivo, robusto y seguro) que minimizan evolución hacia la automatización y la
ambas características anteriores, y (b) miniaturización con el objetivo de disminuir el
determinación por LC y GC, evolucionando consumo de disolventes orgánicos, la
desde detectores clásicos, UV-‐vis, reducción de costes y el tiempo de
fluorescencia, captura de electrones (ECD) o manipulación de la muestra.
nitrógeno-‐fósforo (NPD), a detectores de
espectrometría de masas (MS). Finalmente Así, los métodos tradicionales de Luke y Luke
todo ello se enmarca en el escenario de los modificado o mini-‐Luke [8,9], desarrollados
costes económicos asociados a la aplicación para extraer plaguicidas organoclorados y
de dichos métodos al análisis de muestras en organofosforados de muestras alimentarias,
laboratorios de ensayo acreditados. emplean acetona y posteriormente un
reparto con disolventes no-‐polares,
2. Evolución de los métodos de diclorometano y éter de petróleo para el
método Luke, y acetato de etilo y ciclohexano
extracción para el método Luke modificado. Por tanto,
Durante estos últimos veinte años los estos métodos consumen un alto volumen de
métodos de extracción para análisis de RPs en disolvente orgánico y de tiempo por muestra
frutas y hortalizas han experimentado una procesada. En los años 90, la Administración
evolución consistente con los cambios Nacional de Alimentación de Suecia propuso
habidos en el problema analítico. En la Figura un procedimiento basado en el empleo de
1 puede observarse una representación del acetato de etilo como agente extractante (sin
incremento de la complejidad de los servicios posteriores etapas de partición), permitiendo
analíticos demandados a los laboratorios de la extracción simultánea de un mayor número
análisis de RPs, desde los métodos mono-‐ de plaguicidas [10], y que hasta hace unos 10
residuo, a los MMR (monofamilia y años ha sido ampliamente utilizado en los
multifamilia) y métodos multiclase, en los que laboratorios de ensayo. Además el empleo de
además de plaguicidas, se analizan de manera homogeneizadores de alta velocidad como
simultánea otras familias de compuestos Polytron [11] han permitido reducir el tiempo
como medicamentos veterinarios, de extracción y la cantidad de disolvente
micotoxinas, etc. empleado.
4

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compuestos polares y/o no volátiles, y/o 150 plaguicidas en menos de 30 minutos

termolábiles. (Figura 3a).
De manera general, para que el análisis de un La aplicación de GC al análisis de RPs se debió
determinado compuesto sea compatible con principalmente a las características de los
GC, no sólo debe mostrar elevada volatilidad compuestos analizados, tales como volatilidad
a temperaturas por debajo de 350-‐400ºC, sino y baja polaridad, proporcionando una buena
que también debe ser resistente a la eficiencia en la separación, sensibilidad y
degradación ó a la reacción con otros capacidad de identificación de los analitos. Sin
compuestos a dichas temperaturas [21]. El embargo, en los últimos años se ha
análisis por GC consta de varias etapas experimentado una creciente tendencia al
incluyendo la introducción de la muestra desarrollo de nuevos plaguicidas con
(inyección), separación y detección. El estructuras más complejas y de mayor
desarrollo y la optimización de un método de polaridad, que proporcionan una mejor
separación por GC incluye el estudio de respuesta mediante LC [24]. De esta forma,
numerosas variables como son tipo de aunque LC y GC son técnicas
inyección, fase estacionaria (longitud, complementarias, existe una clara tendencia
diámetro, fase estacionaria), rampa de hacia el uso de LC [25].
temperatura ó gas portador (tipo, flujo)
empleados. La inyección de la muestra es sin Aunque LC, en su versión denominada
lugar a dudas un aspecto clave en el análisis cromatografía de líquidos de alta eficacia
por GC, pudiendo distinguir 4 tipos como los (HPLC) ha sido ampliamente utilizada en los
más comunes: inyección con división (split), laboratorios mundiales durante más de 40
sin división (splitless), en columna (on-‐column) años, en la última década hay una demanda
y vaporización a temperatura programada creciente para la disminución del tiempo de
(programmed-‐temperature vaporization, PTV) análisis, así como de incrementar el número
[22]. de compuestos analizados, disminuyendo por
tanto los costes del análisis. Aunque para
Este último modo es de los más utilizados hoy alcanzar este objetivo se han desarrollado
en día para la determinación de RPs debido a diversas estrategias como incrementar el flujo
sus múltiples ventajas, como reducir la de fase móvil o la temperatura de la columna,
termodegradación de los compuestos, puesto la que ha tenido un mayor éxito ha sido la
que cada analito migra a la columna a su utilización de fases estacionarias con un
temperatura óptima. Además el empleo de tamaño de partícula inferior a 2 µm, dando
rellenos inertes (carbofrit) mejora la precisión lugar lo que se denomina cromatografía de
y la forma de los picos cromatográficos [23], y líquidos de ultra alta eficacia (UHPLC), que
prolonga los plazos de mantenimiento del permite una considerable reducción del
instrumento. En relación a la fase tiempo de análisis sin comprometer la eficacia
estacionaria, las columnas más utilizadas para o la resolución de la separación
la separación de RPs son las que contienen cromatográfica [26], como puede observarse
una fase estacionaria compuesta por un 5 % en la Figura 3b, donde se consigue la elución
de difenilsiloxano y un 95 % de de más de 50 plaguicidas en menos de 10
dimetilsiloxano, presentando una longitud minutos.
promedio de 30 m. Por ejemplo, esta columna
se ha empleado para la separación de más de
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Otra forma de incrementar la eficiencia y la disolución reguladora o ácido/base débil), y

velocidad de separación es mediante el uso de metanol o acetonitrilo como fase orgánica.
de partículas superficialmente porosas como
son las columnas disponibles en el mercado En lo que respecta a la detección, GC y LC han
bajo las marcas comerciales Halo, Ascentis, sido acopladas a sistemas de detección
Kinetex o Poroshell [29], y que generalmente convencionales. Así GC se acoplaba a
se basan en un núcleo de sílice sobre la que se detectores ECD [30], que permitían el análisis
deposita una capa porosa homogénea. Esta de plaguicidas conteniendo elementos
tecnología ha permitido alcanzar electronegativos como halógenos (p. ej. DDTs
rendimientos similares a UHPLC pero que contienen Cl), y NPD [31,32], que eran
trabajando a presiones típicas de HPLC. empleados para determinar compuestos
conteniendo N y/o P, tales como los
En relación con las fases móviles empleadas plaguicidas organofosforados, o detectores de
en la cromatografía en fase reversa, indicar ionización de llama (FID) [33]. Por otro lado,
que tienen carácter polar, siendo muy LC se acoplaba a detectores como
frecuente el uso de combinaciones de agua fluorescencia [34], UV-‐visible [35] o diodos en
como fase acuosa (con la adición de una fila [36].
a
Tabla 2. Características de los principales analizadores de espectrometría de masas
Analizador Características Principales aplicaciones
QqQ Alta sensibilidad en modo de trabajo MRM, Determinación cuantitativa de compuestos

sencillez, bajo precio, amplio rango lineal diana, inferior a 150-‐200 compuestos
IT Alta sensibilidad, capacidad de realizar sucesivas Determinación cuantitativa de compuestos diana
n
fragmentaciones (MS ), bajo rango de masas de (< 150 compuestos), mayor capacidad de
trabajo, número limitado de iones monitorizados elucidación estructural que QqQ
de manera simultánea
Q-‐LIT Combina la selectividad de QqQ y la capacidad de Identificación y cuantificación de compuestos
n
realizar sucesivas fragmentaciones (MS ) de IT. diana. Apropiado para identificar compuestos
Mayor rango de trabajo que IT que exhiben una pobre fragmentación
TOF Adquisición en modo barrido completo. Alta Útil en métodos de cribado. Identificación de
resolución y exactitud de masas. Peor sensibilidad compuestos desconocidos basados en la
que QqQ exactitud de masas y perfil isotópico. Análisis
retrospectivo
QqTOF Adquisición en modo barrido completo o MS/MS. Útil en métodos de cribado. Identificación de
Alta resolución en la medida de iones producto compuestos desconocidos basados en la
exactitud de masas, perfil isotópico y
fragmentación. Análisis retrospectivo
Orbitrap Adquisición en modo barrido completo. Mayor Útil en métodos de cribado. Identificación de
resolución que TOF desconocidos basados en la exactitud de masas y
perfil isotópico. Análisis retrospectivo
a
Abreviaturas: IT: Trampa de iones; MRM: Monitorización de reacciones múltiples; MS: Espectrometría de masas; QqQ:
Triple cuadrupolo; QqTOF: Cuadrupolo acoplado a tiempo de vuelo; TOF: Tiempo de vuelo.
La principal debilidad de estos sistemas de suficientemente libre de interferencias para

detección clásicos es la carencia de una poder llevar a cabo la determinación.
confirmación inequívoca de la identidad del
compuesto, de manera que es necesario Es por ello que el acoplamiento de las técnicas
realizar un segundo análisis, bien empleando cromatográficas con MS ha supuesto una gran
una columna analítica diferente, o bien evolución en el análisis de RPs ya que MS
realizando un análisis con sistemas de MS ofrece mejores características en términos de
[37,38]. En consecuencia, los tiempos de selectividad y sensibilidad, requisitos
análisis se extienden en exceso. Además, dada indispensables en el análisis de residuos y
la falta de selectividad de estos detectores, se contaminantes a niveles traza en muestras
requieren largos métodos de extracción con el complejas. Además, en función a lo
objetivo de obtener un extracto lo establecido en la Decisión 2002/657/CE [5] de
la Comisión Europea, "los métodos de
9

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información estructural como para dilucidar laboratorios que emplean analizadores de

estructuras complejas, o bien no permiten la espectrometría de masas de alta resolución
identificación de compuestos no incluidos en (HRMS) es reducido, y limitado a laboratorios
la lista objeto de análisis. Este inconveniente de amplia experiencia con personal altamente
se solventa usando analizadores híbridos cualificado. Queda por ver si, al igual que
como son el QqTOF o Q-‐Exactive, en los que el ocurrió por ejemplo con los primeros sistemas
tercer cuadrupolo se sustituye por un de LC-‐MS, cuyo uso se extendió muy
analizador de alta resolución (TOF u Orbitrap gradualmente por su elevado coste inicial,
respectivamente). Debido a que estos podemos asistir a una implementación de la
analizadores adquieren en modo barrido HRMS en los laboratorios de RPs de manera
completo (full scan) los hace idóneos para los generalizada.
métodos de cribado y para la identificación de
compuestos desconocidos como En consecuencia, puede señalarse que,
determinados productos de transformación mientras los analizadores de LRMS como Q, IT
[49]. Como ejemplo, en la Figura 4, se o QqQ se emplean para el análisis de
muestra el caso de la detección e compuestos diana, los analizadores de HRMS,
identificación de clorpirifos en una muestra como Orbitrap, TOF o QqTOF, están
vegetal, en la que se puede observar que el enfocados tanto al análisis de compuestos
espectro experimental y teórico de dicho diana (métodos de cribado) como de
compuesto coincide, incluyendo su perfil compuestos desconocidos o no buscados.
isotópico.
Por lo tanto y a la vista de los diferentes tipos
Estos analizadores están siendo cada vez más de técnicas cromatográficas, sistemas de
utilizados en los laboratorios de ensayo ionización, analizadores de masas y
[13,50,51], complementando a los actuales modalidades de registro de datos (Tabla 3), se
sistemas de espectrometría de masas de baja puede concluir que la GC-‐MS y LC-‐MS
resolución (LRMS). Esta complementariedad presentan una gran variedad de
se puede definir desde el punto de vista de: (i) combinaciones adaptables a las necesidades
una ampliación de las capacidades de del laboratorio de análisis de trazas. Además,
identificación (p.ej. mediante la realización de el empleo de GC-‐MS y LC-‐MS ha influido en
medidas de masa exacta), y (ii) del alcance de los métodos de extracción, de manera que
los métodos (p.ej. ampliación de los analitos son menos exhaustivos, con una menor
hasta 500 compuestos en una sola inyección). dedicación a la etapa de limpieza, gracias a la
Si bien es cierto que el número de mayor selectividad proporcionada por la
propia técnica de determinación.

Tabla 3. Resumen de las diferentes posibilidades en GC-‐MS y LC-‐MS
Detección-‐Identificación-‐Cuantificación
Separación
Introducción e Ionización Analizador Modo de trabajo
Ionización Electrónica (EI) Cuadrupolo (Q) o Triple Barrido completo
Ionización Química (CI) Cuadrupolo (QqQ) Monitorización de iones
GC Electronebulización (ESI) Trampa de iones (IT) seleccionados (SIM)
Ionización Química a Presión Tiempo de vuelo (TOF) Espectrometría de masas en
LC Atmosférica (APCI) Orbitrap tándem (MS/MS)
Fotoionización a Presión Analizadores híbridos (p.
Atmosférica (APPI) ej. QqTOF)

11

4. Perspectiva económica carácter genérico para matrices y familias de

El desarrollo de métodos de análisis para RPs compuestos. Los equipos de análisis
en frutas y hortalizas debe hacer consistente cromatográfico, tanto de GC como de LC, han
un balance entre el cumplimiento de los incorporado mejoras en cuanto a sistemas de
criterios normativos, legales y de inyección o fases estacionarias. Los actuales
funcionamiento, con otros requerimientos sistemas de detección de MS permiten la
para la competencia y productividad del identificación segura de cientos de
laboratorio (p.ej.. alto número de analitos por compuestos por análisis cromatográfico y su
método y corto tiempo de análisis). Todo ello detección a bajos niveles de concentración,
junto a factores tales como costes asociados cercana en los actuales MMR a 1 µg/kg en
al mantenimiento del sistema de calidad, equipos de QqQ de última generación. Sin
inversión en equipos y su mantenimiento, embargo, a pesar de la tendencia al uso de
desarrollo/mejora continua de métodos, MMR, hay plaguicidas o familias de
control de calidad y costes de personal, plaguicidas que por su dificultad se siguen
influyen poderosamente en la rentabilidad de analizando hoy en día mediante métodos
los laboratorios que realizan análisis de RPs. mono-‐residuo o monofamilia. Como ejemplos
Estudiando los resultados interanuales de podemos citar: herbicidas ácidos (glifosato);
laboratorios acreditados, la “Daily Effective herbicidas de la familia de los quats
Capacity” [52], entendida como “máximo (paraquat, diquat); herbicidas clorofenoxi
número de muestras que un laboratorio ácidos (2,4-‐D, 2,4,5-‐T) y fungicidas de la
acreditado puede realizar al día”, podría familia de las ftalimidas (captan, folpet,
establecerse en la actualidad en unas 30 captafol) o de los ditiocarbamatos (ziram,
muestras/día empleando GC-‐QqQ/MS (para ferbam), entre otros.
unos 150 analitos en un MMR) y en unas 65
Los criterios de validación de métodos para el
muestras/día empleando UHPLC-‐QqQ/MS
control de RPs han sido normalizados a nivel
(para unos 150 analitos en un MMR); todo
internacional, incorporando la estimación de
ello considerando tiempos de análisis,
la incertidumbre de las medidas, a fin de
actividades control de calidad interno y de
lograr una validación completa de los mismos.
mantenimiento de equipos.
Los controles de calidad internos y externos
En estos laboratorios los costes fijos resultan precisos para obtener resultados analíticos
muy altos en comparación con los variables. comparables figuran como piedras angulares
Ello se debe fundamentalmente a tres en el proceso de acreditación de laboratorios
factores: (a) necesidad de personal bien de análisis. Desde la perspectiva de realizar
formado, (b) baja productividad relativa de los investigación, a fin de ser transferida a
equipos considerando su alto coste y el bajo laboratorios de ensayo, el coste real de un
número de muestras que analizan al día, y (c) MMR debe ser tenido en cuenta a la hora de
costes asociados al sistema de calidad. proponer nuevos métodos de análisis. La
inversión en equipos, costes asociados a su
5. Conclusiones mantenimiento y calibración, inversión en
En el presente artículo se ha descrito el patrones, tiempo de análisis y número de
avance experimentado en instrumentación y analitos en el MRM, entre otros, son factores
métodos de análisis para RPs en frutas y clave en el escenario de trabajo y a considerar
hortalizas en los últimos veinte años. Dichos en el desarrollo de las nuevas metodologías.
avances han sido consistentes con el
desarrollo de normas internacionales a fin de Referencias
[1] M.I. Cervera, C. Medina, T. Portolés, E. Pitarch, J.
garantizar alimentos libres de RPs. Los
Beltrán, E. Serrahima, L. Pineda, G. Muñoz, F. Centrich,
métodos de extracción han evolucionado F. Hernández, Multi-‐residue determination of 130
durante este periodo a fin de disminuir tanto multiclass pesticides in fruits and vegetables by gas
el consumo de disolvente como el tiempo chromatography coupled to triple quadrupole tandem
dedicado a la extracción, incrementado su mass spectrometry, Anal. Bioanal. Chem. 397 (2010)
2873–289.
12


[2] Reglamento (CE) n° 396/2005 del Parlamento 9450-‐9459.
Europeo y del Consejo, de 23 de febrero de 2005 [14] S.J. Lehotay, K. Mastovska, A.R. Lightfield, Use of
relativo a los límites máximos de residuos de plaguicidas buffering and other means to improve results of
en alimentos y piensos de origen vegetal y animal y que problematic pesticides in a fast and easy method for
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96/23/CE del Consejo en cuanto al funcionamiento de plant origin -‐ Determination of pesticide residues using
los métodos analíticos y la interpretación de los GC-‐MS and/or LC-‐MS/MS following acetonitrile
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hollow-‐fiber supported liquid membrane extraction to González, J.L. Martínez-‐Vidal, A. Garrido-‐Frenich,
the simultaneous determination of pesticide residues in Comprehensive qualitative and quantitative
vegetables by liquid chromatography/mass determination of pesticides and veterinary drugs in
spectrometry. Rapid Commun. Mass Spectrom. 20 honey using liquid chromatography-‐Orbitrap high
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14


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(Orbitrap) mass spectrometry, Anal. Bioanal. Chem. 403
(2012) 2891-‐2908.

Los autores del trabajo son miembros del Grupo de Investigación “Química Analítica de Contaminantes” de la Universidad
de Almería. Una de las líneas de trabajo con más tradición en dicho Grupo ha sido la aplicación de técnicas de
cromatografía-‐espectrometría de masas al desarrollo, validación y aplicación de métodos de análisis en el campo de la
Seguridad Alimentaria. En este ámbito los métodos multi-‐residuo para plaguicidas han ocupado un lugar relevante,
aportando mejoras en aspectos tales como número de analitos por análisis cromatográfico, tiempo de análisis o coste del
mismo. Así, el Grupo ha pretendido participar durante estos últimos 25 años del avance en instrumentación y
metodologías, atendiendo a la transferencia de sus resultados mediante su implantación en laboratorios de ensayo para su
acreditación bajo la Norma UNE-‐EN ISO 17025, así como a la formación de postgrado. El Grupo ha dirigido, desde un punto
de vista científico técnico, cinco laboratorios de ensayo para análisis de residuos de plaguicidas en la provincia de Almería
durante este tiempo, y finalmente ha creado una empresa de base tecnológica, LAB, que cuenta actualmente con una
plantilla cercana a los 40 trabajadores, de los cuales un apreciable número son doctores, y que en el año 2013 ha analizado
unas 30.000 muestras. Asimismo, el Grupo ha participado en diversos proyectos (internacionales, nacionales y regionales)
en el campo de la Seguridad Alimentaria. Conscientes del importante reto que significa la internacionalización
mantenemos colaboraciones con grupos de investigación ubicados en distintos países, tanto europeos, de América Latina,
Estados Unidos, Marruecos o Túnez. Todo ello ha contribuido al hecho de que la Universidad de Almería se haya significado
en publicaciones y avances a nivel internacional en este campo de trabajo.

15


Control de micotoxinas en alimentos

NATALIA ARROYO-‐MANZANARES, JOSÉ F. HUERTAS-‐PÉREZ, LAURA GÁMIZ-‐GRACIA
y ANA M. GARCÍA-‐CAMPAÑA*
UNIVERSIDAD DE GRANADA, Departamento de Química Analítica, Grupo de Investigación
FQM-‐302-‐Calidad en Química Analítica Alimentaria, Ambiental y Clínica
(www.ugr.es/~fqm302/), Campus de Fuentenueva s/n, 18071 Granada
E-‐mail: amgarcia@ugr.es

1. Introducción incluso causan la muerte de animales y
personas [2].
Las alarmas alimentarias en Europa han
generado un gran interés y preocupación en La Organización para la Agricultura y la
los consumidores respecto a los productos y Alimentación (FAO) estima que las
su suministro, siendo cada vez más necesario micotoxinas afectan a una cuarta parte de los
el establecimiento de medidas adecuadas de cultivos a nivel mundial, incluyendo alimentos
control que garanticen un consumo seguro básicos, piensos o cultivos de gran valor como
del alimento. En la Unión Europea (EU) se han el café. Según datos publicados por el Sistema
implantado estrategias prioritarias para de Alerta Rápida para Alimentos y Piensos
asegurar la inocuidad de los alimentos, (RASFF) [3], las micotoxinas son las sustancias
recogidas en el Libro Blanco sobre Seguridad tóxicas o contaminantes que mayor número
Alimentaria [1]. de notificaciones presentan, seguidos por los
de origen biológico y los plaguicidas. Esto
El Libro Blanco establece que el análisis del
ocasiona importantes pérdidas económicas
riesgo debe ser la base política de la seguridad
debido a sus efectos sobre la salud de las
alimentaria, mediante sus tres componentes:
personas, la productividad de los animales y el
evaluación del riesgo (asesoramiento
comercio nacional e internacional. En los
científico y análisis de datos), gestión del
países en desarrollo, donde los alimentos
riesgo (reglamentación y control) y
básicos (como el maíz y frutos secos) son
comunicación del riesgo. Los alimentos
susceptibles de contaminación, la población
pueden contener organismos o sustancias
puede verse también afectada de forma
peligrosas, que formen parte del mismo o
significativa por la morbilidad y las muertes
hayan sido introducidas durante las
prematuras relacionadas con las micotoxinas
operaciones de procesamiento, que se
si no se toman medidas.
denominan agentes químicos de riesgo. Su
presencia puede deberse a, entre otras En la actualidad hay más de 300 micotoxinas
causas, residuos procedentes de la adición conocidas de muy diferentes estructuras
intencionada de sustancias (como los químicas y diferentes modos de acción en los
plaguicidas, los medicamentos veterinarios y seres vivos, siendo las más importantes desde
otros productos utilizados en la producción el punto de vista de la seguridad alimentaria
primaria) o sustancias tóxicas presentes las toxinas producidas por mohos de los
naturalmente en los alimentos (como las géneros Aspergillus, Fusarium y Penicillium,
micotoxinas). Las micotoxinas son entre las que se encuentran las aflatoxinas,
metabolitos secundarios altamente tóxicos ocratoxina A, las fumonisinas y los
producidos por ciertos hongos que se tricotecenos. En la Tabla 1 se encuentra una
desarrollan en productos agrícolas y cuya clasificación de los distintos tipos de
ingestión, inhalación o absorción cutánea micotoxinas en función del hongo productor y
reducen la actividad, hacen enfermar o del alimento en el que su aparición es
frecuente.
16


Tabla 1. Principales tipos de micotoxinas, hongo productor y alimentos afectados
Tipo de hongo Micotoxinas producidas Alimentos afectados
Maíz, sorgo, arroz, trigo, semillas
oleaginosas, especias y frutos secos
Aspergillus parasiticus Aflatoxinas B 1 , B 2 , G 1 , G 2
(almendras, pistacho, nuez, coco, nuez de
Brasil, etc.)
Aspergillus flavus Aflatoxinas B 1 y B 2 Idem
Metabolito de aflatoxina B1 en
Aflatoxina M 1 Leche y productos lácteos
mamíferos
Fusarium sporotrichioides Toxinas T-‐2 y HT-‐2 Cereales y derivados
Deoxinivalenol
Fusarium graminearum (o nivalenol) Cereales y derivados
Zearalenona
Fusarium moniliforme
Fumonisinas B 1 y B 2 Maíz y derivados, sorgo, espárrago
(F. verticillioides)
Penicillium verrucosum
Ocratoxina A Cereales, vino, frutas, café
Aspergillus ochraceus
Penicillium expansum Patulina Manzana, zumos y derivados
Aspergillus, Penicilium y
Citrinina Cereales, arroz rojo, frutas y quesos
Monascus
Aspergillus versicolor Esterigmatocistina Cereales, café, jamón, pimienta y queso
Alcaloides ergóticos
Hypocreales (Claviceps
(o del cornezuelo de Cereales
purpúrea), Eurotiales
centeno)

La presencia de estas micotoxinas en los identificado unos 16 compuestos, pero sólo
alimentos puede ser individual o simultánea las aflatoxinas B 1 (AFB 1 ), B 2 (AFB 2 ), G 1 (AFG 1 ),
con otras, lo que puede provocar efectos G 2 (AFG 2 ) y M 1 (AFM 1 ) se analizan
sinérgicos en su acción sobre el organismo, rutinariamente, siendo la más peligrosa de
aumentando así su toxicidad. Elevados niveles todas la AFB 1 [6]. Los animales que consumen
de micotoxinas en la dieta pueden causar alimentos contaminados por aflatoxinas B son
efectos adversos agudos o crónicos sobre la capaces de metabolizarlas, hidroxilándolas en
salud del hombre y una gran variedad de una posición determinada. Así, a partir de la
especies animales, afectando a distintos AFB 1 se forma la AFM 1 , y a partir de la AFB 2
órganos, aparatos o sistemas, especialmente se forma la aflatoxina M 2 (AFM 2 ) y estos
al hígado, riñón, sistema nervioso, endocrino metabolitos son secretados en la leche.
e inmunitario. Los síntomas causados por las
micotoxinas suelen ser tan diferentes unos de Instituciones nacionales y organizaciones
otros como lo son las propias estructuras internacionales, como la Comisión Europea, la
químicas de dichas toxinas [4] (Figura 1). En Food and Drug Administration (FDA) de
cuanto a la toxicidad crónica, la Agencia EE.UU., la Organización Mundial de la Salud
Internacional de Investigación sobre el Cáncer (WHO) y la FAO han reconocido los
(International Agency for Research on Cancer, potenciales riesgos para la salud de los
IARC) [5] clasifica varias micotoxinas como animales y humanos que plantea la
carcinógenas o potencialmente carcinógenas contaminación de alimentos por micotoxinas,
para el hombre, siendo las aflatoxinas las que abordando este problema mediante la
presentan un mayor riesgo como agentes adopción de límites reglamentarios para los
carcinógenos. Dentro de las aflatoxinas se han compuestos más relevantes. Así, la EU tiene
establecidos unos contenidos máximos
17

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2. Métodos de análisis postcolumna mediante una disolución de

yodo o bromo, o mediante hidrólisis por
La obligación de aplicar los límites fotodegradación usando una lámpara UV y un
reglamentarios ha impulsado el desarrollo de reactor [21-‐24]. Otras micotoxinas que no
métodos analíticos para la identificación y presentan fluorescencia nativa también se
cuantificación de micotoxinas en alimentos, han determinado usando HPLC-‐FL con
piensos y matrices biológicas. Esto implica el derivatización, como es el caso de las
empleo de métodos de análisis contrastados fumonisinas [25,26] o T-‐2 y HT-‐2 [27]. El
que cumplan con unos requerimientos de acoplamiento de HPLC y la espectrometría de
calidad establecidos y con los sistemas de masas (MS) mediante técnicas de ionización a
control de seguridad alimentaria con el fin de presión atmosférica (Atmospheric Pressure
preservar la salud de la población [11]. Existen Ionization, API), como la ionización por
diversos métodos de análisis recomendados electrospray (Electrospray Ionization, ESI) o la
para la determinación de micotoxinas en ionización química a presión atmosférica
alimentos, como los Métodos Oficiales de (Atmospheric-‐Pressure Chemical Ionization,
Análisis de la Asociación de Químicos APCI), ha permitido el desarrollo de nuevas
Analíticos Oficiales (AOAC) [12] donde se metodologías para la determinación de
pueden encontrar más de cincuenta métodos micotoxinas [28].
validados para la determinación de diversas
micotoxinas en gran variedad de alimentos, o Algunos artículos de revisión recogen los
los métodos normalizados propuestos por la métodos de determinación de micotoxinas
Organización Internacional para la mediante HPLC-‐MS [15,29]. Además,
Normalización (ISO) y el Comité Europeo de mediante el empleo de MS en tándem
Normalización (CEN). Los análisis requieren un (MS/MS), usando detectores como la trampa
alto grado de exactitud y por esta razón se de iones (Ion Trap, IT) y el triple cuadrupolo
usan métodos recomendados o se lleva a (QqQ), es posible la identificación y
cabo la validación de los nuevos métodos cuantificación de los analitos en mezclas
propuestos a través de procedimientos que complejas, siendo imprescindibles para la
garanticen la calidad de los resultados, confirmación de resultados positivos
incluido el uso de materiales de referencia obtenidos con otras detecciones. HPLC-‐
certificados, o de comparaciones MS/MS ha permitido también el
interlaboratorio. establecimiento de métodos multirresiduo,
que abarquen micotoxinas de diferentes
Los métodos analíticos publicados en la última familias. En este contexto, recientemente se
década para la determinación de micotoxinas han propuesto métodos HPLC-‐MS/MS para,
en alimentos y sus principales aplicaciones, por ejemplo, la determinación simultánea de
han sido recopilados en diversos artículos de OTA, ácido micofenólico y fumonisina B2 (FB 2 )
revisión [13-‐20], siendo los más numerosos en productos cárnicos [30], 27 micotoxinas y
los que emplean cromatografía de líquidos otros metabolitos secundarios en maíz [31],
(HPLC) con detección UV o fluorescencia (FL), 49 micotoxinas diferentes en diversos
ya que ciertas micotoxinas (OTA, aflatoxinas) alimentos [32] o 21 micotoxinas en alimentos
presentan fluorescencia nativa y este tipo de infantiles [33]. En los últimos años el empleo
detección ofrece ciertas ventajas, como de fases estacionarias con un tamaño de
mayor sensibilidad y selectividad. Existen partícula inferior a los 2 ʅm ha originado el
numerosos métodos HPLC-‐FL para la desarrollo de la cromatografía de líquidos de
determinación de OTA sin derivatización ultra resolución (UHPLC), mejorando la
previa en distintas matrices, principalmente eficacia del proceso cromatográfico al trabajar
en vinos, café o cerveza. En el caso de las a altos flujos de la fase móvil sin pérdida de la
aflatoxinas, su fluorescencia se muestra calidad de la separación cromatográfica,
atenuada en presencia de ciertos disolventes, reduciendo notablemente el tiempo de
siendo necesaria su derivatización bien análisis para la determinación simultánea de
precolumna con ácido trifluoroacético, o un elevado número de compuestos. Son cada
19

vez más numerosas las aplicaciones de esta bajas. Por otra parte, la complejidad de los
técnica acoplada a detección MS/MS; como alimentos, donde se encuentran presentes
ejemplo, la determinación simultánea de cantidades importantes de proteínas, lípidos,
micotoxinas de varias familias en cerveza hidratos de carbono, agua y otros
[34,35]. En nuestro grupo de investigación componentes minoritarios, requiere
hemos aplicado esta técnica al control de generalmente una purificación de los
micotoxinas en productos botánicos [36], extractos, para eliminar las sustancias
frutos secos [37], cereales y pseudocereales interferentes antes de realizar la medida
[38] y melazas de cereal [39]. analítica.
Además, en los últimos años las técnicas de El empleo de columnas de inmunoafinidad

separación miniaturizadas han cobrado gran (Immuno Affinity Column, IAC) [45] constituye
interés debido a las numerosas ventajas que el método de extracción más común hoy en
presentan, tales como la reducción del día en los laboratorios de rutina para la
consumo de disolventes, bajo volumen de extracción y purificación de micotoxinas [46],
muestras requerido, incremento en la siendo además el seleccionado por la mayoría
resolución e incluso una mejorada de los métodos recomendados, incluido el de
sensibilidad. Dentro de los sistemas la Farmacopea, para la determinación de AFB 1
miniaturizados se incluyen los que utilizan [10]. Esta técnica consiste en el empleo de
columnas de reducido diámetro interno (HPLC columnas empaquetadas con un relleno en el
capilar) o capilares de sílice fundida que se inmoviliza un anticuerpo específico
(electroforesis capilar, CE). A pesar de las frente al analito que se quiere determinar. La
ventajas de la HPLC capilar respecto a la HPLC carga de la muestra en la columna da lugar a
convencional la única aplicación de este tipo la captura selectiva del analito gracias a la
de cromatografía en el análisis de micotoxinas especificidad del reconocimiento antígeno-‐
es la desarrollada en nuestro grupo usando la anticuerpo, mientras que otros componentes
detección por fluorescencia inducida por láser de la muestra eluyen sin retenerse en la
(LIF) para la determinación de OTA en vinos columna. Posteriormente pueden eliminarse
[40,41]. En cuanto al empleo de la CE, los restos de extracto indeseables mediante un
bajos límites de detección requeridos para la disolvente de lavado adecuado, y por último
determinación de estos contaminantes en la etapa de elución permitirá obtener el
alimentos hacen que la LIF sea igualmente analito aislado para su determinación. Las
una técnica ideal para su detección, micotoxinas tienen, por lo general, un peso
empleándose por ejemplo, en la molecular bajo, comportándose como
determinación de ZEN en maíz [42], en la haptenos. Los anticuerpos producidos
determinación semicuantitativa (screening) de (monoclonales) requieren una unión a
aflatoxinas [43] o para su cuantificación en distintos transportadores tales como la
arroz, sin necesidad de procesos de agarosa, sefarosa o dextrano (soporte), para
derivatización previos y con límites de fijarlo en la fase estacionaria. Actualmente se
detección comprendidos entre 0.04 y 0.52 µg comercializan IACs para aflatoxinas del grupo
Kg-‐1 [44]. B, G y M, OTA, DON, fumonisinas, T-‐2 y ZEN.
También se han desarrollado IACs que
3. Extracción de micotoxinas y permiten la extracción y la purificación
purificación de extractos simultánea de varias micotoxinas, como la
OchraAflaprep para aflatoxinas y OTA. Sin
Las micotoxinas en los alimentos presentan embargo, las IACs presentan como principales
una distribución poco uniforme por lo que se inconvenientes su elevado coste, lentitud y,
requiere, además de un proceso de toma de en ocasiones, bajas recuperaciones, además
muestra adecuado, una cuidadosa de su limitado uso en determinaciones
homogeneización de ésta, previa a la multirresiduo.
extracción de estos residuos que además se
suelen encontrar en concentraciones muy
20


Dadas las limitaciones de las IACs, en los consta de dos etapas: la primera etapa
últimos años se han propuesto tratamientos consiste en una extracción con disolvente
de muestra alternativos para mejorar la orgánico y reparto de la fase acuosa y
eficacia de los procedimientos de extracción orgánica mediante salting-‐out, seguido de una
de micotoxinas y limpieza de los extractos, limpieza usando extracción en fase sólida
considerando las tendencias actuales en dispersiva (dSPE) con diferentes sorbentes
cuanto a simplificación y miniaturización de (C18 , amina primaria y secundaria, PSA,
los sistemas de tratamiento de muestra, carbón grafitizado, etc.).
introduciendo disolventes menos
contaminantes y disminuyendo en lo posible Recientemente se ha empleado en la
las cantidades de disolventes orgánicos determinación de micotoxinas de Fusarium
utilizados, en línea con los principios de la [49] y en el desarrollo de métodos
llamada Química Verde, que implican una multirresiduo en cereales [38, 50-‐54] y en
mayor seguridad y un menor coste en relación melazas de cereales [39]. Esta metodología
a los procesos convencionales. Además, se también ha sido utilizada en métodos
han propuesto procedimientos de extracción multirresiduo para la determinación conjunta
genérica multirresiduo que permitan su de distintas familias de contaminantes, entre
posible automatización y/o aumentar la las que se incluyen micotoxinas [55-‐57]. En
rapidez de tratamiento. A continuación se nuestro laboratorio se ha comparado este
describen algunos de los tratamientos de tratamiento con otros aplicados a la
muestras propuestos en los últimos años para extracción de OTA en vino [41]. En la Figura 2
el análisis de micotoxinas. se muestra el esquema de tratamiento de
muestra y la naturaleza de los disolventes y
3.1. Extracción en fase sólida sales usados para la extracción. Para su
dispersiva (dSPE)-‐QuEChERS determinación se empleó HPLC capilar con
detección por LIF (láser He-‐Cd con excitación
QuEChERS es una metodología rápida y barata a 325 nm), añadiendo a la fase móvil un
de tratamiento de muestra muy aplicada medio micelar aniónico para aumentar la
durante los últimos años, introducida para la intensidad de fluorescencia y mejorar la
determinación de pesticidas, pero que está eficacia. El límite de cuantificación (LOQ) fue
siendo empleada para la extracción y 286 ng L-‐1, la desviación estándar relativa
purificación de otros compuestos, como (DER) fue inferior al 6.0 % y se obtuvieron
antibióticos y micotoxinas [47]. Esta recuperaciones por encima del 81% para
metodología QuEChERS presenta varias vinos blanco, rosado y tinto.
ventajas, como su simplicidad y su eficiencia
en la limpieza de muestras complejas para
análisis multirresiduo [48]. Este tratamiento
21

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comportamientos químicos muy diferentes a Otro aspecto de gran interés es la evaluación
las micotoxinas de origen, no siendo de la presencia en los alimentos de las
detectadas en los análisis de rutina. Este llamadas micotoxinas emergentes derivadas
fenómeno ocurre fundamentalmente en las de hongos del género Fusarium, como
toxinas de Fusarium (tricotecenos, ZEN y fusaproliferina, moniliformina, beauvericina y
fumonisinas), aunque se han descrito también eniatinas, cuya presencia es frecuente en
para otras micotoxinas. Así, como mecanismo alimentos procedentes del norte de Europa y
detoxificador, algunas plantas son capaces de paises del Mediterráneo. A diferencia de otras
convertir los relativamente apolares micotoxinas mucho más estudiadas,
tricotecenos y ZEN en derivados más polares a actualmente no existen contenidos máximos
través de conjugación con azúcares, permitidos para estas micotoxinas debido
aminoácidos o grupos sulfato, con objeto de fundamentalmente a la escasez de datos
compartimentarlos en vacuolas. No obstante, relacionados con su presencia en alimentos,
estas formas podrían ser hidrolizadas a sus nivel de contaminación y toxicidad. Aunque
precursoras en el tracto digestivo de los no hay descritos casos de micotoxicosis
animales, pudiendo presentar efectos tóxicos debidos a la ingesta de estas micotoxinas,
comparables a los de las micotoxinas libres. algunos estudios (la mayoría in vitro) revelan
la posible toxicidad de estos compuestos, que
Igualmente los procesos tecnológicos tienen podría verse aumentada como consecuencia
un papel importante en los mecanismos de de la interacción de varias micotoxinas
enmascaramiento, fundamentalmente en presentes en el mismo alimento. En este
productos derivados de cereales, ya que sentido la Autoridad Europea de Seguridad
pueden inducir reacciones con Alimentaria (EFSA) ha emitido diversos
macromoléculas tales como azúcares, informes sobre su posible riesgo en alimentos
proteínas o lípidos, o la liberación de las y piensos [81]. Es por ello que, con el fin de
formas nativas por descomposición de los evaluar mejor el riesgo que suponen para la
derivados enmascarados. Los datos salud pública estas micotoxinas emergentes,
toxicológicos relativos a micotoxinas será necesario disponer de métodos analíticos
enmascaradas son escasos, pero varios sensibles y selectivos para distintas matrices
estudios ponen de relieve la amenaza de alimentos [82,83].
potencial que supone la presencia de estos
compuestos para la seguridad de los Referencias
consumidores. En particular, la posible
hidrólisis de la micotoxina enmascarada [1] Libro Blanco sobre Seguridad Alimentaria.
Comisión de las Comunidades Europeas. Bruselas,
(generando la micotoxina inicial) durante la 12-‐1-‐2000. COM (1999) 719 final.
digestión de los mamíferos sería un factor de [2] J.M. Soriano del Castillo (Ed.). “Micotoxinas en
riesgo a tener en consideración. Así, alimentos”. Díaz de Santos, Madrid, 2007.
productos con una aparentemente baja [3]http://ec.europa.eu/food/food/rapidalert/index_en.h
tm
contaminación por micotoxinas, han inducido
[4] E. M. Faustman, G. S. Ommenn, en: C. D Klassen
efectos tóxicos debido a la presencia de (Ed.), Casarett y Doull, Fundamentos de
fumonisinas "ocultas", liberadas tras la Toxicología, McGraw Hill Interamericana, Madrid,
hidrólisis. De este modo, las micotoxinas 2005, pp. 50.
enmascaradas pueden contribuir [5] International Agency for Research on Cancer
(IARC) (2012). Disponible en: http://www.iarc.fr
cuantitativamente a la cantidad total de [6] G. S. Shephard, Aflatoxin analysis at the beginning
micotoxinas presentes en matrices como el of the twenty-‐first century. Anal. Bioanal. Chem.
maíz y sus productos derivados. Por lo tanto, 395 (2009) 1215-‐1214.
es prioritario que se desarrollen métodos [7] Reglamento (CE) Nº 1881/2006 por el que se fija el
contenido máximo de determinados
analíticos para la determinación multiclase de
contaminantes en los productos alimenticios.
micotoxinas que incluyan a sus distintos DOUE L364 (2006) 5-‐24.
productos de transformación, con objeto de [8] Recomendación 2012/154/UE sobre el control de
evaluar el riesgo que suponen para la salud la presencia de alcaloides de cornezuelo en los
del consumidor [79,80]. piensos y los alimentos. DOUE L77 (2012) 20-‐21.
27

[9] Recomendación 2013/165/UE sobre la presencia subsequent development of an improved method.
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molécula, aumentándose así el espectro generación, sin embargo algunas

antimicrobiano y mejorando la actividad publicaciones han propuesto que este grupo
contra gram-‐positivos, anaerobios y de quinolonas pertenecen a una cuarta
microbacterias. generación. El principal rasgo diferenciador de
Cuarta generación. En los últimos años han esta generación es una mayor potencia
aparecido nuevas quinolonas que incorporan antibacteriana y mayor biodisponibilidad oral
pequeñas modificaciones estructurales que sus antecesores.
respecto a las quinolonas de tercera
Tabla 1. Clasificación de las quinolonas por generaciones
No fluoradas Fluoroquinolonas
Primera Generación Segunda Generación Tercera Generación Cuarta Generación
Ácido nalidíxico Norfloxacina Difloxacina Trovafloxacina
Ácido oxolínico Enoxacina Amifloxacina Gatifloxacina
Ácido piromídico Perfloxacina Temafloxacina Moxifloxacina
Ácido pipemídico Ciprofloxacina Lomefloxacina Balofloxacina
Cinoxacina Ofloxacina Esparfloxacina Gemifloxacina
Resoxacina Flerofloxacina Levofloxacina Pazufloxacina
Tosufloxacina
Clinafloxacina
Sarafloxacina

El uso de los antibióticos en veterinaria para sobre todo, la administración de bajos niveles
el tratamiento de enfermedades en el ganado de antibióticos puede dar lugar a la aparición
destinado al consumo humano, así como su de bacterias resistentes, que pueden llegar a
utilización en forma de aditivos en granjas los humanos a través de dichos alimentos [4,
industriales, han dado como resultado que 5] (Figura 2). Este hecho hace inútiles
deba considerarse su presencia potencial de fármacos que hace algunos años podían ser
estos compuestos en alimentos de origen muy efectivos en el tratamiento de ciertas
animal. Los residuos de antibióticos en infecciones. Además de estos efectos
alimentos pueden provocar reacciones adversos inmediatos, podrían existir también
alérgicas en individuos hipersensibles, pero efectos a largo plazo, aún desconocidos.
Resistencia bacteriana
a las quinolonas
Consumo de carne
y leche
contaminadas

Figura 2. Transmisión de resistencia a quinolonas de animales a seres humanos

Por los motivos anteriormente mencionados, estableciendo unos Límites Máximos de
organismos encargados de la vigilancia de la Residuos (LMR). El LMR representa aquella
salud pública, como la European Agency for concentración permitida de un principio
the Evaluation of Medical Products (EMEA) de activo en alimentos de origen animal
la Unión Europea o la Food and Drug (músculo, hígado, riñón, grasa, leche, huevo,
Administration (FDA) de los Estados Unidos, etc.) que al ser ingerida por el ser humano, no
han desarrollado normativas de control de constituye ningún riesgo para su salud. En la
estos compuestos en diferentes tejidos Tabla 2 se recogen los LMR para quinolonas
animales, destinados al consumo humano, de uso veterinario establecidos por la EMEA.
33

Tabla 2. Límites Máximos de Residuos (LMR) de quinolonas de uso veterinario establecidos por la EMEA
-‐1
Sustancia Especie animal LMR (µg kg ) Tejido
Danofloxacina Ganado ovino, bovino 200 Músculo
y caprino 100 Grasa
400 Hígado, Riñón
30 Leche
Aves de corral 200 Músculo
100 Grasa
Resto 100 Músculo
50 Grasa
Sarafloxacina Pollos 10 Piel + Grasa
100 Hígado
Salmónidos 30 Músculo + Piel
Ciprofloxacina Ganado ovino, bovino 100 Músculo, Grasa, Leche
+ y caprino 300 Hígado
Enrofloxacina 200 Riñón
Ganado porcino y conejos 100 Músculo, Grasa
200 Hígado
300 Riñón
Aves de corral 100 Músculo, Grasa+piel
200 Hígado
300 Riñón
Resto 100 Músculo, Grasa
Difloxacina Aves de corral 300 Músculos
400 Grasa + Piel
1900 Hígado
600 Riñón
Ganado ovino, bovino 400 Músculo
y caprino 100 Grasa
1400 Hígado
800 Riñón
Ganado porcino 400 Músculo
100 Grasa
Resto 300 Músculo
100 Grasa
800 Hígado
600 Riñón
Marbofloxacina Ganado bovino y porcino 150 Músculo, Hígado, Riñón
50 Grasa
Ganado bovino 75 Leche
Flumequina Ganado bovino, ovino, 200 Músculo
caprino y porcino 300 Grasa
500 Hígado
1500 Riñón
Ganado bovino, ovino 50 Leche
y caprino
Aves corral 400 Músculo
250 Piel + Grasa
800 Hígado
100 Riñón
Peces 600 Músculo + Piel
Resto 200 Músculo
250 Grasa
500 Hígado
1000 Riñón
Ácido oxolínico Todas especies destinadas 100 Músculo
a producción de alimentos 50 Grasa
34


En este contexto, se hace necesario llevar a una técnica de extracción que permita
cabo un control de los alimentos destinados al purificar y aislar las quinolonas del resto de la
consumo humano para así garantizar la salud matriz.
del consumidor. De ahí, el desarrollo en los Las quinolonas son sustancias solubles en
últimos 20 años de una gran variedad de disolventes orgánicos polares, no siéndolo en
métodos analíticos capaces de cuantificar disolventes muy apolares como el hexano o el
residuos de quinolonas en productos tolueno. Teniendo en cuenta sus propiedades
alimenticios de origen animal, con el objetivo ácido-‐base, su solubilidad en agua pura es
final de permitir un control tóxico-‐sanitario de limitada, pero pueden disolverse fácilmente
los alimentos destinados al consumo humano. en medio ácido y/o básico, dependiendo de
las características de la quinolona. Así pues,
2. Análisis de quinolonas en los agentes extractantes más usados
tradicionalmente han sido los disolventes
alimentos de origen animal orgánicos polares y las disoluciones acuosas o
hidroorgánicas a pH adecuado. En muchos
2.1. Propiedades fisicoquímicas
casos la extracción se ha llevado a cabo
El desarrollo de metodologías analíticas para
mediante simple agitación [8-‐10], aunque
la determinación de quinolonas parte de las
también se han empleado técnicas más
propiedades fisicoquímicas más relevantes de
complejas como ultrasonidos (US) [11-‐13],
estos compuestos. Las quinolonas son
extracción con fluidos supercríticos (SFE) [14],
química y térmicamente estables, siendo
extracción con disolventes presurizados (PLE)
resistentes a la hidrólisis y a las altas
[15-‐17], extracción asistida con microondas
temperaturas. Presentan como parte de su
(MAE) [18, 19] y dispersión de matriz en fase
estructura grupos ionizables que determinan
sólida [20]. Recientemente, con el objetivo de
sus propiedades ácido-‐base, de modo que
reducir los volúmenes de disolvente
dependiendo del pH, estos compuestos
empleados e incrementar los factores de
pueden ser neutros, catiónicos, aniónicos o
enriquecimiento, se han propuesto técnicas
anfóteros. Otra propiedad que presentan es
de microextracción tales como la
que absorben radiación UV, mostrando dos
microextracción líquido-‐líquido dispersiva
bandas de absorción: una entre 300 y 350 nm,
(DLLME) y la microextracción en fase sólida
que es común para todas las quinolonas, y
dispersiva (DMSPE) [21].
una segunda banda entre 245 y 290 nm que

es más específica para cada sustancia [6]. Las
quinolonas también se caracterizan por 2.3. Métodos de limpieza (“clean-‐up”)
presentar fluorescencia nativa, su espectro de Como consecuencia de la naturaleza compleja
excitación coincide con el espectro de de las muestras objeto de estudio,
absorción molecular, mientras que su normalmente se requiere de una etapa previa
espectro de emisión consta de una banda de limpieza antes de la determinación
ancha centrada entre 350 y 400 nm en el caso analítica. La mayoría de los tratamientos
de quinolonas ácidas, y entre 440 y 500 nm en descritos en la bibliografía especializada
el de las anfóteras. Es importante destacar consisten en extracciones líquido-‐líquido (LLE)
que, a medida que aumenta el pH del medio, y/o extracciones en fase sólida (SPE). Sin
la intensidad de fluorescencia disminuye, de embargo, el procedimiento de limpieza puede
manera que la forma aniónica no presenta variar ampliamente, sin tener necesariamente
fluorescencia nativa [7]. que depender de la matriz o del disolvente
usado en la etapa de extracción; mientras que
algunos autores describen extensos
2.2. Métodos de extracción
tratamientos de limpieza que involucran

varias etapas de extracción líquido-‐líquido o
Para llevar a cabo la determinación de
combinaciones de extracciones líquido-‐líquido
residuos de quinolonas en alimentos de
con extracciones en fase sólida, otros autores
origen animal se requiere, en primer lugar, de
35

realizan etapas de limpieza más sencillas e de uso menos frecuente han sido la
incluso algunos llegan a prescindir de dicha electroforesis capilar (CE) y sobre todo la
etapa [14]. cromatografía de gases (GC).
La extracción líquido-‐líquido es la técnica de
limpieza más empleada cuando la extracción 2.4.1. Métodos de cromatografía de gases
de las quinolonas se lleva a cabo con Las quinolonas son sustancias muy polares y
disolventes orgánicos puros. Puede tratarse no volátiles, como consecuencia, para su
de una limpieza simple con hexano, para análisis mediante GC deben obtenerse
eliminar grasas, pero gracias a las previamente derivados volátiles. Existen muy
características ácido-‐base de las quinolonas, pocos trabajos publicados donde se emplee la
se pueden realizar extracciones líquido-‐ GC como método de análisis de quinolonas.
líquido en las que el analito se trasfiere de En ellos se emplea la reducción con NaBH 4 ,
una fase a otra por control del pH [22, 23]. puesto que la esterificación daría lugar a
También es habitual la combinación de estas compuestos excesivamente polares [30, 31].
particiones ácido-‐base con la etapa de lavado
con hexano [24, 25]. 2.4.2. Métodos de electroforesis capilar
Los procedimientos de limpieza basados en Una técnica que ha experimentado un gran
SPE se aplican fundamentalmente después de auge en los últimos años es la CE debido a su
la extracción de las quinolonas con gran capacidad y versatilidad para la
disolventes polares. El algunos casos, previa a resolución de mezclas complejas de
la SPE, se lleva a cabo una etapa de LLE con compuestos. Esto se debe a que los capilares
hexano. Los cartuchos de SPE más usados empleados tienen mayor número de platos
para llevar a cabo la etapa de limpieza han teóricos que las columnas cromatográficas.
sido los de sílice de fase reversa, Sin embargo, el número de publicaciones
principalmente los C18 [10, 26, 27]; los dedicadas a la determinación de quinolonas
poliméricos, como ENV+ y HLB [11,13] y en en alimentos es en la actualidad todavía bajo.
menor grado los de sílice de intercambio Sus principales aplicaciones se han
catiónico [28], para quinolonas que pueden establecido empleando como sistema de
encontrarse como especies catiónicas. detección la espectrofotometría de absorción
Recientemente se han empleado los molecular UV-‐visible [32, 33]. Como resultado
polímeros de impresión molecular (MIPs), de la baja sensibilidad inherente a la
dando lugar a la técnica de extracción en fase detección UV-‐Vis, se han adoptado diversas
sólida basada en los mismos (MISPE). Esta estrategias para mejorar los límites de
técnica es altamente selectiva, aunque no se detección. Entre ellas se encuentra el empleo
ha sido muy empleada en el análisis de de la detección fluorescente inducida por
residuos de quinolonas en alimentos. Tan sólo láser [34, 35]; el uso de técnicas de
Yan y Row [29] describen su aplicación en la preconcentración on-‐line, como el
determinación de enrofloxacina y denominado “sweeping” [36]; o el empleo de
ciprofloxacina en músculo de pollo. dispositivos de preconcentración in-‐line,
como los concentradores de analito [16]. Con
2.4. Técnicas de determinación respecto a los acoplamientos CE–MS, indicar
La mayoría de los métodos usados para la que comúnmente se han llevado a cabo
determinación de residuos de quinolonas en utilizando mediante electrospray (ESI).
alimentos de origen animal emplean la Aunque en auge actualmente, la CE–MS ha
cromatografía de líquidos (LC) para llevar a sido escasamente usada para la
cabo la separación de los analitos, mientras determinación de quinolonas en alimentos de
que la detección se lleva a cabo origen animal [37, 38].
habitualmente mediante el uso de la
espectrofotometría de absorción molecular 2.4.3. Métodos de cromatografía de líquidos
UV-‐visible, la espectrofluorimetría o la La LC ha sido la técnica más empleada para la
espectrometría de masas (MS). Otras técnicas determinación de residuos de quinolonas en
36


alimentos de origen animal. La separación se 3. Conclusiones

ha llevado a cabo principalmente con
columnas de fase reversa C18 y C8, aunque Durante los últimos 20 años se han dedicado
también se han empleado las fases fenilo y un gran número de trabajos científicos al
amida. Las fases móviles han consistido análisis de residuos de quinolonas en
principalmente en mezclas binarias ACN-‐H 2 O, productos animales destinados al consumo
aunque también se han utilizado de forma humano. Aunque muchos de estos métodos
habitual las mezclas ternarias de ACN-‐MeOH-‐ se han desarrollado para el análisis de
H 2 O, ACN-‐THF-‐H 2 O y ACN-‐Dimetilformamida-‐ quinolonas individuales o para dos o tres
H 2 O. En relación al pH, habitualmente se compuestos en el mejor de los casos, la
mantiene en el rango de 2 a 4 para reducir así tendencia actual es al desarrollo de métodos
la ionización de los grupos silanol y minimizar multi-‐residuo, que ofrecen grandes ventajas
su interacción con los analitos, que estarán para propósitos de control.
presentes como especies catiónicas. La El tratamiento de muestra para el análisis de
disolución reguladora de fosfatos ha sido la quinolonas varía ampliamente de unos
más usada para ajustar el pH. En el caso de la métodos a otros, sin dependencia de la matriz
detección con MS, los aditivos más empleados o los analitos de interés. La tendencia en los
son el acetato de amonio y los ácidos fórmico, últimos años ha sido reducir el tiempo de
acético y trifluoroacético. análisis y el volumen de disolvente empleado
Para la detección se ha descrito el uso de en la extracción dando lugar a métodos más
diferentes técnicas espectroscópicas, tales amigables con el medio ambiente.
como la espectrofotometría de absorción UV-‐ Por último, debido a que las quinolonas son
Vis [39-‐41], la espectrofluorimetría [11, 42] y compuestos polares, y la mayoría de ellas
la espectrometría de masas [10, 15, 17, 20, fluorescentes, la cromatografía de líquidos
25, 43, 44]. con detección fluorescente ha sido una
Si se realiza un estudio cronológico de los técnica analítica muy usada para análisis de
tipos de detección empleados a lo largo de los rutina. Sin embargo, para fines reguladores y
años, los primeros métodos dedicados a la debido a su inherente capacidad de
determinación de quinolonas en muestras de caracterización, actualmente se prefiere y
alimentos usaban casi exclusivamente la recomienda la espectrometría de masas
detección UV; posteriormente se optó por acoplada a la cromatografía de líquidos.
usar la detección fluorimétrica, debido a su
mayor sensibilidad y selectividad; y Agradecimientos
actualmente, debido a su alta especificidad, la Los autores agradecen al Instituto de Salud
detección mediante espectrometría de masas Carlos III la concesión de un contrato
es la opción más elegida para análisis de postdoctoral “Sara Borrell” a la Dra.
confirmación. Inmaculada Jiménez Díaz.

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39


Inmaculada Jiménez Díaz es Doctora en Ciencias Químicas por la Universidad de Granada desde
marzo de 2009. Su Tesis Doctoral estuvo centrada en el estudio de tensioactivos y sus productos de
degradación en muestras ambientales mediante el uso de distintas técnicas separativas (LC-‐UV, LC-‐
FD, GC-‐MS). Tras doctorarse, disfrutó de un contrato como técnica de investigación del Ciber de
Epidemiología y Salud Pública (CIBERESP), dedicándose primordialmente al desarrollo de
metodología analítica para la determinación de disruptores endocrinos en placentas humanas
mediante LC-‐MS/MS y su aplicación a muestras de la Cohorte INMA (Infancia y Medio Ambiente).
Posteriormente, fue investigadora postdoctoral del Proyecto Europeo CONTAMED (Contaminant
mixtures and human reproductive health -‐ novel strategies for health impact and risk assessment
of endocrine disrupters). Actualmente disfruta de un contrato postdoctoral “Sara Borrell” del
Instituto de Salud Carlos III estando su trabajo, centrado en el análisis de diferentes familias de
disruptores endocrinos en muestras biológicas humanas (orina, suero, placenta, grasa, etc).
Alberto Zafra Gómez es Profesor Titular del Departamento de Química Analítica de la Universidad
de Granada desde 2011, habiendo estado anteriormente contratado por las empresas Puleva
Biotech S.A durante 5 años como investigador y NeuronBioPharma S.A. durante 3 como
responsable del Área de Química de Productos Naturales y de gestión de la I+D+i, Calidad y
Seguridad y Salud Laboral. Es un reconocido especialista en técnicas cromatográficas, experto en el
manejo de numerosas técnicas de extracción y en validación de metodologías analíticas, tal y como
demuestran las publicaciones realizadas en los últimos años. Ha dirigido 11 trabajos fin de máster y
5 tesis doctorales. Actualmente codirige 3 tesis doctorales que se encuentran en fase experimental.
Ha publicado 68 trabajos en revistas científicas internacionales con alto índice de impacto y es co-‐
inventor de 4 patentes (2 nacionales y 2 internacionales). Es coautor de más de 70 comunicaciones
a congresos nacionales e internacionales y participa y/o ha participado en 16 proyectos y contratos
de investigación financiados en convocatorias públicas y privadas, tanto nacionales como
internacionales. Su Tesis Doctoral obtuvo el Premio Extraordinario de Doctorado en 2001.
Oscar Ballesteros García es Profesor Titular del Departamento de Química Analítica de la
Universidad de Granada desde 2009. Doctor en Ciencias Químicas por la Universidad de Granada
en 2001. Su Tesis Doctoral estuvo centrada en el análisis de quinolonas en muestras de orina
humana y animal mediante el uso de distintas técnicas separativas (LC-‐UV, LC-‐FD, LC-‐MS). Desde
principios de 2003 hasta finales de 2004 estuvo contratado por DSM Deretil S.A. como
investigador. Entre 2005 y 2007 desarrolló su trabajo como investigador postdoctoral dentro del
programa “Juan de la Cierva” y desde 2007 hasta 2009 como Profesor Ayudante Doctor. Es un
reconocido especialista en técnicas cromatográficas, experto en el manejo de numerosas técnicas
de extracción, y en validación de metodologías analíticas, tal y como demuestran las publicaciones
realizadas en los últimos años. Ha dirigido 6 trabajos fin de máster y 5 tesis doctorales.
Actualmente codirige 2 tesis doctorales que se encuentran en fase experimental. Ha publicado 55
trabajos en revistas científicas internacionales con alto índice de impacto. Es coautor de más de
100 comunicaciones a congresos nacionales e internacionales y participa y/o ha participado en 15
proyectos y contratos de investigación financiados en convocatorias públicas y privadas, tanto
nacionales como internacionales.
Alberto Navalón Montón es Catedrático de Química Analítica de la Universidad de Granada desde
2009. Licenciado (1979) y Doctor (1986) en Ciencias Químicas por la Universidad de Granada, ha
desarrollado su labor docente e investigadora durante más de 33 años en el Área de Química
Analítica. Es responsable del grupo de investigación FQM-‐338 “Química Analítica y Ciencias de la
Vida”, reconocido por la Consejería de Economía, Innovación, Ciencia y Empleo de la Junta de
Andalucía. Ha co-‐dirigido 10 Tesis Doctorales, 5 Memorias de Licenciatura y 5 Tesis de Master. Es
co-‐autor de 130 artículos científicos publicados en revistas recogidas en el JCR y co-‐autor de 150
comunicaciones a congresos internacionales y nacionales. Igualmente, es co-‐inventor de una
patente y co-‐autor de 7 capítulos de libro. Ha participado en 15 proyectos de investigación
financiados con fondos europeos, nacionales y regionales así como en 2 proyectos de innovación
docente y 5 contratos de investigación con empresas. Su actividad investigadora se centra
actualmente en el desarrollo de nuevas metodologías analíticas para la caracterización,
identificación y cuantificación de residuos de fármacos y disruptores endocrinos químicos en
diferentes matrices, tanto biológicas como ambientales, mediante el empleo de técnicas
separativas avanzadas y nuevos procedimientos de tratamiento de muestra.
40

,.2Ya_!6>!^\S>_B^,;U^`\!,.;_>:;!
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ANÁLISIS QUÍMICO (FQM-291)

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equipamiento un espectrómetro de masas Q-‐TOF. La actividad científica del Grupo se centra en el
desarrollo de metodologías analíticas para el análisis de contaminantes emergentes en muestras
biológicas y ambientales. Actualmente, una de las líneas prioritarias es el desarrollo de
procedimientos de microextracción en fase líquida y por electromembranas en diferentes
configuraciones y haciendo uso de diversos materiales como soporte de las membranas líquidas;
cabe destacar en este campo, el desarrollo y aplicación de soportes natroestructurados, altamente
difusivos y versátiles, con inclusión de nanopartículas metálicas, para la microextracción en fase
líquida y electrocinética de principios activos farmacológicos, disruptores endocrinos, pesticidas, etc,
tanto en muestras medioambientales como biológicas. El grupo mantiene una estrecha relación con
el Grupo FQM-‐141 “Análisis Medioambiental y Bioanálisis” así como con otros grupos europeos de
prestigio (Universidades de Lund (Suecia) y de Copenhague (Dinamarca)). Colabora con la empresa
granadina NanoMyP en el desarrollo y aplicación de nuevos soportes para sistemas de extracción,
con la finalidad de canalizar transferencia de resultados.
.
LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN ACTUALES

1.-‐ DESARROLLO DE NUEVAS TÉCNICAS DE MICROEXTRACCIÓN EN FASE LÍQUIDA
Microextracción en fase líquida utilizando fibras huecas (HF-‐LPME)
Microextracción con electromembras (EME)
Desarrollo y caracterización de materiales nanoestructurados para microextracción en fase
líquida
Extracción con polímeros de impronta molecular (MIPs)
2.-‐ SEGURIDAD ALIMENTARIA
Análisis de antibióticos pertenecientes a las familias de las fluroroquinolonas,
tetraciclinas, sulfamidas y cefalosporinas en alimentos frescos y procesados, tanto de
origen animal como vegetal.
Análisis de disruptores endocrinos, PAHs, en alimentos frescos y procesados, de origen
animal y vegetal.
Análisis de metabolitos y compuestos desconocidos en alimentos y bebidas.
3.-‐ ANALISIS MEDIOAMBIENTAL
Análisis y seguimiento de principios activos farmacológicos en los procesos
convencionales de depuración.
Análisis de contaminantes emergentes en aguas y sedimentos.
Análisis de disruptores endocrinos, pesticidas, PAHs, y otros contaminantes en muestras
ambientales.
Análisis de productos de transformación y compuestos desconocidos en muestras
ambientales
Seguimiento de la presencia de contaminantes emergentes en exposiciones controladas
de bioindicadores acuáticos.
Estudio de los procesos de alteración de materiales empleados en la construcción de
monumentos
4.-‐ ANÁLISIS BIOMÉDICO
Análisis de principios activos farmacológicos en fluidos biológicos humanos.
Análisis de metabolitos y desconocidos en fluidos biológicos.
5.-‐ TRANSFERENCIA DEL CONOCIMIENTO
Contratos de I+D con empresas Caracterización analítica de proteínas terapéuticas.

42

TESIS DOCTORALES GRASEQA

“APLICACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS ACOPLADA A

ESPECTROMETRÍA DE MASAS DE BAJA, MEDIA Y ALTA RESOLUCIÓN PARA LA
DETERMINACIÓN DE RESIDUOS Y CONTAMINANTES EN MUESTRAS
ALIMENTARIAS”
MARÍA DEL MAR AGUILERA LUIZ (Universidad de Almería)
DIRECTORES: JOSE LUIS MARTÍNEZ VIDAL, ANTONIA GARRIDO FRENICH y ROBERTO
ROMERO GONZÁLEZ
GRUPO: FQM-‐170
FECHA: 31/05/2013
En esta Tesis Doctoral se ha evaluado el potencial analítico y la aplicabilidad del acoplamiento instrumental de
la técnica de UHPLC a analizadores de masas de baja resolución (low resolution mass spectrometry, LRMS) así
como con analizadores de y media/alta resolución (medium/high resolution mass spectrometry, M/HRMS),
para la determinación de residuos de medicamentos veterinarios (VDs), plaguicidas y toxinas naturales
(micotoxinas) en alimentos de origen animal y vegetal, en productos derivados de éstos y en piensos.
Asimismo, se han evaluado y optimizado diferentes procesos de tratamiento y extracción de muestra de forma
que resulten lo más rápidos y sencillos de aplicar. El trabajo se organiza en cuatro bloques.

El primer bloque, referido al empleo de UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para la determinación de residuos de VDs:
x Empleo de la metodología QuEChERS y UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para el análisis de 18 VDs en leche.
x Uso de SPE y UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para la extracción y análisis multi-‐residuo de 17 VDs en miel.
x Comparación de la eficacia de diferentes técnicas para la extracción simultánea de 25 VDs en huevo y
posterior análisis por UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS.
x Uso de la metodología QuEChERS y UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para el análisis de 20 VDs en alimentos para bebés.
x Desarrollo y comparación de dos métodos de cribado para el análisis rápido de 21 VDs en leche mediante
UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS empleando modos de adquisición diferentes.

El segundo bloque se basa en el uso de analizadores de M/HRMS para el análisis de VDs:
x Desarrollo de dos métodos de cribado basados en el uso de los analizadores QqTOF y Orbitrap acoplados a
UHPLC para la detección rápida de 29 VDs en leche
x Uso de Turboflow acoplado a UHPLC-‐Orbitrap para la extracción y análisis de 36 VDs en miel.

El tercer bloque engloba la determinación de micotoxinas mediante UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS:
x Análisis de 12 micotoxinas en cereales y productos derivados mediante SLE con disolvente
UHPLC-‐QqQMS/MS.
x Uso de SPE y UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para la extracción y análisis de 12 micotoxinas en cerveza.
x Uso de HF-‐LPME y UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS para la extracción y análisis de la T-‐2 y HT-‐2 en bebidas alcohólicas.

Finalmente, el cuarto bloque se enfoca en el análisis de un número elevado de residuos y contaminante en
alimentos.
x Análisis multi-‐clase de 6 micotoxinas y 42 residuos de plaguicidas en leche mediante UHPLC-‐QqQMS/MS.
x Desarrollo de un método genérico para el análisis de residuos de plaguicidas y VDs en pienso para animales
mediante UHPLC-‐QqTOF.

REFERENCIAS
x M.M. Aguilera-‐Luiz, J.L. Martínez Vidal, R. Romero-‐González, A. Garrido Frenich. Multi-‐residue
determination of veterinary drugs in milk by ultra-‐high-‐pressure liquid chromatography–tandem mass
spectrometry. Journal of chromatography A 1205 (2008) 10–16.
x J.L. Martínez Vidal, M.M. Aguilera-‐Luiz, R. Romero-‐González, A. Garrido Frenich. Multiclass analysis of
antibiotic residues in honey by ultra performance liquid chromatography-‐tandem mass spectrometry.
43

Journal of Agricultural and Food Chemistry 57 (2009) 1760-‐1767.

x Garrido Frenich, M.M. Aguilera-‐Luiz, J.L. Martínez Vidal, R. Romero-‐González. Comparison of several
extraction techniques for multiclass analysis of veterinary drugs in eggs using ultra-‐high pressure liquid
chromatography–tandem mass spectrometry. Analytica Chimica Acta 661 (2010) 150-‐160.
x J.L. Martínez Vidal, A. Garrido Frenich, M.M. Aguilera-‐Luiz, R. Romero-‐González.Development of fast
screening methods for the analysis of veterinary drug residues in milk by liquid chromatography-‐triple
quadrupole mass spectrometry. Analytical and Bioanalytical Chemistry 397 (2010) 2777-‐2790.
x M.M. Aguilera-‐Luiz, J.L. Martínez Vidal, R. Romero-‐González, A. Garrido Frenich.Multiclass method for fast
determination of veterinary drug residues in baby food by ultra-‐high-‐performance liquid chromatography–
tandem mass spectrometry. Food Chemistry 132 (2012) 2171-‐2180.
x R. Romero-‐González, M.M. Aguilera-‐Luiz, P. Plaza-‐Bolaños, A. Garrido Frenich, J.L. Martínez Vidal. Food
contaminant analysis at high resolution mass spectrometry: Application for the determination of veterinary
drugs in milk. Journal of Chromatography A 1218 (2011) 9353-‐9365.
x M.M. Aguilera-‐Luiz, R. Romero-‐González, P. Plaza-‐Bolaños, J.L. Martínez Vidal, A. Garrido Frenich. Rapid
and semiautomated method for the analysis of veterinary drug residues in honey based on turbulent-‐flow
ůŝƋƵŝĚ ĐŚƌŽŵĂƚŽŐƌĂƉŚǇ ĐŽƵƉůĞĚ ƚŽ ƵůƚƌĂŚŝŐŚͲƉĞƌĨŽƌŵĂŶĐĞ ůŝƋƵŝĚ ĐŚƌŽŵĂƚŽŐƌĂƉŚǇоŽƌďŝƚƌĂƉ ŵĂƐƐ
spectrometry (TFC-‐UHPLC-‐Orbitrap-‐ MS). Journal of Agricultural and Food Chemistry 61 (2013) 829-‐839.
x Garrido Frenich, J.L. Martínez Vidal, R. Romero-‐González, M.M. Aguilera-‐Luiz. Simple and high-‐throughput
method for the multi-‐mycotoxin analysis in cereals and related foods by ultra-‐high performance liquid
chromatography/tandem mass spectrometry. Food Chemistry 117 (2009) 705712.
x R. Romero-‐González, J.L. Martínez Vidal, M.M. Aguilera-‐Luiz, A. Garrido Frenich. Application of
conventional solid-‐phase extraction for multi-‐mycotoxin analysis in beers by ultrahigh-‐performance liquid
chromatography-‐tandem mass spectrometry. Journal of Agricultural and Food Chemistry 57 (2009) 9385-‐
9392.
x R. Romero-‐González, A. Garrido Frenich, J.L. Martínez Vidal, M.M. Aguilera-‐Luiz. Determination of
ochratoxin A and T-‐2 toxin in alcoholic beverages by hollow fiber liquid phase microextraction and ultra
high-‐pressure liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Talanta 82 (2010) 171-‐176.
x M.M. Aguilera-‐Luiz, P. Plaza-‐Bolaños, R. Romero-‐González, J.L. Martínez Vidal, A. Garrido Frenich.
Comparison of the efficiency of different extraction methods for the simultaneous determination of
mycotoxins and pesticides in milk samples by ultra high-‐performance liquid chromatography-‐tandem mass
spectrometry. Analytical and Bioanalytical Chemistry 399 (2011) 2863-‐2875.
x M.M. Aguilera-‐Luiz, R. Romero-‐González, P. Plaza-‐Bolaños, A. Garrido Frenich, J.L. Martínez Vidal. Wide
scope analysis of veterinary drug and pesticide residues in animal feed by liquid chromatography coupled
to quadrupole-‐time of flight mass spectrometry. Analytical and Bioanalytical Chemistry 405 (2013)
6543-‐6553.
CURRICULUM VITAE
María del Mar Aguilera Luiz (Almería, 1984) se licenció en Ciencias Químicas en la
Universidad de Almería entre 2002-‐2007. En 2007 comenzó a trabajar con una beca
de colaboración en el grupo de investigación “Química Analítica de Contaminantes”
(FQM-‐170). Una vez acabada la licenciatura y tras publicar un artículo en una revista
de ámbito internacional consigue una beca FPU para comenzar su Tesis Doctoral en
el mismo grupo de investigación la cual ha defendido en el año 2013. Dicha Tesis
Doctoral estuvo centrada en el desarrollo de metodologías analíticas para el análisis
de residuos y contaminantes en diversas muestras alimentarias usando técnicas
cromatográficas acopladas a espectrometría de masas de baja y media/alta
resolución. Además, durante este periodo realizó una estancia de 4 meses en
“Department of Food Chemistry and Analysis of Institute of Chemical Technology” en
Praga, en el que trabajó con equipos de alta resolución para la búsqueda de
metabolitos en alimentos. Actualmente disfruta de un contrato puente concedido
por la Universidad de Almería para continuar labores de investigación.

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“APLICACIÓN DE TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS ACOPLADAS A

ESPECTROMETRÍA DE MASAS PARA LA DETERMINACIÓN DE RESIDUOS Y
CONTAMINANTES ORGÁNICOS EN AGUAS RESIDUALES Y SUELOS”
MARÍA DE LAS NIEVES BARCO BONILLA (Universidad de Almería)
DIRECTORES: JOSÉ LUIS MARTÍNEZ VIDAL, ANTONIA GARRIDO FRENICH y ROBERTO
ROMERO GONZÁLEZ
GRUPO: FQM-‐170
FECHA: 14/06/2013
La Tesis Doctoral se ha centrado en el estudio del potencial analítico de la cromatografía, tanto de gases (GC)
como líquidos (LC), acopladas a espectrometría de masas (MS) para la determinación de residuos y
contaminantes orgánicos en muestras medioambientales. Por un lado, GC acoplada a espectrometría de masas
en tándem con un analizador de triple cuadrupolo (GC-‐QqQ-‐MS/MS) se utilizó para el análisis de plaguicidas
apolares, hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs), compuestos fenólicos y compuestos orgánicos volátiles
(VOCs). Por otro lado, la LC de ultra alta eficacia acoplada a espectrometría de masas en tándem con un
analizador de triple cuadrupolo (UHPLC-‐QqQ-‐MS/MS) y la LC de alta eficacia acoplada a espectrometría de
masas con un analizador de cuadrupolo simple (HPLCQ-‐MS) se usaron para la determinación de plaguicidas
polares y DEHP, respectivamente. Por otro lado, para la determinación de difeniléteres polibromados (PBDEs)
se utilizó GC acoplada a espectrometría de masas de alta resolución (HRMS) con un analizador de tipo sector
magnético. Estos estudios se llevaron a cabo en suelos, aguas superficiales y efluentes de aguas residuales
destinados a la reutilización. Adicionalmente, se evaluaron y optimizaron varios procedimientos de
tratamiento de muestra y de extracción con el fin de desarrollar métodos simples y rápidos que permitan
aumentar el rendimiento de la muestra y facilitar su uso en análisis de rutina.

Esta Tesis Doctoral se organizó en cuatro partes:

La primera parte se centró en el desarrollo y validación de metodologías analíticas para el análisis de
contaminantes orgánicos en suelos y aguas superficiales:
Desarrollo de un método basado en GC–QqQ-‐MS/MS para la determinación de 24 PAHs, comparando la
extracción con líquidos presurizados (PLE) con ultrasonidos (USE).
Desarrollo de un método basado en HPLC-‐Q-‐MS para la determinación de DEHP en aguas superficiales y
suelos, utilizando extracción en fase sólida (SPE) y PLE, respectivamente.

En la segunda parte, se desarrollaron y validaron varias metodologías para el análisis de 139 plaguicidas
apolares, 39 plaguicidas polares, 24 PAHs, 13 compuestos fenólicos y 19 VOCs en efluentes de aguas residuales
con diferentes propiedades físico-‐químicas procedentes de distintas tecnologías. También se realizó un estudio
de distribución de estos compuestos entre la fase acuosa y la materia particulada en suspensión para
establecer la necesidad de analizar ambas fases, o únicamente una de ellas. En esta parte hay que resaltar la
necesidad de optimizar métodos de extracción específicos para cada efluente de aguas residuales basándose
en sus características físico-‐químicas, así como la necesidad de llevar a cabo una evaluación exhaustiva del
efecto matriz, probando los diferentes métodos de calibrado que se pueden aplicar para minimizarlo.

La tercera parte se focalizó en la aplicación de las metodologías desarrolladas y validadas para monitorizar 226
compuestos, incluyendo plaguicidas, PAHs, compuestos fenólicos y VOCs, en efluentes de estaciones de
tratamiento de aguas residuales (ETARs) de Andalucía. Los estudios realizados en esta parte incluyen:

La evaluación de la presencia de 226 contaminantes orgánicos en efluentes de aguas residuales
procedentes de tratamientos secundarios de 12 ETARs localizadas a través de un área semiárida
caracterizada por una elevada actividad turística y agrícola, como la provincia de Almería (sureste de
España), en tres campañas de muestreo llevadas a cabo durante 2011.
Un estudio exhaustivo de la presencia de 226 compuestos orgánicos en muestras de efluentes de 21 ETARs
urbanas procedentes tanto de tratamientos secundarios como terciarios en las cuencas Mediterránea y
45

Atlántica andaluzas.

En la cuarta parte se desarrolló y validó una metodología analítica basada en SPE para el análisis de los 6 PBDEs
especificados por la Directiva 2008/105/EC de aguas de la Unión Europea. Los análisis finales se realizaron
mediante un método basado en GC-‐HRMS utilizando un analizador de tipo sector magnético, que fue también
optimizado para detectar los compuestos objeto de estudio en muestras de aguas a concentraciones inferiores
a las normas de calidad ambiental establecidas por la legislación europea (por debajo del ng/L).

REFERENCIAS

Nieves Barco-‐Bonilla, José Luis Martínez Vidal, Roberto Romero-‐González, Antonia Garrido Frenich.
Comparison of ultrasonic and pressurized liquid extraction for the analysis of polycyclic aromatic
compounds in soil samples by gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Talanta
(2009), 78, 156–540.

Antonia Garrido Frenich, Nieves Barco-‐Bonilla, Juan Carlos López Martínez, José Luis Martínez Vidal,
Roberto Romero González. Determination of di-‐(2-‐ethylhexyl)phthalate in environmental samples by
liquid chromatography coupled with mass spectrometry. Journal of Separation Sciences (2009), 32,
1383–1389.

Nieves Barco-‐Bonilla, Roberto Romero González, Patricia Plaza Bolaños, Antonia Garrido Frenich, José
Luis Martínez Vidal Analysis and study of the distribution of polar and non-‐polar pesticides in
wastewater effluents from modern and conventional treatments. Journal of Chromatography A
(2010), 1217, 7817–7825.

Nieves Barco-‐Bonilla, Roberto Romero González, Patricia Plaza Bolaños, José Luis Fernández Moreno,
Antonia Garrido Frenich, José Luis Martínez Vidal. Comprehensive analysis of polycyclic aromatic
hydrocarbons in wastewater using stir bar sorptive extraction and gas chromatography coupled to
tandem mass spectrometry. Analytica Chimica Acta (2011), 693, 62–71.

Juan Antonio Padilla Sánchez, Patricia Plaza Bolaños, Roberto Romero González, Nieves Barco-‐Bonilla,
José Luis Martínez Vidal, Antonia Garrido Frenich. Simultaneous analysis of chlorophenols,
alkylphenols, nitrophenols and cresols in wastewater effluents, using solid phase extraction and
further determination by gas chromatography–tandem mass spectrometry. Talanta (2011), 85, 2397–
2404.

Nieves Barco-‐Bonilla, Patricia Plaza Bolaños, José Luis Fernández Moreno, Roberto Romero González,
Antonia Garrido Frenich, José Luis Martínez Vidal. Determination of 19 volatile organic compounds in
wastewater effluents from different treatments by purge and trap followed by gas-‐chromatography
coupled to mass spectrometry. Analytical and Bioanalytical Chemistry (2011), 400, 3537–3546.

Nieves Barco-‐Bonilla, Roberto Romero González, Patricia Plaza Bolaños, Antonia Garrido Frenich, José
Luis Martínez Vidal, Juan José Salas, Isabel Martín. Study of the distribution of 204 organic
contaminants between the aqueous phase and the suspended particulate matter in treated
wastewater for proper environmental control. Desalination and Water Treatment (2013), 51, 2497–
2515.

Nieves Barco-‐Bonilla, Roberto Romero González, Patricia Plaza Bolaños, José Luis Martínez Vidal,
Antonia Garrido Frenich. Systematic study of the contamination of wastewater treatment plant
effluents by organic priority compounds in Almeria province (SE Spain). Science of the Total
Environment (2013), 447, 381–389

Nieves Barco-‐Bonilla, Roberto Romero González, Patricia Plaza Bolaños, José Luis Martínez Vidal,
Antonio J. Castro, Isabel Martín, Juan José Salas, Antonia Garrido Frenich. Priority organic compounds
in wastewater effluents from the Mediterranean and Atlantic basins of Andalusia (Spain).
Environmental Science: Processes & Impacts (2013), 15, 2194-‐2203
46


Nieves Barco-‐Bonilla, Patricia Plaza Bolaños, Noelia María Valera Tarifa, Roberto Romero González,
José Luis Martínez Vidal, Antonia Garrido Frenich. Highly sensitive determination of polybrominated
diphenyl ethers in surface water by gas chromatography coupled to high resolution mass
spectrometry according to the EU Water Directive 2008/105/EC.. Journal of Separation Science
(2014), 37, 69-‐76

CURRICULUM VITAE
Mª Nieves Barco Bonilla (Laujar de Andarax, Almería, 1984) se licenció en Ciencias
Químicas en la Universidad de Almería (2002-‐2007). En 2009 comenzó su Tesis Doctoral
en el grupo de investigación “Química Analítica de Contaminantes” (FQM-‐170), la cual ha
defendido en el año 2013. Dicha Tesis Doctoral estuvo centrada en el desarrollo de
metodologías analíticas para el análisis de residuos y contaminantes orgánicos en aguas
residuales y suelos usando técnicas cromatográficas acopladas a espectrometría de
masas de baja y alta resolución. Además dichas metodologías fueron aplicadas para la
realización de estudios de contaminación de efluentes de aguas residuales procedentes
de diferentes tratamientos secundarios y terciarios en Andalucía, así como
específicamente en la provincia de Almería. Además, se realizó una estancia de 3 meses
en el Instituto de Estudios Medioambientales (IVM) de la Universidad de Ámsterdam
(Holanda). Al finalizar su Tesis Doctoral, desempeñó la tarea de profesora del curso
denominado “Aplicación de técnicas avanzadas de cromatografía-‐espectrometría de
masas para análisis de residuos de plaguicidas y medicamentos veterinarios en
alimentos” (ceiA3 Training Networks), impartido en la Universidad de Almería. En la
actualidad disfruta de un año de contrato posdoctoral financiado por la Consejería de
Economía, Innovación, Ciencia y Empleo de la Junta de Andalucía en el grupo de
investigación antes mencionado.

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ACTUALIDAD GRASEQA
“Principios y Aplicaciones de Metrología en Química.
Aspectos prácticos de la ISO-‐17025”

Los pasados días 17 y 18 de octubre tuvo lugar en Zaragoza
la VI edición del Curso “Principios y Aplicaciones de
Metrología en Química. Aspectos prácticos de la ISO-‐17025”,
que se enmarca dentro del Programa de la Unión Europea
TrainMiC (Training in Metrology in Chemistry), cuyo principal
objetivo es la formación sobre la interpretación de la norma
ISO/IEC 17025 en el análisis químico aplicado en diferentes
sectores (medioambiente, alimentación, protección al
consumidor, etc.).
El primer curso TrainMiC tuvo lugar en Maribor (Eslovenia) en 2001 y desde entonces se han
celebrado más de 280 cursos en toda Europa, en los que han participado más de 8300 científicos y
personal técnico. El programa se inició en uno de los centros JRC de la Comisión Europea, el Institute
of Reference Materials and Measurements, JRC-‐IRMM (Geel, Bélgica) con el fin de mejorar la calidad
de los resultados analíticos mediante la promoción y desarrollo de una formación armonizada en
Metrología química a través de una red de equipos nacionales que comparten recursos (materiales y
sistemas de enseñanza). Este material se comparte por los equipos de muchos países europeos y ha
sido desarrollado por expertos de toda Europa trabajando bajo la supervisión de un consejo editorial
y ha sido traducido a 14 idiomas. Los cursos de formación están orientados a personal de
laboratorio, investigadores, profesores, acreditadores y cualquier persona relacionada con
resultados analíticos y su uso final.
El equipo TrainMiC español
comenzó a trabajar en el
año 2007 y desde entonces
se han llevado a cabo 6
cursos (Madrid, Cádiz,
Alicante, Bilbao, Madrid y
Zaragoza) en los que se han
formado más de 100
asistentes, con un alto
grado de satisfacción. En la
fotografía se muestran los
asistentes a la edición
celebrada en Zaragoza,
para la que se ha contado
con la colaboración de la
empresa INYCOM.
El enfoque de los cursos es aplicado, con una introducción teórica a las cuestiones más importantes
de la metrología química y ejemplos prácticos para el cálculo de incertidumbres y validación de
procedimientos con una discusión final de los resultados obtenidos. De esta forma, los participantes
tienen una serie de referencias en las que basarse para poder trabajar cuando se enfrenten a estas

cuestiones en su lugar de trabajo con sus casos particulares. (C. Moreno, UCA)

48

ACTUALIDAD GRASEQA
ACTUALIDAD GRASEQA
“Cien años de Química en Granada”

Luis Fermín Capitán Vallvey, Universidad de Granada

El pasado año 2013 se celebró el centenario de la implantación de los estudios de Química en la
Universidad de Granada. Celebración, que además de la connotación tanto festiva como formal que
tiene la palabra, ha servido como punto de reflexión colectiva, de excusa para conocer la pequeña
historia escondida y sus personajes, con sus claros y oscuros, y para saber –intuir-‐ en qué dirección
nos encaminamos.
Ocurrió en 1913. El primero de enero
de 1913 se firmó la R.O. por la que se
creaban formalmente los estudios de
licenciatura en ciencias químicas siendo
fugaz ministro de Instrucción Pública y
Bellas Artes, el liberal Antonio López
Muñoz, del gabinete del conde de

Romanones; R.O. que fue publicada el 13
de enero de ese año.

Los primeros estudios de química en Granada comenzaron en el siglo XVIII y a cargo del Estado;
en concreto, en 1776 dentro del nuevo plan de estudios universitario para los estudios de medicina,
donde se explicaba en primer curso química junto con botánica y farmacia en Materia Médica,
aunque con escaso éxito al ser asignatura eminentemente libresca.
También hubo enseñanza de química en Granada en el contexto de sociedades ilustradas
relacionadas con la Sociedad Económica de Amigos del País; es el caso de la Academia de Química y
Botánica que tuvo actividad docente en Granada, aunque de manera irregular, entre 1797 y 1807, y
de la que fue regente José Ponce de León, catedrático de la universidad granadina.
Ya en el siglo XIX el Plan Caballero (1807) traslada la enseñanza de la química a la Facultad de
Artes donde es impartida por la cátedra de Física Experimental. Con la aprobación del plan Pidal en
1845 se divide esa facultad en dos secciones: filosofía y ciencias, que con posterioridad el plan
Moyano (1857) transforma en facultades. Esto da lugar al nacimiento de la actual Facultad de
Ciencias, cuyo primer decano sería Francisco de Paula Montells y Nadal, primer catedrático de
química y uno de los personajes más interesantes de la universidad de Granada del siglo XIX.
Durante muchos años la única Facultad de Ciencias que impartía las diferentes licenciaturas:
química, físico-‐matemática y naturales, fue la de la Universidad Central de Madrid. En el resto de
universidades, Granada incluida, solo se ofrecían estudios de los dos primeros cursos que conducían
al título de Bachiller en Ciencias, habiendo que completar los estudios en la Universidad Central a fin
de obtener el título de Licenciado.
El anquilosamiento de la universidad, y de la enseñanza en general, a fin de siglo XIX desemboca
en una crisis dando lugar al movimiento regeneracionista. El ministro García Alix al frente del recién
creado Ministerio de Instrucción Pública y Bellas Artes, en su reforma de los planes de estudios en
1900, intenta adecuar la preparación en las aulas a las demandas reales de la sociedad. Ello supone
la reorganización de las Facultades de Ciencias desdoblando la Sección de Ciencias físico-‐químicas en
una de Físicas y otra de Químicas y la reducción de las licenciaturas a cuatro años. Sin embargo, y
nuevamente, la mayoría de las universidades de provincias siguen teniendo facultades de ciencias
incompletas en las que sólo se dan los cursos preparatorios.

49

El deseo de completar los estudios de químicas en Granada hay que contemplarlo dentro del
movimiento de reforma surgido en el seno de la Universidad. Regeneración que centrada en
autonomía universitaria, asociacionismo estudiantil, planes de estudios y nuevos centros de estudio
e investigación, va cobrando fuerza poco a poco en los claustros universitarios, entre ellos el de
Granada.
Al estado de opinión creado por este movimiento de renovación hay que sumar la coyuntura
económica favorable de las primeras décadas del siglo XX y que en Granada se ejemplifica con la
implantación del cultivo de la remolacha azucarera en la vega de Granada que movilizó a la práctica
totalidad de la burguesía granadina y tuvo un fuerte impacto en la ciudad.
Ya en 1902, el rector granadino García Sola solicita disponer de nuevos estudios universitarios
que ayudasen al desarrollo industrial en su intervención en el acto académico que tuvo lugar en
Madrid con motivo de la coronación de Alfonso XIII. En 1910 se volvió a la carga argumentando el
poco gasto que suponía; los profesores se comprometieron a dar las clases de forma gratuita y el
Ayuntamiento de la ciudad a pagar el material necesario. De nuevo silencio; solo roto en 1911
cuando como resultado de las gestiones realizadas por la Universidad de Sevilla, se autorizaron en
ella los estudios de Químicas.
El rector Federico Gutiérrez y el decano de la Facultad de Ciencias, Pascual Nacher, iniciaron
entonces una campaña en Madrid para reactivar la petición en la que intervinieron senadores y
diputados provinciales y especialmente Natalio Rivas, por entonces subsecretario del Ministerio de
Instrucción Pública. No es hasta finales de 1912 cuando este último consiguió que la Comisión de
Presupuestos de las Cortes consignara el dinero necesario para la creación de la Sección de
Químicas.
El 13 de enero de 1913 se publicó en la Gaceta de Madrid la Real Orden del Ministerio de
Instrucción Pública y Bellas Artes por la que se establecían en Granada los estudios de la Licenciatura
en Químicas.
Un conjunto de profesores de los diferentes
departamentos de la sección de químicas de la Universidad
de Granada (Luis Fermín Capitán Vallvey (QA), Antonio
Guadix Escobar (IQ), Encarnación Jurado Alameda (IQ),
Enrique López-‐Cantarero Vargas (QF), Pedro Luis Mateo
Alarcón (QF), Juan Enrique Oltra Ferrero (QO), Juan Manuel
Salas Peregrin (QI) y Carmen Valencia Mirón (QA))
empezamos a principios de 2012 a darle vueltas a la
posibilidad de conmemorar el centenario; discutimos
posibilidades, rechazamos ideas y diseñamos un proyecto.
Tanto el rector de la Universidad de Granada, Prof.
González Lodeiro, como el decano de la Facultad de
Ciencias, Prof. Ríos Guadix, nos dieron su apoyo
incondicional y nuevas ideas.

50

ACTUALIDAD GRASEQA

Comenzamos a hacer ambiente al incluir en la agenda, memoria académica y calendario del
curso 2012/2013 de la Universidad de Granada, el tema e imagen del Centenario de los estudios de
Químicas.
El inicio de actividades tuvo lugar en una fecha lo más próxima posible a la simbólica del 13/1/13
que al ser en esta ocasión domingo -‐en aquella fue lunes-‐, elegimos el 14 de enero de 2013. El acto
inaugural, presidido por el rector de la UGR, contó con una conferencia del Prof. Mayor Zaragoza
titulada “Ciencias Químicas: Presente y Futuro”, tras lo cual se presentó el retrato de Pascual
Nácher, decano de la Facultad de Ciencias en 1913, y cuyo papel fue de gran importancia para la
creación de los estudios de Ciencias Químicas. Retrato que faltaba en la galería de decanos existente
en la Facultad de Ciencias.

En el mismo acto se presentó el blog del
Centenario de Químicas
(http://q100ugr.blogspot.com.es/), que ha
recogido todas actividades realizadas y que
aloja un interesante archivo fotográfico, así
como dos sellos personalizados
conmemorativos del centenario. El diseño
del primero de los sellos se basa en un
tapiz que fue sufragado por profesores y
alumnos en noviembre de 1913 como
recuerdo de la creación de los estudios.
Restaurado en los años setenta, preside en
la actualidad la Sala de Claustro de la
Facultad de Ciencias.

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ACTUALIDAD GRASEQA
Con ambas actividades nos hemos obligado

colectivamente a reflexionar sobre lo que han supuesto los
estudios de químicas, su impacto sobre la propia universidad
y sobre la sociedad granadina. Hemos recuperado la
memoria y el recuerdo de personas que en su momento
fueron decisivos para que hoy contemos con unos estudios
firmemente enraizados a través de un conjunto de 125
profesores articulados en cinco Departamentos y 28 grupos
de investigación que imparten su docencia, además de en
los estudios de Química e Ingeniería Química, en otros diez
grados de la Universidad de Granada.

Luis Fermín Capitán Vallvey
Universidad de Granada

E-‐mail: lcapitan@ugr.es

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AGENDA GRASEQA
AGENDA

CONGRESO: 65th Pittsburg Conference on CONGRESO: 30th International Symposium on
Analytical Chemistry and Applied Microscale Bioseparations
Spectroscopy (PITTCON 2014) FECHAS: 27 Abril-‐1 de Mayo de 2014.
FECHAS: 2-‐6 de Marzo de 2014 SEDE: Pecs, Hungría.
SEDE: Chicago (EE.UU.). INFORMACIÓN: www.msb2014.org
INFORMACIÓN: www.pittcon.org

CONGRESO: 24th Anniversary World CONGRESO: 62nd ASMS Conference on Mass
Congress on Biosensors (Biosensors 2014) Spectrometryand Allied Topics
FECHAS: 27-‐30 de Mayo de 2014 FECHAS: 15-‐19 de Junio de 2014
SEDE: Melbourne, Australia SEDE: Baltimore, EE.UU.
INFORMACIÓN: www.biosensors-‐ INFORMACIÓN: www.asms.org
congress.elsevier.com

CONGRESO: The 38th International CONGRESO: XIV Reunión del Grupo Regional
Symposium on Environmental Analytical Andaluz de la Sociedad Española de Química
Chemistry-‐ISEAC38 (including Conference on Analítica (XIV GRASEQA 2014)
Food Safety (food analytics and authencity FECHAS: 26 y 27 de Junio 2014
control) SEDE: Universidad Internacional de Andalucía, Sede
FECHAS: 17-‐20 de Junio de 2014 Antonio Machado, Baeza (Jaén).
SEDE: Lausana, Suiza INFORMACIÓN:
INFORMACIÓN: http://www.iseac38.ch www.ujaen.es/eventos/graseqa2014

CONGRESO: 10th European Pesticide Residue CONGRESO: 10th Annual LC/MS/MS Workshop on
Workshop (EPRW 2014) Environmental Applications and Food Safety
FECHAS: 30 Junio al 3 de Julio 2014 FECHAS: 1-‐3 de Julio de 2014
SEDE: Dublín (Irlanda). SEDE: Barcelona.
INFORMACIÓN: www.eprw2014.com INFORMACIÓN: mpetrovic@icra.cat
CONGRESO: DIOXIN 2014. 34th International CONGRESO: ISC 2014 (30th International Symposium
Symposium on Halogenated Persistent on Chromatography)
Organic Pollutants FECHAS: 14 al 18 de Septiembre de 2014.
FECHAS: 31 de Agosto a 5 de Septiembre de SEDE: Salburgo, Austria.
2014. INFORMACIÓN: www.isc2014.at
SEDE: Madrid
INFORMACIÓN: www.dioxin2014.org
CONGRESO: XIV JAI 2014 (14º Jornadas de

Análisis Instrumental 2014
FECHAS: 29 de Septiembre al 3 de Octubre
de 2014.
SEDE: Barcelona.
INFORMACIÓN: www.barter.es/JAI

BOLETÍN DE INSCRIPCIÓN
GRUPO REGIONAL ANDALUZ
SOCIEDAD ESPAÑOLA DE QUÍMICA ANALÍITICA
D. / Dª :
Departamento / Sección :
Institución / Empresa :
Cargo :
DIRECCIÓN PROFESIONAL
Avda. / Calle / Plaza : Nº :
Localidad :
C.P. : Provincia :
Teléfono : Fax :
e-mail :
DIRECCIÓN PARTICULAR
Avda. / Calle / Plaza :
Nº : Portal : Esc. : Piso : Puerta : Letra :
Localidad :
C.P. : Provincia :
Teléfono : Móvil :
Fdo. :
ENVIAR A Juan Francisco García Reyes (Tesorería GRASEQA )

.
( por e-mail a: jfgreyes@ujaen.es)
BOLETÍN DE INSCRIPCIÓN
GRUPO REGIONAL ANDALUZ
SOCIEDAD ESPAÑOLA DE QUÍMICA ANALÍITICA
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Caja Ahorros / Banco:

Oficina / Sucursal :
Dirección :
Localidad :
Provincia :
Código Cuenta Cliente ( 20 dígitos ) ____ ____ __ __________
ENVIAR A Juan Francisco García Reyes (Tesorería GRASEQA )

. ( por e-mail a: jfgreyes@ujaen.es)
* Si ya se ha realizado el pago domiciliado de la cuota correspondiente al año en curso,

debe ingresar directamente la cuota en: BANCO POPULAR ESPAÑOL JAÉN Urb. 2
0075 3272 61 0600048022
Caja Ahorros / Banco :

Oficina / Sucursal :
Dirección :
Localidad :
Provincia :
Muy Sres. míos:
A partir de la presente, agradecería a Vds. se sirvan cargar en mi Cuenta Corriente /
Libreta de Ahorros Nº _ _ _ _ ____ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ abierta en esta
entidad, los recibos de las cuotas anuales extendidas por el Grupo Regional Andaluz de la
Sociedad Española de Química Analítica (GRASEQA)
Atentamente les saluda,
Fdo. :
ENVIAR A LA ENTIDAD BANCARIA

SOCIEDAD ESPAÑOLA DE QUÍMICA ANALITICA
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Nombre
Titulación
Dirección Profesional
Universidad
C.P. Ciudad
Teléfono
Fax
Correo electrónico
Domicilio particular
C.P.y Ciudad
Teléfono
Nº de cuenta (20 dígitos)
Numerario (Cuota 60,10 Euros)

Tipo de socio
Adherido Cuota: 30,05 Euros
* Jóvenes investigadores (menores de 35 años) / sin contrato de trabajo
Enviar por e-‐mail a : seqa@qa.uva.es
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firmante autoriza a SOCIEDAD ESPAÑOLA DE QUÍMICA ANALÍTICA al tratamiento de los
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Veinte años de análisis de residuos de

compuestos polares y/o no volátiles, y/o 150 plaguicidas en menos de 30 minutos

Otra forma de incrementar la eficiencia y la disolución reguladora o ácido/base débil), y

QqQ Alta sensibilidad en modo de trabajo MRM, Determinación cuantitativa de compuestos

La principal debilidad de estos sistemas de suficientemente libre de interferencias para

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información estructural como para dilucidar laboratorios que emplean analizadores de

4. Perspectiva económica carácter genérico para matrices y familias de

Control de micotoxinas en alimentos

2. Métodos de análisis postcolumna mediante una disolución de

Además, en los últimos años las técnicas de El empleo de columnas de inmunoafinidad

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molécula, aumentándose así el espectro generación, sin embargo algunas

alimentos de origen animal. La separación se 3. Conclusiones

fluoroquinolones in veterinary medicine, J.

fluoroquinolones in varying media, Spectrochim. performance liquid chromatography, Chinese J.

ANÁLISIS QUÍMICO (FQM-291)

TESIS DOCTORALES GRASEQA

“APLICACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS ACOPLADA A

Journal of Agricultural and Food Chemistry 57 (2009) 1760-­‐1767.

“APLICACIÓN DE TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS ACOPLADAS A

“Cien años de Química en Granada”

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Con ambas actividades nos hemos obligado

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CONGRESO: XIV JAI 2014 (14º Jornadas de

Avda. / Calle / Plaza : Nº :

Avda. / Calle / Plaza :

Nº : Portal : Esc. : Piso : Puerta : Letra :

ENVIAR A Juan Francisco García Reyes (Tesorería GRASEQA )

DOMICILIACIÓN BANCARIA (*)

Caja Ahorros / Banco:

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* Si ya se ha realizado el pago domiciliado de la cuota correspondiente al año en curso,

Caja Ahorros / Banco :

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Boletín de Inscripción

Nº de cuenta (20 dígitos)

Numerario (Cuota 60,10 Euros)

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Journal of Agricultural and Food Chemistry 57 (2009) 1760-‐1767.

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