Tema 1.

Modelo eléctrico de membrana

Vamos a hacer dos aproximaciones a lo que es una célula: una desde el punto de vista eléctrico y
otra desde la química.
Voltaje (V): Cantidad de energía necesaria para mover una unidad de carga eléctrica de un laod a
otro.
Corriente (I): Mov. De cargas a través de un medio conductor entre dos puntos del espacio entre
los que existe una diferencia de potencial.
Conductancia (facilitad) o resistencia (dificultad) con la que una corriente eléctrica se mueve a
través de un medio conductor entre los que existe una diferenciad de potencial. La resistencia es el
inverso de la conductancia. Cuanto mas ancho es el conductor, más fácil es que fluya (mayor
conductancia y menor resistencia). Cuanto más pequeño, mayor conductancia, menor resistencia.
Estos tres conceptos se relacionan según la ley de Ohm de la siguiente manera: V=I*R
Condensador: Está formada por un dielectrico …… Se mide segun la capacitancia.
En términos eléctricos, en la membrana celular los canales iónicos son equivalentes a un
conductor por el que fluye la membrana. En este caso, fluyen iones cargados. Cada canal va a tener
una conductancia distinta. La conductancia depende de la permeabilidad a los iones. Cuanto mayor
numero de canales, menor resistencia tendrá la membrana y mayor conductancia.
La membrana es el condensador. La membrana funciona como circuito RC.
Para que el circuito celular funcione como circuito tiene que fluir la corriente, para lo que debe
existir una fuerza electromotriz (Eion), que en este caso es la diferencia de potencial.
V es la diferencia entre el potencial de membrana (Vm) y el potencial de equilibrio del ion (Eion).
La intensidad de corriente que va a pasar por un canal es V* por la conductancia especifica del ion.
Cuando el potencial de equilibrio del ión y el potencial de membrana sean igual, el flujo neto del
ión es 0. En realidad… El potencial de equilibrio del ión se calcula a través de la ecuación de Nerst,
que relaciona la concentración intracelular y extracelular del ión, así como el gradiente eléctrico
provocado por la carga del ión. En la posición de equilibrio el gradiente químico y eléctrico son
iguales, y si igualamos ambas ecuaciones tenemos la ecuación de Nerst.
El paso de iones a través de los canales sigue la ley de Ohm. Cambios en el voltaje, van a producir
cambios en la intensidad de corriente. Conociendo el potencial de equilibrio podemos representar
cuál sería la corriente para los diferentes voltajes celulares. Ademas esta representacion no solo nos
indica qué corrientes va a haber, sino en qué direccion va a ser el flujo. No es que los canales
conduzcan en un sentido u otro; esto va a depender de las concentraciones del ión y del potencial.
Si consideramos la célula como un RC, cuando el flujo neto del ión es cero, la intensidad de
corriente transportada por los canales de ese ión también será cero.
Diapo. El potencial de reposo de una célula viene determinado por el potencial de equilibrio de los
iones y sus respectivas conductancias. ¿Qué consecuencias tiene esto? Que la contribución al
potencial de reposo de los canales que tengan mayor conductancia será mayor. Es decir, que en
reposo, el potencial de reposo puede ser aproximado al potencial de equilibrio del potasio.
Si la conductancia de un canal varía con un fármaco porque éste altera el transporte de un ión
determinado a través del canal, va a variar el potencial de membrana. Ya no te sirve la aproximación
del potasio, tendrás que mirar hacia dónde varía.
Para cada tipo celular, el potencial de membrana en reposo (Vm) va a ser distinto, en función de las
concentraciones de iones y los canales presentes en la membrana. Además, la membrana
citoplásmica tiene una permeabilidad selectiva. Tienes una distribucion asimetrica de iones y
ademas la membrana tiene una permeabilidad selectiva a K+, entonces tu gradiente de
concentración será mayor que el eléctrico. Si no hubiera permeabilidad selectiva, el gradiente
eléctrico será mayor que el de concentración.
Foto
Diapo.
Sin embargo, el potencial de reposo no depende sólo del K+; los experimentos demuestran que
también depende de Na+ y Cl-. La ecuación GHK refleja esto y se parece bastanet a la ecuación
antes planteada.
FOTO
El voltaje impuesto nos permite estudiar qué pasa a diferentes potenciales de membrana. EL voltaje
impuesto te permite inyectar una cantidad de corriente que te lleve el potencial de membrana al
potencial que TÚ quieres. Puedes medir cómo es la respuesta de tu muestra a diferentes
condiciones: antagonistas, agonistas, diferentes concentraciones, etc.
Consecuencia de las propiedades pasivas de la membrana (desventaja):
1. Hay un delay entre que yo inyecto la corriente y esta corriente se hace efectiva. Esto es debido a
las propiedades de la membrana, porque está compuesta por resistencias y conductores. En la
práctica podremos ver cómo puedo convertir este delay en 0.
2. Lo explicado hasta ahora esstá bien para células pequeñas y redondas, pero cuando tenemos
células complejas (como la neurona, con muchas ramificaciones), el potencial eléctrico tiene que
desplazarse por ellas y el potencial de acción no será función sólo del tiempo, sino también de la
distancia. Aquí hay que tener que la dendrita, axón, etc, presentan su propia resistencia; esta va a
depender del radio y la longitud. Por eso, cuando le inyecto corriente a este sistema, veo que el
cambio en el voltaje se va perdiendo con el tiemmpo. ¿Qué soluciones ha encontrado la naturaleza
para solventar el problema de que no se propague el impulso?
1. Aumentar el radio del cable (axón, dendrita, etc) para que disminuya la resistencia y
aumente la conducción del potencial de acción → Pero esto no se lo pueden permitir todos los
animales.
2. Recubrimiento con aislantes (mielina; que son oligodendrocitos). Aumenta la rm y
disminuye Cm. Se aumenta la lamda y la velocidad de conducción
 Tema 3: Biofisica Molecular de Canales Iónicos
Los canales iónicos son una común diana terapeutica; el problema del targeting sobre canales es que
la mayoría no son específicos, entonces también vas a alterar otros posibles transportes a través de
él, además del de interés.
Hay canales que son específicos de determinadas zonas de la membrana. Recuerda el caso de los
canales de Na+ localizados abundantemente en los nódulos de Ranvier, más que en la zona envuelta
por la vaina de mielina.
Principales funciones de los canales iónicos:
1. Los canales de iones configuran el potencial de membrana en reposo de las células
2. El flujo iónico contribuye al movimiento electrolítico necesario para regular el volumen de
células individuales.
3.
Normalmente el potasio se envía al exterior por los canales dependientes de voltaje, pero hay
canales rectificadores que introducen potasio a la celula.
Tipos de canales
Canales dependientes de voltaje:
Hay dos tipos de compuertas: activación e inactivacion. La compuerta de inactivación
Mecanismo de inactivación de ball and chain.

Cuando remueves la ball no se inactivan los canales de potasio. Si eliminas el amino terminal sí se
genera corriente.
El ion channel gating es un proceso estocástico. Los picos para arriba o para abajo no tienen un
código definido de si está abierto o no: depende de muchos factores, el canal, el potencial de
membrana.
Por qué el potasio está favorecido sobre el sodio. El ion de potasio es mayor que el de sodio.
Cuando el potasio entra en el filtro de selectividad, tiene 4 sitios de union, mientras que el sodio
tiene dos sólo. Hay otras dos razones (las preguntas de la diapo).
Los iones de potasio dentro del filtro de selectividad está deshidratado, aunque antes de entrar está
hidratado.
Hay dos mecanismos por los cuales los canales de potasio estabilizan los cationes en el centro de la
cavidad central.
Los canales de potasio son sensores de voltaje.
EL potencial de membrana de la membrana es -70 mV. Cuando pasa la depolarización se convierte
en 20 mV. Los residuos del dominio S3 se mueve fuera de la membrana. Hay dos tipos de
movimiento fuera de la membrana: 1) El sensor rota y se mueve fuera de la membrana (helical
screw → y es suficiente para abrir el canal). En el estado de reposo, hay una union entre redisduos
de S2-S3-S4 y se mueve fuera de la membrana. 2. Paddle modle. Es como si tuvieran unos brazos
que se levantan desde la membrana. Hay un modelo convencional y uno nuevo. Existe cierta
controversia respecto a esto.
Inward rectifiers.
Canales activados por luz. Se añade un linker con un residuo de glutamato al canal por biología
molecular, y por luz se pueden activar y el residuo interacciona con el canal. El linker contiene una
parte que es activable por luz (se descubrió en unos canales dependiente de luz) y por eso funciona
(es dependiente de luz).
Tema 4. Fisiologia y biologia molecular de los transportadores de membrana
Se creia que las sustancias solubles en lipidos atraviesan le membrana lipidica para entrar en la
celula (regla de Overton) y que las sustancias no lipidicas utilizarian otros mecanismos (que mas
tarde se descubrió que eran proteinas transportadoras). Pero lo cierto es que hoy en dia se sabe que
la mayoria de sustancias de interes farmacologico o fisiologico (tanto lipidicas como no) entran por
proteinas transportadorass, maayormente. Las hormonas esteroideas sí que atraviesan la membrana
por difusion pasiva.
Al ver las graficas, podemos pensar que los transportadores son enzimas ancladas a las membranas
pero que en vez de realizar una transformacion quimica, cambian la localizacion del sustrato.
 Tema 4: Comunicación y Señalización intercelular: la sinapsis
Las vesículas oscuras son vesículas electrodensas de tamaño variable que se encuentran tanto en
células sinápticas y también en ceĺulas extra-sinápticas. El cargo de las vesículas sinapticas son
normalmente derivados de a.a o relacionadas con ellas, pero además en las vesículas de
nucleodenso si bien no hay monoaminas no hay GABA, ni glicina, ni glutamato. La alta
condensación en estas vesículas provocaría que fueran electrodensas.
En examen en años anteriores puso una imagen de una sinapsis (similar a la de la diapo, pero no la
misma) y tenias que indicar las partes (hendidura, terminal pre, pro, etc).
Los mecanismos de llenado (transportadores para introducir el contenido de la vesicula) son
dependiente de intercambio con H+. Esto permite que no se agote el sistema. Esta implicada una
bomba de protones activa (ATPasa) que es el motor esencial para que los otros co-transportadores
dependientes de protones funcionen. La exocitosis es un proceso que permite la fusión de la
membrana vesicular a la membrana celular para liberar su contenido al espacio sináptico, es un
proceso calcio dependiente.
SNAP25 y sintapsina no están ancladas en la membrana vesicular, sino que están ancladas a otras
proteinas. Estas forman un complejo denominado SNARE que permite fusionar la bicapa lipidica de
la membrana plasmatica y vesicular, que si no de otra forma no podrian unirse porque se repelen. S
reconocen proteinas especificas de la memb vesicular y otras de la memb plasmatica que forman
una cremallera que vence la repulsion electrostatica.
Acoplamiento excitación-secreción: definicion. El calcio es necesario para que haya secreción. SI
uso soluciones acuosas tengo excitación pero no secrecion.
Patch-clamp:
Si el sello entre la membrana y la pipeta se va perdiendo, empiezan a haber corrientes de fuga. ¿Que
permite el acercar la pipeta a la membrana? Permite que dé potenciales y medir el potencial de la
membrana.
La concentracion es constante, lo que varia es la cantidad. Si es pequeña la vesicula, tendra menos
cantidad de catecolaminas, y si es mas grande la vesicula, mas cantidad de catecolaminas. Pero la
concentracion es la misma en todas las vesiculas. Esto esta relacionado con vencer la fuerza
osmótica. Para vencerla se deben introducir cantidades enormes en la vesicula.
Definicion de exocitosis y tipos.
Cosas clave desde el punto de vista historico (otlo levi, teoria cuanal, amperometria que aporta a la
fisiologia celular).
Morfologia de la sinapsis

Tema 5: Sinapsis
La sinapsis rapida esta mediada por vesiculas pequeñas con aminoacidos mientras que en la sinapsis
lenta, con moleculas mas grandes, las vesiculas son mas grandes. En este ultmo caso no se activan
canales ionicos directamente, sino que primero se activan proteinas G.
El principal NT inhibidor es el GABA. Hay receptores Gaba A (ionotropicos) y GABA
B(metabotropicos). Hacen a la celula mas negativa y veo esta hiperpolarizacion (gaba b).
Si queremos ver un solo ion usamos la ecuacion de Nerst, peor si queremos ver más de uno
miramos el potencial de inversion.
Las quinasas dependientes de ciclinas son un componente central de la regulación de los puntos de
control del ciclo celular. La ciclina se une a la quinasa y aumenta su actividad de fosforilación. Las
Cdk estan activas durante todo el ciclo celular; y el numero de Cdk depende de la especie. Son
fosforilasas pero además son componentes de la maquinaria del ciclo celular. Sin la ciclina, la Cdk
está poco activa.
Los complejos Cdk-ciclinas que se activan en las diferentes fases del ciclo celular son distintos. La
ciclina se une al Cdk por un T-loop del Cdk que es reconocido por un motivo conservado SPXK.
Para prevenir una activación premautra de las Cdk se tiene foforilado los residuos de Thr14/Thr15
de Cdk. Las responsables de la fosforilación son Myt1 y Wee1. Las proteina que desfosforila es
Cdc25 y esto activa la Cdk.
Despues del punto de restriccion, la celula sigue como sea. Es en el propio punto donde hay que
regular.
Mesodermoo axial o corda es muy improtante. Los humanos lo tenemos, somos cordado. EL
mesodermo paraaxial es paralelo al mesodermo axial y cuando se divide da lugar a somitas, uqe son
agrupaciones de celulas que luego formaran nuestros musculos.
Fgf8 es determinante para el desarrollo de las extremidades. Si no se expresa, probablemten no se
desarrollen las extremidades. No se expresa en el mesodermo lateral, pero difunde desde los
mesodermos intermedios hasta esa zona para incitar la expresion de otros genes.

Hox son genes hometoicos.