“NOMBRE DE LA PRACTICA. No.
”
Alumnos: Jiménez Caraveo Alonso
Profesores:
INTRODUCCIÓN
Tal como su nombre lo indica, los aminoácidos son
compuestos orgánicos que contienen grupos amino y
carboxilo y por lo tanto poseen propiedades acidas y
básicas. Los aminoácidos poseen propiedades diferents
a los compuestos orgánicos de bajo peso molecular y
semejan mas bien sales inorganicas. En general, son
facilmente solubles en un medio acuoso, pero solo
ligeramente solubles o insolubles en solventes
orgánicos. Los aminoacidos son las unidades
estructurales de las proteinas, estas pueden contener
en su cadena hasta 22 aminoacidos diferentes.
Ademas los aminoácidos se encuentran unidos por
enlaces peptidicos (-CO-NH-) que forman condensación
del alfa-COOH de un aminoácido con el alfa-NH 2
OBJETIVOS
1.-Efectuar una hidrolisis completa de una proteína.
2.-Identificar algunos aminoácidos presentes en un
hidrolizado de proteína por medio de sus propiedades
fisicoquímicas.
3.-Identificar por cromatografía en placa fina algunos
de los aminoácidos presentes en un hidrolizado de
proteína.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
Reacción de precipitación
La prueba era positiva si nuestro tubo además de
precipitar se tornaba de un color oscuro.
Los resultados obtenidos en esta prueba fueron los
siguientes
Tubo c/sol A negativa, Tubo testigo negativa por no
contener puentes disulfuro. Tubo c/sol D positiva.
Primero genera una mezcla bifásica que en la parte
superior contiene NaOH+(AcO)2Pb y cuando reacciona
cambia de color oscuro opaco con una reacción
exotérmica y nos deja un precipitado de PbS.
En base a esto podemos argumentar que nuestro tubo
c/ sol A no precipito debido a que las proteínas dentro
de este se encuentran hidrolizadas y sabemos que las
propiedades biológicas de una proteína, así como parte
de sus propiedades físico-químicas, dependen de su
estructura. Cuando estas estructuras se alteran o se
destruyen, aunque no haya ruptura de las cadenas
polipeptídicas, la proteína pierde sus características
funcionales y se alteran sus propiedades físico-
Químicas. Además de que nuestra prueba consiste en
la precipitación de proteínas por la acción de ciertos
iones metales pesados como Hg, Zn, Cd, Cu, y Pb. En
este caso el plomo. Todos estos agentes hacen
precipitar las proteínas por que forman con ellas sales
insolubles. El mecanismo de acción de estos agentes es
la siguiente: los metales pesados forman sales
insolubles con las formas aniónicas (-) de la proteína
necesitándose entonces un pH más alcalino.
R-S-S-R + NaOH R- SH + (CH3-COOH)2Pb PbS
Reacción de ninhidrina
En esta prueba obtuvimos los siguientes resultados
tomando en cuenta que la prueba se tomaba como
positiva si el tubo cambiaba de color al inicial.
Tubo c/agua destilada negativa, Tubo c/sol B positiva
coloración violeta claro, Tubo c/sol C positivo rojo
oscuro,, Tubo c/sol D positiva violeta opaco, Tubo c/
aminoácido patrón, alanina, positiva, coloaración
violeta oscuro.
Esta prueba se utiliza con frecuencia para cuantificar
aminoácidos. Cuando un aminoácido reacciona con la
ninhidrina, se forman: por cada mol de aminoácido que
reacciona con ninhidrina se forman como
intermediarios sendas de amoniaco, aldehído, CO 2 e
hidrindantina. El amoniaco que se libera reacciona
subsiguientemente con un mol de ninhidrina y un mol
de hidrindantina, formando un color violeta, conocido
como purpura de Ruhenmann.
Con los resultados que obtuvimos podemos decir que
los aminoácidos cuyo grupo amino es primario
cambiaron al purpura. En caso de haber tenido un tubo
que cambiase a color amarillo podríamos determinar la
presencia de prolina que podría ser el caso del tubo B
puesto a que se podría observar un poco amarillento.
Ademas de que nuestro tubo c/ sol C no tubo cambió
de coloración debido a que este no presenta grupos
alfa-aminolibres en comparación con las otras
soluciones ya que en este tubo tenemos la grenetina
sin hidrolizar y como sabemos el hecho de que este
hidrolizada nos habla sobre el hecho de
“descomponer” nuestra proteína en sus aminoácidos.
Reaccion de Biuret
Con el CuSO4, la reacción basa en la formación de un
compuesto de color violeta, debido a la formación de un
complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los
pares de electrones no compartidos del nitrógeno que
forma parte de los enlaces peptídicos presentando un
máximo de absorción a 540 nm, y vira a rosa cuando se
combina con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido
de potasio no participa en la reacción, pero proporciona
el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Sustrato Observaciones
Agua destilada Azul Cielo
Solucion “A” Incoloro
Solucion “C” Azul rey
Solucion “D” Azul rey
Así como podemos observar en la tabla, los tubos en
los cuales contenían solución de grenetina sin hidrolizar
y la solución de albumina nos dieron positivo esto
indica la presencia de enlaces peptídicos (aminos libres
de su estructura) ya que en esos tubos hubo una
desnaturalización de las proteínas.
Acción Reguladora de Aminoácidos
En esta reacción se hace notar como un aminoácido
actúa como un ácido o una base ya que estos actúan de
manera anfótera, para esto usamos NaOH Y HCl, para
esto, utilizamos en 2 tubos de ensayo, añadimos 2ml de
la solución “B” y en el otro 2 ml de agua destilada,
agregando gotas de rojo congo, observando que ambos
mostraron un color rojo intenso indicando que nuestras
muestras estaban básicas, al agregarle el HCl el tubo 1
agua destilada ocupó 1 gota de rojo congo y 1 gota
para acidificarse a color azul el tubo 2 con solución B al
agregar rojo congo no coloreó la mezcla muy intenso
pero con HCl cambió a azul, esto se debió a que los
aminoácidos presentes en la solución B producen un
efecto buffer que de alguna manera amortigua , o en
otras palabras hace que la reacción se lleve a cabo de
manera más lenta, en cambio al repetir el proceso
usando la fenolftaleína, en el agua se tornó totalmente
rosa de manera rápida pero al agregarle NaOH a la
solución B se tornó solo la mitad de color rosa pálido y
lo del fondo no.
Cromatografía en placa fina
Colocamos tres muestras en la cromatoplaca, en el
primero (a) colocamos solución de Grenetina, en el
siguiente (b) solución de fenilalanina y por ultimo (c)
glicina, lo introducimos en una cámara de
cromatografía que contenía una mezcla de alcohol
terbutilico-agua 3:1. Lo dejamos secar y le
aplicamos una solución de ninhidrina
arrojando los siguientes resultados:
Solución Rf
Grenetina Indeterminado
Fenilalanina 0.425
Glicina 0.575
Podemos observar que la grenetina está compuesta
mayormente por glicina y no por fenilalanina.
Reacción xantoproteica
Solución A – Sin precipitado previamente hidrolizada
Solución D sin hidrolizar – Forma precipitado
La desnaturalización provoca, generalmente, una
disminución de la solubilidad de las proteínas, que
pueden precipitar, esto es, las proteínas se solidifican o
aparecen grumos en la disolución. Ello se debe a la
pérdida de su estructura globular, que pasa a
filamentosa.
Al calentar en el baño maria o plancha de
calentamiento, en la solución D las proteínas se
desnaturalizaron esto provocado por el calor. En
cambio la solución A previamente hidrolizada solo
presentaba aminoácidos así que no formo el
precipitado (grumos), pero si adquiriendo el color
amarillo por la presencia de aminoácidos
Ambas adquieren un color amarillo
En la reacción xantoproteica, el HNO3 reacciona con el
radical fenilo de los aminoácidos que lo contienen,
radical que se transforma en hidroxi-benceno, que da el
color amarillo característico de esta reacción, de ahí su
nombre, reacción xantoproteica
diferentes reacciones que realizamos podemos
identificar los aminoácidos contenidos en diferentes
productos. Como es el caso de la cromatografía que por
medio de los Rf nos permite identificar los diferentes
aminoácidos contenidos en la grenetina hidrolizada.

Reacción xantoproteica

Reacción con ácido nitroso

Cuestionario
6. Indicar por medio de reacciones, el efecto
regulador de aminoácidos.

Tubo 1 (Sol A) – Se observa burbujeo

Tubo 1 (sol C) – Sin burbujeo
Tubo 3 (Sol D) – Burbujeo
Tubo 4 (Testigo) – Sin burbujeo
La presencia de anillos aromáticos fenólicos o
nitrogenados en la cadena lateral de los aminoácidos se
puede identificar mediante la reacción con ácido
clorhidrico y nitrito de Sodio por formación de sales de
Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así
detectar la presencia de Histidina libres o formando
péptidos y proteínas.
El resultado positivo de esta prueba se puede
evidenciar con un color levemente rojizo – amarillo
fuerte y además al reaccionar desprenden hidrogeno
como es el caso del tubo 1 y 3
7. Explicar los resultados obtenidos en la
prueba del efecto regulador de los
aminoácidos.
En esta reacción se hace notar como un
aminoácido actúa como un ácido o una base
ya que estos actúan de manera anfótera. El
cambio de color a diferentes velocidades se
debió a que los aminoácidos presentes en la
solución B producen un efecto búfer que de
alguna manera amortigua , o en otras
palabras hace que la reacción se lleve a cabo
de manera más lenta

8. Indicar la fórmula de los aminoácidos que

identificó por cromatografía.

CONCLUSIONES

Las proteínas forman un papel importante en la

alimentación de los seres vivos porque es importante
conocer e identificar el contenido proteico de los
alimentos que consumimos, asi mismo conocer los
aminoacios que estas contienen. Gracias a las
9. Investigar algunos de los aminoácidos que
se encuentran presentes en grenetina y
albúmina.
 Grenetina :
 Lisina
 Arginina
 Ácido Glutámico
 Glicina y Prolina

 Albumina:
 Ácido aspártico
 Ácido glutámico
 Alanina
 Arginina
 Cistina
 Fenilalanina
 Glicina
 Hidroxiprolina
 Histidina
 Isoleucina

10. Investigar de qué proteína se obtiene la

grenetina

Su componente principal es una proteína

llamada colágeno

BIBLIOGRAFÍA: (mínimo 3 referencias dos de ellas de

libros)

1. Wade, Leroy. Química Orgánica, Volumen 2. Séptima.

México: PEARSON EDUCACION, 2011.pp: 1153-1161

http://www.dgari.com.mx/sitio/salud-articulos-
grenetina.php