introduccion

El término colinesterasa (ChE) hace referencia a una serie de enzimas que

hidrolizan a los ésteres de la colina. Su principal función fisiológica tiene lugar en el
tejido nervioso, donde juega un importante papel en la destrucción del
neurotransmisor. Principalmente, existen dos enzimas con actividad colinesterasa:
acetilcolinesterasa (AChE) y butirilcolinesterasa (BChE). La colinesterasa puede ser
analizada en un gran número de tejidos orgánicos, pero su determinación en sangre
entera ha demostrado presentar una serie de ventajas, como: la facilidad de
obtención y manejo de las muestras, la posibilidad de analizar acetilcolinesterasa y
butirilcolinesterasa en la misma muestra sin necesidad de separar plasma y
eritrocitos. La técnica se basa en la hidrólisis del sustrato acetiltiocolina (ATCh) por
la enzima colinesterasa. 1La tiocolina liberada reacciona con un cromóforo, el ácido
5,5’-ditiobis-2- nitrobenzoico (DTNB), dando lugar como producto de reacción al
ácido 5-tio-2-nitrobenzoico, compuesto de color amarillo cuyo máximo de
absorbancia se encuentra entre 405 y 420 nm de longitud de onda, con un óptimo
en 412 nm. Cuando se utiliza sangre entera para determinar la actividad
colinesterasa mediante el método de Ellman las muestras deben ser diluidas antes
de ser analizadas, para disminuir la concentración de hemoglobina en el medio de
reacción, ya que su alta concentración provoca un elevado pico de absorbancia que
enmascara cualquier cambio ocurrido durante la reacción. Hay diluyentes
hemolizantes y diluyentes no hemolizantes como la solución salina isotónica,
tampón fosfato 0,1 M y la albúmina sérica bovina.2
RESULTADOS
Tabla 1.- Valores de AChE y Hb en la
muestra.
[Hb] AChE AChE/Hb
14.85 g/dL 1.2852 8.6545 U/g
U/mL

CALCULOS
ΔAbs

(𝐴𝑏𝑠1−𝐴𝑏𝑠0)+(𝐴𝑏𝑠2−𝐴𝑏𝑠1)+(𝐴𝑏𝑠3−𝐴𝑏𝑠2)
Datos: ΔAbs =
3
Abs0=1.045
Abs1=1.222 ΔAbs=1.28
Abs2=1.347 52
Abs3=1.433

AChE
Datos:
Vol. Total= 3.16mL 𝐴𝐶ℎ𝐸 𝑒𝑛 𝑈/𝑚𝐿 =
(𝑣𝑜𝑙.𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙)(1000000 𝜇𝑚𝑜𝑙)(1𝐿)(∆𝐴𝑏𝑠)
(𝐸×𝑐𝑚×𝑉𝑜𝑙.𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎)(1𝑚𝑜𝑙)(1000𝑚𝐿)(3min)
E=10.6x103/M cm
Cm=1
ΔAbs=1.2852 AChE= 1.2852 U/mL
Vol. Muestra= 0.01mL

AChE/Hb
Datos:
𝐴𝐶ℎ𝐸
AChE=1.2852 U/mL 𝐴𝐶ℎ𝑒 𝑒𝑛 𝑈⁄𝑔 𝑑𝑒 𝐻𝑏 = 𝐻𝑏 𝑒𝑛 𝑔/𝑑𝐿
⁄100

[Hb]= 14.85 g/dL

AChE/Hb= 8.65454 U/g
Discusión

La acetil colinesterasa(AChE), colinesterasa verdadera o colinesterasa 1 es una

enzima capaz de hidrolizar la ACh, Desde su descubrimiento en la década de 1920,
la AChE ha sido una de las enzimas más estudiadas en cuanto a su efecto
fisiológico, mecanismo de acción, naturaleza de su centro activo, así como su
distribución y localización en diferentes tejidos .3

Hoy por hoy, la determinación de la actividad de la colinesterasa sanguínea es el

biomarcador por excelencia de exposición ambiental a compuestos
organofosforados, sulfatos y sulfonatos orgánicos, y carbamatos.4

La AChE pertenece a una familia de enzimas conocidas como colinesterasas, las

cuales pueden ser definidas como un grupo de esterasas de serina capaces de
hidrolizar ésteres de colina, tales como la acetilcolina. Cabe mencionar que hay
varias patologias relacionadas con las alteraciones de la AChE se ha demostrado
que cambios en los niveles de AChE-S y sus propiedades se han reportado en
varias enfermedades neurodegenerativas. Las enfermedades de Alzheimer,
Parkinson y miastenia gravis son las tres neuropatologías más estudiadas en
relación con alteraciones en la AChE.2

De acuerdo con la prueba que se realizo que fue la determinación de

acetilcolinesterasa en una muestra de sangre de un compañero (sujeto de prueba)
la cual arrojo resultados que se encontraban dentro de los parámetros normales de
acetilcolinesterasa que fueron los siguientes 1.2852 U/mL de AChE y AChE/Hb de
8.65454 U/g.

En la determinación de acetilcolinesterasa se tuvo mucho cuidado en la temperatura

que se utilizo en la reacción ya que la temperatura era un factor clave dentro del la
reacción ya que la actividad colinesterasa es dependiente de la temperatura y en
los mamíferos alcanza su máxima actividad entre 37º y 40º C (Witter 1963). El llevar
un correcto control de todos los factores que pueden influir dentro de la reacción
para la determinación de acetilcolinesterasa nos puede llevar a un resultado con
menor margen de erro ya que si no se llevara el debido cuidado y control de ello,
esto podría repercutir sobre el valor final de nuestro resultado de la prueba. 5
Conclusión

Se determinó de manera correcta la actividad de la acetilcolinesterasa (AChE) en

una muestra de sangre periférica proporcionada por un donante. Dicha actividad
resulto ser normal según lo consultado en las bibliografías, por lo que se puede decir
que la persona se encuentra sana, o por lo menos en un estado normal según los
resultados obtenidos en la prueba.

Bibliografía

1. Jiménez Dias Manuel. Validación de la determinación de acetilcolinesterasa

eritrocítica humana a 340 nm. Departamento de Análisis Clínicos, Facultad
de Microbiología, Universidad de Costa Rica. Revista Biomed. (2000)
recuperado el 26/10716 de:
http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb001132.pdf

2. Tecles F. Determinación espectrofotométrica de colinesterasa en sangre

entera de animales domésticos: factores pre y analíticos. Departamento de
Medicina y Cirugía Animal Universidad de Murcia. (2003) recuperado el
26/10/16 de: http://revistas.um.es/analesvet/article/viewFile/17091/16461

3. Robledo M, Rojas A, Medina I, Barrón B. fundamentos de toxicología. 1 er

edición. México. (2012).pag.67-69

4. Ibarra E, Linares T.La inhibición de la actividad colinesterásica sanguínea

como biomarcador de exposición a compuestos organofosforados y
carbamatos.Revista Cubana de Salud y Trabajo (2012.) recuperado el:
26/10/16 de: http://bvs.sld.cu/revistas/rst/vol13_3_12/rst09312.htm

5. Sanchez G, Salceda R. Enzimas polifuncionales: el caso de la

acetilcolinesterasa. recuperado el 26/10/16 de:
http://www.medigraphic.com/pdfs/revedubio/reb-2008/reb082b.pdf