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2- Citometria de Fluxo
A citometria de fluxo será realizada colocando-se as células a serem
analisadas em um equipamento denominado citômetro de fluxo, o qual
alinhará as células de forma que possam passar enfileiradas pelo sistema e
serem analisadas. Para ser feita a análise, o aparelho utiliza um sistema
óptico, no qual se incide feixes de laser sobre as células, as quais serão
analisadas tendo como base a forma como a luz foi desviada. A luz desviada
pela célula será captada por detectores: o FSC é relacionado ao volume
celular e o SSC analisa a complexidade da célula (se ela tem grânulos, tipo
dos grânulos, forma do núcleo, etc). Cada célula que passa através do feixe
de laser, dispersa a luz de uma forma, tornando possível fazer esta análise.
A aplicação desta técnica é feita na imunologia para a distinção de tipos
celulares em uma amostra (por exemplo, separar neutrófilos, macrófagos e
linfócitos em uma determinada amostra), pode ser usada na hematologia e
oncologia para a detecção de células cancerosas, etc.
3- Imuno-histoquímica
Como o próprio nome já diz, a imuno-histoquímica é a técnica utilizada
para detectar algum antígeno de interesse em um tecido, utilizando-se de
um anticorpo marcado, geralmente com uma enzima.
Para a execução da técnica, utiliza-se um anticorpo primário não marcado,
o qual reagirá com o antígeno de interesse do tecido. Em seguida, utiliza-se
um secundo anticorpo marcado, que se ligará ao primeiro anticorpo,
amplificando o sinal.
Por fim, adiciona-se o substrato da enzima, para que a reação possa ocorrer
e observarmos o resultado.
4- Aglutinação Direta
No teste de aglutinação direta, o antígeno faz parte naturalmente da
célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpos
contra esses antígenos. Como exemplo de aglutinação indireta, temos a
hemaglutinação, usada para a identificação de antígenos eritrocitários
na tipagem sanguínea utilizando anticorpos específicos.
Os testes para detectar anticorpos específicos são realizados empregando-se
diluições em série do anticorpo, frente a uma quantidade constante de
antígeno. Após um período de incubação, a aglutinação se completa e o
resultado é geralmente expresso como a máxima diluição em que ocorre a
aglutinação.
5- Aglutinação Indireta