MICROSCOPIA

Practica #1

8 DE FEBRERO DE 2018
ELIZABETH AGUILAR SERNA
Laboratorio de microbiología
Objetivo
Reconocer al microscopio y sus elementos. Identificar los diferentes tipos de microscopios.
Aprender la forma de manejo y el cuidado de un microscopio. Asimilar la técnica adecuada
para el enfoque.

Introducción
Un microscopio simple (de un lente o varios lentes), es un instrumento que amplifica
una imagen y permite la observación de mayores detalles de los posibles a simple vista. El
microscopio más simple es una lente de aumento o un par de anteojos. El poder de
resolución del ojo humano es de 0,2 mm es decir que para ver dos objetos separados estos
deben estar como mínimo a esa distancia. El microscopio aumenta la imagen hasta el nivel
de la retina, para captar la información. La resolución depende de la longitud de onda de la
fuente luminosa, el espesor del espécimen, la calidad de la fijación y la intensidad de la
coloración. Teóricamente la máxima resolución que se puede alcanzar es de 0,2 um dada
por una luz con longitud de onda de 540 nm, la cual pasa por un filtro verde (muy sensible
por el ojo humano) y con objetos condensadores adecuados. El ocular aumenta la imagen
producida por el objetivo, pero no puede aumentar la resolución. Existen distintos
microscopios ópticos generales y de investigación que se diferencian en factores tales como
la longitud de onda de la iluminación del espécimen, la alteración física de la luz que incide
en la muestra y procesos analíticos que se aplican a la imagen final.

Antonie van Leeuwenhoek (Holanda, 1632-1723), un vendedor de telas, aficionado a pulir

lentes, logró fabricar lentes lo suficientemente poderosas como para observar bacterias,
hongos y protozoos, a los que llamó "animálculos".
El primer microscopio compuesto fue desarrollado por Zacharias Janssen. A partir de éste,
los avances tecnológicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro
tiempo, los que existen de varios tipos y son usados con diferentes fines. Cincuenta años
después de la creación del microscopio, el inglés Robert Hooke perfecciona el microscopio;
Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los
pequeños poros en forma de caja, a los que él llamó "células". Publica su libro Micrographia.
Estructura El microscopio óptico común está conformado por dos sistemas: El sistema
mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que
permiten el movimiento para el enfoque. El sistema óptico comprende un conjunto de
lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imágenes que se observan
a través de ellas. La parte mecánica del Microscopio. La parte mecánica del microscopio
comprende: el pie, el cabezal, el revólver, la platina, el tornillo micrométrico y el tornillo
micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación, además permite
los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma
de Y o bien es rectangular. El cabezal o tubo óptico. Tiene forma cilíndrica y está
ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En
su extremidad superior se colocan los oculares. El revólver. Es una pieza giratoria provista
de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan
por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un
piñón que lo fija. La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la
parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior
se adapta al pie. La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación
u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el
paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso
permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales
puede centrarse o producir movimientos circulares. El tornillo macrométrico. Girando este
tornillo, asciende o desciende el tubo óptico o la platina del microscopio, deslizándose en
sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque
rápido de la preparación. El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi
imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido
de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se
utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Sistema Óptico El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes

mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por los lentes oculares, los
objetivos, la fuente de luz, el condensador y el diafragma. Los oculares. Los oculares están
constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares
generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar
en forma abreviada los aumentos. Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las
imágenes de los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se
examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y
objetivos de inmersión. Se disponen en una pieza giratoria denominada revólver. Los
objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que
producen, la abertura numérica y otros datos. El número de objetivos varía con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más
frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X.

El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para

observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el
objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de
cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos círculos o
anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

La Fuente de Luz: Que puede ser natural (a través de un espejo) o artificial (una lámpara
conectado a una fuente de energía eléctrica). Condensador. El condensador está formado
por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano
de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede
deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su
movimiento ascendente o descendente.
Material
Cubreobjetos y portaobjetos
Muestra (Agua estancada)
Microscopio

Metodología

Colocar una gota de muestra en el portaobjetos

Colocar encima de la muestra el cubreobjetos

llevar al microscopio, colocar la muestra asegurada en la platina

Ajustar con el tornillo macrometrico hasta tener una imagen de la muestra

Con la ayuda del tornillo micrometrico enfocar la imagen

Realizar anotaciones de los protozorios observados en la muestra

Observaciones
Durante la practica me di cuenta de que muchos conceptos como todo lo referente a la luz
son conceptos que todos hemos ido aprendiendo desde semestres atrás y que no tomamos
en cuenta al momento de analizar una muestra en un microscopio. El microscopio es un
instrumento compuesto por varias partes que son las que nos permiten tener una imagen
mas grande y clara de la muestra que estamos analizando, la luz y las diferentes lentes que
componen el microscopio son partes muy importantes al momento de aumentar una
imagen.
Al momento de observar en el microscopio me di cuenta de que había cosas que yo hacia
mal por lo que yo no enfocaba bien mis muestras, y no podía hacer un buen reporte ya que
muchas veces lo que yo hacía era cambiar el aumento de 10x a 40x sin antes tener bien
enfocada la muestra, también algo que yo hacía mal era el usar el aceite de inmersión de
manera incorrecta ya que colocaba el gota en el 100x pero seguía moviendo la platina
entonces toda el aceite se esparcía a lo largo de la muestra y no se formaba el menisco de
 la forma correcta, al enfocar bien una muestra podemos hacer una mejor identificación de
la misma , incluso de sus organelos y partes más pequeñas.

Resultados (Frotis en fresco, muestras sin teñir)

Parte frontal de planaria observada Parte trasera de planaria Sistema digestivo de

con un aumento total de 100x, observada con un aumento planaria observado con un
muestra de agua estancada total de 100x. aumento total de 100x

Resto de algas observadas a un Amiba observada con un Amiba observada con un

aumento total de 400x, aumento total de 400x aumento total de 100x
muestra de agua estancada. muestra tomada de agua
estancada en la DCNE.
Análisis de resultados
Los resultados obtenidos dependen mucho de la muestra, pero por otra parte dependen
también del procedimiento desde que se prepara el frotis, si lleva tinción o no y después de
preparar el frotis se lleva al microscopio, ya estando asegurado el portaobjetos en la platina
se comienza a enfocar la muestra. La parte de enfoque es muy importante ya que es la
forma de encontrar lo que estamos buscando en la muestra, siempre es importante
comenzar con el objetivo 10x para tener un campo mas grande y así poder ir buscando y
recorriendo todo el frotis, una vez enfocada la parte que nos interesa observar con mas
aumento se debe colocar en la parte central del campo y así poder cambiar con el revolver
al objetivo 40x y enfocar un poco con el micro, si se requiere mas aumento se puede
cambiar al objetivo de inmersión pero en este paso ya no se debe mover la muestra para
que el aceite de inmersión forme el menisco y de esa manera se concentre la luz y podamos
observar una imagen con una mejor resolución. En esta práctica no se utilizó ningún tipo de
tinción ya que la muestra era agua estancada y los protozoarios que ahí se pueden
encontrar se observan claramente sin tinción, pero, sin embargo, es muy importante hacer
un buen manejo del microscopio, de la luz sobre todo para aprovechar la capacidad de
contraste que tienen los objetos observados que nos permite identificar las diferentes
estructuras que los conforman, organelos etc.

Conclusión
Este tipo de practicas son muy importantes y mas para nosotros, futuros biólogos científicos
que siempre estaremos en contacto con muestras que es necesario observarlas en un
microscopio y por consecuencia es muy importante saber como es que se compone y como
funciona este aparato ya que de esa manera podemos aprovechar mejor todas las
propiedades y capacidades, tanto del microscopio como de la luz o del mismo objeto que
estemos observando, se logró el objetivo de la practica ya que gracias a la teoría que vimos
pudimos recordar y reforzar los conocimientos básicos que ya teníamos y aprendimos cosas
nuevas y mejores acerca del uso del microscopio, de igual manera practicamos el enfoque
con muestras sin teñir para poder comprobar las capacidades que estuvimos mencionando
en la teoría y saber cómo utilizarlas para tener imágenes más claras y con mayor resolución
Cuestionario
Son componentes del sistema mecánico del microscopio. Excepto:
-El tubo óptico -El brazo. -
La platina. -El diafragma. -Los tornillos macro y micrométrico. -Todos. -Ninguno.

-Sobre el manejo y cuidado del microscopio. Señale lo correcto: -Se debe

levantar y transportar el microscopio por el brazo. -Es conveniente limpiar y revisar siempre
los microscopios al inicio y final de la sesión práctica. -Nunca hay que tocar las lentes con
las manos. -No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el
microscopio. -Todos. -Ninguno.

-Señale 2 diferencias entre el microscopio óptico y el microscopio

electrónico:

- ¿Qué entiende por poder de definición del microscopio?

El poder de resolución está determinado en parte por la longitud de onda de la radiación
empleada para iluminar el espécimen y es inversamente proporcional a la misma, es decir,
a menor longitud de onda, mayor poder de resolución.

Bibliografía
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo5_4.htm

https://es.khanacademy.org/science/biology/structure-of-a-cell/introduction-to-
cells/a/microscopy