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PRÁCTICA Nº 01
“DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ÁCIDO CARMÍNICO EN MUESTRA DE
COCHINILLA”
I. OBJETIVOS:
COCHINILLA
DEFINICION.- El insecto Dactylopius Coccus Costa de la familia de los Cóccidos, es conocido con el
nombre de "cochinilla" que habita como huésped sobre las pencas de las tunas. De las hembras de
cochinilla se obtiene el ácido carmínico y de este ácido se produce el colorante natural llamado carmín.
Es originaria del Perú y México. La utilidad industrial de la cochinilla no está debidamente explotada
pese a ser Perú el primer productor de cochinilla en el mundo.
Phylum: Artropoda
Clase: In secta
Orden: Homóptera
Sub-Orden: Sternorrhyncha Súper
familia: Coccoidea
Familia: Dactylopidae
Género: Dactylopius
Especie: Dactylopius Coccus Costa
Nombre común: Cochinilla
a) Huevo: Los huevos son ovalados de superficie lisa y lustrosa semitransparente al estado inicial,
presenta un color rojo vivo a morado lila, su tamaño varía de acuerdo al piso ecológico de habitad,
siendo de 1 mm de longitud por 0.5 mm de ancho.
b) Estados ninfales: Ninfa 1: Es conocida como ninfa migrante y luego es fijada a la penca, es de forma
oval con setas modificadas, presenta un color rojo, su tamaño varia en tunas bajo riesgo siendo 0.8 mm
de longitud por 0.4 mm de ancho. Posee antenas, patas y ojos, se moviliza en este estadio buscando en
la penca un lugar de fijación hasta ser adulto y morir. Ninfa 11: Muda para convertirse en hembra
adulta.
c)Hembra adulta: Las hembras carecen de alas, son de forma oval plano convexas (región dorsal
convexa y ventral plana) y claramente segmentadas, su tamaño puede variar entre 4 y 6 mm de largo
por 3 a 4 mm de ancho, dependiendo esencialmente de las condiciones de su cultivo y del periodo de
reproducción. La boca tiene un pico por el que se alimentan de las pecas de tuna. Están cubiertas de una
cera de color blanco y de consistencia pulverulenta, pueden estar en forma individual o formando
colonias.
Macho adulto: Es más pequeño que la hembra, tienen cabeza, tórax y abdomen bien diferenciados; este
último termina en dos largos filamentos; un par de alas y antenas bien desarrolladas, carecen de
órganos bucales y son de vida muy corta. Proporcionalmente el número de macho es menor que el de
hembras.
El contenido de humedad es considerada la cantidad máxima de agua que debe contener La cochinilla
para su comercialización. Su valor se expresa en porcentaje en peso (p/p ). En el mercado exige un
contenido de humedad entre 10% a 12%. El cuerpo del insecto seco contiene de 3 a 5 % de cenizas que
son los restos de cochinilla luego de ser calcinados, constituidas por óxidos de calcio (CaO), magnesio
(MgO), sodio (Na20), potasio (K20), estaño (Sn02), aluminio (Ah03) y otros. Su valor se expresa en
porcentaje en peso (p/p ). Adicionalmente la cochinilla contiene impurezas que serían los residuos
vegetales, piedras, restos de otros insectos, materia orgánica, productos químicos, minerales, etc.; que
son retenidos por la malla clasificatoria del tamaño de cochinilla. Su valor es expresado en porcentaje en
peso (p/p ).
TÉCNICAS DE MUERTE.- Se tiene en cuenta también las técnicas de muerte y secado de la cochinilla ya
que está muy relacionada con la calidad del colorante a obtenerse junto al tiempo en que se coseche la
misma.
MATANZA POR ASFIXIA: Para ésta técnica se utiliza Bandejas cubiertas con plástico, bolsas, cilindros de
plástico debidamente cubiertos para provocar la muerte por asfixia y posteriormente se expone al sol
por cuatro o cinco días para la deshidratación o secado.
MATANZA UTILIZANDO INSUMOS: Esta técnica no es recomendable y su empleo se va descartando
drásticamente por el grado de impurezas y toxicidad que se aplican a la cochinilla, se utiliza ceniza,
hexano C6H14 o thiner.
MATANZA AL SOL: Es la más empleada y recomendable, previamente se debe quitar mediante fricción
la cera que protege a la cochinilla mediante el uso de zarandas con malla de metal, para su posterior
exposición directa al sol en mantas tendidas; este proceso dura de 3 a 4 días.
B) SECADO ARTIFICIAL Para ello se utilizan equipos denominados secadores, con los que es posible
realizar un adecuado control de las variables de secado (temperatura, velocidad del aire y altura del
techo), a la vez que del comportamiento del producto durante el secado, así como un eficiente control
sanitario. El secador industrial más apropiado es el que funciona mediante aire caliente, a una
temperatura de 60°C durante 8 horas (para la Cochinilla tratada sin solvente).
ACIDO CARMINICO El ácido carmínico (C22H2o013), es una sustancia química compleja, utilizada como
colorante rojo, extraído de la cochinilla (Dactylopius coccus costa). Se - utiliza como colorante en
cosméticos (pintalabios, entre otros) y como E-120 en la industria alimenticia para dar un color rojo a los
alimentos. Es un colorante caro, por lo que se utiliza fundamentalmente en productos de gama alta.
Dependiendo del país y/o institución, el ácido carmínico (C22H2o013) es conocido por muchos nombres
comerciales o claves de identificación:
PROPIEDADES FÍSICAS DEL ÁCIDO CARMÍNICO (C22H2o013).- Las propiedades físicas del ácido
carmínico son las siguientes:
• Es insípido e inodoro.
• Se cristaliza en forma de prisma de color rojo brillante, truncados oblicuamente, que observados por
transparencia parecen tener un color rojo anaranjado.
• La capacidad· para extraer el ácido carmínico desde los tejidos del insecto, generando soluciones
homogéneas que condujeran a valores reproducibles de absorbancia.
• El efecto sobre la estabilidad del ácido carmínico una vez solubilizado o todavía contenido en el
insecto muerto. En el siguiente cuadro se muestran los factores examinados:
Cuadro 5: Factores examinados durante el desarrollo del método para determinar la Concentración de
ácido carmínico (CAC).
Mediante este grafico podemos llegar a la conclusión de que a menor peso seco que tenga el insecto la
concentración del ácido carmínico será mayor.
ANÁLISIS ESPECTROFOTOMÉTRICO: La
espectrofotometría que es el conjunto de
procedimientos los cuales utilizan la luz
visible para medir concentraciones químicas.
Según la Ley de Beer Lambert, la absorbancia
es importante porque es directamente
proporcional a la concentración (C), de la
especie que absorbe la luz en la muestra.
Toda sustancia que absorbe luz visible aparece coloreada cuando transmite o refleja la luz. La sustancia
absorbe ciertas longitudes de onda de la luz blanca, y nuestros ojos detectan las longitudes de onda que
no se absorben. El color observado se llama el complementario del color absorbido.
El carmín es insoluble en agua y en alcohol. Soluble en medios alcalinos· Es un polvo casi impalpable de
color rojo o morado. Tiene mejor resistencia al calor y a la oxidación química al compararse con los
colorantes sintéticos. Tiene buena estabilidad a la luz visible. Su principal propiedad radica en su enorme
poder colorante, que supera indiscutiblemente al de cualquier otro colorante.
El color y la fuerza de tinte del carmín no dependen sólo de la concentración del ácido carmínico sino de
la calidad de la cochinilla y las variables del proceso. También tienen influencia la temperatura- tiempo
·para la precipitación de la laca, la temperatura durante el secado y el diámetro de la partícula. Se ha
innovado La laca de carmín que es soluble en soluciones alcalinas, poco soluble en agua caliente y
prácticamente insoluble en agua fría y ácidos diluidos.
III. MATERIALES
Espectrofotómetro Mortero
Balanza analítica Embudos simples
Estufa eléctrica Papel de filtro de porosidad fina p
Cocinilla o plancha eléctrica whatman N°02
Vasos precipitados de 250ml y 150 ml Pipeta graduada
Fiolas de 10 ml y 500 ml Probeta graduada
Lunas de reloj Buereta de 50 mL
Espátula
Solución de HCl 2N
REACTIVOS: Muestra problema
𝑀 ∗ 𝑃𝑚 ∗ 𝑉𝑠𝑙𝑛(𝑑𝑖𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎)
𝑉𝑠𝑙𝑐(𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎) =
𝜌 ∗ %𝑝
Datos para HCl :
𝜌 = 1.19𝑔/𝑚𝑙
%𝑝 = 0.37
𝑒𝑞
𝜃𝐻𝐶𝑙 = 1
𝑚𝑜𝑙
𝑁 2𝑒𝑞/𝐿
𝑀𝐻𝐶𝑙 = = = 2𝑚𝑜𝑙/𝐿
𝜃 1𝑒𝑞/𝑚𝑜𝑙
𝑃𝑚(𝐻𝐶𝑙) = 36.43𝑔/𝑚𝑜𝑙
Reemplazando en la fórmula:
𝑀 ∗ 𝑃𝑚 ∗ 𝑉𝑠𝑙𝑛(𝑑𝑖𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎)
𝑉𝑠𝑙𝑐(𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎) =
𝜌 ∗ %𝑝
36.46𝑔 2𝑚𝑜𝑙
0.1𝐿 ∗ ∗ 𝐿
𝑉𝑠𝑙𝑐(𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎) = 𝑚𝑜𝑙 = 16.56𝑚𝑙
1.19𝑔
∗ 0.37
𝑚𝑙
CALCULOS
1. calcular el porcentaje de ácido carmínico en las 2 fracciones de solución problema y obtener el
porcentaje promedio.
𝑨𝒎
𝑪𝒎 = 𝑪𝒑 ∗
𝑨𝒑
Dónde:
𝒎𝑨𝑪
%𝑨. 𝑪 = ∗ 𝟏𝟎𝟎
𝒎𝒎
De la mesa n°1:
Masa 1 =0.1155 g
Absorbancia Promedio
0.510 0.5165
0.523
Hallando la concentración de la muestra (ppm):
Datos:
Am1=0.5165 (a 495nm)
Ap=1.39
Cp=100 ppm
𝑨𝒎
𝑪𝒎 = 𝑪𝒑 ∗
𝑨𝒑
𝟎. 𝟓𝟏𝟔𝟓 𝒎𝒈
𝑪𝒎 = 𝟏𝟎𝟎 ∗ = 𝟑𝟕. 𝟏𝟓𝟖𝟑 𝒑𝒑𝒎( )
𝟏. 𝟑𝟗 𝑳
𝑚𝐴𝐶
%𝐴𝐶 = ∗ 100
𝑚𝑚
Hallado mm:
0.1155g…….0.5L
mm ………..1L
1𝐿 ∗ 0.1155𝑔
𝐦𝐦 = = 0.231𝑔/𝐿
0.5𝐿
𝐦𝐦 = 231 𝑚𝑔/𝐿
Para AC=37.1583pmm(g/mL)
37.1583
%𝐴𝐶 = ∗ 100 = 16.0859%
231
Datos:
Am2=1.0945 (a 495nm)
Ap=1.39
Cp=100 ppm
𝑨𝒎
𝑪𝒎 = 𝑪𝒑 ∗
𝑨𝒑
𝟏. 𝟎𝟗𝟒𝟓 𝒎𝒈
𝑪𝒎 = 𝟏𝟎𝟎 ∗ = 𝟕𝟖. 𝟕𝟒𝟏𝟎 𝒑𝒑𝒎( )
𝟏. 𝟑𝟗 𝑳
𝑚𝐴𝐶
%𝐴𝐶 = ∗ 100
𝑚𝑚
Hallado mm:
0.1714g…….0.5L
mm ………..1L
1𝐿 ∗ 0.1714𝑔
𝐦𝐦 = = 0.3428𝑔/𝐿
0.5𝐿
𝐦𝐦 = 342.8𝑚𝑔/𝐿
ParaAC=78.74100pmm(g/ml)
78.74100
%𝐴𝐶 = ∗ 100 = 22.96995%
342.8
De la mesa n°2:
3) Muestra deshidratada y pulverizada de cochinilla
Masa 3 =0.1222 g
Absorbancia Promedio
0.569 0.5765
0.584
Datos:
Am3=0.5765 (a 495nm)
Ap=1.39
Cp=100 ppm
𝑨𝒎
𝑪𝒎 = 𝑪𝒑 ∗
𝑨𝒑
𝟎. 𝟓𝟕𝟔𝟓 𝒎𝒈
𝑪𝒎 = 𝟏𝟎𝟎 ∗ = 𝟒𝟏. 𝟒𝟕𝟒𝟖 𝒑𝒑𝒎( )
𝟏. 𝟑𝟗 𝑳
𝑚𝐴𝐶
%𝐴𝐶 = ∗ 100
𝑚𝑚
Hallado mm:
0.1222g…….0.5L
mm ………..1L
1𝐿 ∗ 0.1222𝑔
𝐦𝐦 = = 0.2444𝑔/𝐿
0.5𝐿
𝐦𝐦 = 244.4 𝑚𝑔/𝐿
ParaAC=41.4748pmm(g/mL)
41.4748
%𝐴𝐶 = ∗ 100 = 16.97%
244.4
Datos:
Am4=1.4865 (a 495nm)
Ap=1.39
Cp=100 ppm
𝑨𝒎
𝑪𝒎 = 𝑪𝒑 ∗
𝑨𝒑
𝟏. 𝟒𝟖𝟔𝟓 𝒎𝒈
𝑪𝒎 = 𝟏𝟎𝟎 ∗ = 𝟏𝟎𝟔. 𝟗𝟒𝟐𝟒 𝒑𝒑𝒎( )
𝟏. 𝟑𝟗 𝑳
𝑚𝐴𝐶
%𝐴𝐶 = ∗ 100
𝑚𝑚
Hallado mm:
0.1180g…….0.5L
mm ………..1L
1𝐿 ∗ 0.1180𝑔
𝐦𝐦 = = 0.236𝑔/𝐿
0.5𝐿
𝐦𝐦 = 236𝑚𝑔/𝐿
%AC PROMEDIO
Muestra 1 a 2 16.0854 19.5275 ParaAC=106.9424pmm(g/mL)
(mesa n°1) 22.9696
Muestra 3 a 4 16.97
(mesa n°2) 45.31 31.14
RESULTADOS FINALES
Ventajas Desventajas
Preparación mínima de muestra de Alto precio del equipo
cochinilla . Lámparas especiales
Alta sensibilidad Celdas muy sensibles
Precisión
Análisis rápido
Versátil
Fácil de usar
Es digital
5) ¿Qué otros métodos de análisis conoce para cuantificar el ácido carmínico en muestras de
cochinilla?
Métodos de extracción de ácido carmínico en cristales: Los métodos para extracción de ácido
carmínico se basan en su concentración y cristalización a partir de un complejo metálico precipitado
de una extracción acuosa de la cochinilla. Algunos métodos descritos son: I. Método Japonés, II.
Método Alemán (Nony y Bouman, 1983).
Equipo y reactivos: 93.75 mL de agua desmineralizada 0.06 g de ácido tartárico. 0.2 g de gelatina
3.12 g de cochinilla molida Tamiz de malla No. 20 En una autoclave se calientan a 150°C y 16 lb. De
presión durante 10 minutos, 93.75 mL de agua desmineralizada, 0.06 g de ácido tartárico, 0.2 g de
gelatina, 3.12 g de cochinilla molida y tamizada con malla No. 20 y a 8% de humedad. Se deja
reposar, se filtra y luego la solución obtenida se destila hasta obtener un extracto concentrado con
un alto porcentaje de ácido carmínico.
Método Inglés:
Método Alemán:
6.- Formular la estructura molecular del acido carmínico y del carmín . Mencionar las aplicaciones
industriales de estos compuestos. Señalar las propiedades físicas y químicas del ácido carmínico.
Los extractos de cochinilla y el ácido carmínico son colorantes orgánicos naturales, mientras que los
carmines son colorantes orgánico-artificiales.
Este colorante es utilizado como aditivo en alimentos, medicamentos y cosméticos. Posee la
clasificación FD&C de la Administración de Drogas y Alimentos (FDA) de los Estados Unidos y está
incluido en la lista de aditivos de la Comunidad Económica Europea(actual Unión Europea) bajo los
parámetros de toxicidad permitida -Ingesta Diaria Admitida IDA-.
Es probablemente el colorante con mejores características tecnológicas de entre los naturales, pero
se utiliza cada vez menos debido a su alto precio. Confiere a los alimentos a los que se añade un color
rojo muy agradable, utilizándose en conservas vegetales y mermeladas (hasta 100 mg/kg), helados,
productos cárnicos y lácteos, como el yogur y el queso fresco (20 mg/kg de producto) y bebidas,
tanto alcohólicas como no alcohólicas.
Este colorante es un sustituto adecuado para los colorantes artificiales como el rojo 40 pero por ser
de origen animal es caro comparado con los sintéticos.
Recomendaciones:
Mantener limpio y ordenado los materiales e instrumentos de laboratorio para tener buenos
resultados del análisis.
Manejar con cuidado el equipo de espectrofotometría.
VII. BIBLIOGRAFIA