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CENTRIFUGACIÓN
RESUMEN
Es un método por el cual se pueden separar sólidos de líquidos de diferente densidad mediante
una fuerza rotativa, la cual imprime a la mezcla con una fuerza mayor a la de la gravedad,
provocando sedimentación de los sólidos o de las partículas de mayor densidad. El objetivo de la
centrifugación es separar sólidos insolubles de partículas muy pequeñas difíciles de sedimentar, de
un líquido. Para ello se aplica un fuerte campo centrifugo, con lo cual las partículas tenderán a
desplazarse a través del medio en el que se encuentren con la aceleración G E=VELOCIDAD
ANGULAR 2x RADIO. Las centrifugas son dispositivos móviles canales en las brequeas, tiene 2
componentes ROTOR Y MOTOR, el rotor donde se coloca la muestra a centrifugar, y el motor que
mueve. Hay analíticas con las que se obtienen datos moleculares, masa molecular, coeficiente de
sedimentación, etc. Son preparativas con las que se aíslan y purifican las muestras. Hay 4 a seguir
de masa, de alta capacidad, de alta velocidad y ultra centrífugas. La centrifugación es un proceso
de separación que utiliza la acción de la fuerza centrífuga para promover la aceleración de
partículas en una mezcla de sólido-líquido. Dos fases claramente distintas se forman en el
recipiente durante la centrifugación, el sedimento no tiene una estructura uniforme, el
centrifugado o el concentrado que es el líquido flotante.
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ÍNDICE
RESUMEN ............................................................................................................................................ 1
ÍNDICE.................................................................................................................................................. 2
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................... 4
OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 5
CENTRIFUGACIÓN ............................................................................................................................... 6
Sedimento ....................................................................................................................................... 6
El centrifugado o el concentrado .................................................................................................... 6
SEDIMENTACION Y CENTRIFUGACION ................................................................................................ 7
PRINCIPIOS FÍSICO - QUÍMICO. ........................................................................................................... 8
Principio de Arquímedes ................................................................................................................. 8
Principio de Stokes .......................................................................................................................... 9
Fuerza Centrípeta .............................................................................................................................. 10
Fuerza Friccional................................................................................................................................ 10
COMPONENTES DE LA CENTRÍFUGA ................................................................................................. 11
CLASIFICACIÓN DE ROTORES............................................................................................................. 12
Rotores Flotantes .......................................................................................................................... 12
Rotores de Ángulo Fijo .................................................................................................................. 15
Rotores Verticales ......................................................................................................................... 16
VARIABLES QUE AFECTAN LA CENTRIFUGACIÓN. ............................................................................. 17
A.- Masa y densidad de la partícula .............................................................................................. 17
B.- Densidad del medio ................................................................................................................. 17
C.- Aceleración de la gravedad ...................................................................................................... 17
D.- Coeficiente de Difusión............................................................................................................ 17
E.- Tiempo ..................................................................................................................................... 18
F.- Temperatura............................................................................................................................. 18
G.- Presión y Velocidad ................................................................................................................. 18
TIPOS DE CENTRIFUGACION. ............................................................................................................. 18
Centrifugación Analítica ................................................................................................................ 18
Centrifugación Preparativa ........................................................................................................... 19
Centrifugación diferencial ............................................................................................................. 19
Centrifugación en Gradiente de Densidad ........................................................................................ 21
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INTRODUCCIÓN
El proceso de separación consiste en convertir una mezcla de elementos en dos o más productos
que se diferencian uno del otro en su composición. Para poder llevar esto acabo se debe crear un
mecanismo que proporcione la energía necesaria para provocar la separación.
La separación de dos compuestos se hace basándose en una propiedad física o química. Para que
el proceso sea viable, debe existir una diferencia mínima entre los dos compuestos, ya que
mientras mayor sea la diferencia más eficaz será la separación. Los principales métodos de
separación que se utilizan son los siguientes:
- Centrifugación
- Flotación
- Filtrado
- Destilación
- Cristalización
- Precipitación
- Separación
- Magnética
- Sedimentación
- Tamizado
- Intercambio iónico
- Deshidratación
- Ósmosis inversa
Las separaciones que se llevan a cabo lentamente por gravedad y pueden acelerarse en gran
medida con el disponer de un equipo centrífugo. Una centrífuga utiliza fuerza centrífuga (fuerza-g)
para aislar partículas suspendidas del medio que las rodea ya sea en conjunto o como flujo
continuo.
OBJETIVOS
Objetivo General
Objetivos específicos
CENTRIFUGACIÓN
Es un método mecánico por el cual se pueden separar líquidos no miscibles o también puede
separar sólidos de líquidos de diferente densidad mediante una centrifugadora, la cual imprime a
la mezcla un movimiento rotatorio con una fuerza de mayor intensidad que la gravedad
denominada fuerza centrífuga, provocando la sedimentación del sólido o de las partículas de
mayor densidad. Este es uno de los principios en los que se basa la densidad: Todas las partículas,
por poseer masa, se ven afectadas por cualquier fuerza (origen de una aceleración).
Lenntech (1998) indica que durante la centrifugación, en el recipiente se forman dos fases
distintas.
Sedimento
El centrifugado o el concentrado
El centrifugado hace referencia al liquido flotante una vez centrifugado, y este a menudo se
muestra de manera evidente con sus respectivas fases resultantes. En pocos casos la
demostración de este concentrado no es clara debido a la presencia de partículas finas que no se
depositan en el fondo con facilidad provocando la aparición de otras fases las cuales contienen
elementos con distintas densidades, por ejemplo el aceite.
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SEDIMENTACION Y CENTRIFUGACION
La teoría de la sedimentación está basada en la Ley de Stokes que establece los aspectos básicos
del movimiento de un sólido en un líquido cuando existe un gradiente de densidad. Este
movimiento puede ser causado por la fuerza gravitacional o por una fuerza centrífuga.
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La base física de la separación es la acción de la fuerza centrífuga sobre las partículas en rotación,
que aumenta con el radio del campo rotacional y con la velocidad de rotación. La velocidad de
sedimentación se determina por la densidad de las partículas. Las partículas densas sedimentan
primero, seguida de las partículas más ligeras. En función de las condiciones existentes, las
partículas muy ligeras pueden incluso permanecer en suspensión.
La fuerza centrífuga relativa guarda relación con el número de revoluciones del rotor por minuto
conforme a la fórmula:
Principio de Arquímedes
Es un principio físico que afirma que un cuerpo total o parcialmente sumergido en un fluido
estático, será empujado con una fuerza igual al peso del volumen de fluido desplazado por
dicho objeto. De este modo cuando un cuerpo está sumergido en el fluido se genera un
empuje hidrostático resultante de las presiones sobre la superficie del cuerpo que actúa
siempre hacia arriba a través del centro de gravedad del cuerpo del fluido desplazado y de
valor igual al peso del fluido desplazado. Esta fuerza se mide en Newtons y su ecuación se
describe como:
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Principio de Stokes
Si las partículas están cayendo verticalmente en un fluido viscoso debido a su propio peso
puede calcularse su velocidad de caída o sedimentación igualando la fuerza de fricción con
la fuerza de gravedad.
donde:
- Vs es la velocidad de caída de las partículas (velocidad límite).
- g es la aceleración de la gravedad.
- pp es la densidad de las partículas.
- pf es la densidad del fluido.
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Fuerza Centrípeta
El término “centrípeta” proviene de las palabras latinas centrum (centro) y petere, “dirigirse
hacia”, y puede ser obtenida a partir de las leyes de Newton. En el caso de un objeto que se
mueve en trayectoria circular con velocidad cambiante, la fuerza neta sobre el cuerpo puede
ser descompuesta en un componente perpendicular que cambia la dirección del movimiento
y uno tangencial, paralelo a la velocidad, que modifica el módulo de la velocidad.
Fuerza Friccional
COMPONENTES DE LA CENTRÍFUGA
Motor: Es eléctrico y capaz de girar a docenas de miles de veces por minuto. Permite que la
técnica sea ejecutada.
Cámara de Vacío: Es una pieza cóncava que sirve para contener dentro de ella el rotor y su
respectivo soporte que lo une o conecta con el motor.
CLASIFICACIÓN DE ROTORES
Flotante
De ángulo fijo
Vertical
Rotores Flotantes
Los tubos se cargan en un cubos individuales que cuelgan en forma vertical mientras el
rotor se mantiene quieto. Cuando comienza la rotación los cubos adoptan una posición
horizontal. Es especialmente útil en los casos en que las muestras deben tratarse en
gradientes de densidad. A mayor longitud de trayectoria, mejor separación de clases de
partículas individuales de una mezcla. Sin embargo, este rotor no resulta muy eficaz para
peletizar. Además, se deben evitar las “cargas concentradas” ocasionadas por CsCl
giratorio u otros materiales de gradientes densos que puedan precipitarse.
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CENTRIFUGA DE BAJA
VELOCIDAD
ULTRACENTRIFUGA
En este tipo de rotor, los tubos que se utilizan para centrifugar están unidos al brazo del
rotor por su parte superior.
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Los tubos calzan fijos en el ángulo de la cavidad dentro del rotor. Cuando comienza la
rotación, la solución se reorienta en los tubos (Figura 4). Este tipo de rotor es comúnmente
utilizado para peletizar. Algunos ejemplos incluyen bacterias de pellets, levadura y otras
células mamíferas. También resulta útil para separaciones Isopícnica de macromoléculas
tales como ácidos nucléicos.
En este tipo de rotores la centrifugación se lleva a cabo siempre en un ángulo fijo respecto
al eje de rotación.
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Rotores Verticales
Se sostienen los rotores en forma vertical durante la rotación. Este tipo de rotor no resulta
adecuado para peletizar sino que es es más eficiente para separaciones isopícnicas (en base
a la densidad) debido la corta longitud de trayectoria. ADN plásmido, ARN y aislamientos
de lipoproteínas son algunas de sus aplicaciones.
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E.- Tiempo
La centrifugación debe hacerse en el tiempo justo, ya que en el proceso se pierden
elementos de gran importancia para el estudio.
F.- Temperatura
Básicamente lo mismo que en el tiempo. Esto también dependerá del tipo de análisis que se
desea realizar.
TIPOS DE CENTRIFUGACION.
Centrifugación Analítica
Estima propiedades físicas (coeficiente de sedimentación o peso molecular) de alguna
partícula en concreto: sus propiedades hidrodinámicas.
Para poder aplicar la tecnología de la centrifugación analítica deben cumplirse una serie de
requisitos:
Que se aplique a sustancias lo más puras posible, no a grandes mezclas.
Que presenten una mayor capacidad de giro, en torno a las 100.000 r.p.m.
En cuanto al tipo de rotores, se necesita que las paredes del tubo se encuentren alineadas
con las líneas de fuerza y estén provistos de sistemas ópticos capaces de detectar la
sedimentación de la partícula en cada momento.
Las moléculas se observan en un sistema óptico durante la centrifugación, para detectar las
macromoléculas en solución a medida que se mueven en el campo gravitacional. Las
muestras se centrifugan en celdas con ventanas que se disponen en el plano paralelo al
sentido de giro del rotor. A medida que el rotor gira, las imágenes de la celda, se proyectan
en un sistema óptico sobre un film o una computadora. La concentración de la solución en
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Centrifugación Preparativa
Diferencial y en gradiente de densidad
El objetivo de la centrifugación preparativa es aislar partículas específicas.
Existen dos métodos de separación en centrifugación preparativa: Diferencial y En
gradiente de densidad.
Centrifugación diferencial
Es el método más común de separación, y es rara la purificación enzimática que no lo
utiliza. En este método, el tubo de centrífuga se llena con una mezcla uniforme problema.
Tras la centrifugación se obtienen dos fracciones: un pellet que contiene el material
sedimentado y un sobrenadante con el material no sedimentado. El método es bastante
inespecífico, y a priori no se puede saber si la partícula buscada quedará en el sobrenadante,
en el pellet o repartido entre ambos; sin embargo es una técnica muy útil, sobre todo para
aislamiento de células y orgánulos subcelulares.
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Centrifugación Zonal
La muestra a analizar se deposita en la parte superior de un gradiente de densidad
preformado. Bajo fuerza centrífuga las partículas comenzarán a sedimentar a través del
gradiente, moviéndose cada partícula a diferentes velocidades dependiendo de su masa.
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CONCLUSIONES
Las partes que componen a una centrífuga son: rotor, motor, cámara de vacío,
control de velocidad, tiempo y temperatura.
La centrifugación cumple un rol importante en el área de salud en la separación y
análisis de muestras como hormonas, química sanguínea, electrolitos, inmunología,
serología, entre otros.
La centrifugación también es usado en la sedimentación de células y virus, la
separación de orgánulos subcelulares y el aislamiento de macromoléculas, tales
como ADN, ARN, proteínas o lípidos.
La centrifugas garantiza la separación mecánica de diferentes fases líquidas y
sólidas, en forma rápida y en continua que se aplica en diferentes procesos
industriales que por el método de sedimentación por gravedad.
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BIBLIOGRAFÍA
http://biomodel.uah.es/tecnicas/centrif/inicio.htm
https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/procedimientos-basicos-de-
laboratorio/centrifugacion.html
https://definicion.de/centrifugacion/
https://prezi.com/rhjg8fawbez4/centrifugacion/