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ARTÍCULO

Fundamentos y aspectos microbiológicos Jesús Sánchez Martín


Microbiólogo
Profesor Titular

Biorremediación José Luis Rodríguez Gallego


Ingeniero de Minas
Profesor Asociado

Universidad de Oviedo

• Líquido: aguas superficia-


El artículo introduce los This article presents basic les y subterráneas, aguas
conceptos básicos para en- concepts useful under- residuales.
tender qué es la biorreme- standing bioremediation • Gases: emisiones industria-
diación y sus posibilidades and its possibilities of appli- les, así como productos deri-
de aplicación (atenuación cation (natural attenuation, vados del tratamiento de
aguas o suelos.
natural, bioestimulación y biostimulation and bioaug-
bioaumentación). También mentation). In addition, a También se puede realizar una
se presenta una descripción description of the most im- clasificación en función de los
del papel fundamental de portant aspects of microbial contaminantes con los que se
los microorganismos en to- activity is showed with spe- puede trabajar (Alexander,
do el proceso, así como con- cial attention focused in 1999; Eweis et al., 1999):

ceptos clave como biosur- concepts such as biosurfac- • Hidrocarburos de todo ti-
factante y cometabolismo. tant and cometabolism. po (alifáticos, aromáticos,
BTEX, PAHs,...).
• Hidrocarburos clorados
(PCBs, TCE, PCE, pesticidas,
Definición, limitaciones y limpiar terrenos o aguas conta- herbicidas,...).
campo de aplicación minadas (Glazer y Nikaido, • Compuestos nitroaromáticos
1995). Su ámbito de aplicabili- (TNT y otros).
La biorremediación es una tec- dad es muy amplio, pudiendo • Metales pesados: Estos no se
nología que utiliza el potencial considerarse como objeto cada metabolizan por los microor-
metabólico de los microorga- uno de los estados de la mate- ganismos de manera aprecia-
nismos (fundamentalmente ria (Atlas y Unterman, 1999): ble, pero pueden ser inmovi-
bacterias, pero también hon- lizados o precipitados.
gos y levaduras) para transfor- • Sólido: con aplicaciones so- Figura 1. • Otros contaminantes: Com-
Parámetros
mar contaminantes orgánicos bre medios contaminados puestos organofosforados,
implicados en la
en compuestos más simples po- como suelos o sedimentos, biorremediación cianuros, fenoles, etc.
co o nada contamiantes, y, por o bien directamente en lo- (modificada de
tanto, se puede utilizar para dos, residuos, etc. Walter y ¿Cuáles son las ventajas técni-
Crawford, 1997). cas de la biorremediación? A
su amplio ámbito de aplicabi-
-Composición
-Propiedades lidad en cuanto a compuestos
CARACTERÍSTICAS DEL
CONTAMINANTE -Toxicidad orgánicos, como ya se ha men-
cionado arriba, pueden su-
-Nutrientes
-Humedad marse las siguientes:
OPTIMIZACIÓN
MICROBIOLÓGICA -Aireación
-Inóculo • Mientras que los tratamien-
TECNOLOGÍA APLICADA
-Land treatment tos físicos y buena parte de
IN SITU VS. EX SITU -Bioslurry los químicos están basados en
COMBINACIONES -Compostaje
BIORREMEDIACIÓN transferir la contaminación
-Bioventing
entre medios gaseoso, líquido
-Adecuación
MÉTODOS ANALÍTICOS
y sólido, en la biorremedia-
-Control de calidad
ción se transfiere poca conta-
-Estadística minación de un medio a otro.
MUESTREO -Procedimientos • Es una tecnología poco intru-
-Valores de referencia
siva en el medio y general-
REGULACIÓN LEGAL -Análisis de riesgos mente no requiere compo-
-Permisos nentes estructurales o mecá-
nicos dignos de destacar.
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ARTÍCULO
TRANSFORMACIÓN
cos y humina). Esta es una de
CONTAMINANTE: -Contaminante las causas, por ejemplo, de la
Carbono orgánico modificado.
(Cometabolismo) persistencia de muchos pesti-
cidas. La producción de sur-
Figura 2.
Actividades factantes por los microorga-
NUTRIENTES: MICROORGANISMOS: microbianas en nismos es un factor determi-
- Nitrógeno SISTEMAS el proceso de nante, como veremos, que
- Fósforo ENZIMÁTICOS biorremediación.
- Otros atenúa este problema y facili-
ta la degradación.
• Condiciones del medio con-
MINERALIZACIÓN
RECEPTORES DE - Contaminante taminado: Propiedades que
ELECTRONES: transformado en CO2 permiten o limitan el creci-
- Oxígeno y H2 O .
- Nitratos miento microbiano y el me-
- Sulfatos
- Otros tabolismo del compuesto. A
veces es necesario modificar
las condiciones, por ejemplo,
• Comparativamente, es eco- ciones, halogenaciones) tam- añadiendo nutrientes o
nómica y, al tratarse de un bién hacen la molécula más aireando (bioestimulación).
proceso natural, suele tener resistente. Por otra parte, la
aceptación por parte de la biodegradación de compues- Es evidente que no podemos lle-
opinión pública. tos que contienen N ó S está var a cabo un análisis de los es-
ligada frecuentemente a su tudios de biodegradación exis-
La biorremediación tiene tam- utilización como nutrientes. tentes sobre todos los compues-
bién inconvenientes y limitacio- • Presencia de comunidades tos potencialmente contami-
nes. Por ejemplo, la biodegra- microbianas adecuadas, con nantes. Por ello, el texto lo cen-
dación incompleta puede ge- capacidad enzimática para traremos principalmente en los
nerar intermediarios metabóli- metabolizar el compuesto(-s). hidrocarburos, ya que estos
cos inaceptables, con un poder Los microorganismos pue- compuestos son los implicados
contaminante similar o incluso den ser autóctonos (biorre- en la problemática del Prestige.
superior al producto de parti- mediación intrínseca o ate-
da. Por otra parte, algunos nuación) o añadidos al siste- Biodegradación de
compuestos, como veremos, ma para mejorar la degra- hidrocarburos y enfoques
son resistentes o inhiben la bio- dación (bioaumentación). metodológicos
rremediación. El tiempo reque- Sobre estos conceptos vol-
rido para un tratamiento ade- veremos más adelante. Las enumeraciones precedentes
cuado puede ser difícil de pre- • Disponibilidad del contami- dejan claro que la complejidad
decir y el seguimiento y control nante. Es un factor crítico, implicada en esta tecnología
de la velocidad y/o extensión más importante que la propia hace inexcusable una aproxima-
del proceso es laborioso. presencia de comunidades ción multidisciplinar, en la que
microbianas. Para que la de- la microbiología, la química y la
La aplicabilidad de esta técnica gradación de un contaminan- ingeniería tienen un papel im-
depende de varios factores: te pueda producirse, es nece- portante. La amplitud de los as-
sario que interaccione con la pectos incluidos en la aplicación
• Propiedades del contami- célula en medio acuoso. Ini- de las técnicas de biorremedia-
nante (biodegradabilidad). cialmente lo hará con la parte ción se refleja en la figura 1.
En general, los hidrocarbu- exterior de su pared para pos-
ros alifáticos se degradan rá- teriormente ser transportado Los microorganimos dotados
pidamente. Las estructuras al interior de la misma. La for- genéticamente para la degra-
mas ramificadas son más di- ma más común de transporte dación pueden utilizar su po-
fíciles de degradar que las es la complejación con enzi- tencial enzimático para mine-
cadenas lineales, al producir mas extracelulares producidos ralizar (biodegradar completa-
impedimentos estéricos. Las por los microorganismos. Mu- mente hasta CO2) algunas fa-
cadenas ramificadas de sul- chos contaminantes orgáni- milias de hidrocarburos, o bien,
fonatos de alquilo o arilo a cos, como los derivados del simplemente, degradarlos has-
menudo se degradan muy petroleo, PCBs, hidrocarburos ta productos intermedios, ya
lentamente. Los dobles enla- aromáticos policíclicos (nafta- sea en un ambiente aerobio o
ces hacen la molécula más leno, pireno, fluoreno), sol- anaerobio (figura 2). El recorri-
resistente, así como un in- ventes halogenados, etc., son do, catalizado por las enzimas
cremento del número de hidrofóbicos y tienden a ad- microbianas a través de los di-
anillos bencénicos. Las susti- sorberse en el suelo, concreta- versos subproductos, se conoce
tuciones químicas (ácidos di- mente a la fracción orgánica como ruta de degradación o
carboxílicos, nitrilos, metila- (ácidos humicos, ácidos fúlvi- “pathway” (figura 3). En cual-
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ARTÍCULO

quier caso, los procesos suelen lugares afectados por el ver- Si aportamos al medio alguno
tener lugar mediante una tido del Prestige. de los elementos de los que
gran variedad de interaccio- • En el caso de escasez de oxí- carece o bien potenciamos los
nes biogeoquímicas entre los geno (condiciones anaeróbi- existentes, favoreceremos la
componentes del suelo, el cas), los microorganismos de- eliminación del posible conta-
agua, los microorganismos y penden de otros aceptores de minante. En muchos casos es-
los contaminantes. electrones disponibles (nitra- te tipo de intervención será
to, sulfato, formas oxidadas necesario para reforzar el pro-
Desde un punto de vista me- de Fe o Mn,...). Se trata de ceso natural o bien para im-
todológico, los tres conceptos, una biodegradación anaero- plantar unas condiciones que
ya mencionados anteriormen- bia, cuyos mecanismos y signi- reduzcan el riesgo. En esto se
te, que determinan a su vez ficado se están comenzando basan las siguientes aproxima-
otras tantas aproximaciones a comprender en los últimos ciones biotecnológicas:
principales a la biorremedia- años (Heider et al., 1999)
ción son los siguientes: Bioestimulación
En condiciones ideales, los La bioestimulación consiste en
Atenuación natural contaminantes se transforma- la introducción de modifica-
Se denomina biorremediación rían en compuestos químicos ciones en el medio, mediante
intrínseca o atenuación natu- más simples, no peligrosos pa- el aporte de nutrientes, airea-
ral, a la que sobre muchos ra los posibles receptores ni ción y otros procesos (“biosti-
compuestos orgánicos se lleva para el medio. Desgraciada- mulation” o “enhanced biore-
a cabo por los microorganis- mente, además de la propia mediation”). En ocasiones será
mos autóctonos, principalmen- recalcitrancia intrínseca de la suficiente añadir oxígeno me-
te bacterias, del medio afecta- molécula, hay bastantes facto- diante aireación, aunque en
do (Rosenberg y Ron,1996). res que pueden limitar o im- otros se podría requerir la adi-
pedir la atenuación natural en ción de nutrientes o ajustes de
La capacidad intrínseca de asi- un medio contaminado; algu- pH. En todo caso, estas aproxi-
milación de un medio depen- nos de ellos ya los hemos maciones son válidas siempre
de, como ya se ha apuntado, apuntado (King et al., 1997): y cuando los microorganismos
de las “habilidades metabóli- autóctonos sean capaces de
cas” de los microorganismos • Carencia de nutrientes esen- degradar el contaminante tras
nativos, del tipo de contami- ciales para los microorganis- un proceso más o menos largo
nante y, lógicamente, de la mos (por ejemplo, nitróge- de aclimatación previa.
geoquímica y la hidrogeología no y/o fósforo).
en la zona. En relación con el • Ausencia de aceptores ade- En lo que se refiere a la adi-
oxígeno, y en un modelo muy cuados de electrones (gene- ción de nutrientes, la biorre-
simplificado, el proceso se de- ralmente oxígeno). mediación requiere que estos
finiría de la siguiente forma: • Inexistencia de condiciones entren en contacto con el área
medioambientales apropia- impregnada por el contami-
• En presencia de oxígeno das (pH, potencial redox, nante y que su concentración
(condiciones aerobias) los mi- humedad, temperatura). sea suficiente para soportar el
croorganismos convertirían • Ausencia de poblaciones crecimiento máximo previsto
en última instancia los conta- microbianas con el poten- de la población degradadora
minantes en dióxido de car- Figura 3. Ruta cial enzimático adecuado en el transcurso de las opera-
bono, agua y masa celular habitual de necesario para degradar los ciones de remediación. Estos
degradación de
microbiana (mineralización). los hidrocarburos
contaminantes. dos factores van a resultar cla-
Este proceso de biodegrada- aromáticos (Riser- • Presencia de componentes ves en los intentos de biorre-
ción aeróbica ya está tenien- Roberts, 1998; tóxicos en la mezcla conta- mediación en las costas afecta-
do lugar en muchos de los Atlas & Bartha, minante. das por el vertido del Prestige.
2001).

H
CHO Bioaumentación
Ruta 'orto'
Bacteria + O2
OH NAD+
NADH + H + OH
CHO
Otras líneas de investigación
Rotura del anillo cis, cis- Ácido Mucónico
Dioxigenasa OH Dihidrogenasa OH Dioxigenasa Ruta 'meta' CHO
han llevado a la introducción
CHO

Anillo aromático
H
cis-Dihidrodiol Catecol
de microorganismos aclimata-
CHO
dos o incluso modificados ge-
2- Hidroxi-cis, cis-mucónico semialdehído
néticamente en el medio, con
O
+O 2 CHO + CoA CH3 C SCA o
el fin de mejorar la biodegra-
O O
H C CH2 CH2 CHO +
CHO
Ácido succínico
O dación (Walter, 1997; Atlas y
Ácido beta-cetoadípico Acetil-CoA
Unterman, 1999). Esta técni-
-HC OO H
CHO
ca funciona en condiciones de
C H3 C CHO O
+
CH3 CH
laboratorio o biorreactor, pe-
H 2O
+ O
O
Ácido 2-ceto-4-pentenoico
Ácido pirúvico Acetaldehído ro en ambientes externos
14
ARTÍCULO
(suelo, agua) su implantación La complementación de las acti-
depende de una serie de fac- vidades metabólicas se lleva a
tores (Alexander, 1999). cabo mediante relaciones de co-
metabolismo y/o sintrofismo. El
• El tamaño de la población cometabolismo es una actividad
de microorganismos degra- importante desde el punto de
dadores crece rápidamente vista medioambiental, con mati-
como respuesta a la conta- ces complejos, que no podemos
minación del medio y es desarrollar en este espacio. Im-
muy difícil, si no imposible, plica, esencialmente, el metabo-
incrementar la población lismo "gratuito" (es decir, no
microbiana más allá de esos útil para el crecimiento u obten-
valores. Figura 4: ción de energía) de un substra-
• La capacidad de carga de Degradación por incremento de las tasas de de- to secundario (compuesto con-
muchos ambientes viene parte de un consorcio gradación. No obstante, los taminante) por enzimas que re-
microbiano de una
determinada por factores problemas de persistencia de quieren otro substrato primario
mezcla de
tales como la presencia de hidrocarburos similar cepas modificadas en el am- diferente, el cual proporciona la
toxinas, nutrientes y condi- a la vertida por el biente y los aspectos legales re- energía y/o los cofactores reduc-
ciones ambientales, movili- Prestige. De abajo lacionados con la liberación de tores necesarios. Ambas activi-
arriba: (1) Medio
dad y/o distribución de los MMG, hacen esta solución no dades enzimáticas pueden ser
acuoso con algunas
microorganismos y la pre- bacterias libres;(2) factible a corto plazo. diferentes y el resultado es, en
sencia de abundante mate- emulsión agua- teoría, la acumulación de pro-
ria orgánica. hidrocarburos Interacciones microbianas con ductos de reacción a partir del
• Los microorganismos añadi- alifáticos y aromáticos los contaminantes contaminante. En la práctica, la
con bacterias en su
dos deben sobrevivir a los interior; (3) "fibras
existencia de otros microorga-
depredadores y competir complejas" (posibles La capacidad de obtener en el nismos hace factible la degrada-
con éxito con la población estructuras micelares laboratorio, mediante manipu- ción posterior de esos produc-
autóctona antes de ocupar de asfaltenos y lación genética, microorganis- tos mediante reacciones sintró-
resinas) en el inicio de
los nichos potenciales. mos con mejores propiedades ficas y, en última instancia, su
su degradación. (Foto
• En general, los ambientes tomada por los degradativas de compuestos mineralización (descartando la
más selectivos y la utiliza- autores). contaminantes no debe oscu- posibilidad, a tener en cuenta,
ción de consorcios micro- recer el hecho de que, en los de que dichos productos sean
bianos (ver abajo) favore- ambientes naturales, los micro- tóxicos, y/o persistentes) (Ale-
cen la bioaumentación. organismos poseen una nota- xander, 1999; Wackett y
ble capacidad de adaptación, Hershberger, 2001). El término
Existen en el mercado produc- lo que se favorece por su inte- de sintrofía, por tanto, implica
tos comerciales, ensayados en gración en poblaciones dentro la acción concertada de diferen-
el laboratorio, que reúnen mi- de una comunidad. La base de tes microorganismos sobre un
croorganismos con gran poten- este fenómeno se encuentra, sustrato(-s), mediante la combi-
cial biodegradador (Korda et por una parte, en la adquisi- nación de sus actividades meta-
al., 1997).Sin embargo, la rein- ción de nuevas capacidades bólicas, lo que permite su de-
troducción de microorganis- metabólicas, mediante meca- gradación. Esta no sería posible
mos indígenas, aislados del si- nismos de variación genética en presencia de los microorga-
tio contaminado y cultivados convencionales (mutación, nismos aislados. Se comprende
posteriormente, es más efecti- conversión génica, duplicación, entonces la importancia de las
va, especialmente cuando se transposición) o intercambio poblaciones mixtas (que a veces
acompañan de un suplemento de genes y, por otra, en la po- se denominan consorcios) para
nutricional y oxígeno. Por otro sibilidad de complementación la degradación más efectiva de
lado, es probable que el desa- de las actividades metabólicas los contaminantes orgánicos (fi-
rrollo de microorganismos ma- de los distintos grupos. La ca- gura 4). Todo esto se refleja en
nipulados genéticamente pacidad de intercambio gené- el creciente aumento de datos
(MMG) (Timmis y Pieper, tico entre las poblaciones, me- experimentales, en los que la
1999; De Lorenzo, 2001) pue- diante conjugación, transfor- bioaumentación con consorcios
da en el futuro permitir abor- mación y transducción se ha microbianos, tanto a nivel de la-
dar con éxito la degradación a comenzado a analizar a nivel boratorio como en el campo,
escala real de compuestos que de laboratorio (Jaenecke et está produciendo resultados es-
por sus características químicas al., 1996) y constituye una peranzadores (ejemplos aplica-
son resistentes. Esta aproxima- fuerza directora notable en la dos al petróleo o sus derivados
ción incluye también la amplia- evolución que conduce a la se encuentran en Mishra et al.,
ción de la capacidad degradati- adaptación a nuevos ambien- 2001; Vasudevan et al., 2001;
va de una bacteria frente a dis- tes, incluyendo los contamina- Potter y Duval, 2001; Rahman
tintos compuestos, así como el dos (Paul, 1999). et al., 2002; Vinas et al., 2002).
15
ARTÍCULO

Por último, y no menos impor- Paul, J.H. (1999). Microbial ge-


tante en cuanto a facilitar la de- ne transfer: an ecological
gradación de los compuestos perspective. J. Mol. Micro-
orgánicos por las poblaciones biol. Biotechnol. 1: 45-50.
microbianas, está la capacidad Potter, T.L. y Duval, B. (2001).
de producir biosurfactantes y Cerro Negro bitumen de-
bioemulsionantes (Ron y Ro- gradation by a consor-
senberg, 2001; Lang, 2002; tium of marine benthic
Christofi e Ivshina, 2002). Los microorganisms. Environ.
primeros se manifiestan como Sci. Technol. 35: 76-83.
agentes que disminuyen la ten- Rahman, K.S.; Thahira-Rah-
sión superficial del agua (tensio- man, J.; Lakshmanape-
activos) y los segundos estabili- rumalsam, P. y Banat,
zan las emulsiones entre el I.M. (2002). Towards effi-
agua y otro líquido (figura 5). cient crude oil degrada-
La presencia o utilización de mi- Figura 5. tion by a mixed bacterial
croorganismos con esa capaci- Observación al nology: Fundamentals of consortium. Bioresour.
microscopio de
dad en un medio contaminado contraste de fases
Applied Microbiology. W. Technol. 85: 257-261.
es un factor a considerar, por fa- (1000x) de bacterias H. Freeman and Com- Ron, E.Z. y Rosenberg, E.
cilitar la disponibilidad de los de la cepa AC pany, New York. (2001). Natural roles of
compuestos hidrofóbicos (as- rodeando y Heider, J.; Spormann, A.M.; biosurfactants. Environ-
degradando una
pecto ya mencionado atrás) y Beller, H.R. y Widdel, F. metal Microbiology 3(4),
gotícula de
por la propia biodegradabilidad hidrocarburo (gasoil). (1999). Anaerobic bacte- 229-236.
de los biosurfactantes, que des- Nótese la rial metabolism of hydro- Rosenberg, E. y Ron, E.Z.
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te nocivos de estas moléculas. interfase y el cambio logy Reviews 22, 459-473. petroleum contamina-
de color que denota
la producción de
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16
Aspectos tecnológicos y aplicación al vertido del Prestige

ARTÍCULO
José Luis Rodríguez Gallego
Ingeniero de Minas
Profesor Asociado

Biorremediación Jesús Sánchez Martín


Microbiólogo
Profesor Titular

Universidad de Oviedo

En este trabajo se abordan In this work, the benefits of años 80 se generalizó el uso del
los beneficios de biorreme- bioremediation techniques aire y peróxidos para suminis-
diación frente a otras alter- to reduce environmental im- trar oxígeno a las zonas conta-
nativas existentes en el pacts are studied. In order to minadas mejorando la eficien-
mercado. También se explo- deal with Prestige oil spill, cia de los procesos degradati-
vos. Durante los años 90 el de-
ran las posibilidades de some possible approaches of sarrollo de las técnicas de "air
aplicación de estas técnicas bioremediation are present- sparging" (burbujeo de oxíge-
en el caso del vertido del ed; special references to the no) hizo posible la biorreme-
Prestige haciendo referen- main factors implied in the diación en zonas por debajo
cia a los principales factores clean-up of coastal sedi- del nivel freático. Al mismo
implicados (tipo de conta- ments are pointed out (type tiempo, la implementación en
la práctica de aproximaciones
minante, dinámica marina, of contaminants, marine ge- experimentales en el laborato-
productos comerciales, odynamic, available biore- rio permitió el tratamiento de
etc.). mediation products, etc.). hidrocarburos clorados, los pri-
meros intentos con metales pe-
sados, el trabajo en ambientes
Un poco de historia ("bioremediation"). Las pri- anaerobios, etc. Paralelamente,
meras técnicas que se aplica- se desarrollaron métodos de in-
A mediados del siglo XX se de- ron fueron similares al "land- geniería que mejoraron los
sarrollaron las primeras inves- farming" (‘labranza’) actual y rendimientos de las técnicas
tigaciones encaminadas a es- sus actores, lógicamente, com- más populares para suelos con-
tudiar el potencial de los mi- pañías petrolíferas. taminados ("landfarming",
croorganismos para biodegra- "composting", etc.) (Riser-Ro-
dar contaminantes (Zobell, Las primeras patentes, funda- Fotografía 1. Agua berts, 1998).
1946; Davis, 1956). Este “uso” mentalmente para remedia- e hidrocarburos en
los intersticios entre
intencionado recibió entonces ción de vertidos de gasolina, En el presente se enfrenta un
rocas. Ensenada de
el nombre de biorremediación aparecen en los años 70. En los la Playa de Aramar nuevo reto que pasa por con-
en Asturias. vencer poco a poco a las em-
presas y a los organismos oficia-
les del potencial de la biorre-
mediación. En algunos países se
puede ya afirmar sin lugar a du-
das que la biorremediación,
Cortesía: Íñigo Sánchez. Área de Ecología. Universidad de Oviedo (diciembre 2002)

que una vez fue una técnica


marginal y que generaba de-
masiadas dudas, ha pasado a
ser una verdadera industria. Es-
ta ‘industria’ busca hoy por
hoy seguir mejorando en unas
líneas, decididamente interdis-
ciplinares, que se pueden resu-
mir en los siguientes puntos:

• Desarrollo de técnicas rápi-


das de biología molecular
que permitan caracterizar las
poblaciones indígenas de los
emplazamientos contamina-
dos así como su potencial en-
17
ARTÍCULO

zimático (Theron y Cloete, Teniendo en cuenta los facto- ¿Es la biorremediación una
2000; Watanabe, 2001). res reseñados el proceso se técnica económicamente
• Integración en el proceso puede llevar a cabo mediante rentable?
de técnicas innovadoras dos aproximaciones:
(por ejemplo geofísica de Como premisa fundamental
superficie) que ayuden a • Biorremediación “in si- hay que mencionar que la bio-
comprender y controlar los tu”: Consiste en tratar las rremediación es una herra-
fenómenos de transporte aguas, suelos o arenas con- mienta que puede ser utiliza-
de nutrientes y otros posi- taminadas sin sacarlas del da eficazmente en ambientes
bles aditivos. lugar en el que se encuen- contaminados específicos. Ha-
• Exploración de las implica- tran. Para ello, tanto en bitualmente se usa como un
ciones del concepto de bio- métodos de bioestimula- paso posterior a la limpieza
disponibilidad ("bioavaila- ción como en bioaumenta- por medios físicos o mecánicos
bility") definido por las ción, se puede disponer de la parte más palpable del
propiedades físico-químicas una red de bombeo de nu- vertido o bien directamente
de los contaminantes. Se trientes o un sistema de sobre determinados residuos.
trata de un factor que en inoculación o bien una sim- Es un proceso relativamente
un muchos casos está limi- ple aireación del terreno lento que requiere meses o
tando la biodegradación y con bombeo (“bioventing” años en muchas ocasiones, pe-
en otros reduciendo la toxi- y “air sparging”) o con ara- ro muy económico si se efec-
cidad de los contaminantes. do (“landfarming” in situ). túa adecuadamente. Por otro
• Desarrollo definitivo de téc- • Biorremediación “ex si- lado, su ventaja principal con-
nicas de bioaumentación tu”: Los procesos de trata- siste en que los contaminantes
realmente útiles (Major et miento se llevan a cabo tras son destruidos en una fase
al., 2002). la excavación del medio más del ciclo del carbono, más
contaminado, bien en sim- allá de un traslado, como en
Técnicas de biorremediación ples biorreactores (técnicas el caso de otros métodos.
para contaminación por de “bioslurry” para suelos),
hidrocarburos en plantas de tratamiento Una vez obtenida la certeza de
(técnicas “pump & treat”), que el problema que se desea
En la Tabla 1 se resumen los en biopilas, o sobre láminas resolver es abordable con técni-
parámetros que aumentan o impermeables (“landfar- cas de biorremediación, es pro-
disminuyen la probabilidad ming” ex situ), etc. Las ven- bablemente una de las opcio-
de obtener resultados favora- tajas de estos procedimien- nes más baratas o la más bara-
bles en un proceso de biorre- tos frente a los primeros ra- ta de todas. En las Tablas 2 y 3
mediación en un medio con- dican en la posibilidad de se muestran algunos cálculos
taminado por hidrocarburos optimizar mejor los pará- realizados por autores de reco-
(algunos ya se han tratado Tabla 1. Factores metros microbiológicos, así nocido prestigio en este campo
favorables y
con detalle en el anterior ar- como el control del proce- (Walter y Crawford, 1997;
desfavorables
tículo sobre Biorremediación que influyen en so; a cambio, lógicamente, Atlas y Unterman, 1999).
en este número). el proceso de de un mayor coste.
biorremediación. No obstante es preciso consi-
derar otros factores además
Factores favorables Factores desfavorables
del económico antes de imple-
mentar un tratamiento de
➢ Abundancia de ➢ Componentes muy
biorremediación. Desde el
hidrocarburos alifáticos pesados abundantes en punto de vista de los benefi-
lineales, escasa presencia la mezcla. ciarios, que en el caso que nos
de resinas y asfaltenos. ➢ Mezcla de compuestos ocupa del Prestige son las
Características ➢ Concentraciones bajas. orgánicos e inorgánicos. personas que viven directa o
químicas ➢ Presencia de poblaciones ➢ Concentraciones tóxicas. indirectamente de la mar, el
microbianas diversas. ➢ Escasa actividad microbiana. parámetro más importante es
➢ Adecuada oxigenación ➢ Ambientes anóxicos. el tiempo que dura el trata-
➢ pH entre 6 y 8. ➢ pH extremos. miento. En este sentido la bio-
➢ Temperaturas superiores ➢ Temperaturas bajas. rremediación no ofrece venta-
jas ya que, al menos en teoría,
a 15ºC.
es más lenta que otras alter-
nativas. Sin embargo, la au-
➢ Porosidad media. ➢ Rocas fracturadas.
sencia de agresividad para el
Características ➢ Elevada permeabilidad. ➢ Baja permeabilidad. medio y el coste de esta técni-
hidrogeológicas ➢ Mineralogía uniforme. ➢ Compleja mineralogía. ca pueden ser factores que
➢ Homogeneidad. ➢ Heterogeneidad. motiven su inclusión en un
18
ARTÍCULO
Incineración Vertedero Desorción térmica Lavado de suelos Biorremediación

Costes (rango en $ por m3) 350-1.600 100-600 50-200 125-350 40-150

Tabla 2.
Costes
programa de recuperación de relativos de mos autóctonos, la densi- Consideraciones sobre la
las costas. Por otra parte, la ci- diversas dad de las poblaciones bio- aplicabilidad de técnicas de
nética de los procesos biode- tecnologías de degradadoras y su poten- biorremediación en el vertido
gradativos puede optimizarse remediación cial enzimático (Yuste et del Prestige
(fuente: Walter
con un programa de trabajo & Crawford, al., 2000; Gallego et al.,
adecuado, con el objeto de 1997). 2001; Röling et al, 2002). En este apartado señalaremos
mejorar su rendimiento. • Estudios de laboratorio y a algunos aspectos que se de-
escala piloto, que permitan ben considerar antes de plan-
Implementación de un evaluar las diferentes alter- tear tratamientos de biorre-
programa de nativas de biorremediación mediación en las costas afec-
biorremediación (Skladany y Baker, 1994; tadas por el vertido:
King et al., 1997; Head,
Un programa con perspecti- 1998). a) Tipos de hidrocarburos y su
vas de éxito requiere un estu- concentración
dio de “bioviabilidad” ("bio- Más adelante, durante el de- No hay un límite claro estableci-
treatability"), que contaría sarrollo del proceso de bio- do de concentraciones máximas
con las siguientes fases: rremediación, la monitoriza- de hidrocarburos para que la
ción juega también un papel biorremediación sea efectiva.
• Revisión bibliográfica, para clave en la evaluación de la De todos modos el mayor pro-
obtener datos sobre la bio- efectividad del trabajo, con blema en el caso del Prestige lo
degradabilidad de los conta- el objeto de evaluar la desa- constituye la cantidad de resi-
minantes del emplazamien- parición del contaminante nas y asfaltenos presentes.
to y sobre la existencia de con el tiempo y la disminu- Mientras que la biodegradación
casos similares (Swannell et ción del riesgo para el medio afectará en primer lugar a los
al., 1996; Prince, 1997; He- receptor (Shannon y Unter- alcanos y parte de la fracción
ad y Swannell, 1999). man, 1993). En este sentido aromática, el comportamiento
• Estudios iniciales, para ob- es necesario distinguir entre de las resinas y asfaltenos es im-
tener parámetros ambien- la desaparición de contami- predecible aunque, no obstan-
tales de importancia: nu- nantes por fenómenos físicos te, otros procesos naturales co-
trientes, presencia de acep- o químicos y por la acción mo la fotooxidación, pueden
tores de electrones, poten- biológica, para lo cual se colaborar en su degradación.
cial redox, pH, temperatu- Tabla 3. aplican diversos procedi-
ra, etc (Gallego et al., Beneficios mientos, como el análisis de b) Climatología, mareas y
2001b; Vallejo et al., 2001). económicos de la biomarcadores (Bragg et al., movimiento de los sedimentos
biorremediación
• Muestreo detallado, para en casos reales 1994 y datos no publicados La influencia de la temperatu-
analizar los microorganis- (fuente: Atlas & por los autores). ra se pondrá de manifiesto en
Unterman, 1999). cuanto a que en los meses más
cálidos la acción microbiana se
Aplicación Tratamiento físico Biorremediación Diferencia
reforzará. La dinámica de las
y/o químico (beneficio)
playas y acantilados puede
Suelo contaminado Excavación y "Bioventing on site": $2,8 millones ayudar a retirar residuos de la
por hidrocarburos transporte a vertedero. $0,2 millones costa y colaborar en la oxida-
("brownfield" urbano) Coste: $3 millones ción, pero puede igualmente
confinar aguas contaminadas
Acuífero contaminado Bombeo, tratamiento de ‘Soil vapor extraction’ $1,75 millones
por un vertido de gasolina “air stripping” y “skimming”. y ‘bioventing’. en los espacios intersticiales
desde un tanque enterrado Coste: $2 millones $0,25 millones. (fotografía 1). Hay que consi-
derar también que las mareas
Contaminación múltiple Encapsulamiento. Biorremediación ‘in situ’. $20 millones pueden impedir la aplicación
("superfund site") Coste: $25 millones $5 millones.
de productos de bioestimula-
Contaminación múltiple c Bombeo y tratamiento. Bioestimulación ‘in situ’, $48 millones ción o dificultar la fijación de
con BTEX y Arsénico Encapsulamiento. bioventing y air sparging. los microorganismos si se lleva
("superfund site") Coste: $50 millones Inmovilización biológica a cabo algún tipo de bioau-
de metales. mentación (ver "Biorreme-
$2 millones.
diación: Fundamentos y as-
Vertido de crudo Lavado físico, coste de Bioestimulación con Más de pectos microbiológicos" en
en el mar. $1,1 millones por kilómetro fertilizante; $0,005 millones $1 millón este mismo número). Todo es-
de costa afectado. por kilómetro de costa afectado por km de costa to abre las posibilidades a tra-
19
ARTÍCULO
Cortesía: Íñigo Sánchez. Área de Ecología. Universidad de Oviedo (diciembre 2002)
• Otros productos hipotética-
mente desarrollados en el
marco de las investigacio-
nes sobre el vertido del
Fotografía 2. Prestige que nos ocupa.
Distribución
heterogénea de
Conclusiones
restos de fuel
mezclados con
algas y grava Como criterio general, consi-
(Playa de la deramos que la aplicación de
Gargantera,
técnicas de biorremediación
Gozón, Asturias).
puede ser efectiva (sobre sus-
tratos de roca y/o sobre arena)
con la combinación de un pro-
ducto surfactante o dispersan-
te que permita la emulsión de
los hidrocarburos y un fertili-
tamientos ex situ, especial- cial mediante pequeñas catas. zante que aumente la presen-
mente en el caso de las are- También es posible que, termi- cia de Nitrógeno y Fósforo dis-
nas, aunque en este supuesto nadas las labores de limpieza fí- ponible. Este enfoque permiti-
deberían ser ecólogos y exper- sica, visualmente no se aprecien ría reducir la concentración de
tos en geomorfología de cos- restos de hidrocarburos pero hidrocarburos y evitaría la
tas los que valorasen el riesgo aún exista una cantidad rema- acumulación definitiva de los
de excavar una gran cantidad nente que permanecerá adsor- compuestos no degradados en
de arena para tratarla en un bida (Swannell et al., 1996). el sedimento marino.
recinto controlado y luego de-
volverla a su lugar original. d) Productos para la Sin embargo, debido a la com-
biorremediación plejidad de los parámetros físi-
c) Tipo de entorno a recuperar (bioestimulación) co-químicos y biológicos impli-
La biorremediación se ha apli- El objetivo de la mayoría de cados en la relación microorga-
cado con resultado desigual ellos es aportar al medio las nismo-contaminante, que he-
en playas de arena, playas de cantidades necesarias de N y P mos intentado enunciar en es-
roca y marismas. En estas últi- disponible, para permitir la te artículo y en el precedente,
mas el problema fundamental degradación de hidrocarburos una aproximación experimen-
son las condiciones anóxicas, el por los microorganismos. Te- tal correcta al tratamiento bio-
bajo pH y la gran salinidad de niendo en cuenta las caracte- lógico de los vertidos requiere
los sedimentos. En cuanto a las rísticas del entorno menciona- un estudio previo detallado de
playas de piedra o acantilados, das arriba, además de su com- cada uno de los emplazamien-
el problema operacional es posición química es muy im- tos y un control efectivo a cor-
grande ya que no se tienen las portante su constitución física to y medio plazo del proceso,
facilidades de muestreo, analí- y su interacción con las mareas. más que un aporte indiscrimi-
tica, etc. que hay en una arena Hay varias posibilidades, algu- nado de un producto elegido
debido a la heterogeneidad nas de ellas ensayadas tras el aleatoriamente. Hay que apun-
del reparto del chapapote (fo- accidente del Exxon Valdez tar, en este sentido, que la
tografía 2). La aproximación (Pritchard, 1997; ver artículo elección de un producto bioes-
requiere fuentes oleofílicas de sobre el vertido en este mismo timulante puede estar condi-
nutrientes y biosurfactantes, número) y en otros vertidos cionada por factores no direc-
siendo la monitorización visual (Swannell et al., 1996): tamente relacionados con su
muy importante. efectividad, como por ejemplo,
• Briquetas o gránulos de li- su disponibilidad comercial en
En las playas de arena, la bio- beración lenta. las cantidades necesarias.
rremediación se puede plan- • Fertilizantes oleofílicos lí-
tear in situ o ex situ en función quidos (el más conocido es Por último, el estudio previo
de las mareas. Aunque el me- el Inipol EAP22). de los parámetros de degrada-
dio es en principio más homo- • Productos naturales con pro- ción en el laboratorio sobre
géneo y fácil de parcelar y ai- piedades nutritivas y surfac- muestras y condiciones análo-
rear, la interestratificación de tantes (extractos de algas). gas a las del medio natural (mi-
las manchas y a veces el reduci- • Biosurfactantes de origen crocosmos) constituye, si es po-
do tamaño de éstas (fotogra- bacteriano (Emulsan, otros). sible llevarlas a cabo, una fuen-
fía 3) puede dificultar las ope- • Surfactantes de origen quí- te de información muy valiosa
raciones por lo que es impres- mico, biodegradables, com- para su aplicación posterior en
cindible un estudio subsuperfi- binados con sales minerales. el campo (Pritchard, 1997).
20
ARTÍCULO
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21
ARTÍCULO

Experiencia de Repsol YPF Carlos García Fandiño


Coordinador de Medio
Ambiente

Repsol YPF, Refino y

en biorremediación Logística Europa

de suelos
Se resume la experiencia al- This paper deas with the ex- dora: los lodos de hidrocarbu-
canzada por una empresa de perience reached by a pe- ros, extendidos sobre el terre-
no, se iban degradando como
refino de petróleo en la bio- troleum refining company consecuencia de la actividad mi-
rremediación de terrenos in the bioremediation of crobiana; si se estimulaba esa
contaminados por hidrocar- soils contaminated by hy- actividad aportando nutrientes,
buros, desde las primeras ac- drocarbons. This covers humedad y, por supuesto, oxí-
tuaciones, en 1976, limitán- from the first performances, geno –ya que de vida aerobia
dose a tomar contacto con la in 1976, when there was se trataba– se podría contar con
un procedimiento de desconta-
técnica, hasta el momento just a first contact with the minación de suelos.
presente en que ya se em- technique, until present,
plea cuando es preciso y la when it is already used and Realmente, las primeras aplica-
investigación se orienta ha- the investigation is guided ciones experimentales a escala
cia la aplicación en situacio- towards the application in industrial, en terrenos de la re-
nes reales de las distintas real situations of the differ- finería de Cartagena, no se lle-
varon a cabo hasta 1980. Al
opciones conocidas de la ent well-known options of igual que las refinerías ameri-
biodegradación. biodegradation. canas de entonces, se preten-
día conocer la cantidad máxi-
ma de hidrocarburos (kg/m2)
a curiosidad por estos Lo que había sido una mala que podía degradarse en un
L temas en Repsol YPF práctica de algunas refinerías tiempo razonable en terrenos
data de 1976, cuando americanas, en los años cuaren- representativos de los alrede-
en el Centro de Investigaciones ta y cincuenta, extendiendo los dores. Para ello se eligieron
de la empresa en Cartagena se lodos aceitosos, de limpiezas de Vista de la unas parcelas, se prepararon
iniciaron las primeras expe- tanques y otras actividades, por biopila de convenientemente para reco-
riencias de selección y desarro- los terrenos de sus alrededores, experimentación ger por pendiente los lixiviados
llo de cepas bacterianas espe- había dado lugar a una técnica de la refinería y, manifestando una preocupa-
de Puertollano.
cialmente efectivas en la de- que en aquellos años setenta En primer plano ción por el subsuelo poco fre-
gradación de hidrocarburos. se presentaba como promete- se aprecia la cuente entonces, se hizo un se-
soplante. guimiento de la calidad del
freático mediante pozos piezo-
métricos. La aireación del te-
rreno para proporcionar el oxí-
geno requerido por los micro-
organismos se efectuaba me-
diante el arado de las parcelas
("land farming").

Lo único que se buscaba era


el conocimiento de la técnica,
ya que en ninguna de las refi-
nerías de la empresa, mucho
más recientes que las ameri-
canas, se acostumbraba a ex-
tender los lodos aceitosos so-
bre el terreno próximo.
28
ARTÍCULO
Con la misma intención, en
1982, se repitieron experiencias
similares, en pequeña escala,
en la refinería de Puertollano.

Con estas pruebas, la biorre-


mediación llegó a ser una téc-
nica conocida en las refinerías
de Repsol YPF, aunque no se
aplicara como método de Vista del “land
descontaminación habitual. farming” de
experimentación
de la refinería
En la actualidad, cuando ya la de Puertollano.
biorremediación ha dejado de
ser una técncia prometedora
para ser una herramienta habi-
tual y eficaz, la Central de In-
geniería, de Repsol YPF, res-
ponsable del desarrollo de to-
dos los grandes proyectos del
Grupo, dispone de una depen-
dencia especializada que dise-
ña, contrata y supervisa todos
los trabajos de prevención y re-
mediación de la contaminación
del subsuelo, acumulando gran
experiencia en todas estas ta-
reas, que transmite a los técni-
cos interesados del Grupo.

La expansión de la Empresa
por Latinoamérica ha permiti- cando un "land farming" y desarrollando en la refinería
do incorporar al conocimien- van a poner en marcha expe- de Cartagena, con la autoriza-
to general la experiencia de riencias de fitorremediación, o ción de la Consejería de Me-
los técnicos de aquella zona, en Lima (Perú), donde se va a dio Ambiente de Murcia, en
destacando las aplicaciones iniciar un gran proyecto de el que se eliminan una serie de
en tierras contaminadas de compostaje de lodos aceitosos. lodos residuales. Esta práctica
yacimientos y refinerías, como va unida a una experiencia que
Pruebas de
en Mendoza (República Ar- Aquí en España, es de destacar se realiza con el Centro de
compostaje en
gentina), donde se está apli- la refinería de el "land farming" que se está Edafología y Biología Apli-
Puertollano. cada del Segura (CEBAS),
del Consejo Superior de In-
vestigaciones Científicas,
por el que se pretende demos-
trar que la aplicación de lodos
al terreno y su tratamiento por
"land farming" no sólo es una
buena técnica de depuración,
sino una forma de recuperar
terrenos degradados, especial-
mente en zonas semidesérticas
como las del SE peninsular.

Ocasionalmente los terenos


de alguna estación de servicio
se ven afectados por derra-
mes y requieren ser recupera-
dos. En esas circunstancias,
son habituales las técnicas de
tratamiento "in situ", descon-
taminando los terrenos sin re-
tirarlos de su emplazamiento,
29
ARTÍCULO

estimulando la actividad de la En la actualidad, y desde hace


vida microbiana local, me- más de dos años, se están reali-
diante aireación subsuperfi- zando en la refinería de Puerto-
cial ("bioventing") y, en su ca- llano experiencias de composta-
so, aporte de nutrientes. je de tierras previamente im-
pregnadas con hidrocarburos,
Una de las experiencias de con la intención de profundizar
biorremediación más impor- en el conocimiento de dicha
tantes que se han llevado a técnica y disponer de ella como
cabo en los últimos años en una alternativa a la gestión co-
España tuvo lugar en Málaga; mo residuos peligrosos de las
durante 35 años un terminal y tierras sucias resultantes de pe-
un parque de almacenamien- queños derrames internos.
Pruebas de
to habían sido la cabecera del fitorremediación
microorganismos especializa-
oleoducto que alimentaba en la refinería dos); o la preparación de inó- También en Puertollano se dis-
desde aquella población la re- de Puertollano. culos de cepas de los lodos pone de un área de trabajo pa-
finería de Puertollano (Ciudad biológicos y su incorporación ra realizar pruebas de "land
Real). Cuando llegó el mo- al "land farming". farming" y biopilas. Para pro-
mento de abandonar el lugar, porcionar aire en la biopilas se
al construirse el nuevo Oleo- También en el Terminal, se es- dispone de una soplante, unida
ducto Cartagena-Puertollano, tudió la disponibilidad para la a una red de tubos ranurados
se acordó adecuar los terrenos revegetación de los terrenos que permanecen en el interior
a los usos futuros mediante con la aplicación de especies de la pila de tierra, que da un
técnicas de biorremediación seleccionadas (festuca rubra, caudal próximo a 900 m3/h, pa-
en sus distintas variantes, por medicago sativa, lolium pe- ra una presión diferencial de
ser una técnica "blanda", po- renne y trifolium alba), y se 220 mbar. El criterio de selec-
co agresiva con el entorno. comparó el grado de desarro- ción ha sido tener capacidad
llo alcanzado entre adicionar para suministrar 2 m3/h de aire
Se llevaron a cabo experien- fertilizantes comerciales y lo- por m3 de tierra. Por su carác-
cias a escala de laboratorio e dos biológicos de depuradora. ter experimental, se ha previs-
industrial para confirmar la to la posibilidad de aspirar ai-
biodegradabilidad de los hi- Finalmente, se contrató a una re a través de la tierra e impul-
drocarburos presentes en empresa especializada -aun- sarlo al exterior, o de aspirar
aquellos terrenos, tanto por que hubo un seguimiento per- del exterior e impulsarlo a tra-
"land farming" como por bio- manente por técnicos de Rep- vés de la tierra.
pilas. Se efectuaron también sol YPF-, y se trataron unos
pruebas novedosas, como la 25.000 m3 de tierras por "land También se están iniciando ex-
aplicación al "land farming" farming" y unos 150.000 m 3 periencias de fitorremediación.
de lodos biológicos del trata- por "bioventing", alcanzando
miento de aguas residuales en un plazo de meses los re- Aunque pueda resultar paradó-
Vista del “land
de la refinería de Puertollano sultados definidos como obje- gico que la máquina más sofisti-
farming” de
(para aportar materia orgáni- experimentación tivo de la biorremediación en cada que se emplea en un
ca, nutrientes y, sobre todo, de la refinería de los terrenos del Terminal. "land farming" sea un arado,
Puertollano. para remover y airear las tierras,
cualquiera de las técnicas de
biorremediación que experi-
mentamos son, en definitiva, de
alta tecnología: no hay produc-
to de ingeniería que supere a la
complejidad de un ser vivo; y
hay un consumo energético im-
portante, pero lo aportan con
su actividad y su metabolismo
los propios microorganismos.

En Repsol YPF sabemos que la


biotecnología no está hacien-
do más que empezar a mos-
trarnos sus posibilidades, tam-
bién en nuestro Sector. Sabe-
mos que hay que seguir inves-
tigando en esa línea.
30
ARTÍCULO

La biorremediación José Luis Rodríguez Gallego


Ingeniero de Minas
Profesor Asociado

Universidad de Oviedo

frente al vertido del


Exxon Valdez
El vertido del Exxon Valdez The Exxon Valdez oil spill in l 24 de marzo de 1989,
en las costas de Alaska es Alaska shorelines is an es- E un petrolero de más
una referencia imprescindi- sential reference to under- de 300 metros de eslo-
ble para entender cómo se stand how definitive clean ra, llamado Exxon Valdez y
cargado con un millón y me-
puede afrontar la limpieza up works in coasts affected dio de barriles de crudo, na-
definitiva de las costas afec- by Prestige fuel spill should vegaba bordeando la costa de
tadas por el Prestige. Este ar- be considered. In this article, Alaska. Había salido horas an-
tículo explica cómo la biorre- the author explains the im- tes del puerto de Valdez con
mediación fue una de las portant role that bioremedi- rumbo a California para de-
técnicas dominantes en los ation techniques had in positar su carga en una refi-
nería de la Exxon. Una inex-
programas de limpieza usa- long-term remediation pro- plicable cadena de errores co-
dos a largo plazo. grammes in Alaska. metidos por el guardacostas,
el capitán y su tercero llevó al
barco hasta los arrecifes de
Figura 1. Mapa de
la zona afectada Blight. Aunque intentaron
por el vertido, con la evitarlos, no fue posible y el
disposición espacio- barco se incrustó en uno de
tiempo que alcanzó. ellos, produciéndose así una
enorme grieta en el casco y
derramándose parte del cru-
do. La bahía de Prince Wi-
lliam se cubrió con más de
30.000 toneladas de crudo
(40.000 según otras fuentes)
que pocos días después afec-
taron a más de 1.000 km de la
costa (figuras 1 y 2).

Veintidós años antes, quizá no


el primer accidente de este ti-
po, pero sí el que provocó un
aldabonazo importante en la
opinión pública, fue el del pe-
trolero Torrey Canyon al
suroeste de Cornwall, Inglate-
rra. Entonces, como en 1989,
Cortesía de ‘Exxon Valdez Oil Spill Trustee Counci

como ahora en 2003, las medi-


das que se tomaron para mini-
mizar el vertido (en aquel ca-
so utilización de detergentes y
bombardeo del barco) fueron
terriblemente controvertidas y
finalmente, una buena parte
de la costa británica, e incluso
de la Bretaña francesa, fue se-
riamente afectada.
24
ARTÍCULO
tos utilizados fueron princi-
palmente manuales, al
igual que ha ocurrido en el
caso del Prestige, con la
diferencia de que en Alaska
fueron afectadas playas de
grava y guijarros en mucha
mayor proporción que las
Cortesía de ‘Exxon Valdez Oil Spill Trustee Counci

de arena. En algunas zonas


se utilizó el lavado a pre-
sión con agua caliente co-
mo alternativa, procurando
desplazar los hidrocarburos
de nuevo hacia el agua
donde eran recogidos por
los skimmers (figura 3).
c) En el tratamiento a largo
plazo, se planteó, en primer
Figura 2. lugar, el uso de dispersan-
Ya en aquellos años sesenta, la Fotografía del ción de limpieza en la historia tes, aunque fueron descar-
idea de que la biodegradación Exxon Valdez de los Estados Unidos. El proce- tados por cuestiones toxico-
rodeado por
del petróleo vertido en un acci- so se desarrolló en tres fases: lógicas. También se realizó
barreras de
dente se podía mejorar con la contención horas una monitorización de la ca-
adición de nitrógeno y fósforo después del a) Como respuesta inmediata lidad de las aguas en treinta
inorgánico había aparecido en accidente. se utilizaron “skimmers”, y cinco emplazamientos; en
los círculos científicos. Uno de equipos típicos en la recogi- total unas 23.000 muestras
sus principales impulsores (Ro- da de productos petrolíferos tomadas a lo largo de varios
nald Atlas) acabó tiempo des- vertidos en el agua. Su fun- años. Por otra parte, se in-
pués trabajando en la limpieza cionamiento se basa en la di- tentó, con cierto éxito, el la-
de las costas de Alaska tras el ferencia de tensión superfi- vado físico de las arenas
vertido del Exxon Valdez. En cial y de peso especifico en- afectadas, pero los equipos
efecto, lo cierto es que esta tre hidrocarburos y agua, pu- empleados producían efec-
tecnología comenzó definitiva- diendo bombearse aquellos tos indeseables en los sedi-
mente a llamar la atención en hacia depósitos para su reco- mentos (pérdida de fracción
los años setenta, por entonces gida. Desgraciadamente, la fina, afección del ecosiste-
reducida a experimentos de la- falta de suficientes medios ma, etc.). Agotadas otras
boratorio o a pequeñas de- permitió recoger solo una posibilidades, y previendo la
mostraciones en el campo. Sin pequeña cantidad del crudo. persistencia a largo plazo de
embargo, otro famoso acci- Al tercer día se produjo un muchas fracciones contami-
dente, el del Amoco Cádiz en brusco cambio del tiempo, nantes, Exxon y la EPA
1978, supuso un nuevo impul- acompañado de fuertes vien- (agencia medioambiental
so a la investigación. A partir tos y oleaje que, estos sí, dis- norteamericana) decidieron
de entonces, el número de fra- persaron en una franja de poner en marcha un progra-
casos comenzó a disminuir y a cerca de cien kilómetros el ma de investigación para es-
finales de los ochenta, la co- vertido, y formaron la emul- tudiar las posibilidades de
munidad científica ya tenía la sión petróleo-agua conocida utilizar la biorremediación
certeza de que si no la mejor, si como "mousse". Tras este en las costas afectadas.
era una buena manera de en- contratiempo se hicieron los
frentarse a los efectos de los últimos intentos fallidos de
vertidos de petróleo. El último evitar que el petróleo afecta- Programa de biorremediación
y más importante impulso ven- ra dramáticamente a las cos- desarrollado.
dría meses después del acci- tas, pero ni el incendio pro-
dente del Exxon Valdez. vocado de parte de la carga En un primer estadio, se reali-
del barco, ni las barreras anti- zaron gran cantidad de mues-
contaminación, ni el uso de treos y experimentos de labo-
Fases de la operación de dispersantes (ineficaces si hay ratorio que demostraron que
limpieza emulsión) fueron suficientes. la población de microorganis-
b) La segunda fase de las mos autóctonos tenía capaci-
Volvamos a marzo de 1989. tareas consistió en la retira- dades degradativas de hidro-
Tras el vertido, se puso en mar- da de la mayor cantidad po- carburos alifáticos y aromáti-
cha lo que con el tiempo se sible del crudo vertido en cos y que la cinética de la de-
convertiría en la mayor opera- las playas. Los procedimien- gradación podía ser mejorada
25
ARTÍCULO

Hoy en día sabemos que los se-


dimentos de la zona eran clara-
mente deficitarios en nitrógeno
y fósforo, por lo que, después
de una la fase de limpieza por
medios físicos, la biodegrada-
ción propiciada por los microor-
ganismos autóctonos estimula-
dos con el fertilizante fue efec-
tiva. Así lo atestiguaban las evi-
dencias visuales que, frente a
ensayos de control, mostraban
que las rocas se limpiaban mu-
Figura 3. Imágenes cho antes si se les aplicaba ferti-
Cortesía de ‘Exxon Valdez Oil Spill Trustee Counci

de las tareas de lizante. Sin embargo, los mues-


limpieza física treos realizados en aquel mo-
mediante chorros a mento chocaron con la tremen-
presión y
“skimmers” en las
da heterogeneidad en cada
playas afectadas. emplazamiento tratado y entre
distintos emplazamientos. Tan-
to es así, que algunos investiga-
dores, obsesionados por la va-
riabilidad de los resultados,
propusieron que se añadiera
más petróleo en determinados
lugares para unificar los puntos
con la adición de nutrientes. Los abonos habituales en de partida, idea rápidamente
La traslación de estos resulta- agricultura fueron desestima- descartada. En suma, se temió
dos a ensayos de campo, y dos inicialmente, y entree los que en realidad no se estaba
luego a gran escala, requirió productos ensayados se esco- consiguiendo nada y así se re-
la valoración de otros muchos gieron dos para su aplicación: cogía en los primeros informes
factores. Algunos de estos son El Inipol EAP22, fertilizante lí- de las comisiones científicas.
habituales en cualquier trata- quido oleofílico y Custom-
miento de biorremediación; blen, fertilizante de liberación Los esfuerzos de los investiga-
por ejemplo, la temperatura, lenta en gránulos (tabla 1). dores se condujeron entonces
la actividad microbiana y la Fue el primero de ellos el que a establecer una monitoriza-
geoquímica del contaminante, finalmente se utilizó a gran ción estándar de la biodegra-
pero otros son específicos de escala durante los tres vera- dación, mediante un cociente
las costas: mareas, salinidad, nos que duraron los trabajos, entre la degradación de los al-
concentración de nutrientes no tanto porque cumpliera canos lineales de 17 y 18 áto-
en la columna de agua, etc. escrupulosamente las condi- mos de carbono frente a la de
ciones antes expuestas sino dos biomarcadores habituales
Los trabajos, poco a poco, se porque era el único cuyo su- como son el pristano y el fita-
Tabla 1.
dirigieron a la selección de un ministro en los volúmenes ne- Componentes de
no, hidrocarburos mucho más
fertilizante adecuado, descar- cesarios estaba garantizado los dos difícilmente biodegradables.
tadas ya otras alternativas de (la empresa Elf lo había desa- fertilizantes Sin embargo, el método no
inoculación y similares. El rrollado a raíz del accidente utilizados en los funcionó, ya que los microor-
programas de
producto elegido debería en del Amoco Cádiz). ganismos presentes en las pla-
biorremediación.
principio haber cumplido las
siguientes condiciones: COMPONENTES FÓRMULA QUÍMICA FUNCIÓN

• Proporcionar nitrógeno y Inipol EAP 22


fósforo de forma que los Ácido oleico CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH Fase hidrofóbica
microorganismos tuvieran Lauril fosfato [C12H25(OC2H4)3O]3PO Fuente de fósforo y surfactante
un fácil acceso a ellos. 2-Butoxietanol HO-C2H4-O-C4H9 Surfactante y estabilizador de la emulsión
• Permanencia en la zona ba- Urea NH2-CO-NH2 Fuente de nitrógeno
ñada por las mareas, pese a Agua H2O Disolvente
la actividad de éstas y a la
existencia de tormentas. Customblen
• Ausencia de riesgos toxico- Nitrato de amonio NH4NO3 Fuente de nitrógeno
lógicos para el ecosistema Fosfato de calcio Ca3(PO4)2 Fuente de fósforo
marino. Fosfato de amonio (NH4)3PO4 Fuente de nitrógeno y fósforo

26
ARTÍCULO
yas se demostraron capaces PLAYAS RECUPERADO
de degradar también estos Figura 5. Estimación de 2% 14%
la National Oceanic BIODEGRADADO-
INFRAESTRUCTURAS
hidrocarburos ramificados, si FOTODEGRADADO
and Atmospheric 50% EN SEDIMENTOS
no tan rápidamente como Administration (NOAA) 13%
los lineales, sí de una manera sobre la distribución del DISPERSO EN
crudo vertido en 1992, EL AGUA
importante. 1%
más de tres años
después del accidente. VOLATILIZADO
La solución la aportó la geo- 20%

química del petróleo. Desde


hacía bastante tiempo se ve- agresión al ya dañado ecosiste- Alaskan oil spill Exxon Com-
nían utilizando algunos otros ma frente a cualquier otra téc- pany, U.S.A., Houston, TX.
biomarcadores, con el objeti- nica que se hubiera empleado Head, I.M. y Swannell, R.P.
vo de caracterizar tipos de pe- para la remediación a largo (1999). Bioremediation of
tróleo en yacimientos profun- plazo. De alguna forma, la ex- petroleum hydrocarbon
dos. Uno de ellos era el periencia puso de manifiesto, contaminants in marine ha-
17a(H), 21b(H)-hopano, terpe- una vez más, que el petróleo bitats. Curr. Op. Biotechnol.
no no biodegradable, que es un producto natural, y que 10: 234-239.
permitiría establecer una rela- si su inoportuna aparición en Kelso, D.D. y Kendziorek,
ción segura frente a los hidro- tiempo y lugar inadecuado da- M. (1991). Alaska response
carburos del petróleo biode- ña los ecosistemas y destruye to the Exxon Valdez oil
gradables. Por fin, se consi- vida, hay otro tipo de vida mi- spill., Environmental Scien-
guió verificar estadísticamente croscópica que puede verse fa- ce and Technology, 25, 202-
la degradación biológica gra- vorecida. Fomentar su acción, 209.
cias al uso de este hopano. biorremediar, no es más que Pain, S. (1993). The two faces
Además, los datos obtenidos aprovecharse del ciclo del car- of the Exxon disaster, New
mostraron que los niveles de bono (figura 5). Scientist, 138, 11-13.
nitrógeno en las aguas inters- Prince, R.C. (1997). Bioreme-
ticiales eran el factor limitante Sea como fuere, e indepen- diation of marine oil spills.
de la biodegradación, al me- dientemente de las técnicas Tibtech 15:158-160.
nos con el tipo de materiales que se utilizaron, el desastre Pritchard, P.H. y Costa, C.F.
geológicos que hay en las pla- del Exxon Valdez (como Mina- (1991). EPA's Alaska oil spill
yas de Alaska. Estudios poste- mata, como Chernobyl, como bioremediation project. En-
riores han demostrado que la Bhopal, como Aznalcóllar, ¿có- vironmental Science and
tasa de oxígeno también es mo el Prestige?) abrió las puer- Technology, 25, 3, 372-379.
un factor fundamental, por lo tas a una nueva percepción so- Pritchard, P.H. (1997). Cuestio-
que el volteo o suave arado bre los riesgos que comporta nes reglamentarias y de efi-
en zonas arenosas es útil. nuestra relación con la natura- cacia en la biorrecuperación
leza. Así, actualmente se reali- de los derrames de petróleo:
Conclusiones zan en Alaska evaluaciones pe- experiencias con el derrame
riódicas, páginas web y varios del Exxon Valdez en Alaska.
Oficialmente, las labores de programas educativos y de in- En: Levin, M. y Gealt, M.A.
limpieza terminaron en 1992. vestigación a propósito de la –editores- Biotratamiento de
Años después sabemos que la experiencia del Exxon Valdez. residuos sólidos y peligrosos.
biorremediación fue una he- Tampoco han faltado las com- Cap. 12, pp 273-311. Mc-
rramienta muy importante, pensaciones económicas a los Graw Hill. Madrid.
que demostró una efectividad afectados, ni los cambios legis- Röling, W.F; Milner, M.G.;
en principio no exenta de du- lativos. Tampoco faltan los vo- Jones, D.M.; Lee, K.; Da-
das. A pesar de todas las im- Figura 4. luntarios, científicos y no cientí- niel, F.; Swannell, R.P. y
Operarios
perfecciones, supuso un im- ficos, que siguen trabajando en Head, I.M. (2002). Robust
aplicando
portante ahorro y una menor INIPOL recuperar el petróleo que aún hydrocarbon degradation
EAP22). duerme en muchos sedimentos. and dynamics of bacterial
communities during nu-
Cortesía de ‘Exxon Valdez Oil Spill Trustee Counci

Bibliografía seleccionada trient-enhanced oil spill bio-


remediation. Applied and
Bragg, J.R.; Prince, R.C.; Har- Environmental Microbiology
ner, E.J. y Atlas, R.M. (1994). Vol. 68 (11), pp 5537-5548.
Effectiveness of bioremedia- Swannell, R.P; Lee, K. y Mc-
tion for the Exxon Valdez oil Donagh, M. (1996). Field
spill. Nature 368: 413-418. evaluations of marine oil
Bragg, J.R. et al. (1992). Bio- spill bioremediation. Micro-
remediation for shoreline biological Reviews vol. 60
cleanup following the 1989 (2), pp 342-365.
27
ARTÍCULO

Evaluación y aplicación de
técnicas de biorremediación en
tres playas de la costa de Muxía
Ante la magnitud del desas- Due to the extension of the
Juan F. Llamas Borrajo
tre ocasionado por el acci- disaster caused by the acci- Dr. Ingeniero de Minas
dente del Prestige, el Consejo dent of the Prestige, the Catedrático
Superior de Colegios de Inge- "Consejo Superior de Cole- E.T.S. de Ingenieros de
Minas de Madrid
nieros de Minas acordó finan- gios de Ingenieros de Mi-
ciar un proyecto para evaluar nas" agreed to fund a pro- José Luis Rodríguez Gallego
el potencial de las técnicas de ject to evaluate the poten- Ingeniero de Minas
biorremediación como méto- tial of the bioremediation Profesor Asociado
E.T.S. de Ingenieros de
do de recuperación de las techniques as a method of Minas de Oviedo
costas afectadas. Las Escuelas recovery of the affected
de Minas de Madrid y de coasts. The Schools of Mines
Oviedo con experiencia en of Madrid and Oviedo,
este campo fueron las encar- which have experience in
gadas del desarrollo del pro- this field, are in charge of
yecto. En lo que sigue se ha- this project. This paper deals
blará tan solo del proyecto, with the project, which at
actualmente en marcha y con this moment is in progress
unos primeros resultados que with some results that are
permiten ser muy optimistas. very encouraging.

Praia Moreira.
ntes de pasar al pro-
E yecto propiamente di-
cho, quisiéramos co-
mentar otros aspectos, no pu-
ramente técnicos, relaciona-
dos con el mismo.

Dentro del proyecto, se ha


desarrollado en Vigo, en el
edificio del Rectorado, duran-
te los días 25 a 27 de marzo,
el Curso sobre "Biorreme-
diación aplicada a los pro-
ductos petrolíferos" al que
asistieron 49 alumnos, de
ayuntamientos, empresas, pe-
riodistas, profesores, quími-
cos, biólogos, ... si bien la ma-
yoría eran de la propia Escue-
la de Minas. Muchos de los
alumnos del curso ya han ma-
4
ARTÍCULO
nifestado su interés en cola- de aquí, se elaborará un pro-
borar en el desarrollo del tocolo práctico de biorreme-
proyecto, y esperamos que diación (bioaumentación y/o
sea del curso de donde salgan bioestimulación) en el que se
los técnicos que probable- consideren conjuntamente
mente tengan que aplicar es- los aspectos químicos y micro-
tas técnicas en otros puntos biológicos (selección de las
de la costa. mezclas bacterianas, si se
aplican, concentración, com-
A su vez, los alumnos de ter- plementación nutricional del
cer curso de la Escuela de Mi- medio, si es necesario) y de
nas de Madrid que cursan las operación: diseño, aplicación
Coido de
asignaturas de "Geoquímica" Cuño. de los productos necesarios y
y "Análisis Instrumental", jun- la experiencia acumulada en medida de los parámetros crí-
to con los de "Fundamentos otros casos como el del Exxon ticos durante el proceso, con-
de Geoquímica" de la titula- Valdez, la eficacia de los mé- cretamente concentración de
ción de Ingeniero Geólogo, todos de biorremediacion pa- bacterias, sean alóctonas o
van a realizar este año sus ra afrontar este problema. autóctonas, y desaparición
prácticas de laboratorio en las del contaminante. El proceso
tres playas seleccionadas. Estas El proyecto presentado pre- de aplicación de esta tecnolo-
prácticas consistirán en la to- tende desarrollar este aspecto gía sobre el terreno llevará
ma de datos analíticos en mediante la realización de un un escrupuloso control de to-
campo y en su interpretación, estudio amplio a escala de la- do tipo de riesgo biológico
y se llevarán a cabo en dos pe- boratorio, a escala piloto so- en el que se pudiera incurrir.
ríodos, del 11 al 14 y del 26 al bre el terreno, y, si se conside-
30 de abril. Para ello se ha ra procedente, a escala real Los trabajos se desarrollarán
contado con la inestimable co- que permita la evaluación y en las calas y playas de Arne-
laboración de la Xunta de selección de las técnicas de la, Moreira y Coido de Cuño,
Galicia y del Ayuntamiento biorremediación (bioestimula- situadas todas ellas al sur de
de Muxía; así como, con la ción o bioaumentación) más Muxía; por lo que el conoci-
necesaria coordinación de la adecuadas para la degrada- miento del entorno costero y
Jefatura de Estudios de la Es- ción de los hidrocarburos que de su relación con los factores
cuela de Minas de Madrid. permanezcan en las playas principales que afectan a la
afectadas después de la finali- biorremediación se considera
Introducción y grupo de zación de las labores de lim- capital. Por último para esta
investigadores pieza. Para ello, se realizará introducción, pero no menos
una caracterización químico- importante, creemos que el
La biorremediación es una física y microbiológica de los proyecto propone un aborda-
herramienta que puede ser emplazamientos, seguida del je interdisciplinar, lo que es
utilizada con eficacia en cier- aislamiento, identificación y decisivo para abordar de una
tos entornos contaminados y caracterización de microorga- forma integral todos los obje-
cuyos mayores éxitos docu- nismos con capacidades de- tivos del mismo. Así el grupo
mentados se han obtenido gradativas a partir del am- de investigadores es variado y
frente a vertidos de hidrocar- biente contaminado. A partir abarca, a nuestro entender, a
buros. Es un proceso lento,
pero económico, si se efectúa
adecuadamente, y no es
agresivo con el medio, ya que
los contaminantes son mine-
ralizados por los microorga-
nismos, siendo incorporados
en la biomasa. No existen en Praia Moreira.
nuestro pais experiencias di-
rectas encaminadas a evaluar
la eficacia de los métodos de
biorremediación de ambien-
tes litorales contaminados
por vertidos de hidrocarburos
de petroleo, por lo que el ac-
cidente del Prestige consti-
tuye una circunstancia idónea
para evaluar, aprovechando
5
ARTÍCULO

profesionales competentes en que aumente la presencia de


los muchos aspectos contem- nitrógeno y fósforo disponi-
plados, sin descartar ni poste- ble. Este enfoque puede per-
riores incorporaciones ni toda mitir que se reduzca la con-
la ayuda que las administra- centración de hidrocarburos y
ciones competentes puedan evitar la acumulación definiti-
suministrar: va de los no degradados en el
sedimento marino. Pese a ser
• Juan F. Llamas Borrajo y este el procedimiento general
Mª. Jesús García Martí- más recomendado, hay más
nez, Ingenieros de Minas posibilidades que deben estu-
del Dpto. de Ingeniería Arnela. diarse (por ejemplo, en el caso
Química y Combustibles de zarán en los trabajos; más ade- del Exxon Valdez se utilizó el
la Universidad Politécni- lante se detallará, en concreto, Inipol por ser el único produc-
ca de Madrid. el tipo de trabajo específico que to comercialmente disponible
• Jorge Loredo Pérez y José se utilizará en cada playa. en las cantidades necesarias).
Luis Rodríguez Gallego,
Ingenieros de Minas del En general, el modelo de traba- La influencia de la temperatu-
Dpto. de Explotación y Pros- jo que se siga intentará repro- ra va a ser obvia en cuanto a
pección de Minas de la Uni- ducir en sus vertientes más exi- que en los meses más cálidos
versidad de Oviedo. tosas los métodos empleados la acción microbiana se refor-
• Jesús Sánchez Martín y en la remediación del vertido zará, aunque pueden apare-
Ana Isabel Peláez, Dpto. del Exxon Valdez. Para ello, en cer escenarios adicionales si el
de Biología Funcional de la un primer momento, ya se ha fuel se licúa con las altas tem-
Universidad de Oviedo. recopilado la información bi- peraturas. La dinámica marina
• Trinidad de Torres Pérez- bliográfica y los informes exis- lleva meses ayudando a reti-
Hidalgo y José Eugenio tentes sobre el empleo de la rar residuos de la costa, cola-
Ortiz Menéndez, Ingenie- biorremediación tras el citado bora en la oxidación, etc.,
ros de Minas del Dpto. de accidente. Por otra parte, la aunque, por otro lado, fuertes
Ingeniería Geológica de la metodología utilizada se basa- mareas pueden impedir la
Universidad Politécnica de rá en técnicas químicas y micro- aplicación de productos o evi-
Madrid. biológicas de probada eficacia tar que se fijen los microorga-
• Enrique Chacón Oreja, In- en trabajos de investigación si- nismos si se efectúa algún ti-
geniero de Minas del Dpto. milares en suelos o sobre resi- po de bioaumentación, por lo
de Matemática Aplicada a duos pesados de refinería reali- que se idearán sistemas para
los recursos Naturales de la zados en los laboratorios de la evitar este problema.
Universidad Politécnica de Universidad de Oviedo y de la
Madrid. Escuela de Minas de Madrid. La biorremediación ha tenido
éxitos y fracasos en playas de
Entre los medios, además de El objetivo del proyecto es la arena y en zonas rocosas En
los propios de los departamen- evaluación, selección y apli- cuanto a playas de piedra o
tos involucrados, se cuenta con cación de las técnicas de bio- acantilados, el problema ope-
los del Laboratorio de Estra- rremediación más adecuadas racional es grande ya que no
tigrafía Biomolecular (LEB) para la degradación de los se tienen las facilidades de
(http://www.minas.upm.es/leb. hidrocarburos que, después muestreo, analítica, etc. que
htm). También se está en con- de la finalización de las la- hay en una arena, la aproxi-
tacto con otros expertos de la bores de limpieza física, per- mación requiere fuentes oleo-
Unión Europea y se espera manecen en las playas afec- fílicas de nutrientes y biosur-
contar con la colaboración de tadas por el fuel objeto del factantes, siendo conscientes
la Universidad de Santiago proyecto. de que la monitorización de
de Compostela, en concreto la eficiencia del proceso de
con el equipo del profesor Fe- Consideraciones de partida biorremediación deberá ba-
lipe Macías, quienes irían sarse en el estudio de los bio-
asumiendo mayor protagonis- Como criterio general se con- marcadores y de que la eva-
mo de las actuaciones futuras. sidera que el proceso puede luación global deberá tener
llevarse a cabo (con diferen- un marcado componente vi-
Metodología general cias según se trabaje sobre ro- sual, que afectará al diseño
ca o sobre arena) con la com- del muestreo (estratificado).
En este apartado se describirán binación de un producto sur- En las zonas arenosas todo es
brevemente los procedimientos factante o dispersante que más fácil (se puede plantear
analíticos, de muestreo y de ca- permita la emulsión de los hi- in situ, o incluso ex situ en
racterización in situ que se utili- drocarburos y un fertilizante función de las mareas, el me-
6
ARTÍCULO
iniciado contactos con los
suministradores para conse-
guir cantidades pequeñas
con las que realizar los en-
sayos. Las posibilidades son
muy diversas: briquetas,
gránulos (“Customblen”),
“Inipol” (fertilizante oleofí-
lico líquido), Sea Weed
(proyecto basado en algas
con efecto surfactante), sur-
factantes de origen químico
biodegradables, sales mine-
rales y otros productos.
• Experimentos de control.
• Bioaumentación con bac-
terias procedentes de la
colección del grupo que
lleva adelante el proyecto,
aisladas todas ellas en zo-
nas de vertidos de produc-
Praia tos similares en diferentes
dio es más o menos homogé- Moreira. nos, los siguientes experimen- puntos de la Península. En
neo, es fácil parcelar, etc.). tos de biorremediación: este caso, se llevará un es-
crupuloso control de todo
En lo que se refiere a los • Bioaumentación con bacte- tipo de riesgo biológico en
plazos, es imposible prede- rias autóctonas, mediante el que se pudiera incurrir,
cir la efectividad que van a un consorcio preparado con según se indica al final del
tener los tratamientos así parte de las aisladas en la punto 2.6.
como su duración. Cabe re- primera fase.
cordar que en las costas • La experiencia existente y La monitorización que se rea-
afectadas por el vertido del la prudencia necesaria no lice con posterioridad al inicio
Exxon Valdez la biorreme- recomiendan la utilización de los ensayos abarcará los si-
diación ocupó tres o cuatro productos con "bacterias guientes parámetros:
períodos de varios meses (el comerciales", por lo que se
problema eran allí las bajas descarta. • Niveles de nutrientes en el
temperaturas) y no se cerró • Bioestimulación mediante "agua de poro" de las pla-
el tratamiento hasta más de fertilizantes (la selección de yas para controlar la per-
tres años después del verti- éstos es un punto clave de manencia de éstos y para
do; es más, el informe final todo el trabajo). Probable- evitar la eutrofización.
sobre el conjunto de las la- mente más importante que • Control de la dinámica
bores de limpieza no se pu- su composición química costera.
blicó hasta 1997 (ochos años puede ser su "físico" y su • Actividad microbiana.
después del vertido). En relación con las mareas. En • Degradación de hidrocar-
principio, la financiación ac- estos momentos ya se han buros (con biomarcador:
tualmente existente permiti- Hopano; medida de TPH,
ría un trabajo que no iría PAHs y fraccionamiento en
mucho más allá del verano, alifáticos, aromáticos y resi-
tiempo que consideramos nas+asfaltenos).
suficiente para completar
los objetivos marcados. Determinaciones ‘in situ’

Protocolo general Praia Moreira. Para la determinación de pa-


rámetros ambientales sobre
Una vez obtenidos todos los el terreno, se cuenta con lo si-
datos del muestreo (ver deta- guientes equipos:
lles para cada playa en el
punto 3 y metodología a par- • Terminales y electrodos de
tir de 2.3), se dividirán en va- todo tipo, para la medida
rias parcelas las zonas selec- de pH, Eh, conductividad,
cionadas. En ellas se procede- salinidad, oxígeno disuelto
rá a la realización de, al me- y temperatura.
7
ARTÍCULO

con destino al aislamiento tos del número de bacterias


de microorganismos espe- presentes en las distintas
cializados se tomaran en muestras. Por otra parte, se
condiciones estériles, si- aislará el ADN total a partir
guiendo un protocolo esta- de las mismas muestras, lo
dístico que asegure su re- que nos permitirá después
presentatividad. llevar a cabo un estudio mas
• Los experimentos que se rea- completo de todas las bac-
licen en las diferentes par- terias, incluyendo aquellas
celas acotadas para ello, que no crecen en los medios
contarán con un diseño es- de cultivo.
tadístico previo y con con- • Identificación mediante téc-
trol del mismo tipo. Tam- nicas moleculares, que con-
Arnela.
bién se tratará de conseguir sisten esencialmente en la
• Métodos geoquímicos de que los posibles efectos po- amplificación del gen del
campo, para medir la pre- sitivos sean visibles y com- ARN ribosomal 16S, utilizan-
sencia de hidrocarburos vo- parables con zonas de con- do oligonucleotidos conser-
látiles y semivolátiles (TCD, trol no tratadas. vados de eubacterias como
semiconductores, cromató- iniciadores en reacciones de
grafo portátil, FID y PID). Métodos químicos amplificación en un equipo
• Espectrofotómetros de de PCR. Una vez amplificado
campo, para la determina- • Cuando se considere nece- el fragmento, se procederá a
ción de contenido en nu- sario, se realizará una ca- su secuenciación en un equi-
trientes y de metales. racterización de la frac- po automático multicapilar.
• Se ensayará el uso de lámpa- ción inorgánica de las Las secuencias obtenidas se-
ras UV para el cartografiado muestras, para lo que se rán comparadas a otras de
de las zonas contaminadas. utilizará analítica tipo especies conocidas mediante
• GPS para georeferenciar to- plasma (ICP), absorción búsquedas BLASTN en bases
da la información. atómica y rayos X. de datos GenBank + EMBL +
• La medida de hidrocarbu- DDBJ + PDB, utilizando el
En la primera fase está previs- ros totales (TPH) y conteni- Web-Service NCBI (www.nc-
to contar con la colaboración do en hidrocarburos polia- bi.nlm.nih.gov/blst).
de los alumnos de las asigna- romáticos (PAHs), se reali- • Se obtendrán imágenes de las
turas de "Análisis Instrumen- zará por medio de espec- cepas mediante microscopía
tal", "Geoquímica" y "Funda- trometría infrarroja (IR-FT) laser confocal y con otras téc-
mentos de Geoquímica" de y el cálculo de índices de nicas de microscopía óptica.
las titulaciones de Ingeniero biodegradación, mediante • La identificación de las bacte-
de Minas e Ingeniero Geólo- cromatografía de gases- rias es una información muy
go, de la Universidad Politéc- espectrometría de masas valiosa que nos permitirá "in-
nica de Madrid, para la reali- (GC-MS), con respecto a ferir" en una primera aproxi-
zación de dos campañas in- biomarcadores como pris- mación sus capacidades de-
tensivas de determinaciones tano y fitano, en una pri- gradativas, ya que consultare-
"in situ". mera aproximación, y ho- mos en las bases de datos ge-
panos en una segunda más nerales (PubMed: http://
Procedimientos de fina. Esta última técnica www.ncbi.nlm.nih.gov/en-
muestreo y de diseño de también permitirá deter- trez/query.fcgi; Scirus: http://
experimentos minar el fraccionamiento www.scirus.com/) y en las ba-
actual del fuel y el estudio ses de datos de microorganis-
• Los muestreos que se reali- de cada una de las fraccio- mos degradativos (http://
cen, se efectuarán con son- nes (alifáticos, aromáticos, bsd.cme.msu.edu/bsd/in-
das manuales tipo Auger o resinas y asfaltenos). dex.html, Universidad de
semimecánicas ("rusa" o Michigan; http://umbbd.
muestreadores de sedimen- Métodos microbiológicos ahc.umn.edu, Universidad
tos). Los procedimientos se- de Minnesota) todo lo re-
guirán mallados regulares, • A partir de las muestras re- ferente a los distintos géne-
en la medida de lo posible, cogidas, se llevarán a cabo ros y especies aislados en
para facilitar el tratamiento diluciones en agua marina nuestro trabajo.
estadístico y geoestadístico estéril y siembra en placas • La medida de la cinética de
de los datos. de distintos medios sólidos los procesos degradativos y
• Las muestras de sustratos (sintético, semisintético y evaluación inicial de la posi-
contaminados (arena, roca, complejo). De esta forma, ble producción de biosurfac-
fuel puro, suelo, agua etc.) podremos realizar recuen- tantes por las bacterias selec-
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ARTÍCULO
cionadas. Para analizar la ca- b) Si hubiera algún tipo de Valoración
pacidad degradativa de las duda o se requiriera certifi-
bacterias utilizaremos me- cación, el grupo que desa- Parece un lugar adecuado,
dios de cultivo sintéticos, en rrolla el proyecto ha cola- por su pequeño tamaño, para
los que la fuente de carbono borado anteriormente con efectuar un muestreo exhaus-
serán los diferentes residuos microbiólogos especializa- tivo y, por su moderada con-
del fuel obtenidos en los lu- dos en patogeneidad bac- taminación, para realizar en-
gares contaminados. teriana del Hospital Cen- sayos de biorremediación;
• El crecimiento bacteriano tral de Asturias, por lo además, el acceso de maqui-
se analizará espectrofoto- que se contaría con su apo- naria es complicado, por lo
métricamente mediante la yo para realizar las pruebas que otros métodos tendrían
medida de la densidad óp- que fueran necesarias. serios problemas. Por otra
tica a 660 nm. En paralelo, parte, el uso turístico del em-
se realizarán diluciones y Propuestas para cada plazamiento se nos ha sugeri-
siembra en placa, para ana- emplazamiento do reducido, por lo que no
lizar el número de viables. habría apreturas de tiempo
De esta forma se obtendrá Realizada una primera visita a de cara al verano.
una relación DO/número de la zona y teniendo en cuenta
viables para cada bacteria, las consideraciones del perso- Programa de trabajo
que relacionaremos a lo lar- nal que allí ha trabajado du-
go del crecimiento con la rante estos meses, se propo- a) Arenas. En un primer mo-
utilización del petroleo y/o nen las siguientes actuaciones. mento, se efectuará un
sus componentes como muestreo muy detallado
fuente de carbono. Playa de Arnela de Muxía (con una malla de 10 por
• Para medir el potencial bio- 10 metros) de la zona are-
surfactante o bioemulsio- Descripción nosa. La caracterización in
nante utilizaremos un ensa- situ se realizaría con los
yo que consiste en la medi- Se trata de una cala en forma equipos de medida directa
da del volumen ocupado de semicírculo compuesta por ya descritos y se estudiaría,
por la fase acuosa (medio sedimentos de todo tipo, aun- mediante sondas manua-
de cultivo libre de células) que fundamentalmente abun- les, el sedimento en pro-
en una mezcla con hidro- dan arenas y bolos de tamaño fundidad. También se to-
carburos (por ejemplo, die- medio. El acceso se realiza por marían muestras en el nú-
sel), utilizando como con- una pista "ad hoc" realizada mero necesario para la ca-
trol un volumen equivalen- con escoria suministrada por racterización química y mi-
te de agua. Ferroatlántico. La contami- crobiológica. En posterio-
• En el diseño de mezclas de nación se aprecia en las rocas res estancias, se verificarían
bacterias adecuadas para más alejadas del batir de la los resultados del muestreo
ensayos de bioaumenta- marea, en pequeños grumos en algunos puntos para te-
ción, se utilizarán los mi- aislados sobre la arena y, en ner así una idea clara de la
crorganismos aislados en ésta última, también en partí- variabilidad de la situación.
las playas y los que dispone culas finas que se entremez- En una siguiente fase se
el grupo solicitante, por clan con el grano mineral. plantearía un diseño de
trabajos previos.
• En el caso en el que se libe-
raran en el medio contami-
nado microorganismos
alóctonos, su posible carác-
ter patógeno se analizaría
previamente, mediante un
doble procedimiento: Coido de
a) La correcta identificación Cuño.
del microorganismo en el
laboratorio permitirá
contrastar su identidad
con la bibliografía y las
bases de datos disponi-
bles, con lo que se descar-
taría el carácter patóge-
no o algún otro proble-
ma, siempre antes de su
utilización.
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ARTÍCULO

experimentos con varias


pequeñas parcelas desti-
nadas a probar distintos
métodos de biorremedia-
ción. Las parcelas se dis- Praia Moreira.
pondrían en líneas parale-
las a partir de la zona in-
termareal, de modo que
pudiera evaluarse el efec-
to del lavado; probable-
mente se utilizarían fertili-
zantes de liberación lenta,
con un dispositivo de las-
tre o de fijación para que
no fueran arrastrados por
la marea. Se efectuaría un
control periódico a partir
de ese momento.
b) Rocas. Se realizará un la excepción de los que apare- Playa de Moreira
planteamiento similar al cen en la zona batida con ma-
que se presenta para la yor fuerza por el oleaje en ma- Descripción
playa de Moreira (ver más reas altas; no obstante, en esta
adelante), aunque, tenien- zona se observan grumos ais- El acceso se realiza por carrete-
do en cuenta la pequeña lados de fuel. ra y existe un importante espa-
cantidad de estas, tendrá cio, aparentemente no conta-
una complejidad menor. Valoración minado, en la parte de atrás de
Los resultados serán útiles la playa. Se trata de un empla-
para contrastar con los de Las condiciones observadas zamiento bastante abierto al
Moreira. no parecen favorables a la im- mar, en el que aparece una
plementación de tratamien- gran diversidad de ambientes
Plazos tos de biorremediación (mu- contaminados: arena fina apa-
cho fuel, mucho oleaje, au- rentemente limpia y batida por
Es imposible avanzar plazos sencia de variedad de sedi- las olas, sedimento más grueso
precisos, aunque sí disposi- mentos, no hay aportes de que "rellena" el fondo de la
ción de los primeros trabajos. materia orgánica). En conse- playa, amplias zonas de bolos y
En este sentido, durante el cuencia, se sugiere que se de roca expuesta bastante con-
mes de abril se efectuaría el continúe la limpieza física de taminada, un pequeño cauce
muestreo y se tomarían las la playa mediante hidrolim- de agua dulce que atraviesa la
decisiones, con la adquisición pieza o cualquier otro méto- zona contaminada, etc. Las ob-
de productos o la elaboración do; tras esa fase, se podría re- servaciones allí efectuadas, así
de "biorremedios" en el labo- evaluar la situación de la pla- como las primeras muestras re-
ratorio, para parcelar en ma- ya y, entonces sí, aplicar técni- cogidas, sugieren la presencia
yo, y que el proceso de bio- cas de biorremediación, con la de actividad microbiana.
rremediación coincida con la experiencia acumulada en los
época más favorable: tempe- otros dos emplazamientos. Valoración
raturas altas, con la consi-
guiente fluidificación del No obstante todo lo anterior, Aunque algunas zonas de la
fuel, menores precipitaciones sí se sugiere la "preservación" playa (las rocas más mancha-
y alteraciones de las mareas. en el estado actual de la zona das) pudieran requerir la uti-
de suelo contaminado que se lización de medios físicos de
Coido de Cuño encuentra tras la playa y que limpieza, el resto puede con-
fue afectado por el fuel, siderarse un excelente labora-
Descripción puesto que constituye un im- torio para la puesta en prácti-
portante reservorio de cepas ca de ensayos de biorreme-
Es una playa bastante abierta adaptadas, que pueden ser diación, tanto en arenas (si es
y con una franja de suelo en de utilidad. De otro modo, que se demuestran contami-
la parte de atrás. El acceso se también esta zona de suelo y nadas), como en roca.
realiza fácilmente en vehículos los accesos a la playa podrían
adecuados. La playa se compo- ser descontaminados con cier- Programa de trabajo
ne de bolos de medio y gran ta facilidad con un "landfar-
tamaño que se encuentran ming", una vez finalizado el a) Arenas. En un primer mo-
muy afectados por el fuel, con resto de las labores. mento, se efectuaría un
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ARTÍCULO
muestreo muy detallado de realizar experimentos Posibilidades de actuación
(con una malla metro a me- de laboratorio previos, se adicionales y necesidades de
tro) de la zona arenosa de puede parcelar y aplicar al- cubrir
las mismas características guno de los productos bio-
que el de la primera de las estimulantes disponibles en La financiación disponible
playas consideradas. La ca- el mercado (por ejemplo el (27.000 euros) permite afron-
racterización in situ se reali- Inipol EAP22 que tan bue- tar muy ajustadamente el tra-
zaría con los equipos de me- nos resultados ofreció en bajo propuesto, y la aparición
dida y se estudiaría median- Alaska); sí es necesario un de imprevistos puede provo-
te sondas manuales (puede adecuado diseño de los ex- car serios problemas. Una si-
tener interés realizar una perimentos y un seguimien- tuación más holgada se pre-
calicata en la zona de roca to continuado, así como tende conseguir mediante so-
para estudiar el lecho). Tam- demostrar la existencia de licitud de proyectos en convo-
bién se tomarían muestras bacterias en las rocas afec- catorias oficiales, pero de mo-
en el número necesario pa- tadas. Simultáneamente, se mento estas no se han produ-
ra la caracterización química prepararía en el laborato- cido. De conseguirse financia-
y microbiológica. Finalmen- rio algún otro tipo de pro- ción adicional o colaboración
te, en posteriores estancias ducto bioestimulante que extensa por parte de los orga-
se verificarían los resultados pudiera ser de utilidad. nismos competentes, se plan-
del muestreo en algunos Si se realizara algún expe- tearían las siguientes actuacio-
puntos, para tener así una rimento de bioaumenta- nes y mejoras adicionales:
idea clara de la variabilidad ción, sería en una fase pos-
de la situación. terior una vez aisladas, • Se dispondría una persona
Si, según los resultados ob- identificadas y demostrada fija en la zona que controla-
tenidos, se considera nece- la inocuidad de bacterias ra los procesos y que reduje-
sario, en la siguiente fase aisladas "in situ", o bien, ra el número de viajes a la
se plantearía un diseño de en todo caso, de algunas zona (necesariamente, de
experimentos con varias de la colección del grupo. frecuencia semanal, en al-
pequeñas parcelas destina- gunas fases).
das a probar distintos mé- Plazos • Se podrían adquirir equipos
todos de biorremediación, adicionales a los que se dis-
al modo en que se trabaja- Si los productos necesarios se pone para complementar y
rá en la cala de Arnela. consiguen con rapidez y se mejorar el trabajo (Petro-
b) Rocas. La diversidad de ti- efectúa una aplicación inicial Flag para medida de hidro-
po de rocas en cuanto a ta- en algunas parcelas en abril (en carburos ‘in situ’ y respiró-
maño, orientación respec- roca), podría haber resultados metro para controlar la acti-
to al mar, grado de afec- –positivos o negativos, y en to- vidad bacteriana).
ción, contacto con agua do caso visibles a simple vista- a • Se podría realizar una cola-
dulce o salada y/o sedimen- finales de mayo. En función de boración con investigadores
tos más finos hacen muy estos primeros resultados y de británicos y alemanes de
adecuada la zona sur de la la valoración de la situación de amplia experiencia, con los
playa para efectuar ensayos las arenas se plantearía el resto que ya se tiene contacto,
de todo tipo. Sin necesidad de los trabajos. para la aplicación de pro-
Praia Moreira. ductos biosurfactantes.
• Se podría abordar el estudio
de la evolución del fuel depo-
sitado en el fondo marino
cercano a la costa, para lo
que ya se han establecido
contactos con Océano Alfa,
una organización de bucea-
dores profesionales que ha
estado trabajando en la zona
(http://www.oceanoalfa.com).
• Los aspectos de valoración
de riesgos, dinámica de las
playas y, en general, todo el
seguimiento geoquímico y
monitorización se podrían
realizar con mucha mayor
holgura, disponiendo de
personal fijo en la zona.
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