PRUEVA DE PATOGENICIDAD DEL HONGO Fusarium Oxysporum EN

TUBERCULOS DE PAPA (Solanum tuberosum L.) VARIEDAD PARDO PASTUSA.

Fonseca, Erika; Rodelo, María José; Martínez, Wilson.

Semestre 2018-1
Fitopatología – Profesor: Ing. Mónica Jovanna Patiño Pacheco
Programa de Ingeniería Agronómica.

INTRODUCCION

La papa (Solanum tuberosum L.) es considerada el tercer alimento de mayor importancia a

nivel mundial (Visser et al., 2009). En el año 2006, Colombia fue catalogado como el tercer
productor de papa en América Latina (15 millones de ton anuales) y el vigésimo a nivel
mundial (CEVIPAPA, 2008). La variedad pastusa presenta porte de planta alto, con follaje
verde ligeramente claro, moderada floración y alta androesterilidad. Presenta producción de
tubérculo uniforme en alta proporción en categoría primera (diámetro > 7 cm). Tiene
excelente calidad culinaria, es versatil para diferentes platos (caldo, sopa, cocida o salada,
sudada, etc.) y es relativamente tardía (165 días, 2600 msnm).

Su potencial de rendimiento en condiciones óptimas de cultivo es superior a 45 t/ha,

periodo de reposo de 2 meses (15°C y 75% H.R.) y es susceptible a PYVV. Se cultiva en el
departamento de Nariño (región donde fue registrada inicialmente) y en las zonas altas de
los departamentos de Cundinamarca y Boyacá (principal zona productora del país). Esta
variedad ha reemplazado en alta proporción a la principal variedad tradicional del país
(Parda Pastusa). Información sobre fenología y aspectos de fisiología de esta variedad se
pueden consultar en Segura et. al (2006) y Ñústez et. al (2009).

Sin embargo, los niveles de producción pueden bajar considerablemente debido a la presión
de factores bióticos (plagas y enfermedades) y/o abióticos (adversidades del
medioambiente) (Saladín, 1996).

Entre los principales agentes causales de enfermedades, se encuentran los géneros Fusarium
y Rhizoctonia; enfermedades que se encuentran ampliamente distribuidas en casi todo el
mundo, ocasionando pérdidas considerables al disminuir las poblaciones, el crecimiento y
la producción de las plantas infectadas (Agrios, 1988).

EL hongo Fusarium oxysporum habita en el suelo y no necesita de heridas para entrar a la

planta. Puede hacerlo por las raíces o en la unión de la papa madre con el tallo cuando
aquélla se pudre. Luego invade toda la planta y posteriormente infecta los tubérculos. De
allí, la infección pasa al suelo contaminándolo y el hongo puede vivir en restos vegetales en
descomposición luego que los suelos se han infectado los daños se van haciendo
progresivamente mayores en las siguientes plantaciones.

Para identificar un organismo (hongo o bacteria) como agente causal de una enfermedad, es
necesario aislarlo en un cultivo puro e inocularlo en la planta o fruto sano para determinar
su patogenicidad. La prueba de patogenicidad consiste en inocular plantas sanas o sus
frutos con los organismos aislados en cultivos puros del material enfermo proveniente del
campo, con el objeto de ratificarlos o descartarlos como agentes causales de una
enfermedad (Teresa., A. 1997)

OBJETIVO

Identificar las técnica utilizada (prueba de patogenicidad) en el diagnóstico de

enfermedades causadas por el hongo Fusarium Oxysporum en tuberculos de papa (Solanum
tuberosum L.) variedad pardo pastusa.

MATERIALES Y METODOS

La práctica se realizó en los laboratorios de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de

Colombia (UPTC) ubicada a 5°32′25″ norte y 73°21′41″ oeste, a una altura de 2.690 msnm,
bajo condiciones de laboratorio.

El material vegetal consto de cuatro papas variedad pardo pastusa, las cuales fueron
obtenidas y escogidas en un mercado de frutas cercano a la universidad; verificando que
estuvieran sanas.

Materiales

 Medios con cultivos puros de bacterias u hongos.

 Hipoclorito de Sodio al 10%
 Agujas estériles para insulina (2)
 Agua destilada estéril
 Tubos de ensayo
 Cajas Petri con medios de cultivo correspondiente
 Plántulas o frutos sanos de donde se realizó el aislamiento.
 Bisturís
 Toallas de papel estéril
 Cajas plásticas herméticas grandes
 Pinzas

Preparación de la suspensión.

La suspensión de bacterias y de hongos debe ser preparada con agua destilada estéril, es
recomendado agitar los tubos vigorosamente durante 5 minutos. La inoculación debe
realizarse muy rápido menos de dos horas la suspensión debe ajustarse en una
concentración entre 106 y 106 bacterias/ml. Para hongos 104 y 105 hongos/ml. Una
concentración impide el estableciemito de bacerial y hongos.

Aislamiento del Hongo Puro

recorte toalla
de papel, dos como 2 Colocarlos al
ASÉPTICAMEN colóquelo en 3PORTA base y un lado de los
TE ultimo
CUBREO cubre
el fondo de OBJETOS
una caja de atravezado. BJETOS. objetos.
Petri.

Se corto en Con aguja

SELLAR Esterilizacion cuadrados un flameada, se
INOCUL
LA CAJA de PDA bloque de inocula el
materiales. medio PDA ACION medio PDA
PETRI
de 1 x 1 cm con el hongo.

Procedimiento Inoculación de hospederos sanos.

Disponga de un cultivo Realice una

Disponga CULTIVO puro con suficiente DESINFECCI
desinfección
MATERIAL tuberculos, DEL cantidad para realizar ON DEL
una suspensión
superficial
VEGETAL sin heridas PATOGEN MATERIAL
consistente para causar con jabón
superficiales. O PURO VEGETAL
una enfermedad.. antibacterial

con la jeringa
Realice un INOCUL con una
INMERCI en hipoclorito triple lavado concentració
ACION
ON Y de sodio por LAVADO con agua n de la
un 1 minuto destilada DEL suspensión
LAVADO
estéril. HONGO sobre
tuberculos.
 Coloque los
INOCUL tuberculos en
MONTEGE En el fondo de la caja colocar servilletas
ACION las cajas
EN CAJAS estériles y humedecer con agua destilada
DEL plásticas
PLASTICAS estéril para favorecer la infección.
HONGO previamente
desinfectadas

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Teniendo el cultivo puro del hongo re realizo la prueba de patogenicidad donde se cumplió
con los cuatro postulados de Robert Koch en 1882, los cuales fueron usados para verificar
la hipótesis de que el patógeno aislado (Fusarium oxysporum) efectivamente es el
causante de la enfermedad de la pudrición húmeda en tubérculos de papa pardo pastusa

Imagen 1: Cultivo puro Fusarium oxysporum Imagen 2: Pudrición húmeda de la papa

Luego de varios días (4) de haber realizado el inoculo del patógeno (Fusarium oxysporum)
en el hospedero que fueron los tubérculos de papa (Solanum tuberosum L.) variedad pardo
pastusa de la cual también se realizó el aislamiento del hongo; se logró observar los
siguientes síntomas:

Síntomas Macroscópicos del Tejido Infectado

 Color del tejido: Marrón oscuro

 Forma y tamaño de la lesión: Prácticamente todo el tubérculo fue infectado y puesto
en descomposición a causa del fitipatogeno.
 Olor: Era fuerte, desagradable y podía sentirse a una distancia considerable.
 Consistencia del tejido: El tejido presentó un aspecto húmedo y suave
correspondiente a la pudrición característica que produce el hongo en su hospedero.

Estos síntomas concuerdan con lo manifestado según C. Moscardi y S. Garcia (1975) en su

artículo; que efectuando cortes transversales en el tubérculo, a partir del punto de inserción
del estolón, se observa una coloración amarronada en los vasos. Al principio la coloración
es de un marrón claro, haciéndose más oscura a medida que la infección progresa.
A igual (Narro, Agronomía, & Parasitología, 2007) mencionan que, Fusarium oxysporum
Causa una variedad de problemas a la papa tales como marchitamientos vasculares,
pudrición de tubérculos, raíz y parte inferior de los tallos.

Signos del Patógeno

Presentó micelio aéreo de color blanco sobre el tejido de los tubérculos, así como también
la presencia de microconidios; lo que concuerda con lo hallado por (Garcés de Granada,
Martha, Bautista, & Valencia, 2001) en donde manifiestan que morfología de las colonias
es muy variable y puede presentar dos tipos: una de tipo micelial caracterizada por la
producción de abundante micelio aéreo, algodonoso, con una coloración variable, de blanco
a rosado durazno, pero usualmente con un tinte púrpura o violeta más intenso en la
superficie del agar y pocas microconidias (Booth, 1970) y una de tipo pionotal con la
formación de poco o ningún micelio aéreo y abundantes microconidias.

Imagen 3: Papas sanas. Fuente propia Imagen 4: Papas inoculadas con Fusarium
Oxysporum. Fuente propia

CONCLUCIONES

Se logró identificar los pasos para la realización de la prueba de patogenicidad del hongo
Fusarium Oxysporum en tubérculos de papa (Solanum tuberosum L.) variedad pardo
pastusa.

Se reconocieron los síntomas y signos propios de este hongo en los tubérculos de papa
pastusa; así como también las comparaciones entre lo observado experimentalmente y lo
hallado en los textos teóricos.
BIBLIOGRAFIA

 AGRIOS, G.; Fitopatología. 2da. Edición. Editorial Limusa. México, D.F.

 Ames Teres de Icochea, Enfermedades Fungosas y Bacterianas de Raices y
Tubérculos Andinos. 1997. Lima, Peru: Centro Internacional de la Papa. Pag 9.

 C. Moscardi y S. Garcia (1975) C. Moscardi y S. Garcia (1975)

 CEVIPAPA. 2008. Año internacional de la papa Diario económico Portafolio.
Centro virtual de investigación de la cadena agroalimentaria de la papa, Bogotá.
 SALADIN, G.F. 1996. INFORME Programa Nacional de Leguminosas. SEA. Sto.
Dgo. Rep. Dom.
 Garcés de Granada, E., Martha, O. D. A., Bautista, G. R., & Valencia, H. (2001).
Fusarium oxysporum El hongo que nos falta conocer. Acta Biológica Colombiana,
6(1), 7–26. https://doi.org/10.1094/PHYTO.2001.91.5.449
 Visser, R. G. F., Bachem, C. W. B., de Boer, J. M., Bryan, G. J., Chakrabati, S. K.,
Feingold, S., Gromadka, R., van Ham, R. C. H. J., Huang, S., Jacobs, J. M. E.,
Kuznetsov, B., de Melo, P. E., Milbourne, D., Orjeda, G., Sagredo, B. and Tang, X.
2009. Sequencing the potato genome: Outline and first results to come from the
elucidation of the sequence of the world’s third most important food crop. American
Journal of Potato Research DOI 10.1007/s12230-009-9097-8.