Universidad Nacional de Colombia- Sede Palmira

Facultad de ingeniería y administración FIA

Microbiología de procesos ambientales
Palmira 2017-1

Tema: Determinación de las características actuales de un lodo anaerobio granular,

proveniente de una planta de tratamiento de aguas residuales domésticas que trata
agua residual domésticas, a través de dos pruebas (AME Volumétrica e Hidrolítica)
y una observación macro y microscópica para la determinación de microorganismos
presentes (protozoos, rotíferos y nematodos) para determinar la calidad del lodo y
su influencia con la calidad del efluente tratado.

Esquema Ensayo

Introducción
Contextualización : ¿Qué es la inmovilización de microorganismos, su importancia,
aplicaciones y sistemas de tratamiento para la degradación de contaminantes?

Desarrollo: En el ensayo se presentarán los resultados de 3 pruebas utilizadas para

degradar contaminantes en el para diferente medios de cultivo y medios de
soporte.

Tesis:

Objetivo del ensayo:

Mediante el desarrollo del documento, como resultado final, se presentarán

algunas soluciones de carácter holística e integral, que el ingeniero ambiental
podrá implementar en la optimización de los procesos de degradación de
contaminantes mediante inmovilización de microorganismos.

A su vez la investigación busca generar estándares que permitan a los

investigadores generar una serie de pautas para evaluar de manera óptima la
respuesta de la variación de los parámetros que influyen en la producción de
metano AMEy de esta forma determinar los parámetros que tendrán un efecto
relevante en la salud y eficiencia de los consorcios microbianos asociados a lodos
anaerobio granulares presentes en procesos de tratamiento de aguas residuales
domésticas e industriales. Lo anterior posee un alto valor agregado en la evaluación
de los procesos pues dichas modificaciones y adaptaciones a los procesos
permiten mejorar: rendimientos, tasas de descontaminación y producción de
metano. La producción de este último tiene un alto valor agregado para la industria,
ya que influye en la presión sobre los combustibles fósiles, lo cual va encaminado a
las políticas internacionales de alternativas para la obtención de productos con
relevancia energética ambiental para la sustitución de combustibles.

Cuerpo:

Primer Párrafo: Prueba de Actividad metanogénica Específica (AME)

Volumétrica
¿En qué consiste dicha prueba y su importancia ?
Resultados obtenidos en la Primera prueba con sus respectivo análisis
Segundo Párrafo:Prueba de Actividad metanogénica específica Hidrolítica
¿En qué consiste dicha prueba y su importancia ?
Resultados obtenidos en la Segunda prueba con sus respectivo análisis
Tercer párrafo : Caracterización Microscópica de los Microorganismos
encontrados en el lodo anaerobio granular
¿En qué consiste dicha prueba y su importancia ?
Resultados obtenidos en la Tercera Prueba prueba con sus respectivo análisis

En el desarrollo de las pruebas objeto del documento se presentan algunas

variaciones en las metodologías de cuantificación de la producción de metano
presente en el biogás; se evaluarán diferentes metodologías para la cuantificación
volumétrica y manométrica del metano producido por las arqueas metanogénicas,
en donde se utilizarán los siguientes métodos

o Volumétrico con lavado de la corriente principal de gases con soluciones

alcalinas con un pH superiores o iguales a 12, debido a que se desea
separar el CO2, el cual no posee un valor comercial en la industria y
no determina la salud del sistema.
● Volumétrico con desplazamiento de columna de agua, para determinar
el volumen total de biogás producido por el sistema, en donde
podremos encontrar gases como el CH4, CO2, H2S y algunos gases
traza despreciables en el proceso.
o Manométrico determinado con los sistemas de medición OXITOP ® ,
este procedimiento junto al volumétrico mediante cromatografía es
poco viable debido a los costos de compra y mantenimiento de los
equipos empleados para tal fin…. Además, presenta fluctuaciones
considerables ya que no considera la solubilidad del metano (35%
Aproximadamente a condiciones normales 273,15 K y 1 ATM).
Se hace necesario la cuantificación de las diferentes bacterias que intervienen en el
proceso de digestión anaerobia (Hidrolíticas, acidogénicas, acetogénicas y
metanogénicas), para dar una aproximación de mayor precisión, pero debido a la
disponibilidad de recursos, no será posible desarrollarlo; además de ello se estima
que las proporciones en poblaciones del consorcio microbiano serán un factor clave
para determinar la salud real del sistema. Pero para superar este inconveniente se
recurre a la cuantificación del biogás producido por el sistema, lo que mostrará a
grandes rasgos las condiciones actuales del sistema; y conociendo las
características físico-químicas del agua de alimentación (pH, concentración de micro
y macronutrientes, SST, DBO, DQO, oxígeno disuelto), y las variables ambientales
del sitio ( pH, Humedad relativa, radiación solar, temperatura), Se podrá estimar el
comportamiento de este lodo a escala de laboratorio.

Conclusión: (Esperadas)

1. Mediante el desarrollo de las pruebas se espera corroborar cuáles son las

variables que influyen en la calidad del lodo anaerobio granular.
2. Se espera determinar en qué medida las variables externas e internas
afectan la calidad de los lodos, y cómo esta calidad se relaciona con la
producción de biogás.
3. además se espera concluir con la diferencia de las dos pruebas (AME
volumétrica e hidrolítica) cual es la producción volumétrica de metano, el cual
es el producto de alto valor agregado que se espera obtener del tratamiento
de las aguas residuales domésticas, las cuales tienen la propiedad de ser
altamente biodegradables debido a su baja presencia de sustancias tóxicas y
recalcitrantes para los sistemas de digestión anaerobio y su balance ideal
para el desarrollo óptimo de los lodos anaerobios granulares
4. además se espera concluir cuales son los tiempos de retención hidráulica
requeridos para que el sistema funcione de manera más eficiente, para lo
cual se realizarán varias réplicas del reactor

Recomendaciones: (Esperadas)
Recomendaciones generadas a partir del análisis de los resultados obtenidos
mediante la realización de las pruebas de caracterización del lodo granular
anaerobio; con el objetivo de optimizar los procesos de depuración de aguas
residuales tratadas a través de reactores UASB, en el tratamiento de aguas
residuales domésticas del municipio de Guasca- Cundinamarca. Para que de esta
manera el sistema cumpla con los requerimientos referentes a calidad del recurso
hídrico, estipulados en el decreto 0631 del 2015, decreto regulador de las variables
físico-químicas con las que el sistema debe entregar el agua producto de
tratamiento a un cuerpo receptor externo con el objetivo que se mantenga la salud
de los cuerpos de agua de incidencia en los procesos.
Tesis:
La unión de dichas Pruebas nos brindara herramientas necesarias para
conocer las condiciones en las que se encuentra el sistema y las variables
que intervienen en su correcto funcionamiento.

Objetivo
A partir de lo anterior se espera que nosotros como ingenieros ambientales
propongamos soluciones holísticas e integrales para la optimización de los
procesos de depuración de aguas residuales domésticas e industriales,
provenientes del municipio de Guasca- Cundinamarca.

Justificación Motivación:

● A partir de este trabajo conoceremos los procedimientos que requieren los

profesionales de la ingeniería ambiental, para determinar las condiciones
actuales de los sistemas de tratamiento de aguas residuales a través de
digestión anaerobia mediante los reactores UASB
● El desarrollo de las pruebas de caracterización permitirá conocer las
variables determinantes de la calidad de los sistemas de lodos, y el
conocimiento de estas variables permitirá que el ingeniero ambiental
proponga soluciones holísticas e integrales para la optimización de los
procesos de depuración de aguas residuales domésticas e industriales,
provenientes del municipio de Guasca- Cundinamarca.
● Permitirá reconocer las acciones a desarrollar en casos de variación de la
concentración de los compuestos presentes en las Aguas Residuales o
cambios en el tipo de agua a tratar, de manera que se puedan encontrar las
condiciones necesarias para desarrollar un adecuado tratamiento de distintos
tipos de aguas residuales.

nes del consorcio microbiano serán un factor clave para determinar la salud real del
sistema. Pero para superar este inconveniente se recurre a la cuantificación del
biogás producido por el sistema, lo que mostrará a grandes rasgos las condiciones
actuales del sistema; y conociendo las características físico-químicas del agua de
alimentación (pH, concentración de micro y macronutrientes, SST, DBO, DQO,
oxígeno disuelto), y las variables ambientales del sitio ( pH, Humedad relativa,
radiación solar, temperatura).

Tres Pruebas para determinar las condiciones actuales del lodo anaerobio
granular proveniente de una planta de tratamiento de aguas residuales
domésticas a través de un reactor UASB. En las que se encuentran las
siguientes pruebas

1. Se hace necesario la cuantificación de las diferentes bacterias que

intervienen en el proceso de digestión anaerobia (Hidrolíticas, acidogénicas,
 acetogénicas y metanogénicas), para dar una aproximación de mayor
precisión, pero debido a la disponibilidad de recursos, no será posible
desarrollarlo; además de ello se estima que las proporciones en poblaciones
del consorcio microbiano serán un factor clave para determinar la salud real
del sistema. Pero para superar este inconveniente se recurre a la
cuantificación del biogás producido por el sistema, lo que mostrará a grandes
rasgos las condiciones actuales del sistema; y conociendo las características
físico-químicas del agua de alimentación (pH, concentración de micro y
macronutrientes, SST, DBO, DQO, oxígeno disuelto), y las variables
ambientales del sitio ( pH, Humedad relativa, radiación solar, temperatura).

Tesis:
La unión de dichas Pruebas nos brindara herramientas necesarias para
conocer las condiciones en las que se encuentra el sistema y las variables
que intervienen en su correcto funcionamiento.

Objetivo
A partir de lo anterior se espera que nosotros como ingenieros ambientales
propongamos soluciones holísticas e integrales para la optimización de los
procesos de depuración de aguas residuales domésticas e industriales,
provenientes del municipio de Guasca- Cundinamarca.

Justificación Motivación:

● A partir de este trabajo conoceremos los procedimientos que requieren los

profesionales de la ingeniería ambiental, para determinar las condiciones
actuales de los sistemas de tratamiento de aguas residuales a través de
digestión anaerobia mediante los reactores UASB
● El desarrollo de las pruebas de caracterización permitirá conocer las
variables determinantes de la calidad de los sistemas de lodos, y el
conocimiento de estas variables permitirá que el ingeniero ambiental
proponga soluciones holísticas e integrales para la optimización de los
procesos de depuración de aguas residuales domésticas e industriales,
provenientes del municipio de Guasca- Cundinamarca.
● Permitirá reconocer las acciones a desarrollar en casos de variación de la
concentración de los compuestos presentes en las Aguas Residuales o
cambios en el tipo de agua a tratar, de manera que se puedan encontrar las
condiciones necesarias para desarrollar un adecuado tratamiento de distintos
tipos de aguas residuales.

Antecedentes del tema (A través review).

Artículo: Influence of incubation conditions on the specific
methanogenic activity test.[4]

En el actual artículo se estima la influencia y relación de diferentes parámetros en la

evaluación de la actividad metanogénica específica de un lodo anaerobio granular
de un reactor UASB con volumen de 15 m 3 que se encuentra en el centro de
investigación de sanitización y entrenamiento de la Universidade Federal de Minas
Gerais y Companhia de Saneamento de Minas Gerais. Este reactor es alimentado
con agua residual doméstica y es operado con un tiempo de retención hidráulica de
aproximadamente 9 horas (TRH = 9 h).

En el documento analizado se desea determinar la actividad metanogénica

específica, desde ahora AME. Para dicha evaluación se tuvieron en cuenta los
siguientes parámetros, que servirán para seleccionar las condiciones óptimas para
maximizar la obtención de metano a partir de un sustrato con el inóculo.

● Relación sustrato / inóculo (F/M), a partir de la experimentación basada en la

planificación factorial se determinó que aquellas relaciones de 0.125 a 0.750
gDQO/SVT presentan los valores más altos de AME. Relación altamente
relevante, debido a que en reactores a escalas reales será el parámetro que
permitirá a los operarios, determinar los volúmenes de purga para mantener
esta relación en sus rangos óptimos.
Con el objetivo de garantizar esta condición se hace necesario realizar una
caracterización fisicoquímica del afluente del reactor para determinar la carga
orgánica representada como DQO que entra al reactor; para así determinar
los volúmenes de biomasa que se deben mantener dentro del reactor, que a
su vez garanticen las condiciones idóneas anteriormente postuladas; que
finalmente determinarán los volúmenes de biogás producido.

Adicionalmente, gracias a software de procesamiento de información con el

que se realizaron correlaciones de las diferentes variables mediante el P-
value, se demostró que existe una fuerte relación entre el F/M y el volumen
de la fase gaseosa o “Headspace”, representado como el volumen efectivo
de un reactor menos el volumen total del mismo. E.g 90% de volumen
efectivo es el que presenta los mejores valores de AME.

● Modo de agitación (Axial, orbital, Manual), En los resultados no se

observaron diferencias significativas entre los modos de agitación orbital y
manual (Desarrollados a una RPM de 200 y 360), ya que presentan AME
similares. Pero se hace de especial relevancia conocer que la agitación axial
en el momento que se posean reducidos volúmenes de microorganismo
generan efectos adversos al contacto con el sustrato, debido a que se
 presentan episodios de desagregación del consorcio, perdiendo así la
capacidad de soportar choques de concentraciones y caudales en los
reactores a escala real.

● Tipo de sustrato (Glucosa, acetato, Formato, Aguas residuales), el cual será

crucial al momento de evaluar las condiciones operativas actuales de un
reactor en operación, debido a que los sustratos seleccionados son selectivos
con las comunidades microbianas presentes en los lodos anaerobios

Como en el caso de la glucosa para los microorganismos acidogénicos, que

posibilita omitir la reacción de hidrólisis que dificulta el acceso a el sustrato,
por otro lado, el acetato y formato será utilizado exclusivamente por las
arqueas metanogénicas; y por último el agua residual cruda que será
degradada por todo el consorcio debido a sus condiciones heterogéneas. Lo
anterior, garantiza la evaluación de los diferentes MO que componen el lodo
anaerobio, sirviendo así de herramienta para determinar la calidad y salud de
los lodos y sus diferentes componentes.

● Concentración del sustrato. Esta variable del proceso toma especial

relevancia debido a que se puede presentar inhibición por altas
concentraciones de sustratos, como en el caso del acetato, el cual a
concentración de 10 g/l genera inhibición de las arqueas metanógenas;
siendo esto un efecto adverso para el desarrollo del consorcio microbiano, ya
que si la inhibición es significativamente grande, puede terminar en la pérdida
del lodo, lo que acarrea episodios de contaminación e inversiones
económicas importantes. Esta condición de inhibición se presenta también en
las aguas residuales domésticas con referente a su concentración de carga
orgánica o presencia de sustancias tóxicas o recalcitrantes ( Metales
pesados, organoclorados, aminas, etc.), que producen eficiencias bajas en
remoción de DQO (Carga orgánica), pudiendo incurrir en episodios de
contaminación, acarreando de esta manera sanciones legales con las
respectivas entidades de control territoriales.

Como valor de referencia, el autor concluye que la concentración ideal de

acetato para la prueba de AME se encuentra en el rango de 0.5 a 3.0 gDQO/l
valores más altos se encuentran asociados a inhibición de los
microorganismo metanogénico.

● Efectos de la temperatura (35-30-20 y 15°C) en la producción de metano con

referencia al tiempo de retención hidráulica (TRH), se observó que el tiempo
de latencia se ve seriamente afectado por la variación en los valores de la
temperatura, debido a que a altas temperaturas (35°C) la producción de
 metano se desarrolló casi que inmediatamente, en cambio con temperaturas
más bajas se obtenían tiempo para la producción de metano de 1 hasta 6
días con temperaturas de 30 y 15°C respectivamente.
Este parámetro tiene una gran influencia a la hora de seleccionar los
procesos y tecnologías de depuración de aguas residuales, ya que
determinara la velocidad con la cual el reactor puede consumir la carga
orgánica del afluente, y a su vez determina los volúmenes y TRH necesarios
para cumplir con los requerimientos propuestos por el diseñador.
Figura 1. Influencia de la temperatura en la AME

● Influencia del volumen de la fase gaseosa: El espacio de cabeza (10-30-50%)

se encuentra relacionado estrechamente con la relación F/M, en la cual
tendrá un efecto inversamente proporcional en la producción de metano.
Debido a que entre un mayor espacio de cabeza (manteniendo como
constante el volumen de los reactores (Botellas), habrá menos espacio para
el contacto entre la biomasa y el sustrato (Menos F/M).
Fig 2. Influencia del volúmen de la fase gaseosa “Headspace” en la AME

● Efectos de las condiciones nutricionales presentes en el sustrato; (Levaduras

“Presentes o Ausentes”, glucosa, acetato y formato. debido a que se espera
que en los sustratos que serán degradados se presenten las condiciones
idóneas para el adecuado crecimiento y desarrollo del consorcio. Por lo tanto
en la investigación se evaluó la presencia o no de levaduras las cuales tienen
influencia en la disponibilidad de vitaminas producto de su actividad
metabólica. Además de las concentraciones y proporciones idóneas de los
macro y micro nutrientes que garantizan lo anteriormente mencionado.

● Variaciones en las metodologías de cuantificación de la producción de

metano presente en el biogás; se evaluaron diferentes metodologías para la
cuantificación volumétrica y manométrica del metano producido por las
arqueas metanogénicas, en donde se utilizaron los siguientes métodos

o Volumétrico con determinación por cromatografía de gases; esta opción

se convierte de “difícil ejecución” debido a que requiere equipo y
mantenimientos sofisticados, pero se convierte en una opción en el
caso de presentar afluentes industriales con condiciones de
composición desconocidas, las cuales se podrán predecir por medio
de esta metodología
o Volumétrico con lavado de la corriente principal de gases con soluciones
alcalinas con un pH superiores o iguales a 12, debido a que se desea
separar el CO2, el cual no posee un valor comercial en la industria y
no determina la salud del sistema.
o Manométrico determinado con los sistemas de medición OXITOP ® ,
este procedimiento junto al volumétrico mediante cromatografía es
poco viable debido a los costos de compra y mantenimiento de los
equipos empleados para tal fin…. Además, presenta fluctuaciones
considerables ya que no considera la solubilidad del metano (35%
Aproximadamente a condiciones normales 273,15 K y 1 ATM).