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Puede ser realizado en una hoja o una Puede ser realizado solamente en
olumna una olumna
Puede ser utilizado para separar cualquier Puede ser aplicado en la separación
pasta soluble, e.g aminoácidos, proteínas, de pastas volátiles y de mezclas
drogas, ácidos nucléicos, lípidos, gaseosas
antioxidantes, hidratos de carbono, y
polímeros naturales y artificiales
Realizado Generalmente en las pastas tan Realizado en substancias inestables
sensibles al calor de la temperatura más altas de las temperaturas pudo
ambiente puede ser analizado con conseguir tan térmicamente
seguridad usando la técnica desnaturalizado
aplicaciones principales: técnica de separación para los materiales menos volátiles e ionicos :
análisis cuantitativo de multicomponentes.
Fenómeno molecular: reparto entre solución liquida y un substracto
Ventajas del análisis cuantitativo: aplicación amplia a los materiales menos volátiles , análisis
de multicomponentes .
Muestra promedio deseable: 10mg
Limitaciones del método: se tarda en desarrollar el método
Un aparato moderno de HPLC se equipa con uno o más recipientes de vidrio o de acero inoxidable,
cada uno de los cuales contiene unos 500 mL de un disolvente. Los recipientes a menudo se
equipan con un sistema para eliminar los gases disueltos -en general oxígeno y nitrógeno- que
interfieren formando burbujas en los sistemas de detección.
Una separación que utiliza un solo disolvente de composición constante se denomina una elución
isocrática.
hay bucles intercambiables que permiten la elección de tamaños de muestra desde 5 a 500 µL.
Con bucles de este tipo se puede introducir la muestra a presiones de hasta 500 kg/cm2 con una
precisión relativa de unas décimas por ciento. También existen válvulas de inyección de
micromuestras, con bucles con volúmenes de 0,5 a 5 µL.
16. cuales son las características generales de una columna en HPLC y gases
Las columnas para cromatografía de líquidos se construyen de ordinario con tubo de acero
inoxidable de diámetro interno uniforme. Cientos de columnas empaquetadas que difieren en
tamaño y relleno
se emplean dos tipos de columnas: las empacadas o de relleno y las tubulares
abiertas o capilares. La longitud de estas columnas es variable, de 2 a 60 metros, y están
construidas de acero inoxidable, vidrio, sílice fundida o teflón
Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un
papel. Las principales técnicas son:
Cromatografía en papel
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el
fluido empleado como fase móvil se distinguen:
Cromatografía de líquidos
Cromatografía de gases
Cromatografía de fluidos supercríticos
Cromatografía de Partición.
Cromatografía de Adsorción
Cromatografía Iónica
Cromatografía de Exclusión
Las velocidades de difusión de los gases son mucho mayores que las de los líquidos, entre
10.000 y 100.000 veces superiores, por lo que el término de difusión longitudinal en
la ecuación de van Deemter es más relevante: