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Estructura y función del factor F y mecanismo de conjugación

Introducción La
conjugación, un proceso que promueve la transferencia de ADN de un donante a un receptor celular mediada por
contacto físico (49, 139), ocurre entre tanto gram-positivas y gram-negativas y bacterias streptomycetes (para exámenes
de sistemas específicos, vea el libro conjugación bacteriana [55]). La capacidad de los donantes es conferido por la
presencia de un elemento de ADN infecciosa que se disemina a otras células.
Comúnmente, los genes que codifican funciones de transferencia conjugativo están asociados con un
replicon extrachromosomal, llamado auto-transmisible o plásmido conjugativo. Además de auto-transferencia, los
sistemas de transferencia de plásmido conjugativo a menudo facilitan la transferencia de nonconjugative
independientes,
plásmidos que son coresident puedan movilizarse en la célula donante. Las secuencias de ADN que se vuelven con el
plásmido conjugativo cointegrate también pueden ser transferidos; por lo tanto, integración y otros reordenamientos
recombinational
puede resultar en la transmisión de secuencias del cromosoma bacteriano, transposones y de
nonmobilizable plásmidos. Como un medio de intercambio genético entre las células individuales y poblaciones, tanto
dentro como entre especies bacterianas, conjugación es un fenómeno de
consecuencias ecológicas y evolutivas fundamentales (para una revisión, ver Referencia 236). La importancia de este
proceso ha sido
resaltado por la evidencia de que los sistemas de conjugación interkingdom también puede facilitar la transmisión de
material genético. Ti mediada por plásmidos transferencia de T-DNA de Agrobacterium especies vegetales parece
representar una novedosa forma de conjugación bacteriana (177, 211, 324, 364, 372). Transferencia de amplio- y
estrecho-host-gama plásmidos (R751 y F, respectivamente) de Escherichia coli a Saccharomyces
cerevisiae ha sido también demostrada (142, 143)

Responsable de la primera observación de transferencia genética (206), el factor F (fertilidad) de E. coli K12
fue el primer plásmido que se describen (49) y, por lo tanto el objeto como herramienta, ha sido estudiado desde
entonces.
La visión y el ingenio de los primeros investigadores permitió a las principales características de F, F-mediada la
transferencia de ADN y la configuración circular del plásmido y cromosómicos DNAs se determinan exclusivamente
a través del análisis de los cruces genéticos con marcadores cromosómicos (por una interesante cuenta, consulte la
genética de las bacterias y sus virus [140]). Deducciones clave eran: (i) que F es una circular "episoma"
capaz de replicarse autónomamente o integrarse en el cromosoma bacteriano y (ii) que la
transferencia eficiente de marcadores cromosómicos de Hfr (alta frecuencia de recombinación) cepas de donantes
refleja
una integración estable de F. El orden y el momento de la entrada de los marcadores transferidos por Hfr donantes
podría entonces considerarse
que refleja la posición y la orientación de un sitio específico, el F origen de transferencia (oriT). Se
percibe que la transferencia de ADN debe comenzar siempre por este sitio y proceder unidirectionally
circular alrededor del genoma. Que una sola hebra de ADN (56, 124, 269) fue transferido en el 5¢® 3¢ dirección
(152, 269) se demostró posteriormente. Estos parecen ser los preceptos básicos para la conjugación y la oriT
sitios en muchos otros elementos conjugativo posteriormente estudiada se han encontrado para funcionar de manera
similar en la
dirección de la transferencia de ADN contiguos.

La observación de conjugación y el sincronismo del HFR cruza el tiempo necesario de entrada


experimentos también dependía de la manera eficiente en que F donantes contacto destinatarios. "Parejas"
podrían formar rápidamente en suspensiones líquidas, persistir durante la dilución, suave y ser interrumpido por
agitación severa. F pili, los filamentos que se extienden desde la superficie celular de donantes para iniciar estos
contactos fueron
descubiertos después de bacteriófagos que infectan F PERO NO F-
células fueron aisladas. La adsorción de ARN a lo largo del fago F pili les distingue de otros apéndices adhesina (60).
Expresión de
un filamento pilus también ha demostrado ser esencial para otros y entéricas pseudomonad llamada conjugación de
plásmidos
systems (36, 38, 100, 161, 286), y el plásmido conjugativo de transferencia entre estos
organismos gram-negativos se cree que depende de los contactos creados por estas estructuras.

Estructura del plásmido F


El plásmido F es una molécula de ADN circular, 100 KB de tamaño (359). Las diferentes regiones funcionales de F y la
posición de la oriT (coordinar 66.700F) se indica en el mapa que se muestra en la Fig. 1. Estas confieren sus propiedades
básicas, resumió brevemente como sigue.

Región líder
del F secuencias de ADN situada entre el origen de la transferencia conjugativa, oriT y RepFIA se presume de ser el
primero en entrar en la célula receptora durante la conjugación y por lo tanto ha sido designada como la región líder
(296). Principales productos de los genes de la región están pensadas para ayudar a establecer F ADN en el destinatario
y se examinan en una sección posterior.

región RepFIA replicación autónoma, creía que era el principal responsable de las propiedades de replicación típica de F,
contiene tanto unidireccional (oriS) y bidireccional (oriV) orígenes de replicación (201). Las características de
mantenimiento de mini-F plásmidos que incluyen sólo el fragmento EcoRI F F5 (44,6 a 53,7F) se asemejan a las de F.
reglamentación estricta de RepFIA y mantenimiento asociado y mecanismos de partición actúan en concierto para
sostener el plásmido de uno a dos copias por célula (57, 97). La región, RepFIB réplica secundaria, con independencia
funcional y puede sostener la replicación de los plásmidos en ausencia de RepFIA. La región incluye RepFIC un
incompleto el remanente de un sistema de replicación que es utilizado por algunos otros plásmidos (31). Las
complejidades de la replicación de F han sido revisados en otros lugares (184, 185, 359)

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