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D ( h-1) Y x/s
(g peso seco /mol glucosa)
0.14 40
0.236 42.5
0.332 43.9
0.426 44.8
0.475 45
0.6 46
0.72 46.5
1
c) Si la concentración en el reservorio (recipiente que contiene el medio de cultivo con el
que se alimenta al fermentador) de glucosa es de 300 g/l calcule el Flujo inicial (Fo).
a) Si tuviera que elegir entre estos cultivos continuos para la producción de etanol, cual
usaría? Justifique su respuesta.
b) Si la glucosa se consume produciendo biomasa, etanol y CO2, como sería el perfil de
YXS y de biomasa en un gráfico vs. D. (elija solo un de los tres como representativo)
2
5. Se estudió la producción de la enzima glucosa oxidasa (GOD) por levaduras
modificadas mediante técnicas de ADN recombinante. Se realizaron tres cultivos de batch
alimentado con alimentación constante. Se usaron dos fuentes distintas de carbono en el
reservorio de alimentación como substrato limitante: glucosa y galactosa. La
concentración de estos azúcares en el reservorio fue de 275 g/l y el flujo inicial (Fo) de
13.5 ml/h. La biomasa inicial (Xo) al comienzo de la alimentación fue de 6.9 g/l y el
volumen inicial (Vo) fue de 2.2 l. El tiempo de duración del batch alimentado desde el
comienzo de la alimentación hasta el final del proceso fue 86 hs. Los resultados obtenidos
se muestran en la siguiente tabla:
¿cuales fueron los rendimientos Yx/s (g PS/ g substrato) para cada proceso, a que
velocidad de crecimiento () empezaron a crecer las levaduras?
¿que proceso elegirías para producir esta enzima?.
Respuesta: YxsGlu: 0.35 gX/gS YxsGal: 0.31 gX/gS µGlu: 0.086 h-1 µGal: 0.076 h-1
20 0,40
sustrato (g/l), producto (g/l)
18 0,35
16
0,30
14
S
12 0,25
10 0,20
8 0,15
6
0,10
4 P
2 0,05
0 0,00
0 10 20 30 40 50 60
tiempo, hs
3
Biomasa Glucosa Retamicina
D h-1 g/l g/l mg/l
0,03 4,3 0,10 85
0,05 5,6 1,00 120
0,10 5,6 1,20 32
0,15 5,6 1,45 21
0,20 5,6 1,65 16
0,25 5,6 1,66 12
0,30 2,4 2,60 5
6 140
5 120
Retamicina, ug/l
100
Biomasa, g/l;
Glucosa g/l
4
80
3
60
2
40
1 20
0 0
0 0,1 0,2 0,3 0,4
D, h -1
Biomasa g/l Glucosa g/l Retamicina mg/l
Y
D h- X S PD Ac CO2/c-
1 g/l g/l g/l g/l But g/l mol s
0,02 1,4 0,1 16,5 0,2 4,4 0,14
0,04 1,1 1,3 14,5 0,3 3,7 0,22
0,08 1,4 1,1 14,9 0,3 3,5 0,21
0,12 1,3 7,4 13,4 0,8 2,7 0,10
0,16 1,3 8,4 13,3 0,7 2,7 0,05
0,21 1,1 8,3 10,7 0,7 1,3 0,30
4
0,29 1,3 9,0 10,0 1,7 1 0,26
a) Cuando se trabajó a una D = 0,16 h-1, cuantas horas se debió dejar pasar para llegar
al estado estacionario?.
b) Si se hubiera trabajado con una concentración de 75 g/l de glicerol que biomasa se
debería alcanzar en el estado estacionario a una D = 0,21 h-1?
c) Se desea producir 1,3-PD por sistema de batch alimentado con alimentación
exponencial a que velocidad de crecimiento programarías tu sistema? Justificar.
d) En base a su respuesta anterior indicá con que flujo inicial deberías trabajar si la
concentración de glicerol en el Reservorio fuera de 60 g/l. Si el proceso se extendiera
hasta las 25 hs. ¿Que biomasa (gr X) alcanzaría y cual sería la concentración de 1,3-
PD. Datos: Xo= 3.5 g/l y Vo= 5,5 l. (Calcular VF utilizando una planilla de cálculo e
intervalos de 1 h para cada cambio de flujo).
D ( h-1) Y x/s
(g peso seco /mol glucosa)
0.14 40.0
0.236 42.5
0.332 43.9
0.426 44.8
0.475 45.0
0.60 46.0
0.72 46.5
De acuerdo a la ecuación
= + mS
Yobs YG
5
Si se gráfica la inversa de D vs. la inversa del Yx/s observado se obtiene el siguiente
gráfico.
0,0300
0,0250
0,0200
0,0150 y = 0,0006x + 0,0209
R² = 0,9872
0,0100
0,0050
0,0000
-1,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0
6
Productividad = [P] * D Prod. = 13 g/l * 0.15 = 1.95 g/l h interferon.
F SR = Xo Vo e t + mS
YXS
Donde se fijan las condiciones iniciales del inóculo, vol inicial, etc
t = ln X V - ln Xo Vo
Por lo tanto
F0 SR = Xo Vo e t
YXS
Despejando F0
F0 = Xo Vo e t
YXS SR
Por lo tanto F0 = 49 ml /h