Aseguramiento de calidad

EQUIPOS
MANIPULACION DE MUESTRAS
Norma ISO 17025

Bqca. QM Alicia I. Cuesta,

Consultora Internacional de la FAO
 Objetivos de la clase:

EQUIPOS: Requisitos de la Norma 17025.

Equipos habituales de un laboratorio microbiológico.
Calibración y verificación de equipos: Definición y concepto.
Programas para calibración, verificación, limpieza y mantenimiento.
Registros del equipamiento.

MANIPULACION DE MUESTRAS: Requisitos de la Norma 17025.

Transporte de las muestras.
Recepción de las muestras.
Manipulación de las muestras.
Almacenamiento de las muestras.
Disposición final de las muestras.
 REQUISITOS: EQUIPOS
El laboratorio debe estar provisto de
todos los equipos necesarios para la
correcta ejecución del ensayo.
 Equipos habituales de
un laboratorio microbiológico :
Material de uso general: Material de vidrio o plástico
(Ejemplo: tubos de ensayo, placas de Petri, etc.),
instrumentos de muestreo, ansas de siembra, etc.

Equipos volumétricos como pipetas, distribuidores

automáticos, sembradores en espiral, etc.

Instrumentos de medida: termómetros, cronómetros,

balanzas, medidor de pH, contadores de colonias, etc.

Estufas, autoclaves, baños termostáticos, heladeras,

congeladores, campanas de flujo laminar, equipos de
filtración, etc.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

Los equipos y su soporte lógico

usados en la realización del ensayo y muestreo
deben permitir lograr
la EXACTITUD REQUERIDA
y cumplir con las especificaciones
establecidas para los ensayos.

Hay equipos cuya exactitud es clave en el

impacto sobre la incertidumbre de los resultados,
por lo que es
imprescindible
que cumplan siempre con las especificaciones
más relevantes del método.
 Definición: Calibración.

Conjunto de operaciones que

PERMITEN ESTABLECER,
en condiciones especificadas,
LA RELACIÓN EXISTENTE ENTRE :

los valores indicados por el instrumento de medida o un

sistema de medida
o un material de referencia
y
los correspondientes valores conocidos del mensurando.
(valores de una magnitud obtenidos mediante un patrón de referencia)
 Calibración:

Formas de establecer esta relación es mediante:

Tablas de corrección
Rectas o curvas de calibración
otras

CALIBRACION
Elimina el error

CORRECCION Incertidumbre
 Ejemplo:
Calibración de termómetro
TABLA 1
Termómetro a calibrar (Tx)
¿Qué hago? Termómetro patrón (Tp)
1. Mido n veces a una
Temperatura y completo la Termómetro Termómetro
TABLA 1. a calibrar patrón
(ºC) (ºC)

Tx Tp

Baño de agua
El baño se pone a Ti
 Ejemplo:
Calibración de termómetro
TABLA 1
Termómetro a calibrar (Tx)
¿Qué hago? Termómetro patrón (Tp)
2. Esto lo realizo para
diferentes temperaturas (Ti) Termómetro Termómetro
según los requerimientos. a calibrar patrón
(ºC) (ºC)
3. Calculo la corrección e
incertidumbre para cada
punto.
Certificado de calibración de un termómetro
Ejemplo de resultados

Indicación del Corrección Incertidumbre

termómetro (º C) (º C)
(º C)
5.5 -0.4 +0.1

30.0 0.2 +0.2

36.8 0.2 +0.2

42.1 0.0 +0.3

 Debe figurar:
Descripción e
identificación del
instrumento que se calibró.
Fecha de calibración.
Fecha de emisión del
certificado de calibración
nombre del cliente
Certificado de Metodología empleada
calibración de un para calibrar.
termómetro Rango de calibración.
Resultados: corrección e
incertidumbre para cada
temperatura.
 Definición:
Incertidumbre de la medición

Parámetro asociado al resultado de la medición,

que caracteriza la dispersión de los valores que
podrían ser razonablemente asignados al
mensurando.

INDICA LA CALIDAD DE UNA MEDICIÓN.

 Relación de exactitud (RE):

RE = Especificación
Incertidumbre

ISO 100012 recomienda RE>3:1

Preferiblemente hasta 10:1
 Definición:
VERIFICACIÓN.

Confirmación por examen

y provisión de evidencia
de que los requerimientos especificados
han sido satisfechos.

Ejemplo:
Verificar diariamente una balanza con una pesa calibrada.
 Verificación
del instrumento de medición

VERIFICACIÓN

TOMO DECISION
Asignar a la
tarea de medición
Reparar/ ajustar
Usarlo para otro equipo
Declararlo fuera de uso
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Antes de poner en servicio un equipo (incluido
el empleado para el muestreo) se lo debe calibrar
o verificar con el fin de asegurar que responde a
las exigencias especificadas del laboratorio y
está conforme a las especificaciones
normalizadas pertinentes.

El equipo debe ser

verificado o calibrado
antes de su uso.
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

El laboratorio debe
documentar e implementar
Programas para
calibración y/o verificación
limpieza, mantenimiento y esterilidad
de los equipos cuando sea necesario.
(Los que tengan una influencia directa en los resultados de
los ensayos).
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

REQUISITOS PROVEEDORES DE CALIBRACION DE

EQUIPOS:
La calibración de los equipos debe ser llevada a cabo por
laboratorios de calibración que demuestren su
competencia y su capacidad de medición y trazabilidad.
(Laboratorio acreditado o aceptado por el organismo de
acreditación)

Las mediciones hechas por el laboratorio de calibración

deben ser trazables al Sistema Internacional de Unidades
(SI).
 La naturaleza del equipo.
La frecuencia
de la calibración y/o Condiciones de uso.
verificación
de los equipos Gravedad de las
o patrón de consecuencias de una falta de
referencia calibración y/o verificación.
depende de:
Historia previa del equipo o
patrón de referencia.

Recomendaciones del
fabricante.
Directrices para
calibración de
equipos en el Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
laboratorio de Termómetro de referencia
Recalibrado y plenamente
trazable
Cada 5 años

microbiología. Termocupla de referencia

Recalibrado y plenamente
trazable
Anualmente.
Frente a un termómetro de
referencia en punto de
Termómetro de trabajo Anualmente.
congelación y/o rangos de
temperatura de trabajo
Frente a un termómetro de
referencia en punto de
Termocupla de trabajo Anualmente.
G-ENAC-04REV. 2 congelación y/o rangos de
temperatura de trabajo

Marzo 97.Guía para Balanza

Calibración plenamente
trazable
Anualmente.

la acreditación de Pesas de calibración

Calibración plenamente
trazable
Bianualmente/
Anualmente.

laboratorios que Frente a pesa calibrada o

verificar en la balanza
Pesas de control Anualmente.
realizan análisis inmediatamente después de
la calibración trazable

microbiológicos Microscopios
Calibración trazable al
micrómetro (cuando sea Inicialmente
apropiado)

Calibración trazable o
Centrifuga verificación con un Anualmente.
tacómetro independiente
Cronómetro Frente a la hora oficial Anualmente.
Directrices para la
puesta en servicio y
verificación de Tipo de Equipamiento
equipos en el Equipos con temperatura
controlada
laboratorio de (estufas de cultivo, baños ,
heladeras, congeladores)
microbiología.
Estufas de esterilización
Autoclave
G-ENAC-04REV. 2
Marzo 97.Guía para Cabinas de seguridad
la acreditación de
laboratorios que Campana de flujo laminar
realizan análisis
Peachímetros
microbiológicos
Balanzas
Destilador, desionizador y
unidad de ósmosis inversa
Requisitos Frecuencia sugerida
a) Verificar la estabilidad
y uniformidad de la
a) Inicialmente, cada 2
años y luego de una
reparación o modificación
temperatura
b) Verificar la temperatura
b) Diariamente o con cada
uso.
a) Verificar la estabilidad
y uniformidad de la
a) Inicialmente, cada 2
años y luego de una
reparación o modificación
temperatura
b) Diariamente o con cada
b) Verificar la temperatura
uso.
a) Verificar la estabilidad a) Inicialmente, cada 2
y uniformidad de la años y luego de una
temperatura reparación o modificación
b) Verificar la temperatura b) Con cada uso.
c) Verificar el tiempo
a) Verificar las
c) semestralmente
a) Inicialmente y luego de
características técnicas una reparación o
b) Verificar la velocidad modificación
del aire b) Anualmente.
c) Monitoreo microbiológico c) semanalmente
a) Inicialmente y luego de
a) Verificar las
características técnicas
b) Verificar la esterilidad
una reparación o
modificación
b) Mensualmente.
Ajuste de la respuesta
usando como mínimo dos Diariamente o con cada
buffers de calidad uso
aceptable.
Ajuste a cero y verificación Diariamente o con cada
con la pesa control uso
a) Verificar la
Conductividad a) Semanalmente
b) Verificar la b) Mensualmente.
Directrices para la
puesta en servicio y
verificación de
equipos en el Tipo de Equipamiento Requisitos
a) Verificar peso y volumen
Frecuencia sugerida

laboratorio de Diluidores gravimétricos

(peso) dispensado.
b) Verificar coeficiente de
a) Diariamente
b) Mensualmente.
dilución
microbiología. Inicialmente y
periódicamente
Verificar el volumen
Distribuidores de medios dependiendo de la
distribuido.
frecuencia y naturaleza
de su uso.
a) Inicialmente y
Verificar la precisión y periódicamente
Pipetas automáticas exactitud del volumen dependiendo de la
distribuido frecuencia y naturaleza
de su uso.
G-ENAC-04REV. 2 a) Verificar las características
técnicas frente al método a) Inicialmente y
Marzo 97.Guía para la Sembradores en espiral
convencional
b) Verificar el estado del
anualmente.
b) Diariamente o con
acreditación de punzón y puntos de inicio y
fin.
cada uso.
c) Mensualmente
c) Verificar volumen distribuido.
laboratorios que
Contadores automáticos Verificar frente al recuento
realizan análisis de colonias manual
Anualmente.

microbiológicos Jarra de anaerobiosis Indicador de anaerobiosis Con cada uso

Verificar la aceleración contra

Centrifugas un tacómetro calibrado y Anualmente.
independiente
 REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

Es de primordial importancia que el laboratorio cuente con

un programa formal, documentado e implementado de
mantenimiento de equipos.

El mantenimiento de los equipos esenciales debe

realizarse a intervalos especificados.
(por el departamento de mantenimiento, por el proveedor,
fabricante, etc).

En el documento ISO 7218: 1996 (E), se facilitan

directrices sobre el mantenimiento de los equipos.
Directrices para el Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
Estufas de cultivo, Limpiar las superficies
mantenimiento de heladeras, congeladores
Estufas de esterilización
internas y desinfectar si es
necesario
Semestralmente

equipos Baños de agua

Vaciar, limpiar, desinfectar
Mensualmente
y rellenar
en el laboratorio de Centrifugas Limpiar y desinfectar Trimestralmente

microbiología. Autoclaves
Verificar visualmente la
junta, limpiar/drenar la Mensualmente
cámara
Cabinas de seguridad y de
Revisión /cambio de filtros Anualmente
flujo laminar
Microscopios Limpieza de objetivos Anualmente
a)Limpiar los electrodos
a)Con cada uso
Peachímetros b)Revisar/rellenar
G-ENAC-04REV. 2 electrolito
b)Cuando sea necesario

Marzo 97.Guía para la Balanzas/ Diluidores

gravimétricos
a)Limpiar
b)Revisar
a) Con cada uso
b) Anualmente

acreditación de Destilador Limpiar y desincrustar Según sea necesario

laboratorios que Desionizador y unidad de

ósmosis inversa
sustituir cartucho y
membrana
Según recomendación del
fabricante
realizan análisis Jarra de anaerobiosis Limpiar y desinfectar Después de cada uso
Distribuidores de medios,
microbiológicos Pipetas automáticas,
Limpiar y desinfectar
según sea apropiado
con cada uso
equipos volumétricos, etc.
a) Descontaminar, limpiar
a) Con cada uso
Sembradores en espiral y esterilizar.
 REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

PARA CADA EQUIPO UTILIZADO EN LOS ENSAYOS EL

LABORATORIO DEBE TENER:

Identificación inequívoca y registro del equipo (con su

soporte lógico o software).

Los resultados de las calibraciones y verificaciones.

Las instrucciones actualizadas de uso y mantenimiento

del equipo disponibles (incluido el manual suministrado por
el fabricante) para el uso del personal del laboratorio.
EN EL IDIOMA DEL PAIS
REQUISITOS: EQUIPOS (cont)
Los registros del equipamiento deben
incluir como mínimo:
Nombre del fabricante,
modelo, número de serie u
otros datos que lo identifique.
Datos de comprobación de
cumplimiento de las
especificaciones a su ingreso.
Ubicación del equipo dentro
del laboratorio, cuando
corresponda (ver Plano del
laboratorio)
Fecha de adquisición y
puesta en servicio.
Instrucciones del fabricante
o la referencia a su ubicación.
Informes de todas las
calibraciones (debe contener
fecha de calibración y
resultados), fecha prevista de
la próxima calibración, los
ajustes, los criterios de
aceptación.
Plan de mantenimiento
(cuando corresponda ) y
mantenimiento llevado a cabo
hasta la fecha
Todo daño, mal
funcionamiento, modificación o
reparación del equipo.
Esto debe mantenerse durante
toda la vida útil del equipo y hasta
dos años después de sacarlo de
servicio.
 REQUISITOS: EQUIPOS (cont)

Los equipos bajo el control del laboratorio que requieren

una calibración deben ser rotulados y identificados
Se deben colocar las Ejemplo:
etiquetas en el equipo : Etiqueta A: Nº de inventario.

Identificación del equipo. Etiqueta B:

 Indicando si el equipo
está en funcionamiento o
fuera de servicio.
Su estado de calibración.
color verde:
equipo/patrón en funcionamiento
o
color rojo:
equipo/patrón fuera de período
de calibración/verificación.
Etiqueta C:
Fecha de calibración/verificación
Fecha de la próxima
calibración/verificación.
 Autoclave

Además de controlar directamente la temperatura,

tiempo y presión del autoclave,
se comprueba la eficacia de su funcionamiento en
cada ciclo de esterilización o descontaminación.
mediante:
 Indicadores Químicos. La cinta de autoclave o las
tiras indicadoras (controles químicos) permiten
distinguir que una carga ha sido procesada.

 Indicadores Biológicos.
 Autoclave

Los controles biológicos:

☺Evalúan la efectividad de la
totalidad del proceso de
esterilización.

☺Contienen esporas
de género Bacillus.

☺En todos los casos los

resultados obtenidos de
controles químicos y
biológicos se deben registrar.
Verificación de la temperatura de trabajo:

Se realiza un Registro de control de

monitoreo continuo de las temperatura:
temperaturas de las estufas,
heladeras, congeladores
usados para la realización -Equipo.
del ensayo. -Nº de inventario.
-Instrumento:
La temperatura del baño Corrección e incertidumbre
termostático se registra del termómetro.
antes de su uso. -Rango de aceptación.
-Tolerancia.
 Ejemplo Cálculo del rango de aceptación

REGISTRO DE CONTROL DE TEMPERATURA:

Equipo: estufa de cultivo de 30º C. Nº de inventario_ _ _

Instrumento: termómetro Nº de inventario_ _ _

CORRECCIÓN DEL TERMÓMETRO (º C ): + 0.3

INCERTIDUMBRE DEL TERMÓMETRO (º C ): + 0.2

TOLERANCIA según metodología usada + 1 º C

Ejemplo Cálculo del rango de aceptación (cont)
Rango aceptado por la técnica es 29 y 31 º C

Cuando leo en el instrumento 29º C en realidad tengo que

leer (es 28.7+0.2) o sea 28.9.
Cuando leo en el instrumento 31º C en realidad tengo que
leer (es 30.7-0.2) o sea 30.5.

Rango de aceptación es 28.9 a 30.5 º C

RANGO DE LECTURA aceptada de las temperaturas leídas
con ese termómetro con esa calibración.
 Síntesis parcial

Requisitos equipos:
•Los equipos y su soporte lógico usados en la
realización del ensayo y muestreo deben permitir
lograr la exactitud requerida y cumplir con las
especificaciones establecidas para los ensayos.

•El laboratorio debe documentar e implementar

programas para la limpieza, mantenimiento,
calibración y/o verificación y esterilidad de los
equipos cuando sea necesario.
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS
El laboratorio debe tener procedimientos para :
 El transporte

 La recepción

 La protección, el almacenamiento.

 La manipulación

 La conservación o la disposición final

de las muestras a ensayar.
 Requisitos:
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS

MUY IMPORTANTE: El laboratorio debe tener un

sistema para la identificación unívoca de las muestras
a ensayar.

La identificación debe ser conservada a lo largo de la

vida de la muestra en el laboratorio.

El sistema debe ser diseñado y operado de modo tal que

asegure que las muestras no puedan ser confundidas
físicamente o cuando se haga referencia a ellas en
registros u otros documentos.
 Requisitos:
MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS

El laboratorio debe tener:

procedimientos
e instalaciones apropiadas
para evitar el deterioro, la pérdida o daño
de las muestras
durante su:
manipulación, preparación y
almacenamiento.
Diagrama de
flujo de
manipulación
de las
muestras
 REQUISITOS:

Transporte de las muestras.

Se debe evitar durante el transporte al laboratorio cualquier
alteración de las muestras.

•Las muestras deben ser enviadas con la mayor brevedad

posible al laboratorio.
•Se documenta quién es el responsable del transporte .

El transporte debe realizarse:

Acondicionados adecuadamente dependerá del estado
físico del producto (líquido, sólido o semisólido).
En recipientes adecuados
A temperaturas adecuadas de conservación del alimento.
 Transporte de las muestras:

Dependiendo del tipo

de alimento que se
trate, Temperaturas de
se prestará particular Tipos de Productos almacenamiento durante
atención en el transporte(º C)
mantener las Estables Temperatura ambiente
temperaturas de Fresco o refrigerados Entre 0 a + 4
almacenamiento
durante el transporte Congelados Debajo de -18
en los rangos Pasteurizados y productos
Entre 0 a + 4
aceptables según similares
figura en el cuadro. Unidades estables dañadas Entre 0 a + 4

Referencia: Norma
ISO 7218:1996 (E)
 REQUISITOS:
RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS.

Las condiciones de llegada al laboratorio de las muestras

deben ser verificadas por el personal perteneciente al mismo.
Si la muestra es:
Insuficiente o
se encuentra en mal estado por deterioro físico,
temperatura inapropiada, envase roto o etiquetado
defectuoso:

El laboratorio debe consultar con el cliente antes de decidir si

analiza o rechaza la muestra.
Debe indicar su estado en el informe del ensayo.

Una vez recibidas las muestras se analizarán lo antes posible.

 Recepción de las muestras.

El personal técnico debe etiquetar y almacenar cada

muestra:

N ° PE:
N ° muestra:
Fecha de ingreso al laboratorio:
Descripción de la muestra:
Fecha vencimiento de la muestra
 Manipulación de las muestras:
•La preparación de las muestras y porciones de ensayo
realizado por el laboratorio inmediatamente antes del
ensayo debe efectuarse conforme a procedimientos
documentados basados en normas nacionales o
internacionales, si es que existen, o a métodos internos
validados.

•Los procedimientos de preparación de las muestras y

porciones de ensayo deben diseñarse teniendo en cuenta
las directrices generales contenidas en los documentos en
ISO 6887 e ISO 7218.

•Se debe llevar los registros del desarrollo del trabajo.

 REQUISITOS
Almacenamiento de las muestras:

Las muestras que se encuentren a la espera de ser

analizadas deben almacenarse en condiciones
adecuadas para reducir al mínimo cualquier
modificación en la población microbiana presente.

El laboratorio debe definir y registrar dichas

condiciones de conservación.
 Los tiempos límites de almacenamiento
dependerán del tipo de producto
Referencia: Norma ISO 7218:1996 (E)

(1) Si no se puede procesar Tipos de Productos

en ese tiempo, las muestras
se pueden congelar por
debajo -18 º C.
Esto debe ser mencionado
en el informe de ensayo.
Precaución: En algunos
productos el congelamiento
produce un cambio de la
composición de la flora.
Tiempos límites de
almacenamiento (horas)
Tan rápido como sea
posible y
Estables
antes de su fecha de
vencimiento
dentro de 24 horas de la
Fresco o refrigerados
recepción la muestra (1)
Tan rápido como sea
Pasteurizados y posible y
productos similares antes de su fecha de
vencimiento
Unidades estables
Tan rápido como sea
posible y dentro de 48
dañadas
horas
 REQUISITOS

Disposición final de las muestras:

 Debe existir un procedimiento documentado para la

conservación y eliminación de muestras.

 Las muestras deben conservarse hasta que se hayan

obtenido los resultados del ensayo, o más tiempo según
sea necesario.

 Cuando se sepa que algunas porciones de muestras de

ensayo del laboratorio están altamente contaminadas,
deben descontaminarse antes de su eliminación.
 REQUISITOS
Disposición final de las muestras:

La correcta eliminación de materiales contaminados puede

no afectar directamente a la calidad de los análisis de las
muestras, aunque los procedimientos deben diseñarse
para reducir al mínimo la posibilidad de contaminación del
lugar donde se realiza el ensayo o los materiales utilizados
en el mismo.

No obstante, es un aspecto de la correcta gestión de un

laboratorio y debe respetarse la legislación nacional e
internacionales sobre medio ambiente, salud y seguridad
(véase también ISO 7218).
 Síntesis final
El laboratorio debe tener procedimientos para :
el transporte, recepción, la protección, el almacenamiento,
la manipulación y disposición final de las muestras.

•El laboratorio debe tener un sistema para la identificación

unívoca de las muestras a ensayar, conservada a lo largo
de la vida de la muestra en el laboratorio.

•Se deben registrar los apartamientos de las condiciones

especificadas para las muestras en el momento de su
recepción en el laboratorio.

•El laboratorio debe tener instalaciones apropiadas para

evitar el deterioro, la pérdida o daño de las muestras
durante manipulación, preparación y almacenamiento